糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号改变及其对Cajal间质细胞的影响

目的 研究糖尿病胃轻瘫大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的形态学改变,测定干细胞因子(stem cellfactor,SCF)及Kit含量变化,探讨糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号在Cajal间质细胞受损中作用.方法 用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型,3个月后采用美蓝方法测定胃排空速率,对胃窦组织进行透射电镜观察Cajal间质细胞超微结构变化,采用RT-PCR方法测定胃窦平滑肌组织SCF mRNA的表达,Western blot法检测胃窦平滑肌组织c-kit蛋白变化.结果 与正常大鼠相比,糖尿病大鼠胃排空明显延迟,胃Cajal间质细胞与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散;细胞器变性、减少;胞质广泛溶解;核周间隙增宽.糖尿病大鼠胃窦平滑肌组织SCF mRNA以及c-kit蛋白表达均明显低于正常大鼠.结论 SCF-Kit系统受损与糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞变性、数量减少以及网络结构破坏有关,最终导致胃运动障碍.     

SCF在糖尿病胃轻瘫大鼠胃壁中表达的研究

目的：制备糖尿病胃轻瘫大鼠模型,通过检测其胃壁组织SCF的表达水平,探讨SCF与糖尿病胃轻瘫的关系。方法：用链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,应用RT—PCR和Wester blotting方法分别检测各实验组胃壁SCF基因（cDNA）及蛋白质的表达水平,分析SCF表达水平与糖尿病胃轻瘫的关系。结果：糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空明显延迟;SCF基因和蛋白的表达水平明显降低;用西沙必利处理后表达升高,且与病情轻重有相关性。结论：SCF与糖尿病胃轻瘫发病有关,SCF在糖尿病胃轻瘫中的表达水平可以反映其病情发展过程。     

麻枳化浊方对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞的影响

目的:观察自拟麻枳化浊方对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)分布数量的影响。方法:将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组、联合组,模型组和正常组分别给予同等体积的生理盐水灌胃,中药组给予麻枳化浊方、西药组给予西沙必利、联合组给予西沙必利加麻枳化浊方进行干预治疗;在光镜下观察大鼠肠道组织的病理改变,应用免疫组化染色法检测各组大鼠胃窦组织中c-kit抗体阳性ICC细胞的表达及分布特点,并使用FR-980复日生物电泳图像分析系统测定大鼠胃窦c-kit抗体免疫反应阳性产物的平均光密度(A)值。结果:中药组、西药组及联合组大鼠小肠推进率较模型组均明显增加(P0.05);模型组大鼠胃窦部c-kit抗体平均光密度值减少,表达减弱(P0.05),中药组、西药组与联合组尚可见着色较深的c-kit阳性细胞,其平均光密度值较模型组升高(P0.05),且中药组及联合组平均光密度值均明显高于西药组(P0.05)。结论:麻枳化浊方能够降低DGP大鼠血糖水平,提高其小肠推进率,可能为其治疗DGP的作用机制之一;麻枳化浊方能够增加DGP大鼠胃窦部c-kit阳性细胞的平均光密度,可能通过调控其胃窦部Cajal ICC的数量,促进大鼠的胃排空。     

姜荣钦主任医师治疗糖尿病胃轻瘫经验

糖尿病性胃轻瘫,属于糖尿病胃肠道神经病变,西医治疗多予胃肠动力药物,疗效多不满意。姜荣钦主任医师结合三十年临床经验,认为此病多属本虚标实,虚实夹杂之证,在治疗上提出标本兼顾,补虚泻实,用药治以健脾疏肝、化痰消瘀为原则。多年经验拟定新糖胃康方,以及结合中药经验方穴位贴敷足三里、神阙穴治疗,在临床中应用疗效颇好,且症状复发率明显降低。     

糖尿病胃轻瘫

<正>糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis)是糖尿病患者的常见并发症,能引起厌食、恶心、早饱、呕吐、腹胀等症状,严重影响患者的生活质量,导致不可预测的血糖波动,加速病情恶化。故对糖尿病胃轻瘫的研究越来越引起重视。     

糖尿病胃轻瘫及其治疗

胃轻瘫是指胃的排空极度延缓 ,用以描述糖尿病人严重的胃排空延缓即糖尿病胃轻瘫 ,了解此合并症的临床意义 ,首先在于解释了许多糖尿病人未发现任何胃肠道器质性病变 ,而出现反复发作的饱胀、厌食、恶心等消化道症状的原因 ,同时根据其发病机制 ,寻求一些较为有效的治疗方法。1　临床表现糖尿病胃轻瘫又称糖尿病性胃麻痹症〔1〕多见于病程较长者 ,常合并自主神经病变、视网膜病变及肾脏病变。其主要症状为饱胀、厌食、烧心、上腹胀痛、严重时呕吐 ,吐出物为胃潴留之食物 ,呕吐可间歇发作 ,发作前升高之血糖较难控制。诊断重要的是排除其他胃…     

胃Cajal间质细胞在糖尿病胃轻瘫中的作用

目的明确胃Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)在糖尿病大鼠胃轻瘫中的作用.方法用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型,3个月后测定胃排空速率,对胃窦组织进行透射电镜观察.结果糖尿病大鼠胃排空明显延迟,胃Cajal间质细胞与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散;细胞器变性、减少;胞质广泛溶解;核周间隙增宽.结论糖尿病Cajal间质细胞变性可能是导致其胃轻瘫的一个重要原因.     

糖尿病与胃轻瘫

血糖控制不良的糖尿病(diabetes mellitus,DM)引起患者胃肠道功能紊乱的并不少见,临床上可不出现症状,但经特殊检查,可发现胃排空延迟,称为胃轻瘫或糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)^[1].Ⅰ型或Ⅱ型糖尿病患者至少有50%以上伴有糖尿病性胃轻瘫,Ⅱ型糖尿病胃排空时间异常者占51.4%^[2],但出现临床表现的仅10%.糖尿病性胃轻瘫不仅可引起上消化道症状,而且也影响血糖的控制及糖尿病慢性并发症的发展,因此正常的胃排空是良好代谢控制的先决条件^[3].     

血糖波动对糖尿病胃轻瘫大鼠Cajal间质细胞的影响及其机制研究

目的 探讨糖尿病胃轻瘫大鼠不同血糖水平对Cajal间质细胞(ICC)的影响及其机制.方法 选择雌性Wista大鼠60只进行随机分组,实验组40只,对照组20只.实验组糖尿病Wista大鼠模型以单次腹腔注射链脲佐菌素法诱导.免疫组织化学荧光染色检测不同血糖浓度大鼠胃ICC数量及网络结构.结果 实验组大鼠血糖浓度高于对照组,ICC数量,低于对照组,且比较差异有统计学意义(P<0.05).实验组大鼠中血糖浓度越高,ICC数量越低,说明血糖浓度升高可能与平滑肌及神经末梢之间缝隙连接的减少及其ICC网络的超微结构损伤及异常有关.结论 DM小鼠胃组织中血糖水平的升高,可能是DM胃中ICC数量减少的原因;外源性降低血糖能改善DM相关的胃肠道ICC病变.     

针灸治疗糖尿病胃轻瘫研究概况

糖尿病胃轻瘫(DGP)是指继发于糖尿病基础上的以胃动力低下为特点的临床症候群,多见有胃脘胀满、食后胀增、早饱、厌食、恶心呕吐、体质量减轻等症状,是糖尿病常见的慢性并发症之一。目前,DGP的发病机制尚未完全阐明,且缺乏理想的治疗药物与手段,而采用针灸治疗DGP则显示出一定的优势,取得了一定进展。现将针灸治疗的主要临床研究概述如下。     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空率及胃电图的影响

目的：观察电针对糖尿病胃轻瘫（diabetic gastroparesis,DGP）大鼠胃排空率及胃电图的影响。方法将实验大鼠随机分为空白组、模型组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安组,每组10只。 DGP模型制备采用单次腹腔注射2％链脲佐菌素溶液和高糖高脂饮食喂养8周的方法。电针穴位组取大鼠“足三里”“梁门”“三阴交”穴,电针非穴组取穴位对照点,胃复安组予1.7%胃复安药液（1 mL/100 g）灌胃。用血糖仪测血糖;以酚红为标记物,检测大鼠胃排空率及小肠推进率;BL-420F生物机能系统记录大鼠胃电图。结果与空白组比较,模型组、电针穴位组、电针非穴组和胃复安组大鼠症状积分、血糖均显著升高（P＜0.01）,模型组胃排空率显著降低（P＜0.01）,模型组、电针穴位组、电针非穴组和胃复安组小肠推进率显著降低（P＜0.01）,模型组、电针非穴组胃电图平均振幅显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,电针穴位组症状积分、血糖显著下降（P＜0.01,P＜0.05）,胃排空率、小肠推进率明显增加（P＜0.05,P＜0.01）,胃电图平均振幅明显增高（P＜0.05）;与电针非穴组比较,电针穴位组症状积分明显下降（P＜0.05）;与胃复安组比较,电针穴位组症状积分显著下降（P＜0.01）。结论电针可改善DGP模型大鼠一般状况,控制血糖水平,促进胃排空,改善胃运动障碍,调节胃电图平均振幅。     

Notch信号通路在胃癌中的研究进展

在全球范围内,胃癌的发病率占所有恶性肿瘤的第二位,病死率位列癌症死亡第四位。我国胃癌发病率、病死率居首位。胃癌的发病机制仍不清楚,近年来众多学者致力于胃癌发病机制的研究,认为细胞信号转导通路的异常与胃癌的发生、发展密切相关。该文简要叙述Notch信号通路,及其相关因子与胃癌的研究进展,为胃癌的治疗提供新的思路。     

RhoA信号通路在胃癌中的研究进展

胃癌是中国常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展分子机制尚未阐明。Ras同源基因家族成员A(RhoA)编码小分子鸟苷三磷酸酶,是重要的细胞内信号分子开关,它通过调控细胞周期和基因表达调节细胞增殖、运动、细胞骨架装配及细胞周期等,在肿瘤的发生、发展中起重要作用。其中,RhoA基因突变是基因组稳定型胃癌的重要分子特征。而RhoA信号通路在胃癌的发生、浸润、转移及多药耐药机制中发挥重要作用,且与胃癌的预后相关。因此,其可能成为胃癌基因治疗中的一个潜在分子靶点。     

实验性脾虚证大鼠胃窦部SP、VIP、CGRP含量的研究

采用放射免疫分析方法（ＲＩＡ）观察了实验性脾虚证大鼠胃窦部Ｐ物质（ＳＰ）、血管活性肠肽（ＶＩＰ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）含量的变化。结果：脾虚组胃窦部ＳＰ、ＶＩＰ、ＣＧＲＰ免疫活性肽（ｉｒ ＳＰ、ｉｒ ＶＩＰ、ｉｒ ＣＧＲＰ）含量均明显降低，下降百分率为ｉｒ ＳＰ＞ｉｒ ＶＩＰ＞ｉｒ ＣＧＲＰ。自然恢复组ｉｒ ＳＰ含量无明显恢复，ｉｒ ＶＩＰ、ｉｒ ＣＧＲＰ含量均恢复正常。加味四君子汤治疗组ｉｒ ＳＰ含量有一定程度恢复，但与对照组相比仍有显著差异，ｉｒ ＶＩＰ、ｉｒ ＣＧＲＰ含量均恢复正常。结果提示：脾虚大鼠胃窦部ｉｒ ＳＰ、ｉｒ ＶＩＰ、ｉｒ ＣＧＲＰ含量的改变可能与脾虚证胃动力失调有一定关系，加味四君子汤对大鼠实验性脾虚证胃肠肽分泌异常有一定调理作用     

芍药苷抑制佐剂性关节炎大鼠mTOR信号通路的实验研究

目的 研究芍药苷（paeoniflorin,PF）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes,FLS）内mTOR信号的影响。 方法 将大鼠分为正常组、AA组、AA+PF 100 μg/mL组、AA+PF 200 μg/mL组、AA+PF 400 μg/mL组和AA+PBS组,除正常组外,其余各组大鼠均采用完全弗氏佐剂足跖注射法制备AA大鼠,AA+PF 100 μg/mL组、AA+PF 200 μg/mL组、AA+PF 400 μg/mL组大鼠造模后向尾静脉注射剂量为0.1 mL/200g体重PF,研究3个剂量PF对AA大鼠关节炎评分的影响。造模后第28天股动脉放血处死正常组和AA组大鼠,分离各组大鼠关节滑膜组织,培养FLS,将培养出的FLS分为正常组、AA组、AA+PF 1 μg/mL、AA+PF 2 μg/mL、AA+PF 4 μg/mL组,通过Real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS内mTOR表达的影响,Western blot检测PF对AA大鼠FLS磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白表达的影响,ELISA检测PF对AA大鼠FLS细胞因子白细胞介素（IL）-1、IL-6表达的影响,real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS内MMP3表达的影响,向FLS转染mTOR过表达载体48 h后再次检测IL-1、IL-6和MMP3的表达。 结果 PF能够降低AA大鼠关节炎评分。PF加药后48 h,与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为1、2、4 μg/mL时mTOR表达均降低。与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为2 μg/mL时p-mTOR蛋白表达量也降低。PF加药后48 h,与AA组FLS相比,AA大鼠FLS在PF为1、2、4 μg/mL时IL-1、IL-6、MMP3表达均降低。向AA+PF 2 μg/mL组FLS转染mTOR过表达载体48 h,与转染前相比,IL-1、IL-6、MMP3表达均升高。 结论 PF可以改善AA大鼠病理,其机制可能与AA大鼠FLS内mTOR信号的抑制有关。     

糖微康对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

随着分子生物学的发展,生长因子在糖尿病肾病发病中的作用已得到证实。其中TGF-β_1与肾脏肾小球系膜区扩张、细胞外基质(ECM)积聚、肾小球硬化最为相关。本实验通过观察中药糖微康对糖尿病大鼠肾脏TGF-β_1的影响,以探讨糖微康防治糖尿病肾病的作用机理。     

Effect of Acupuncture on the Notch Signaling Pathway in Rats with Brain Injury

Objective

To observe the effect of acupuncture on the Notch signaling pathway in rats with traumatic brain injury and to explore the pathogenesis of acupuncture intervention on traumatic brain injury.

Methods

Feeney’s freefall epidural impact method was used to establish a traumatic brain injury model in rats; the rats were randomly divided into a normal group, sham operation group, model group and acupuncture group. Acupuncture was performed in the Baihui (DU 20), Shuigou (DU 26), Fengfu (DU 16), Yamen (DU 15) and Hegu (LI 4) acupoints in the rat, and Yamen was punctured via Fengfu. Then, the rats in each group were randomly divided into three subgroups, namely the day 3 subgroup, day 7 subgroup and day 14 subgroup according to treatment duration. The modified neurological severity scores (mNss) method was used to perform neurobehavioral scoring for evaluating the degree of injury in the rats. The hematoxylin-eosin (HE) staining method was used to observe the pathological change in the brain tissue of rats in each group. Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (Q-PCR) technology was used to detect changes in the Notch1, Hes1 and Hes5 gene expression levels in the cortex on the injured side. Western blot was used to detect the protein expression changes.

Results

One day after modeling, the mNss scores in the model group and in the acupuncture group were significantly higher than those in the normal and sham operation groups (P<0.01) ; there was no statistically significant difference between the normal group and the sham operation group. The scores decreased with increased treatment time, and the scores in the acupuncture group decreased more significantly than those in the model group (P<0.01). The pathological examination by the HE staining method demonstrated that the brain tissue of the rats in the acupuncture and model groups relatively significantly changed. The Notch1 gene expression level in the acupuncture group was significantly higher than the level in all of the other groups (P<0.01) ; the Hes1 and Hes5 gene expression levels were also higher in the acupuncture group. The expression changes of the Notch1 and Hes1 protein were consistent with that of mRNA. In each experimental group, the mNss score and the pathological results by the HE staining method were consistent with the mRNA results.

Conclusion

Acupuncture could significantly promote high expression levels of Notch1, Hes1 and Hes5 in the brain tissue of traumatic brain injury rats. Therefore, acupuncture might be an important intervention for inducing endogenous stem cell proliferation and for promoting nerve repair.

     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦部INS及IR表达的影响

目的 观察电针“足三里”等穴对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)模型大鼠胰岛素及其受体表达的影响,探讨电针调整血糖、改善DGP胃肠动力的可能机制.方法 将50只SD大鼠随机分为5组,即空白对照组、DGP模型对照组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只.造模组按55 mg/kg单次右下腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖不规律饮食建立DGP模型,连续喂养8周,每周用强生稳豪倍易型血糖仪及试纸测量血糖,尿糖试纸测量尿糖.电针穴位取大鼠“足三里”、“梁门”、“三阴交”,电针非穴组取大鼠“足三里”、“梁门”、“三阴交”的穴位对照点,胃复安对照组予1.7％胃复安药液(1 ml/100 g)灌胃.治疗结束后,以酚红为标志物,观察各组大鼠胃排空率及小肠移行率,以ELISA法检测胃窦部胰岛素(INS)及胰岛素受体(IR)的表达.结果 与空白对照组比较,模型组血糖水平、症状积分明显升高,胃排空率、小肠移行率、胃窦部INS、IR含量明显降低(R0.01);与模型组比较,电针穴位组血糖水平及症状积分明显降低,胃排空率及小肠移行率、胃窦组织INS及IR表达升高(P＜0.05,P＜0.01),与电针穴位组比较,电针非穴组、胃复安对照组症状积分升高、胃窦部INS、IR含量明显减少(P＜0.05,P＜0.01).结论 电针能降低DGP大鼠血糖,促进DGP大鼠胃肠动力,其作用机制可能与增加胃窦部INS及IR含量有关.     

JNK信号通路在老年大鼠耳蜗细胞凋亡中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(c-Juna mino-terminal kinase,JNK)信号通路在老年大鼠耳蜗细胞凋亡中的作用,为老年性聋的预防和治疗提供更多的切入点。方法Wistar大鼠24只,其中12只为对照组(3～4月龄),12只为自然衰老组(22～24月龄);听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测听力学改变;采用透射电镜观察老年大鼠耳蜗的超微病理变化;用免疫组化及Western blotting方法检测p-JNK和p-c-Jun蛋白的表达。结果老年组大鼠听力〔(72.083±13.345)dBSPL〕较对照组〔(32.083±3.878)dBSPL〕明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01);透射电镜下可见外毛细胞有凋亡样改变,螺旋神经节细胞内大量脂褐素沉着;在耳蜗石蜡切片中可观察到p-JNK和p-c-Jun免疫反应阳性细胞,定位于细胞核,老年组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blotting结果显示老年组内耳组织p-JNK和p-c-Jun的蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在大鼠老年性聋的发生过程中,各种损伤因素可能通过激活JNK信号通路而促使耳蜗细胞的凋亡。     

肿瘤干细胞及其Wnt信号通路在胃癌患者中的表达

目的通过研究肿瘤干细胞及其Wnt信号通路在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎(伴肠化生或异型增生)、早期胃癌患者中的表达,来探讨肿瘤干细胞及其Wnt信号通路表达在胃癌患者中的作用机制。方法利用免疫组化技术分析了β-catenin和c-myc基因蛋白在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎(伴肠化生或异型增生)、早期胃癌患者非炎症区组织中的表达,并对其进行比较。结果在早期胃癌组和慢性萎缩性胃炎组,β-catenin和c-myc基因蛋白的表达均明显高于慢性非萎缩胃炎组,P<0.05;但早期胃癌组和慢性萎缩性胃炎组相比,β-catenin和c-myc基因蛋白的表达无显著差异,P>0.05。结论胃癌与胃的癌前病变与β-catenin和c-myc基因蛋白的过表达密切相关,Wnt信号通路在胃癌患者发病中具有重要意义。