血清肌红蛋白比浊法测定试剂的评价及其初步临床应用

目的 通过评价肌红蛋白测定试剂的性能,建立一种用全自动生化分析仪检测肌红蛋白的免疫比浊法。 方法 利用标记抗体检测抗原的比浊法原理,进行精密度、线性、回收率、干扰试验。 结果 本法标准曲线y＝7．3635＋0．9739x,r＝0．9997。正常人血清肌红蛋白浓度的批内CV％为0．25％,批CV％为1．49％。心肌梗塞病者的则分别人1．3％与2．23％,回收率为97．1％～104．7％。血清TG＞5．0mmol／L或Hb＞500mg／L对肌红蛋白的检测才有干扰。测定100例健康体检者血清肌红蛋白（SMb）含量为20．7～58．9μg／L。33例急性心肌梗塞（AMI）患者的SMb的含量为542±178μg／L。 结论 该法具有快速、灵敏、简便、准确的优点,对AMI的诊断有较高的应用价值。     

双标记前列腺特异性抗原时间分辨荧光免疫分析试剂盒研究

目的研制钐（Sm）标记检测总前列腺特异性抗原（tPSA）及铕（Eu）标记检测游离前列腺特异性抗原（fPSA）的双标记时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）试剂盒。方法以抗PSA单克隆抗体101^#包被96孔微孔板，用Sm^3＋标记抗tPSA单克隆抗体102^#、Eu^3＋标记抗fPSA单克隆抗体201^#，采用双抗体夹心法建立t／fPSA双标记TRFIA。标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-Log_B函数处理。结果tPSA批内和批间变异系数（CV）分别为2．38％和3．91％，最低检测下限0．02μg／L，可测范围为0．02～250μg／L，回收率为101．3％；fPSA批内和批间CV分别为3．16％和3．34％，最低检测下限0．05μg／L，可测范围为0．05～250μg／L，回收率为103．2％。t／fPSA TRFIA试剂盒测定健康组、前列腺良性疾病组和前列腺癌组（Pca）的tPSA平均值为1．4μg/L、4．3μg/L、14．2μg/L，fPSA平均值为0．3μg/L、1．5μg/L、6．2μg/L。tPSA3．6μg/L、f／tPSA〈0．21为Pca与良性疾病的鉴别阈值。自制试剂盒与PE公司进口试剂盒同时测定血清样本，二者tPSA与fPSA的相关系数分别为0．99和Q97。结论自制t／fPSA TRFIA试剂盒的各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品。     

氢化物发生原子荧光法测定全血铅含量

目的 建立一个易于推广使用的新的血铅浓度检测方法。方法 全血样本经硝酸—高氯酸消化后，在pH0．8～1．0条件下，使用氢化物发生原子荧光光谱仪测定铅含量。结果 血铅浓度在0～600μg／L范围内线性良好，r=0．999；测定高、中、低3种浓度全血样本，批内变异系数(CV)分别为4．1％、3．6％、3．5％，批间CV分别为4．9％、4．6％、4．7％，回收试验的平均回收率分别为105．4％、98．5％、94．8％，对中国预防医学科学院系列浓度铅标准质控物质的单盲测定结果均在规定范围内；检出限为0．3ng；全血中主要二价阳离子对铅测定无明显干扰；样品在4℃保存至少可稳定1个月；使用该法测定天津市869名儿童血铅含量，均值91．9μg／L，中位数83．8μg／L，范围23．1～386．3μg／L，呈正偏态分布。结论 该法对血铅测定是一个灵敏、准确、精密、廉价、快速的分析方法，适于我国绝大部分医疗机构开展铅防治工作的要求。     

用原子吸收光谱法检测血清及组织中的硅

作者建立了原子吸收分光光度法检测血清及组织中硅含量的方法，并且检测了乳房植入及未植入硅的妇女的血清和乳房组织样品、正常人血清以及透析病人的血清样品。血清样品及标准硅溶液用含氧化铝、氯化钙、磷酸锭、EDTA等化学添加剂的溶液按1∶4稀释后进行检测；组织样品经90℃干燥、90℃浓硝酸硝化后用水及50％氢氧化钾按1∶4稀释，在石墨炉内251．6nm处用原子吸收分光光度法进行检测。此方法在1000μg／L以内呈线性，浓度为73μg／L，时CV是8．4％，281μg／L的CV是5．9％，回收率为97％～104％。21岁～44岁的妇女（n＝60）血清中硅含…     

固蓝B单一试剂显色法测定血清总胆红素的探讨

用固蓝B、HCl、尿素已制单一试剂测定血清总胆红素。方法学评价结果：线性范围0～342．0μmol／L，批内CV1．52％，批间CV2．10％，回收率98．2％～102．9％，表观摩尔消光因数K630＝1．0007×105cm2／mol，Hb≤2．5g／L，NaN3≤2．0g／L基本不影响胆红素测定，与改良J－G法比较，γ＝0.999，Y（本法）＝0．99X＋0．15。     

4种方法检测低水平乙型肝炎表面抗原比较

目的比较4种方法对低水平乙型肝炎表面抗原检测的灵敏度与符合率。方法采用Axsym微粒子酶免分析（MEIA）、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免疫层析（GICA）4种方法对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L血清标本及定值质控标本进行检测与比较。结果MEIA、TRFIA、ELISA、GICA检测HBsAg的灵敏度分别为0．125μg/L、0．25μg/L、0．50μg/L和2．50μg／L，对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L的血清阳性检出率为74．5％、70．6％、63．2％、22．1％。以MEIA及中和确认试验为准，TRFIA、ELISA、GICA3种方法对HBsAg浓度在5μg/L以下的血清标本漏检率占阳性总检出者的5．9％、16．4％和70．4％。与MEIA的相符率为95．1％、86．8％、47．5％。结论不同的方法对低水平HBsAg检测灵敏度差异较大，HBsAg浓度5μg／L以下的血清标本阳性检出率高低依次为MEIA〉TRFIA〉EUSA〉CICA。     

4种方法检测低水平乙型肝炎表面抗原比较

目的比较4种方法对低水平乙型肝炎表面抗原检测的灵敏度与符合率。方法采用Axsym微粒子酶免分析（MEIA）、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免疫层析（GICA）4种方法对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L血清标本及定值质控标本进行检测与比较。结果MEIA、TRFIA、ELISA、GICA检测HBsAg的灵敏度分别为0．125μg/L、0．25μg/L、0．50μg/L和2．50μg／L，对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L的血清阳性检出率为74．5％、70．6％、63．2％、22．1％。以MEIA及中和确认试验为准，TRFIA、ELISA、GICA3种方法对HBsAg浓度在5μg/L以下的血清标本漏检率占阳性总检出者的5．9％、16．4％和70．4％。与MEIA的相符率为95．1％、86．8％、47．5％。结论不同的方法对低水平HBsAg检测灵敏度差异较大，HBsAg浓度5μg／L以下的血清标本阳性检出率高低依次为MEIA〉TRFIA〉EUSA〉CICA。     

血清乳酸全自动测定方法的建立

目的建立一种测定血清乳酸的全自动分析方法。方法采用氧化酶法在贝克曼LX20全自动生化分析仪上进行血清乳酸测定结果所建立的氧化酶法全自动血清乳酸测定方法其血清乳酸回收率为98．49％,线性范围可达16．0mmol／L．批内变异系数（CV）1．83％、批间CV2．25％,轻、中度黄疸和溶血标本对血清乳酸的测定无显著干扰,210例健康儿童血清乳酸值为0．56～2．60mmol／L（x^-±2s）。结论采用氧化酶法测定血清乳酸快速、准确、简便、可靠,线性范围宽,适合临床应用。     

用高效液相色谱法测定血清醋氨酚浓度及临床意义

用高效液相色谱（HPLC）测定血清醋氨酚浓度的方法，以β－羟乙基茶碱为内标，用乙腈沉淀血清蛋白，采用国产不锈钢色谱柱（150mm×5mm），流动相组分为乙腈／醋酸缓冲液＝7／93（V／V），用254nm固定波长检测器进行检测。最低检出浓度为5μg／ml。血清醋氨酚浓度至少在25～400μg／ml范围内成线性相关，相对回收率平均为98.7％，批内及批间变异分别为1．06％和3．45％，该方法操作简单、快速、准确，可在一小时内报告结果，适于临床上醋氨酚中毒的急诊测定，可及时为临床医生的诊断提供可靠的实验室依据。     

血清铜比色方法探讨

目的探讨血清铜的比色方法。方法用不去蛋白比色法对孕妇和育龄未孕妇女及正常男性的血清铜参考值进行比较,并作方法学评价。采用日本世诺公司试剂盒,在自动生化分析仪HITACHI7060上进行测定。结果批内CV分别为5．13％、1．67％,日间CV分别为4．3％、2．5％;3种不同浓度定值血清测定的偏倚分别为：2．5％、3．4％及1．4％;正常孕妇血清铜为30．5μmol／L,育龄未孕妇女血清铜为17．5μmol／L,正常男性血清铜为13．89μmol／L。结论血清铜比色法简便,灵敏度高,精密度及准确性均符合临床要求,适合临床常规应用。     

绵阳市0～14岁人群维生素D水平调查

目的：了解绵阳市0～14岁人群维生素D（VitD）营养状况。方法调查对象为2564例在绵阳市中心医院门诊就诊的0～14岁人群,用电化学发光法测定其血清25-羟维生素D [25（O H ）D ],对结果进行统计学分析。结果 2564例0～14岁人群25（OH）D为（30．63±12．78）ng/mL ,最低值为3．00 ng/mL ,最高值为70．00 ng/mL。VitD缺乏574例,占22．4％;VitD不足744例,占29．0％;VitD充足1246例,占48．6％。男性和女性的VitD水平差异无统计学意义（P＞0．05）。2岁以后,随着年龄的增加,VitD水平逐渐降低,VitD缺乏率逐渐升高。1～2岁为VitD水平峰值阶段。结论绵阳市0～14岁人群VitD水平较低,6岁以后VitD缺乏情况更加严重。因此,应该定期进行VitD营养状况的调查,增加孩子户外活动时间,及时补充VitD。     

Analytical and clinical validation of the 25 OH vitamin D assay for the LIAISON automated analyzer

OBJECTIVE: Methods to assess serum 25 OH vitamin D have improved in accuracy, precision, and ease of use. We describe the analytical and clinical validation of an automated, antibody- and microparticle-based, chemiluminescent immunoassay method for the determination of 25 OH vitamin D. DESIGN AND METHODS: The LIAISON 25 OH Vitamin D assay is a rapid automated method with first results available in 40 min, and a subsequent throughput of 180 samples per hour. Assay performance characteristics of precision and recovery were determined according to the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) protocols. Analytical and functional sensitivity were determined according to standard protocols. Samples for method comparison studies were obtained from routine clinical samples submitted for 25 OH Vitamin D determination or from apparently healthy normal volunteers. RESULTS: The detection limit for this assay was <2.0 nmol/L across three lots of materials. Functional sensitivity (inter-assay imprecision <20%) was 17.5 nmol/L. Total imprecision (CV) was <15% at 42.5-137.5 nmol/L. Mean (SD) recovery was 101% (13%). The assay was linear on dilution. Comparison with radioimmunoassay (RIA) yielded acceptable correlation (r = 0.88) and clinical equivalence in the range from 37.5 to 150 nmol/L. CONCLUSIONS: The LIAISON 25 OH Vitamin D assay is a rapid, accurate, and precise tool for the measurement of 25 OH vitamin D.     

3岁以下哮喘患儿血清维生素D水平及其与肺功能的关系

【目的】探讨3岁以下哮喘儿童与维生素D水平其及与肺功能的关系。【方法】选取106例6个月至3岁哮喘患儿作为观察组;选取同期在儿童保健科体检的健康儿童82例为对照组。分别检测两组儿童血清25-（OH）-D。水平,并测定潮气呼吸肺功能。根据维生素D检测水平分类维生素D不足（〈50nmol／L）和维生素缺乏（〈25nmol／L）。【结果】观察组的维生素D缺乏、不足比例均高于对照组（x2-9．111,P-0．011）。观察组中维生素D缺乏者的气道重度阻塞率显著高于维生素D不足者和维生素D正常者,且随着25-（0H）-D。水平的逐渐降低,阻塞程度也不断加重（P〈O．01）。维生素D缺乏者的支气管舒张试验阳性率显著高于维生素D不足者和维生素D正常者,且随着25-（OH）-D。水平的逐渐降低,支气管舒张试验阳性率也逐渐增大（P〈0．05）。【结论】维生素D缺乏或不足与3岁以下儿童哮喘密切相关,25-（OH）-Ds水平与哮喘加重具有相关性,加重了小气道的阻塞程度,并可增加3岁以下儿童哮喘患儿的气道反应性。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对,分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％,批间CV为2．94％;血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％,批间CV为2．7％;平均回收率TBil为101．1％,DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰,三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰,对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

ICP-AES法测定全血锰的方法学评价

目的对电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定血锰进行方法学评价,并应用于日常检测工作。方法全血样本经1 mol/L硝酸处理后吸取上清液,采用ICP-AES在279.544 nm处测定样本,评价其精密度、回收率、灵敏度及抗干扰能力;同时采用ICP-AES测定1 027名健康体检儿童的全血锰浓度,确定正常参考范围。结果 ICP-AES测定血锰的批内变异系数(CV)为6.2%～6.6%,批间CV为7.1%～7.6%,总CV为7.2%～7.8%,相对偏差(RSD)为1.66%～2.36%,加标回收率为95.0%～96.9%,线性方程为Y=7 035.6X+759.02,r=0.999 7;在水空白和100μg/L锰标准储备液中按1∶1分别加入25 mg/L钾、钠、氯、钙、镁标准溶液和2 mg/L铁标准溶液后未检测出锰浓度有明显变化。1 027名健康体检儿童的全血锰正常参考范围为(4.89±2.67)μg/L。结论 ICP-AES检测全血锰未发现明显系统误差,且精密度高、准确度好,可作为检测全血锰的常规方法。     

气质联用技术检测尿琥珀酰丙酮及其在酪氨酸血症诊断中的应用

目的建立气相色谱质谱用技术（GC-MS）测定尿琥珀酰丙酮（SA）的方法,用于临床上鉴别诊断酪氨酸血症Ⅰ型患者。方法尿SA先用盐酸羟胺进行污化反应,然后用乙酰乙酸2次萃取,双三甲基硅烷-三氟乙酰胺（BSTFA-TMCS）衍生化,衍生化后的SA用气相色谱质谱仪进行测定分析。质谱分析模式采用选择离子监测（SIM）模式进行检测,SA选择212/182 m/z,内标丙二酸选择233/248 m/z。分析该法的精确性、稳定性、样本回收率、残留分析和实测浓度与加入浓度之间的相关性。用该法检测肝肿大伴酪氨酸升高的13例患者。结果SA批内变异系数（CV）为6.8%;批间CV为7.8%;回收率为94.0%-102.0%;前处理CV为12.4%;残留分析〈1%。在5-120 mg/mL之间,实测浓度与加入浓度之间的相关系数（r）为0.997。内标丙二酸回收率为95.0%-103.0%。确诊酪氨酸血症Ⅰ型患儿2例,尿SA浓度分别为26、54 mmol/mol肌酐。结论GC-MS测定尿SA具有较高的回收率、精确性和准确性,为临床上鉴别诊断酪氨酸血症Ⅰ型提供了新的方法。     

化学沉淀法测定小而密低密度脂蛋白方法的建立

目的利用化学沉淀原理建立小而密低密度脂蛋白(sdLDL)快速、简便的检测方法。方法通过比较不同种类及不同浓度沉淀剂对血清样本中脂蛋白的分离效果,确定最终沉淀剂,并对化学沉淀法测定血清sdLDL-C的精密度、线性范围和回收率进行分析。结果最终选择140 U/mL肝素-90 mmol/L Mg2+作为沉淀剂测定血清sdLDL胆固醇(sdLDL-C)含量。化学沉淀法测定sdLDL-C在0.14~1.44 mmol/L范围内线性关系良好,回归方程为Y=1.025X-0.197,r=0.988;对高、低2组不同sdLDL-C浓度的样本批内变异系数(CV)分别为2.83%、3.19%,批间CV分别为5.49%、6.13%;回收率为83.81%。结论 sdLDL化学沉淀法具有样本用量少、操作简便、成本低廉等优点,更适合常规实验室检测血清sdLDL-C含量。     

血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。     

HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较

目的建立测定血清甲氨蝶呤（MTX）浓度的高效液相色谱（HPLC）法,并与荧光偏振法（FPIA）作比较,评价其临床实用性。方法血清样本经20%高氯酸沉淀蛋白质,吸取上清液进行HPLC分析。以MTX标准品外标法建立标准曲线,检测62例用药后患者血清MTX浓度,同时以FPIA测定。结果 HPLC法在0.049~25 ng/L内线性关系良好,日内及日间相对标准偏差（RSD）均〈6%,最低检测浓度为0.025 ng/L。HPLC法和FPIA具有良好的相关性（r=0.973,P〈0.01）,2种方法测定值的差异无统计学意义（P=0.705）。结论 HPLC法具有便捷、准确、成本低等特点,与FPIA相关性良好,适用于临床MTX的血药浓度监测。     

生物样品中铜的石墨炉原子吸收检测及其在肝豆状核变性诊断中的应用

目的建立诊断肝豆状核变性患者的生物样品中微量铜的石墨炉原子吸收检测方法。方法尿液和血清样品经1％HNOsub3/sub 稀释后,采用石墨炉原子吸收光谱标准曲线法直接测定。结果线性范围0~200 g/L,相关系数0.9997,方法检出限为1.4 g/L,回收率96.7％～99.2％,相对标准偏差1.0%~1.7％,经冻干人尿标样（GBW 09102）对照测定,其结果在允许范围内,相对误差为-1.2％。结论采用GFAAS法测定生物样品中铜,方法可靠、准确、灵敏,能适用于肝豆状核变性诊断中生物样品微量铜检测的要求。