伏格特-小柳-原田综合征患者外周血淋巴细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的 探讨Fas、FasL mRNA在伏格特-烛柳-原田(Vogt-Koyanagi-Harada,VKH)综合征患者外周血淋巴细胞的表达。方法 于2000年1～6月抽取16例VKH综合征患者和19例正常人的外周血,提取淋巴细胞的总RNA,将RNA逆转录为cDNA,然后用荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)的方法实时检测Fas、FasL PCR扩增的全过程,计算样本中Fas、FasL mRNA的表达量。结果 VKH综合征患者外周血淋巴细胞的Fas mRNA的表达量[(1.6±2.0)×106]显著高于正常对照组[(5.7±2.0)×105](t=4.50,P<0.05),FasLmRNA的表达量[(1.8±1.5)×106]也显著高于正常对照组[(4.8±3.5)×105](t=9.57,P<0.05)。结论 VKH综合征患者外周血中长期存在的大量Fas、FasL mRNA高表达的活化自身免疫性淋巴细胞,可能是其炎性反应反复发作、病情迁延不愈的重要原因之一。(中华眼科杂志,2004,40:507-509)     

Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达

目的研究Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达及其可能的意义。方法采用流式细胞仪(flowcytometry)及三色荧光双标记细胞免疫荧光技术对26例Behcet病患者和43例正常人外周血T淋巴细胞表面Fas和FasL抗原的表达进行检测。结果Behcet病CD4+T细胞Fas表达阳性率为25.70%±7.32%,对照组为14.02%±6.30%,二者有显著性差异(P＜0.01);但CD4+T细胞的FasL表达在2组间无显著性差异。CD8+T细胞Fas表达阳性率为9.47%±6.97%,对照组为3.47%±2.75%,二者有显著性差异(P＜0.01),但FasL表达阳性率二者无显著性差异。结论Behcet病患者外周血CD4+和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能有效地通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是Behcet病患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因之一。     

Behcet病周围血淋巴细胞Fas和FasL的表达

目的 观察Behcet病周围血淋巴细胞Fas和FasL的表达及其意义。方法 应用Oligod(T)18和M-MuLv逆反录酶方法，观察19例Behect病患者和19个正常人周围血淋巴细胞的Fas和FasL mRNA表达，并用流动细胞计和免疫荧光法进一步观察T淋巴细胞的Fas和FasL的表达。结果 Behcet病组Fas和FasL的表达明显高于对照组。Fas抗原在CD4^ 和CD86 的表达明显高于对照组，但FasL的表达与对照组无明显表达明显增设，但其分子表达不平衡，此可能是Behcet病慢性和复发性炎症的一个重要机制。     

Behcet病患者外周血淋巴细胞共刺激分子的表达

目的观察Behcet病患者外周血淋巴细胞CD80(B7-1)、CD86(B7-2)、CD28、CTLA-4分子的表达。方法采用流式细胞三色直接免疫荧光标记法，对24例Behcet病患者(Behcet病组)和20个正常人(对照组)外周血T、B淋巴细胞亚群的共刺激分子CD80、CD86、CD28和CTLA-4的表达进行检测。结果Behcet病患者外周血CD ⁴⁺ T细胞表面 CTLA-4 分子的表达[(3.18±1.18)%]高于对照组[(1.73±0.66) %]，两者差异有显著性的意义(t=-3.722,P<0.01)；CD19⁺ B细胞表面CD86分子的表达[(4.49±1.73)%]高于对照组[(2.40±1.49) %]，两组比较差异有显著性的意义(t=－2.071,P<0.05)。比较两组间其它分子的表达，差异均无显著性的意义。结论Behcet病患者 B7、 CD28的相互作用促进了葡萄膜炎的发生，阻断其相互作用可能为今后葡萄膜炎的治疗提供一种新思路。(中华眼底病杂志,2003,19:357-359)     

Vogt-小柳原田综合征患者外周血和脑脊液淋巴细胞共刺激分子的表达

目的　探讨Vogt-小柳原田综合征 (VKH)患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD2 8和CTLA -4分子的表达及意义。方法　采用流式细胞三色直接免疫荧光标记法 ,检测了 3 9例VKH综合征患者外周血T、B淋巴细胞亚群上共刺激分子CD80 (B7-1)、CD86(B7-2 )、CD2 8和CTLA -4的表达。VKH综合征患者分为葡萄膜炎活动期 (18例 )和静止期 (2 1例 )两组。对于 3例初发的VKH综合征患者 ,我们还检查了脑脊液中T淋巴细胞上共刺激分子的表达。结果　VKH综合征活动期患者外周血CD4 T细胞表面CD2 8分子的表达有所增高 (97 0 %± 3 71% ,正常人为 95 3 %±3 19% ) ,而静止期患者有所下降 (93 7%± 7 5 6% ) ,但三组比较无显著差异。静止期患者CD4 T细胞表面CTLA -4分子的表达 (2 72 %± 1 42 % )显著高于正常人 (1 73 %± 0 66% ) (P <0 0 5 )。另外 ,VKH综合征活动期患者外周血CD4 和CD8 T细胞表面CD86分子的表达显著低于静止期患者和正常人 (P <0 0 5 )。与自身外周血淋巴细胞比较 ,3例初发VKH综合征患者脑脊液CD4 T细胞显著增多 (t=3 3 2 5 ,P <0 0 5 ) ,CD4/CD8比值显著升高 (t =3 2 76,P <0 0 5 ) ,CD2 8分子的表达也显著增高 (t =4 2 42 ,P <0 0 5 )。结论　VKH病患者外周血及脑脊液淋巴细胞上B7、CD2 8     

Fas／FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达

目的评价和探讨Fas/FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达及其可能存在的意义.方法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)及三色荧光双标记细胞免疫荧光染色技术对26例Behcet病、17例Vogt-小柳原田综合征患者、25例特发性前葡萄膜炎患者及43例正常人外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞表面Fas和FasL的表达进行检测.结果Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和特发性前葡萄膜炎患者CD4+T细胞Fas的表达阳性率分别为(25.70±7.32)%、(19.60±11.02)%、(20.81±7.40)%,均显著高于正常对照组[(14.02±6.30)%],而FasL的表达阳性率与正常对照组比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率分别为(9.47±6.97)%,(6.84±5.53)%,均显著高于正常对照组[(3.47±2.75)%];特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率[(5.34±3.08)%]与正常对照组[(3.47±2.75)%]比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率分别为(3.66±2.16)%、(4.05±1.38)%,与正常对照组[(3.09±2.04)%]比较,差异无显著性意义;特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率[(1.58±0.93)%]低于正常对照组[(3.09±2.04)%].结论葡萄膜炎患者CD4+T细胞和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,而FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是葡萄膜炎患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因.     

细胞因子信号抑制因子在Behcet病患者外周血单核细胞的表达

目的 探讨Behcet病患者外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell PBMC）细胞因子信号抑制因子（sup-pressor of cytokine signaling, SOCS）表达以及SOCS在Behcet病发病机制中的作用.设计病例-对照研究.研究对象16例Behcet病患者及16例正常人.方法 取Behcet病患者和正常人的静脉血,用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4、IL-12、IFN-γ的水平;用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹方法检测外周血单核细胞内SOCS基因和蛋白的表达.主要指标Behcet病患者和健康人之间IL-4、IL-12、IFN-γ、CIS、SOCSI、SOCS2、SOCS3、SOCS5含量.结果 IL-4、IL-12和IFN-γ在Behcet病患者血清中的水平均较正常对照组显著升高（P均〈0.05）.相对荧光定量PCR结果显示含SH2结构的细胞因子诱导蛋白（cytokine in-ducible SH2 containing protein,CIS）、SOCS1、SOCS2、SOCS3、SOCS5 mRNA在Behcet病患者PBMC内的表达分别是正常对照组的0.42、1.19、1.31、0.64和1.16倍.蛋白免疫印迹结果显示Behcet病患者的CIS水平显著低于正常人（P〈0.01）,SOCSI明显高于正常人（P〈0.01）,SOCS2在患者和正常对照组之间无显著差异（P〉0.05）,SOCS3低于正常对照组（P〈0.01）,SOCS5高于正常对照组（P〈0.01）.结论 Behcet病患者PBMC内SOCSI和SOCS5水平升高、CIS和SOCS3水平降低与Behcet病Th1型反应增强有关.SOCS5在Behcet病发生过程中可能起保护作用.     

人类白细胞抗原-B51与Behet病葡萄膜炎的相关性研究

目的　探讨人类白细胞抗原 (HL A) - B5 1与 Behcet　 ) 病葡萄膜炎间的相关性。　方法　应用微量淋巴细胞毒试验 ,对 2 7例 Behcet　 ) 病患者和 30例健康人的 HL A- A和 HL A- B抗原进行研究。应用聚合酶链式反应 -序列特异性引物 (PCR- SSP)技术测定 HL A- B5 1抗原阳性的 Behcet　 ) 病患者和对照组人群中的HL A- B5 1等位基因 (HL A- B* 5 10 1- B* 5 10 7)。　结果　 Behcet　 ) 病患者和对照组 HL A- B5 1的阳性频率分别为 6 3%和 16 .7% [χ2 =12 .9,P<0 .0 0 1,Pc<0 .0 5 ,相对危险度 (RR) =8.5 ]。在 Behcet　 ) 病患者中 ,葡萄膜炎的患病率为 4 0 .7% (11/ 2 7) ;72 .7% (8/ 11) Behcet　 ) 病葡萄膜炎中存在 HL A- B5 1(均为 HL A- B* 5 10 1)。HL A- B5 1和 HL A- B* 5 10 1与 Behcet　 ) 病葡萄膜炎存在弱相关性 ,但均未见统计学差异 (分别为 RR=2 .0 7,χ2 =0 .75 9,P >0 .2 5 ;RR =2 .6 7,χ2 =1.395 ,P >0 .10 )。　结论　提示 HL A- B5 1(HL A- B* 5 10 1)是Behcet　 ) 病的易感基因 ,并与葡萄膜炎有一定的相关性     

Behcet''''s病患者外周血和结节性红斑组织中T-bet基因的表达及意义

目的观察Th1细胞特异性转录因子T-bet(T-boxexpressinTcells)在活动期Behcet’s病患者外周血单个核细胞和结节性红斑组织中的表达情况,探讨T-bet在Behcet’s病发病中的作用和地位。方法收集14例活动期Behcet’s病患者和12例正常人外周血,采用Western免疫印迹检测外周血单个核细胞的T-bet的表达水平;对4例Behcet’s病活动期患者腿或臂部结节性红斑组织进行免疫组织化学染色观察的T-bet表达。结果14例活动期Behcet’s病患者均可检测到相对分子质量约为62000的特征性免疫印迹带,所有的正常对照却没有发现。正常人皮肤表皮T-bet分子表达均为阴性,4例结节性红斑表皮T-bet分子均表达阳性,表皮阳性细胞数为108个±10个/mm2,阳性表达率为35%～42%。结论活动期Behcet’s病外周血单个核细胞和结节性红斑组织T-bet的表达均显著增高,T-bet分子可能在Behcet’s病发病机制中起重要作用。     

苯丁酸氮芥诱导Behcet病患者活化淋巴细胞凋亡的研究

目的 研究苯丁酸氮芥对Behcet病患者活化淋巴细胞凋亡的诱导作用。方法 分离正常人与Behcel病患者外周血淋巴细胞并用PHA刺激活化,然后加入苯丁酸氮芥进行体外培养,利用Annexin-V/PI双标记法结合流式细胞技术定量检测淋巴细胞的凋亡。 结果 (1)正常人和Behcet病患者外周血淋巴细胞经PHA活化后均可发生凋亡,其自发凋亡率分别为20.9％±3.4％和16.3％±2.7％,二者具有显著性差异(t=2.36,P<0.05);(2)Behcet病患者的活化淋巴细胞经苯丁酸氮芥作用后凋亡细胞均显著增多,凋亡率从16.3％±2.7％上升至23.6％±5.6％(t=2.72,P<0.05)。结论 Behcet病患者的活化淋巴细胞对凋亡具有抵抗性;苯丁酸氮芥可诱导Behcet病患者的活化淋巴细胞发生凋亡,此可能是其控制炎症与防止炎症复发的作用机制之一。