蛋白激酶C在非心脏器官预处理中的作用

目的探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）在心脏以外组织器官缺血或缺氧预处理（ＰＣ）保护中的作用及其机理。方法分别在原位灌流的大鼠小肠、肢体缺血再灌注模型和培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧模型上观察ＰＫＣ对于器官缺血或细胞缺氧ＰＣ作用的影响。结果ＰＫＣ抑制剂Ｈ７和多粘菌素Ｂ完全消除缺血ＰＣ对小肠和肢体的保护作用;缺氧ＰＣ激活ＶＳＭＣ内ＰＫＣ,并使ＰＫＣ介导的蛋白磷酸化反应加强。结论ＰＫＣ激活是心脏以外组织器官ＰＣ保护的重要环节,其机制可能与底物蛋白的磷酸化有关。     

缺氧性应激反应的分子机制

氧稳态为生存所必需,其在肿瘤、心脑缺血和慢性心肺疾病的发病机制中也起重要作用。在某些生理或病理情况下,整体或局部缺氧或缺血可导致缺氧性细胞应激(hypoxia cellular stress),引起机体或细胞产生一系列的适应反应,以维持氧稳态。体内所有有核细胞均能感受急慢性的氧浓度改变,     

L-Carnitine拮抗培养心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的：探讨L－Carnitine对心肌细胞缺氧／复氧损伤的防护作用及其可能的机制。方法：以原代培养新生鼠心肌细胞建立缺氧／复氧损伤模型,观察不同剂量L－Carnitine处理后细胞增殖活性,凋亡细胞百分率及DNA断片化率,作为反映L－Carnitine对心肌细胞缺氧／复氧损伤防护作用及其机制的指标。结果：在5－5000nmol/L范围内,L－Carnitine预处理对培养心肌细胞缺氧／复氧损伤均显著保护效应,在5,50及500nmol/L时均显著降低DNA断片化率;L－Carnitine在50nmol/L时与单纯缺氧／复氧组比较可显著降低凋亡细胞百分率。结论：缺氧／复氧对心肌细胞的影响之一是可诱导心肌细胞亡。L-Carnitine对培养心肌细胞培养缺氧／复氧损伤具有防护作用。其机制可能与抑制缺氧／复氧诱导细胞凋亡有关。     

缺氧复氧性损伤对培养海马细胞ICAM-1表达影响及银信达莫的保护作用

目的研究缺氧复氧性损伤对培养海马细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达影响及银信达莫的保护作用,探讨其可能的机制。方法将SD大鼠分设正常条件培养组、单纯缺氧复氧组(HR)、缺氧复氧+银信达莫组,于缺氧1h后复氧6h,测定海马细胞ICAM-1表达水平及细胞胞浆游离钙([Ca2+]i)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱苷肽(GSH)水平。结果海马细胞缺氧复氧刺激时,ICAM-1蛋白质表达[、Ca2+]i和MDA均有显著增加,而SOD、GSH、NOS明显下降;银信达莫可明显改善缺氧复氧性海马细胞ICAM-1的表达和MDA[、Ca2+]i超载增高的程度以及SOD、GSH、NOS下降程度。结论海马细胞缺氧复氧通过直接或间接激活ICAM-1引起细胞损伤,但钙超载、氧自由基和NOS系统也共同参与了缺氧复氧性损伤。银信达莫通过直接或间接抑制上述各系统而达到减轻缺氧复氧性损伤。     

氧糖剥夺条件下神经细胞损伤机制研究进展

氧糖剥夺（oxygen glucose deprivation,OGD）通过对细胞培养条件的改变,模拟细胞在缺血/缺氧情况下的损伤,是在细胞层面上模拟缺血/缺氧常用的一种刺激模型。神经系统的细胞主要由神经元和神经胶质细胞组成,缺血缺氧后细胞会产生坏死、凋亡、自噬等现象,中枢神经系统的OGD往往导致不可逆的、毁灭性的后果,最终导致神经功能受损。OGD诱导的神经细胞损伤机制非常复杂,主要有细胞凋亡、钙离子超载、氧化应激、兴奋性氨基酸增多、能量代谢障碍等,这些要素并不是独立的,而是相互影响、互为因果的。因此,该文拟对OGD条件下神经细胞损伤机制研究进展进行综述。     

缺血缺氧状态下细胞自噬相关分子机制的研究进展

细胞自噬是细胞依赖溶酶体的分解代谢过程,能降解受损蛋白、衰老或损伤的细胞器等细胞结构,可被多种应激所触发。在营养匮乏或组织缺血缺氧等应激条件下,自噬作为相应的代谢过程通过提供代用能源及清除功能异常的细胞器及蛋白质类维持细胞存活。缺血缺氧是细胞自噬激活的重要诱因之一,自噬的适度增强可促进细胞在缺血缺氧等状态下的存活。该文就细胞自噬的分子机制、缺血缺氧状态下自噬调控通路的调节机制及其分子水平检测技术的研究进展予以综述。     

细胞缺氧复氧模型建立方法的研究进展

细胞缺氧复氧模型被广泛的用于机体缺血/再灌注损伤及缺血预适应的研究,本文综述了细胞缺氧复氧模型建立方法的最新研究进展,包括单纯物理性模型、单纯化学性模型,以及对模型的评价。     

TTC36蛋白在缺氧复氧诱导的肝脏缺血再灌注损伤中的表达

目的:通过缺氧复氧(H/R)致肝细胞损伤的细胞模型模拟肝缺血再灌注损伤,探索TTC36蛋白对缺氧复氧诱导的肝细胞损伤的动态表达,为临床上的肝脏缺血再灌注损伤提供新的监测指标.方法:选取人正常肝细胞LO2经过厌氧袋和无糖无血清培养基处理建立肝缺血再灌注损伤的细胞模型,检测LO2细胞在缺氧复氧过程中的细胞活力、肝损伤标志物谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)表达水平的差异,验证模型的可行性,同时利用蛋白印迹的方法检测TTC36蛋白在缺氧复氧诱导的肝细胞损伤中的差异表达.结果:LO2细胞构建的缺氧复氧模型中细胞活性降低,细胞外液中的ALT、AST活性增加,细胞中SOD、MDA、GSH活性降低,TTC36蛋白表达下调;且随着复氧时间延长,细胞活性、ALT、AST、SOD、MDA、GSH活性和TTC36蛋白的表达均恢复正常.结论:TTC36蛋白在缺氧复氧诱导的肝缺血再灌注损伤过程中表达明显差异,可能是监测缺血再灌注过程中肝功能损伤和修复的重要靶分子之一.     

细胞保护剂

细胞保护剂是指对细胞膜有稳定作用,能提高细胞对缺血、缺氧的耐受性,即对细胞有明显保护作用的药剂。在休克过程中由于细胞遭受缺血、缺氧损伤,因此有大量休克因子和休克体液因素产生,促进或加速了休克的发生和发展。在休克的早期,细胞尚未受到严重的缺血、缺氧损伤,此时如应用细胞保护剂,可以提高细胞对缺血、缺氧的耐受性,减轻细胞损伤,减少休克因子和休克体液因素的产生,防止休克加重。山莨菪碱、皮质激素是临床上常用于防治休克的细胞保护剂。     

蒺藜皂苷对缺氧-复氧诱导大鼠皮层神经元凋亡的影响

目的：观察蒺藜皂苷（Tribulus terrestrisL．saponion，TTLS）对大鼠皮层神经元经缺氧一复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N：与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3h，再给予95％O2。与59／6CO2混和气复氧12h，建立缺氧复氧损伤的皮层神经元凋亡模型。中药组于缺氧-复氧时均加入TTLS进行干预。AnnexinV—FITC／碘化丙啶（propidiumiodide，PI）双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率；JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内caspase-3／7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况。结果：细胞缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内caspase-3／7活性增多，Bax蛋白大量表达（P〈0．01）。TTLS能抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少caspase-3／7活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生。结论：缺氧一复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。TTLS可降低缺氧-复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与维持线粒体膜电位的稳定，抑制caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。