无生长追赶出生低体重幼鼠生长激素/胰岛素样生长因子1轴抵抗与胰岛素抵抗的相关研究

目的探讨生后无生长追赶的出生低体重（NCU—SGA）幼鼠的胰岛素抵抗对生长激素（GH）抵抗的影响及其受体后信号转导机制。方法以母鼠孕期限制饮食法建立雄性NCU．SGA模型研究：（1）GH和胰岛素抵抗的关系：测定4周龄时24h尿GH排泄率（24hU—GH）,血胰岛素样生长因子（IGF）-1、空腹胰岛素（FINS）、血糖以及肝组织IGF-1mRNA和STATS信号表达;（2）胰岛素抵抗对生长轴的影响：3周龄时注射P13K阻断剂1周后（设溶剂对照组）,测定大鼠体格生长,血IGF-1、FINS水平及肝IGF-1mRNA和STATS信号表达。结果（1）NCU—SGA鼠血清IGF-1浓度、肝IGF-1mRNA表达以及磷酸化与总STAT蛋白表达水平的比率均显著低于健康对照组（C组）,分别为（248±58）ng／ml,（6．1±0．3）拷贝和（61±22）％;C组为（383±62）ng／ml,（6．6±0．4）拷贝和（91±29）％（均P〈0．01）;NCU—SGA组与C组的24hU-GH差异无统计学意义（P〉0．05）;NCU—SGA组FINS及空腹血糖为（24．7±9．6）mU／ml和（5．4±0．3）mmol／L显著高于C组的（9．8±2．8）mmol／L和（4．5±1．7）mmol／L（均P〈0．05）。24hU—GH与FINS显著正相关（r=0．680,P=0．000）。（2）PBK阻断后NCU．SGA鼠胰岛素抵抗加重,体重下降,血清IGF-1及肝IGF-1mRNA为（218±60）ng／ml及（6．1±0．3）拷贝,显著低于溶剂对照组的（286±45）ng／ml及（6．3±0．3）拷贝,均P〈0．05。但两组间肝组织总的及磷酸化STATS信号表达水平差异无统计学意义。结论NCU—SGA幼鼠的胰岛素抵抗与GH抵抗密切相关。生后无追赶与GH受体后JAK2-STATS通路受损所致的GH抵抗有关。胰岛素抵抗可能经非STATS依赖途径加重了GH抵抗及生长障碍。     

高渗盐水对急性胰腺炎早期血清醛固酮、血管紧张素水平的影响

目的：观察7．5％高渗盐水对犬急性胰腺炎早期血清醛固酮、血管紧张素水平的影响。方法：32条犬随机分为4组，每组8条，全部采用自身胆汁逆行主胰管注射法制作急性胰腺炎模型。Ⅰ组：仅给予0．9％氯化钠注射液和10％葡萄糖注射液，以1：1比例静脉输注，24小时补液总量为80ml／kg；Ⅱ组：Ⅰ组方案（按76ml／kg补充）加7．5％高渗盐水（按4ml／kg补充），24小时补液总量为80ml／kg；Ⅲ组：Ⅰ组方案（按80ml／kg补充）加等渗盐水（按40ml／kg），24小时补液总量为120ml／kg；Ⅳ组：Ⅲ组方案（按116ml／kg补充）加7．5％高渗盐水（按4ml／kg补充），24小时补液总量为120ml／kg。干预治疗5天，采用放射免疫分析方法检测血清醛固酮（aldosterone，ALD）、血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）水平。结果：制模后第5日及第6日Ⅱ组和Ⅳ组ALD水平为0．038±0．018、0.040±0.035ng／ml和0．018±0.008、0．014±0.009ng／ml，Ⅰ组和Ⅲ组分别为0.070±0．019、0.060±0．019ng／ml和0.074±0．019、0.064±0.015ng／ml（P〈0．05）。制模后第2、3、4日Ⅱ组和Ⅳ组AngⅡ水平为109.88±13．07、59.54±5.98、65.29±4．95pg／nd和96．42±13．18、43．78±8．40、44.76±5.89pg／nd，Ⅰ组和Ⅲ组分别为202.01±15．89、99.45±10.23、102.27±4．56pg／ml和196，95±15．77、97.91±15.97、87．83±6．05pg／ml（P〈0.05）。结论：急性胰腺炎早期应用高渗盐水治疗可以降低血清中ALD及AngⅡ水平，可能对急性胰腺炎引起的微循环障碍有改善作用。     

辛基酚影响MCF-7细胞凋亡及bcl_2、caspase3表达

目的观察辛基酚（0P）对乳腺癌MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。方法以流式细胞分析、DNA断端末端标记（TUNEL）试验、DNA片断率分析、流式细胞仪免疫荧光和荧光定量PCK等方法观察OP对MCF-7细胞凋亡、bcl2、bax、caspase3表达的影响。结果8、16μmol／LOP作用MCF-7细胞，TUNEL细胞阳性率和DNA片断百分率增加，48h时的凋亡率分别为（6．6±1．32），（16，3±3.48）『对照（43±1．18）]；bcl2荧光量分别为（63．5±5．84），（30．3±2．49）[对照（57．2±4．07）]。4μmol／LOP明显上调MCF-7细胞中bcl2 mRNA表达；16μmol／L OP则明显降低细胞中bcl2 mRNA表达，且bax、caspase3 mRNA表达明显增加。结论8、16μmol／L OP能明显诱导MCF-7乳腺癌细胞的凋亡，增加DNA片断百分率，其机制可能是通过下调细胞中bcl2的表达、上调bax、caspase3的表达来实现。     

RNA干扰抑制胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的实验研究

目的 研究RNA干扰技术对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1（AQP1）基因表达的影响,探讨应用该技术治疗胸腔积液的可行性。方法体外培养大鼠胸膜间皮细胞,细胞鉴定后,采用免疫细胞化学、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测AQP1表达;设计并构建2个靶向大鼠AQP1基因的短发夹RNA（shRNA）重组质粒,脂质体转染大鼠胸膜间皮细胞48h后,采用RT—PCR及Western印迹方法分别在mRNA和蛋白质水平检测AQP1基因表达的抑制效果。结果胸膜间皮细胞存在AQP1表达,所设计的2个AQP1-siRNA重组质粒可不同程度地抑制AQP1在胸膜间皮细胞中的表达,在mRNA水平抑制率分别为83．5％和90．9％;在蛋白质水平抑制率分别为41．2％和67．6％,与空白对照组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义（P〈0．01）。结论质粒介导的RNA干扰可明显抑制大鼠胸膜间皮细胞AQP1基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的胸腔积液基因治疗新方法。     

外源性一氧化氮对新生大鼠神经干细胞/前体细胞分化的影响

目的探讨外源性一氧化氮（NO）对培养状态下的新生大鼠神经干细胞／前体细胞（NSCs／NPs）分化的影响。方法采用常规方法分离新生大鼠脑室下带（SVZ）组织，进行NSCs／NPs体外培养。用二乙烯三胺／一氧化氮聚合物（DETA／NO）作为外源性NO供体培养NSCs／NPs。用免疫细胞化学方法检测NSCs／NPs标记巢蛋白（nestin）、神经元标记神经元特异性微管相关蛋13（Tuj-1）和星型胶质细胞标记胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）。同时用Greiss还原法检测培养液中总NO的浓度。结果原代或次代培养的神经球均为nestin阳性；DETA/NO对体外培养的NSCs／NPs作用5d后，40μmol／L、50μmol/L、60μmol／L DETA／NO实验组分别释放出（62．0±6．4）μmol／L、（64．8±15．7）μmol／L、（68．5±11．6）μmol／L的NO，相应实验组分化的神经元数分别为（53．1±4．7）％、（54．1±6．9）％、（63．8±9．5）％，较对照组[（38．8±7．2）％]，显著增加，差异有高度统计学意义（P〈0．01）；50μmol／L、60μmol／L DETA/NO实验组分化的星型胶质细胞数分别为（38．2±6．7）％、（41±10．5）％，较对照组[（32．8±5．5）％]，有所增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论外源性NO主要促进体外培养的NSCs／NPs向神经元方向分化。     

甲氧基异丁基异腈显像在预测恶性淋巴瘤患者耐药中的临床意义

目的 预测恶性淋巴瘤（ML）患者的治疗反应,并判断根据甲氧基异丁基异腈（99^Tc^m-MIBI）显像参数,能否对多药耐药基因（MDR1）及多药耐药相关蛋白（MRP）基因的表达准确进行功能性评估。方法23例经淋巴结活检病理证实的ML患者,在化疗前均进行99^Tc^m-MIBI显像,分别计算早时像（10min）和晚时像（1h）的靶本（T／B）比值以及99^Tc^m-MIBI显影剂的洗脱率（WR％）;采用逆转录（RT）-PCR方法,检测病变淋巴结活体组织标本多药耐药基因MDR-1及MRP mRNA表达水平;在经过6—8个疗程的联合化疗（加或不加局部放疗）后,通过临床和放射学方法对淋巴瘤患者的治疗反应进行评价。结果 MDR1、MRP mRNA同时表达阴性患者组的WR％（16±6）明显低于两者同时阳性表达组（33±5）和两者其一阳性表达组（28±6,均P〈0．01）;两者同时阳性表达组与两者其一阳性表达组之间差异无统计学意义（P=0.26）。MDR1阳性组早时像T／B值、晚时像T／B值和WR％分别为3．0±1．1,2．5±0．8,17±7,MDR1阴性组三值分别为3．4±1．0,2．3±0．7,32±6,MDR1阳性组与阴性组相比,在早时像T／B、晚时像T／B差异均无统计学意义（均P〉0．05）,但WR％比较差异有统计学意义（P〈0．01）;MRP阳性组三值分别为3．1±1．2,2．5±0．8,19±8,MRP阴性组分别为3．3±1．0,2．3±0．7,31±6,MRP阳性与阴性组比较,也仅WR％差异有统计学意义（P=0．003）,而在早时像T／B、晚时像T／B差异均无统计学意义（均P〉0．01）。MDR1表达水平、WR％与治疗反应均有显著相关性（均P〈0．01）;MRP表达水平与治疗反应则无明显相关性（P=0．052）。结论 99^Tc^m-MIBI作为一种无创性影像学检查手段,能够准确反映MDR1、MRP的表达水平和功能状态,并可以预测ML患者的化疗疗效,针对性的采取个体化治疗策略,有益于患者的治疗。     

果糖氯化钠注射液在急危重病救治中的临床研究

目的观察果糖氯化钠注射液在急危重病救治中对机体内环境的影响。方法将120例急危重病患者随机分为试验组（60例）和对照组（60例）,开放静脉通道的第一瓶液体分别使用果糖氯化钠注射液250ml及0．9％氯化钠注射液250ml,输液速度均为10ml／min。观察两组患者治疗前后的血钾、血钠、血氯、血糖水平变化。结果试验组治疗前后血钾、血钠、血氯、血糖水平变化绝对值分别为（0．26±0．25）mmol/L、（1．7±1．7）mmol／L、（1．5±1．3）mmol／L和（0．7±0．5）mmoL／L,对照组分别为（0．32±0．40）mmol／L、（2．7±3．1）mmol／L、（2．4±2．8）mmol／L和（0．7±0．5）mmol／L,两组患者治疗前后血钠、血氯水平变化绝对值间差异有统计学意义（P〈0．05）,而血钾、血糖水平变化绝对值间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论果糖氯化钠注射液可以保持血钾及血糖水平稳定,且血钠、血氯变化值小于0．9％氯化钠注射液,可为急危重患者提供能量而不引起血糖、血钾升高,是一种安全、合适的注射液。     

植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体介导氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞存活和功能的影响

目的 研究植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体（LOX—1）是否介导氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）对内皮祖细胞（EPC）的存活及功能产生影响。方法 分选脐血CD34^＋细胞,培养于内皮细胞生长培养基（EGM-2）中。培养14d后,部分EPC与10、25、50μg/ml的oxLDL孵育48h;部分EPC先与LOX-1单克隆抗体（LOX—1mAb）预处理24h,再与50μg／ml oxLDL孵育48h;对照组不作处理。检测EPC存活率及EPC迁移、黏附和管状结构形成能力,并检测LOX-1的蛋白及mRNA表达。结果oxLDL浓度为25和50μg／ml时,凋亡率分别为（15．8±1．0）％和（18．8±2．0）％,显著高于对照组的（9．0±1．2）％（P〈0．05）;迁移率分别为（5．7±1．0）％和（5．1±0．8）％,显著低于对照组的（9．5±0．8）％,（P〈0．05）;黏附细胞数分别为（33±2）和（30±3）个,显著少于对照组的（37±5）个（P〈0．05）;形成的管状结构分别为（2．9±0．5）和（1．8±0．5）mm,显著短于对照组的（5．0±0．6）mm（P〈0．05）。OxLDL可增加LOX—1mRNA及蛋白的表达,oxLDL浓度为50μg／ml时,LOX—1mRNA表达由100％增加为（174±39）％,蛋白表达由100％增加为（172±8）％。OxLDL的上述作用能被LOX1mAb所阻断。结论OxLDL可降低EPC存活,抑制EPC功能,其作用是由LOX—1介导的。     

转基因骨髓间充质干细胞治疗鼠糖尿病的实验研究

目的 观察转人胰岛素基因的小鼠骨髓间充质干细胞（mMSCs）植入1型糖尿病小鼠肝脏对糖尿病的治疗作用。方法 分离绿色荧光蛋白（GFP）mMSCs,构建人胰岛素逆转录病毒载体,转染干细胞并移植到糖尿病小鼠肝脏。检测小鼠体重、血糖、血清胰岛素水平变化并作组织学分析。结果治疗组糖尿病小鼠6周内体重增加6％;血糖值在移植后7、42d分别为（10．4±2．8）mmol／L和（6．5±0．9）mmol／L,未经移植患病小鼠分别为（26．8±2．5）mmol／L和（25．4±4．1）mmol／L,二组间差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组小鼠血清及肝脏中检测到人胰岛素分泌。结论 肝内移植表达外源性胰岛素的mMSCs能有效降低糖尿病小鼠的血糖水平,缓解糖尿病症状,是一种糖尿病基因治疗的新途径。     

重组甘精胰岛素联合那格列奈治疗2型糖尿病临床疗效观察

目的观察重组甘精胰岛素（长秀霖）联合那格列奈治疗继发性磺脲类药物失效的2型糖尿病患者的疗效。方法选取32例继发性磺脲类药物失效的糖尿病患者,给予重组甘精胰岛素每晚睡前8小时1次皮下注射,调整剂量（12～26u）使空腹血糖控制在5．0～6．5mmol／L。同时联合那格列奈,调整剂量是使餐后血糖控制在6．0—8．0mmol／L,那格列奈每餐30—60mg,治疗3个月,观察患者空腹血糖及餐后2h血糖、HbAlc及BMI变化。结果治疗3个月后与治疗前相比患者空腹血糖[（5．1±1．3）mmol／Lvs（12．3±4．2）mmol／L]。餐后2h血糖[（8．2±3．8）mmol／Lvs（17．5±6．1）mmol／L],HbAlc[（7．3±1．1）％vs（11．6±1．3）％],均明显下降（P〈0．01）。BMI[（25．8±4．1）ks／m^2 vs （25．6±3．5）kg／m^2],无统计学意义。结论重组甘精胰岛素联合那格列奈对控制继发性磺脲类药物失效的2型糖尿病患者血糖有较好的疗效。     

局部亚低温对大鼠脑出血后水通道蛋白4表达的影响

目的观察局部亚低温对大鼠自体血注入法脑出血模型水通道蛋白4(AQP-4)mRNA及蛋白质表达的影响,探讨局部亚低温减轻脑出血后水肿的可能机制。方法雄性W istar大鼠240只,随机分为脑出血(ICH)组和脑出血加局部亚低温(ICH+H)组。每组分为对照、脑出血后6、24、72 h,5、7 d共6个亚组,ICH+H组于注血后给予4 h的局部亚低温治疗,各亚组分别进行血脑屏障(BBB)通透性、脑水含量的检测以及应用逆转录(RT)-PCR及W estern印迹对AQP-4进行测定。结果ICH组大鼠脑组织水含量、BBB通透性以及AQP-4 mRNA表达的增加始于脑出血后6 h,AQP-4蛋白质表达的增加始于脑出血后24 h,均至72 h达高峰(P<0.01)。AQP-4 mRNA及蛋白质表达的变化与BBB通透性的变化呈正相关(r=0.78和r=0.76)。ICH+H组的脑组织水含量和BBB通透性在各时间点与ICH组相比明显下降,而AQP-4 mRNA吸光度值(A)在脑出血后48 h与ICH组相比开始较低,在72 h,由ICH组的1.25±0.03降至1.04±0.02(P<0.01),AQP-4蛋白质A值在各时间点与ICH组相比明显下降,在72 h,由ICH组的0.77±0.08下降至0.25±0.04(P<0.01)。结论脑出血后BBB完整性的破坏可以导致AQP-4表达的上升。局部亚低温可以抑制脑出血后AQP-4 mRNA和蛋白质表达的增加。局部亚低温可能既通过减轻BBB完整性的破坏在转录水平抑制AQP-4 mRNA表达的增加,也可以在翻译水平直接抑制AQP-4蛋白质的表达,来减轻脑出血后的脑水肿形成。     

丙泊酚下调水通道蛋白3和基质金属蛋白酶-9表达抑制人肺癌A549细胞的侵袭力

目的探讨丙泊酚对人肺癌A549细胞水通道蛋白3（AQP-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达及其侵袭力的影响。方法 A549细胞经丙泊酚不同剂量（25、50、100 μmol/L）和不同时间（12、24 h）处理。用RT-PCR方法观察丙泊酚对A549细胞AQP-3 mRNA的作用,用Western Blot方法和Transwell侵袭实验分别检测不同浓度丙泊酚作用24 h对A549细胞AQP-3、MMP-9蛋白 表达和细胞侵袭力的影响。结果与空白组比较,25、50、100 μmol/L 丙泊酚24 h 处理组对AQP-3 mRNA表达的最大抑制比 值为0.13,最小0.41;12 h处理组最大抑制比值0.19,最小0.65,差异有统计学意义（P<0.05）;丙泊酚100 μmol/L组24 h达到最 大抑制效果（0.13±0.035）。25、50、100 μmol/L 丙泊酚24 h处理组AQP-3蛋白表达（0.91±0.009,0.60±0.020,0.57±0.006）和50、 100 μmol/L 丙泊酚24 h处理组MMP-9蛋白表达（0.65±0.006,0.46±0.021）,较空白组明显降低（P<0.05）。25、50、100 μmol/L 丙泊酚 24 h 处理组的穿膜细胞数（122.55±17.20,96.33±5.82,74.33±2.85）,较空白组（199.33±23.88）明显减少（P<0.05）。结论丙泊酚 50、100 μmol/L处理24 h,可下调人肺癌A549细胞AQP-3 mRNA、AQP-3蛋白和MMP-9蛋白的表达,抑制A549细胞的侵袭力。     

蛋白激酶C对氯化铵上调大鼠脑星形胶质细胞AQP-4表达的影响

目的：研究经氯化铵处理的大鼠脑星形胶质细胞水通道蛋白-4（AQP-4）的表达情况和蛋白激酶C（PKC）对AQP-4表达的调节作用.方法：取出生1～2d的SD大鼠大脑皮质,原代培养星形胶质细胞.将培养的细胞随机分为对照组,用等量培养基培养24h;NH4CL组,用终浓度为5mmol/L氯化铵培养6,12,24,48h;DMSO组：用10g/L二甲基亚砜（DMSO）预处理30min,余处理同NH4CL组;TPA组：蛋白激酶C激动剂TPA（1μmol/L）预处理30min,余处理同NH4CL组;RT组：蛋白激酶C拮抗剂Ro31-8220（1μmol/L）预处理30min后,余处理同TPA组.用光学显微镜观察细胞的形态学变化,用WesternBlot法检测各组细胞AQP-4的表达情况.结果：AQP-4表达量NH4CL组与DMSO组分别为（0.69±0.03）,（0.67±0.03）,与对照组相比较分别增加约90%,87%,细胞肿胀明显,差异显著（P〈0.05）;而NH4Cl组与DMSO组组间差异不显著;TPA组AQP-4表达量（0.40±0.02）与NH4CL组相比较,降低约41%（P〈0.05）;RT组AQP-4表达量（0.68±0.02）与TPA组相比较,明显增加,而与NH4CL组相比较差异无统计学意义.结论：经5mmol/L氯化铵处理的星形胶质细胞其AQP-4的表达明显增加,而PKC的激活能下调AQP-4的表达.     

洗涤红细胞保护液肺动脉灌注对体外循环术后肺损伤的影响

目的观察心内直视手术中采用低温洗涤红细胞保护液肺动脉灌注对肺损伤的影响。方法选择风湿性二尖瓣病变伴中重度肺动脉高压(PH)的患者30例,分为肺动脉灌注组和对照组(各15例)。灌注组在升主动脉阻断后,经主肺动脉间断灌注低温洗涤红细胞保护液,测定并记录两组患者围术期的肺血管阻力(PVR)、静脉血与动脉血白细胞计数比值(V/A)、肺循环血浆丙二醛(MDA)含量及氧合指数(OI)、机械辅助通气时间。结果(1)PVR:转流结束即刻、术后12、24h灌注组(46·4kPa·s·L-1±8·1kPa·s·L-1、48·5kPa·s·L-1±7·0kPa·s·L-1、36·1kPa·s·L-1±6·3kPa·s·L-1)明显低于对照组(65·7kPa·s·L-1±5·3kPa·s·L-1、79·8kPa·s·L-1±8·7kPa·s·L-1、47·9kPa·s·L-1±7·1kPa·s·L-1,均P<0·05)。(2)MDA含量:转流结束即刻、术后12、24h灌注组(分别为14·3mmol/L±0·8mmol/L、16·1mmol/L±0·7mmol/L、13·3mmol/L±0·5mmol/L)明显低于对照组(18·9mmol/L±0·9mmol/L、21·6mmol/L±0·4mmol/L、22·5mmol/L±0·7mmol/L,均P<0·05)。(3)V/A比值:转流结束即刻、术后12h灌注组(1·16±0·05、1·20±0·05)明显低于对照组(1·53±0·07、1·68±0·25,均P<0·01)。(4)OI:转流结束即刻、术后12、24h灌注组(370±33、388±41、414±40)明显高于对照组(217±30、210±36、222±33,均P<0·05)。(5)机械辅助通气时间:灌注组(13h±4h)显著低于对照组(27h±6h,P<0·01)。结论洗涤红细胞保护液肺动脉灌注可以减轻体外循环术后肺损伤。     

角叉菜胶致炎症性胸腔积液大鼠胸膜上水通道蛋白1的表达

目的探讨水通道蛋白1（AQP-1）在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其与胸水形成的关系。方法56只健康Wistar大鼠随机分为对照组（8只）和胸膜炎组（48只）。采用角叉菜胶胸腔内注射复制炎症性胸腔积液大鼠模型。胸膜炎组根据注入角叉菜胶后处理时间再分为6、12、24、36、48和72h组,每组8只。测定各组大鼠胸腔积液量,对胸腔积液进行细胞计数和分类,采用HE染色观察脏、壁层胸膜的病理变化,采用免疫组化染色检测AQP-1在大鼠胸膜上的分布,分别采用RT-PCR和Westernblot方法检测脏、壁层胸膜AQP-1的mRNA和蛋白表达。结果胸膜炎各时相组胸水量分别为（2.10±0.22）mL、（4.10±0.15）mL、（4.40±0.36）mL、（3.20±0.27）mL、（2.60±0.18）mL和（0.12±0.02）mL。AQP-1主要表达在脏、壁层胸膜的间皮细胞和毛细血管内皮细胞。胸膜炎各时相组脏、壁层胸膜AQP-1表达均增强。胸膜炎组AQP-1mRNA在壁层胸膜的表达于6h开始升高,24h达高峰;在脏层胸膜的表达于12h开始升高,24h达高峰。AQP-1蛋白表达的变化趋势与mRNA表达一致。12h和24h组壁层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关（r=0.857,r=0.846,P均〈0.01）;24h脏层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关（r=0.725,P〈0.05）。结论胸膜炎胸腔积液时胸膜AQP-1表达增强,AQP-1可能参与炎症性胸腔积液的转运过程。     

阿托伐他汀对大鼠腹膜间皮细胞在高糖作用下表达单核细胞趋化蛋白1的影响

目的研究阿托伐他汀（ATOR）对大鼠腹膜间皮细胞（PMC）在高糖作用下表达单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的影响及机制。方法胰蛋白酶消化法分离培养PMC,经鉴定分组：（1）0．1％、1．5％、2．5％、4．25％葡萄糖组;（2）1．5％葡萄糖作用0、0．5、1、3、12、24、48h;（3）二硫氨基甲酸吡咯烷（PDTC）（5、10、25、50μmol／L）预孵育2h,加入1．5％葡萄糖再作用3h;（4）ATOR（0．1、1、10mmol／L）预孵育24h,加1．5％葡萄糖再作用3h。Western印迹检测MCP-1、IKBct和065表达情况;RT-PCR检测MCP-1mRNA的表达。结果正常PMC表达MCP-1;1．5％葡萄糖使PMC内IKBct减少（P〈0．05）、核内065增多（P〈0．01）、MCP．1mRNA和蛋白表达增多（均P〈0．05）,4．25％葡萄糖作用最大（P〈0．01）;1．5％葡萄糖作用0．5h,PMC内IκBα减少（P〈0．05）、核内065增多（P〈0．01）,3h达高峰（P〈0．01）;葡萄糖作用1hMCP-1mRNA明显增多（P〈0．01）,3hMCP-1蛋白表达增多（P〈0．01）,48h表达最多（P〈0．01）。5μmol／LPDTC抑制高糖诱导MCP-1mRNA和蛋白的表达（P〈0．05）,50μmol／LPDTC作用最大（P〈0．01）。0．1mmol／LATOR可抑制高糖作用下IκBα的减少（P〈0．05）、核内065的增多（P〈0．01）和MCP-1mRNA和蛋白的表达（P〈0．05）,10mmol／LATOR作用最强（P〈0．01）。结论高糖经NF-κB信号通路以时间和浓度依赖的方式诱导PMC表达MCP-1;阿托伐他汀可通过抑制NF-KB信号通路抑制PMC表达MCP-1。     

促酰化蛋白受体C5L2在前脂肪细胞分化过程和脂肪酸负荷下的表达研究

目的 观察3T3-L1前脂细胞分化和游离脂肪酸（FFA）对3T3-L1（前）脂肪细胞C5L2基因和蛋白表达的影响。方法采用逆转录（RT）-PCR和流式细胞仪检测不同分化时段和FFA处理后（前）脂肪细胞C5L2mRNA和蛋白表达。结果 3T3-L1脂肪细胞C512mRNA表达呈分化依赖性增加,而C5L2蛋白表达水平在分化早期显著增强,诱导分化6hC5L2蛋白表达增加了21％（61％±18％VS51％±15％,P〈0．05）;分化12h达高峰,增加了38％（70％±12％VS51％±15％,P〈0．01）;分化3d基本恢复至0d水平。在3T3-L1成熟脂肪细胞,0．5mmol／L和1．0mmol／L油酸分别抑制46％（0．58±0．21 vs 1．08±0．46,P〈0．05）和84％（0．18±0．04VS1．08±0．46,P〈0．05）C5L2 mRNA表达,而0．125mmol／L油酸即能显著下调36％（35％±8％vs54％±7％,P〈0．01）C5L2蛋白表达。低浓度棕榈酸均能明显抑制C5L2mRNA和蛋白的表达,1．0mmol／L时c512mRNA和蛋白表达分别减少了41％（0．57±0．28vs0．97±0．41,P〈0．05）和55％（24％±13％VS54％±7％,P〈0．01）。油酸和棕榈酸对前脂肪细胞C512表达差异无统计学意义。结论促酰化蛋白／C5L2途径参与了脂肪细胞分化的调控过程。C512mRNA和蛋白表达的下调可能参与了油酸和棕榈酸诱导的成熟脂肪细胞胰岛素抵抗的发生。     

结缔组织生长因子在肾切除大鼠肾脏中的表达和氟伐他汀的调节作用

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)mRNA在 5 / 6肾切除大鼠肾皮质的表达特点和羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀的调节作用。方法　将 2 4只 5 / 6肾切除大鼠随机分为未治疗的 5 / 6肾切除组 (模型组 ,12只 )和氟伐他汀治疗的 5 / 6肾切除组 (治疗组 ,12只 ) ,另设6只假手术大鼠作为对照。氟伐他汀治疗 (7mg·kg-1·d-1) 13周后 ,检测尿蛋白排泄、血清尿素氮和肌酐含量 ,用RT PCR法检测肾皮质CTGFmRNA表达 ,免疫组织化学检测肾小球转化生长因子 β1(TGF β1)、IV型胶原和纤连蛋白的表达水平 ,并评价肾脏病变和肾小球硬化指数 (GSI)。 结果　实验终止时 ,模型组尿蛋白排泄 (30 5 4mg/ 2 4h)显著高于假手术组 (5 6mg/ 2 4h ,P <0 0 1) ,氟伐他汀治疗的大鼠尿蛋白排泄 (2 30 9mg/ 2 4h)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。与假手术组相比 ,模型组血清尿素氮(P <0 0 1)和肌酐 (P <0 0 5 )水平均明显增高 ,氟伐他汀治疗使血清尿素氮和肌酐的含量明显降低。模型组GSI为 4 1 8± 11 5 ,明显高于假手术组 (2 2± 1 3,P <0 0 1) ,治疗组GSI(2 3 4± 6 1)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。肾皮质CTGFmRNA表达水平约为假手术组的 3倍 (P <0 0 1) ,而在治疗组其表达水平减少 5 5 4 %。肾小球TGF     

醛固酮对系膜细胞合成纤溶酶原激活剂抑制物-1的影响

目的 探讨醛固酮及阻断其受体后对系膜细胞生成纤溶酶原激活剂抑制物1（PAI-1）的影响。方法 醛固酮单独刺激大鼠系膜细胞24h以及采用螺内酯阻断后,用RT-PCR观察系膜细胞PA1-1mRNA的变化;用Western印迹方法检测细胞上清液中的PA1-1;采用ELISA方法测定细胞上清液中转化生长因子p1（TGF-β1）的含量;采用激光共聚焦检测系膜细胞内的活性氧（ROS）水平。观察不同浓度及不同作用时间的醛固酮刺激系膜细胞对PA1-1mRNA的影响。结果 醛固酮使系膜细胞PA1-1mRNA及蛋白表达明显升高,同时升高了TGF-β1的表达和细胞内的ROS水平。醛固酮使PA1-1mRNA表达呈剂量依赖性增加。100nmol／L醛固酮刺激系膜细胞4h后PA1-1mRNA表达才明显增加。加用螺内酯后使升高的PA1-1、TGF-β1表达以及细胞内ROS恢复到正常水平。结论醛固酮能独立促进大鼠系膜细胞分泌PA1-1的增加,同时醛固酮使TGF-β1表达以及细胞内ROS水平升高,而这些都是通过盐皮质激素受体介导的。     

阿司匹林诱导内皮细胞铁蛋白表达与抗氧化损伤作用的研究

目的探讨阿司匹林(aspirin,As)在抗H2O2损伤内皮细胞过程中对铁蛋白(ferritin,Fn)表达的作用.方法体外培养人血管内皮细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)测定As在不同浓度(0.1～3mmol/L)、不同处理时间(4～24h)对细胞Fn表达的影响,以及消炎痛和水杨酸钠对Fn表达的作用;并观察经As预处理后的细胞加入H2O2(0.5mmol/L)后乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)释放率、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和细胞存活率的改变.用单因素方差分析对上述指标进行统计学处理.结果小剂量As(0.1mmol/L)即可明显诱导内皮细胞Fn表达(5.8ng/106细胞数±0.3ng/106细胞数),与正常对照组比较P<0.05;且As与Fn之间表现出剂量和时间依赖关系,0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L组Fn浓度分别为(6.4±0.4)ng/106细胞数、(7.0±0.7)ng/106细胞数、(7.4±0.4)ng/106细胞数和(7.7±0.5)ng/106细胞数;4h组Fn尚未明显增加(5.8ng/106细胞数±1.0ng/106细胞数,P>0.05),但8h组Fn浓度(6.5±1.0)ng/106细胞数与正常对照组比较P<0.05,24h组Fn浓度达最大值(7.8±0.8)ng/106细胞数.As诱导Fn表达后能明显增强细胞抗氧化的能力,0.1mmol/L的As可减少细胞50%的LDH释放率,保护74.4%的细胞避免H2O2的损伤,同时使氧自由基指标MDA明显下降.并随As剂量的增大保护作用逐渐增强,其结果与未饱和铁蛋白组相似.而水杨酸钠及消炎痛则无诱导Fn表达的作用.结论As在较小剂量(0.1mmol/L)时即可明显诱导内皮细胞Fn的表达,增强其抗氧化损伤的能力;但其他非甾体类抗炎药不具有这个作用.