脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y Y5受体反义基因减肥降脂作用关系的研究

目的：探讨脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因减肥降脂作用的关系。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义，错义寡核苷酸或生理盐水，观察肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂的变化，采用RT－PCR技术检测腹膜后胎肪组织中TNF-α基因的表达水平。结果：（1）高营养饮食诱导下，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著高于正常大鼠；（2）NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著低于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著低肥胖大鼠的体脂，血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织TNF-α基因的表达下调有关。     

应用神经肽Y Y5受体反义基因治疗肥胖大鼠高Leplin血症效果的探讨

目的：探讨神经肽Y Y5（NPY Y5）受体反义基因治疗对肥胖大鼠高Leptin血症的改善作用及其机制。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、正义、错义寡核苷酸或生理盐水，观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织温重的变化，并采用ELISA双抗体夹心法测定血清Leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果：①高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪湿重明显高于正常大鼠；②经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠血清Leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织温重间均存在一定的正相关关系。结论：侧腔室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高Leptin血症，推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关。     

应用神经肽YY5受体反义基因治疗肥胖大鼠高leptin血症效果的探讨

目的：探讨神经肽Y Y5（NPY Y5）受体反义基因治疗对肥胖大鼠高leptin血症的改善作用及其机制。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、正义、我寡核苷酸或生理盐水，观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织湿重的变化，并采用ELISA双抗体心法测定血清leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果：（1）高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平及两部位脂肪组织湿重明显高于正常大鼠；（2）经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重均明显降低，但生殖器周围脂肪组织湿重无明显变化；（3）大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重间均存在一定的正相关关系。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高leptin血症，推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关。     

β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y Y5受体反义基因治疗中的作用

目的：探讨β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因治疗中的作用。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水，测定肥胖大鼠的腹腔内脂肪组织湿重与血脂，并采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平。结果：①高营养饮食诱导下肥胖模型大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠；②经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平则显著高于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织β3肾上腺素能受体基因的表达上调有关。     

衰老过程中的脂肪组织炎症研究进展

传统上,脂肪组织在肥胖和饮食相关代谢紊乱研究中被视为一种内分泌器官,然而,随着研究揭示白色脂肪组织作为能量储存、脂质代谢位点和脂肪因子分泌者发挥作用,脂肪组织已被认为是年轻肥胖和老年肥胖代谢健康的重要器官。在衰老研究的领域内,抗衰老药senolytics已经成为该领域的研究热点,清除衰老细胞能减少与年龄相关的疾病。更有意思的是,抗衰老研究显示,这些衰老细胞,特别是p16（Ink4a）阳性衰老细胞可在脂肪组织、骨骼肌和眼睛中积累。暗示脂肪组织在衰老中的重要性,并拓宽了衰老细胞跨越免疫和非免疫细胞途径影响机体寿命和健康的研究范围。     

外源性乳酸对高脂饲料诱导肥胖小鼠的代谢调节作用

探讨外源性乳酸对高脂喂养诱导肥胖小鼠的代谢调节作用。采用脂肪含量60%的全合成高脂饲料建立C57小鼠代谢紊乱及肥胖模型，一部分小鼠采取高脂饲料喂养4周造模，于造模同时腹腔注射给予500 mg/(kg·d) 乳酸预防性干预4周；另一部分小鼠采取高脂饲料喂养8周造模，于造模4周后给予500 mg/(kg·d) 乳酸治疗4周。试验期间测定各组小鼠体重、摄食量变化，检测血清葡萄糖、乳酸、甘油三酯、胰岛素及肝糖原水平，通过口服糖耐量（OGTT）和胰岛素耐量（ITT）检测机体葡萄糖代谢和胰岛素抵抗情况，实验结束解剖取脂肪组织称重并进行脂肪组织病理学检查，通过RT-PCR检测脂肪组织的脂质合成和脂质分解基因表达情况。结果显示:（1）4周预防给药试验中，乳酸对正常（CON）和高脂饮食（HFD）小鼠体重未见明显影响，却可提高皮下脂肪与内脏脂肪的质量比；乳酸给药可明显降低HFD小鼠空腹血糖和肝糖原，同时升高血乳酸水平，对HFD小鼠糖耐量受损具有显著改善；乳酸可改善HFD组脂肪细胞的大小和排列形态，同时明显下调脂肪组织中脂肪酸合成和脂解基因表达。（2）在治疗8周实验中，乳酸两种给药途径均能部分减轻HFD组小鼠和减少摄食量，对于脂肪质量有部分改善趋势；乳酸两种给药途径均可明显降低HFD小鼠空腹血糖，显著改善糖耐量和胰岛素耐量，对空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数也有部分改善作用；乳酸两种给药途径对肥胖小鼠脂肪细胞形态有不同程度的改善作用，同时显著下调脂肪组织中脂解基因表达。由此可见，对于高脂饲料诱导的肥胖性代谢失衡小鼠，给予外源性乳酸可以刺激糖代谢，抑制脂肪组织脂解，避免脂肪细胞肥大，进而改善糖耐量和胰岛素敏感性，减轻糖脂代谢紊乱。     

脂肪细胞病理生理学方面的研究进展

肥胖是现今全球性疾病。肥胖与代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病、高血压、非酒精性脂肪肝密切相关。研究发现人体躯干脂肪分布比下半身肥胖与代谢综合征的关系更加密切,特别是与2型糖尿病及心血管疾病。肥胖相关并发症并不与脂肪含量有关,而是与脂肪分布的类型有关。内脏脂肪组织的增加导致脂肪组织的再分布是肥胖相关疾病的独立危险因素,其解剖特点,细胞及分子特征决定了它们这一特性。皮下脂肪、内脏脂肪及异位脂肪储存、释放脂肪酸,合成和分泌脂肪因子的差异,决定了代谢的结果。这篇综述的目的是为了探究不同部位脂肪的堆积,特别是脂肪的堆积与相关代谢疾病的表型及病理生理的差异。     

神经肽Y促进肥胖的研究进展

 神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)是重要的促肥胖因子,广泛分布于中枢和外围神经系统,因此成为研发减肥药物的重要靶点。既往研究主要集中于NPY的中枢促摄食作用,但越来越多的证据表明NPY对能量代谢的调节是从多方面进行的。中枢和外围NPY均能通过促进棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)堆积而导致肥胖,本文主要从中枢和外周两方面对NPY的分布及其在肥胖发生发展过程中的作用进行综述。     

神经肽Y对大鼠心肌细胞胞浆钙及钙瞬变的影响

目的观察神经肽Y（neuropeptideY，NPY）对静息状态下心肌细胞胞浆钙含量及兴奋-收缩耦联过程中心肌细胞钙瞬变的影响。方法用NPY（100nmol／L）刺激Sprague—Dawley乳鼠心肌细胞24h，用荧光染料Fluo 4-AM负载胞浆钙，记录静息状态下心肌细胞胞浆钙浓度，并用场刺激诱发胞浆钙瞬变。所有钙影像均由LeicaSP2激光共聚焦显微镜记录。结果NPY组心肌细胞胞浆钙含量明显高于对照组（P〈0.05）；场刺激诱导下NPY组心肌细胞胞浆钙瞬变幅度明显高于对照组（P〈0.01），NPY组钙瞬变恢复时间明显缩短（P〈0．01），钙瞬变上升时阍则无显著差别。结论长时间的NPY刺激可显著影响兴奋-收缩耦联过程中钙的动态活动，并导致胞浆内钙含量增加。     

神经肽Y诱导大鼠心肌细胞肥大的钙信号机制

目的 探讨钙依赖的信号途径在神经肽Y（NPY）诱导心肌肥大中的作用。方法 NPY刺激乳鼠心肌细胞，加入钙调神经磷酸酶（CaN）抑制剂环胞素A（CsA）进行干预（5μg／mL），观察心肌细胞蛋白合成速率（^3H-Leu掺入量）、早期肥大反应基因（c-jun mRNA）表达以及胞浆和核内[Ca^2＋]i的变化。结果 经100nmol／L NPY刺激24h后，心肌细胞^3H-Leu掺入量、c-jun mRNA表达以及胞浆和核内[Ca^2＋]i均明显高于不加药对照组（P〈0．05，P〈0．01）；而CsA干预后的心肌细胞^3H-Leu掺入量和c-jun mRNA表达与对照组比较则无显著差别。结论 Ca^2＋／CaM依赖的CaN信号途径在NPY诱导心肌细胞肥大中起重要作用；NPY刺激细胞内[Ca^2＋]i增加，可能是活化CaN信号途径的始动环节。     

人Irisin激素减肥作用机制探究

【立论依据】 肥胖是糖尿病、高血压等代谢性疾病的主要诱因,目前尚无特效治疗方法。人类脂肪组织分为白色和棕色脂肪组织。其中白色脂肪组织难被利用,其过度堆积是肥胖的主要原因;棕色脂肪组织易受寒冷刺激转化脂肪产生热量。因此将白色脂肪转化成棕色脂肪将可能消耗脂肪,达到减肥目的。2012年Bostorm在《Nature》报道一种激素Irisin具有将白色脂肪转化为棕色脂肪的功能,提示Irisin具有潜在的减肥作用,但具体机制不清楚。 【设计思路】 从群体和基因水平、结合动物实验探究人Irisin具有减肥作用机制。 【实验内容】 (1)从群体水平、结合临床资料获得Irisin与肥胖相关的证据。ELISA方法检测Irisin在血清中的浓度,运用meta分析,探讨Irisin在同一年龄段的先天消瘦型、先天肥胖型人群分布特点;探究Irisin在新生儿人群和成年人群等不同年龄段人群分布特点;寻找先天性Irisin分泌过量人群,发现其代谢特点。(2)以遗传背景为切入点,从个体基因水平获得Irisin与肥胖相关的证据。探讨上述不同人群Irisin单核苷酸多态性(SNP)特点,以探讨导致肥胖的可能遗传因素。从表观遗传学入手,定量检测Irisin在不同年龄段人群的基因甲基化。(3)建立Irisin基因敲除动物模型,探讨Irisin可能具减肥作用的机制。构建irisin基因缺失小鼠模型,与对照组小鼠一同用高热量饮食饲养,检测两组小鼠体内棕色脂肪组织与白色脂肪组织比例。并将Irisin直接作用于Irisin^-/-小鼠,检测其体重,脂肪组织比例。 【材料】 人群全血标本、Irisin 浓度检测的ELISA试剂盒,Irisin基因敲除小鼠等。 【可行性】 白色脂肪组织是人体最大储能库,是造成肥胖的主要因素,棕色脂肪组织能快速消耗脂肪,因此将白色脂肪转化成棕色脂肪以达到减肥的目的具有理论可行性。动物体内实验、人体外细胞学研究发现Irisin具有转化脂肪的功能,为我们的研究提供了实验依据。 【创新性】 Irisin具有转化白色脂肪组织功能的研究始于2012年,迄今相关研究论文不到200篇,且多集中在人群水平调查。关于Irisin表达具有年龄依赖性、Irisin表观遗传学修饰、以及Irisin基因敲除小鼠相关研究目前未见报道。     

小鼠不同脂肪组织对冷应激的适应性反应

目的：明确C57BL/6J小鼠不同脂肪组织对于冷刺激适应性应答的相似点与差异。方法：建立冷刺激组及对照组小鼠模型,测量体重、进食量等;HE染色观察各脂肪组织切片形态;荧光定量PCR法检测棕色化、线粒体功能等相关基因的表达变化;Western blot检测产热等相关蛋白的表达情况;免疫组化检测脂肪组织交感神经支配;流式细胞术分析脂肪组织中巨噬细胞的分型。结果：与米色和白色脂肪相比,棕色脂肪组织的产热相关基因解偶联蛋白1表达量最高,但冷刺激不能进一步促进其表达;而冷刺激能够显著诱导米色脂肪组织中产热基因和蛋白的表达。冷刺激能够促进棕色脂肪和米色脂肪中交感神经支配和巨噬细胞M2型极化。结论：冷刺激能够诱导米色脂肪组织棕色化,同时促进交感神经支配和巨噬细胞的M2型极化;冷刺激对内脏白色脂肪组织的影响最小。     

CaMKⅡ信号通路在神经肽Y诱导心肌细胞肥大中的作用

目的：探讨钙离子／钙调蛋白（Ca^2＋／CaM）依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号通路在神经肽Y（NPY）诱导下心肌细胞肥大的作用。方法：原代培养SD乳鼠心肌细胞，将细胞分为5组，NPY组：培养液中加入终浓度为100nmol／L的NPY：KN-931组、KN-935组和KN-9310组除加入100nmol／L的NPY外，分别加入CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93，终浓度为1μmol／L、5μmol／L和10μmol／L；对照组：培养液中不加任何刺激药品。加药24h后采用 ^3H-亮氨酸（Leu）掺入法测定各组心肌细胞蛋白质合成速率，Western blotting测定对照组与NPY组心肌细胞的CaMKⅡδ蛋白表达。结果：经100nmol／L NPY刺激24h后，可明显增加心肌细胞^3H-Leu掺入量（p〈0．05），KN-93（1-10μmol／L）可以抑制NPY刺激的心肌细胞^3H-Leu掺入量的增加，并呈剂量依赖性（P均〈0．05）；100nmol／L NPY明显增加心肌细胞内CaMKⅡδ蛋白的表达（P〈（0．05）。结论：Ca^2＋／CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号途径参与NPY诱导的大鼠心肌细胞肥大反应。     

针刺对肥胖大鼠Leptin-下丘脑NPY轴的影响

目的:探讨针刺对肥胖大鼠血清瘦素(Leptin)水平、下丘脑神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)等指标的影响,研究针刺减肥机理,为临床应用针刺减肥提供理论和实验依据.方法:选择1月龄SD雄性大鼠20只,采用自制高脂饲料制备肥胖大鼠模型,分为肥胖组(6只)与针刺组(6只).应用免疫组化方法测定脂肪细胞瘦素表达,应用放射免疫分析方法测定血清Leptin及下丘脑NPY水平.结果:与肥胖组相比,针刺后脂肪组织瘦素表达减弱,血清瘦素水平降低,下丘脑NPY水平降低.结论:针刺对食源性肥胖大鼠的疗效显著,其减肥效果可能是通过Leptin-下丘脑NPY轴发挥作用.     

线粒体对米色脂肪细胞的调控作用

肥胖是由于长期能量摄入大于消耗,使过剩的能量以脂肪形式储存于脂肪组织或者其他部位。脂肪组织适应性产热的激活能够促进能量消耗及改善糖脂代谢,是肥胖治疗的关键。棕色脂肪细胞和米色脂肪细胞均参与产热,成人体内产热脂肪的特性更接近于米色脂肪,即具有储能/耗能双向切换模式,在被寒冷或肾上腺素激动剂等诱导激活后适应性产热增加。 产热脂肪细胞主要通过线粒体中的解偶联蛋白1将化学能转化为热能释放。近期研究发现线粒体动力学、质量控制、代谢产物以及线粒体本身作为细胞间信号传递的载体在米色脂肪细胞生成和功能维持方面也发挥重要作用。文章对米色脂肪细胞中线粒体的特征及线粒体对米色脂肪生成和功能的调控进行综述。     

棕色脂肪组织及其作为糖尿病治疗新靶标应用的研究进展 

机体含有2种脂肪组织：白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）。WAT以甘油三酯形式贮存能量,而BAT却是消耗能量进行产热。近年来研究证实了在成人体内存在具有生理功能的BAT,并显示出其在肥胖以及相关代谢疾病方面潜在的巨大治疗价值。本文简述了BAT的发现、生理功能和起源,并概述其在糖尿病治疗中的应用价值和以BAT为靶标的策略。     

关于情感处理过程、抑郁症与神经肽Y的相关研究

神经肽Y基因（NPY[GenBank基因库序列号K01911]）是一个日益受到重视的有前景的候选基因。NPY基因编码一个分解为NPY的前肽原,一个成了由36个氨基酸残基组成的进化上保守、广泛分布于大脑、高浓度表达的氨基酸类神经递质。动物模型实验表明,应激能增加杏仁核NPY的表达和释放,且NPY能减少焦虑样行为。神经肽Y还能在动物模型中调节中枢性疼痛过程。本文总结了近10年关于此方面的研究结果,特别是2012年BrianJ．Mickey,ZhifengZhou,MaryM．Heitzeg等人的最新研究为此领域开辟了一条新途径。     

肥胖基因学说的初步探讨

肥胖是一种重要的慢性代谢性疾病,是遗传、环境、饮食多种因素作用的结果,基因调控在其中发挥着重要作用[1].本文就肥胖基因学说进行初步探讨,旨在为肥胖的基因治疗提供参考. 1 OB基因与肥胖 OB基因又称肥胖基因,位于人类第7对染色体q31.3位点上,长约20kb,含有3个外显子和2个内含子;OB基因只在脂肪组织中表达,其编码产物瘦素(Leptin)是一种分泌性蛋白质,由167个氨基酸残基组成;研究证实[2],Leptin具有抑制食欲、减少能量摄入、增加能量消耗和抑制脂肪合成的作用,其在脂肪组织合成后,分泌到血液中,通过血液循环到达脑组织并与摄食中枢神经系统上的瘦素受体(LR)结合,把信号传到中枢系统,促进促黑素细胞激素(α-MSH)与其受体结合,抑制神经肽等,从而抑制摄食和肥胖的发生、增加解偶联蛋白在脂肪组织中的表达,使多余能量以热能的形式消耗.LR也可以直接参与并启动细胞内信号转导,调节脂肪细胞功能.     

皮肤桥蛋白在肥胖小鼠脂肪中的表达

目的: 观察细胞外基质成员皮肤桥蛋白（dermatopontin, DPT）基因的组织表达谱,以及在饮食诱导肥胖小鼠脂肪中的表达变化;探讨罗格列酮对3T3 L1脂肪细胞DPT基因表达的调控。方法: 运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测6周龄小鼠主要组织的DPT mRNA和蛋白表达,以及正常和高脂饮食小鼠脂肪中的DPT表达;检测DPT在小鼠脂肪组织血管基质细胞和脂肪细胞中的表达差异。将3T3 L1细胞诱导分化为脂肪细胞,并以0.25、0.5、1、2μmol/L罗格列酮处理24 h,或以2μmol/L罗格列酮处理4、12、24、48 h,检测分化过程中及罗格列酮处理后DPT的表达。结果： DPT在小鼠脂肪中高度表达,高脂饮食16周后明显增加;DPT主要来源于脂肪细胞,且在3T3 L1细胞分化过程中的表达逐渐增加;不同剂量罗格列酮处理脂肪细胞24 h可降低DPT的表达量;2μmol/L罗格列酮处理脂肪细胞24、48 h后,DPT表达量明显降低。 结论： 肥胖状态下,脂肪组织中DPT的表达明显增加,罗格列酮对3T3 L1脂肪细胞DPT的表达具有调控作用,提示DPT可能参与肥胖的发生。     

卡维地洛对原发性高血压血浆神经肽Y和神经降压素水平的影响

原发性高血压（essential hypertention,EH）是遗传因素和环境因素共同作用,以心血管重塑为主要表现的一组疾病。神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）和神经降压素（neurotensin,NT）是2种重要的血管活性多肽,对心血管系统功能及外周血管张力具有重要的调节作用。本研究通过对原发性高血压病患者血浆神经肽Y（NPY）及神经降压素（NT）进行测定,并经卡维地洛治疗12周后,以探讨神经肽Y和神经降压素在高血压病发病中的作用及卡维地洛对它们的影响。