药物代谢酶CYP3A和多药耐药基因在中国肾移植人群的遗传多态性

目的 建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MASS ARRAY)测定中国肾移植人群的CYP3A5*3、CYP3AP1和多药耐药基因(MDR1)的多态性.方法 用MASS ARRAY技术对60例中国肾移植人群的CYP3AS*3、CY3AP1和MDR1位点进行基因分型.结果 CYP3A5*I等位基因占25.9%,*3等位基因占74.1%,CYP3AP1 A等位基因占26.7%,G等位基因占73.3%,MDR1 C1236T、G2677T/A、C3435T个体突变频率分别为65.6%、38.3%、36.6%.结论 中国肾移植人群中CYP3A5*3、CYP3AP1和MDR1位点存在遗传多态性,影响不同个体药物代谢酶活性和药物代谢.     

CYP3A5~* 3基因多态性与肾移植术后环孢素肝损伤的相关性

目的:研究肾移植术后患者CYP3A5*3基因多态性对环孢素(CsA)所致肝损伤的影响。方法:采用PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)方法对359名肾移植患者进行CYP3A5*3基因型检测;荧光偏振免疫法检测肾移植患者CsA血浓度,根据肾移植患者发生肝脏损伤的情况分为CsA肝损伤组、其他原因肝损伤组和对照组。结果:在359名肾移植患者中,CYP3A5*3突变等位基因频率为73.5%。与对照组相比,CsA肝损伤组和其他原因肝损伤组的CYP3A5*3/*3分布频率明显增高(P<0.05或0.01),CsA肝损伤组的CYP3A5*3/*3分布频率亦明显高于其他原因肝损伤组(P<0.01)。肾移植术后1个月和3个月,CYP3A5*3/*3组和*1/*3组的CsA血谷浓度均明显高于*1/*1组(P<0.05)。术后7d、1个月、3个月、6个月,CsA肝损伤组的CsA谷浓度明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。Logistic回归模型显示,*3/*3基因型和术后6个月高CsA谷浓度是CsA肝损伤发生的危险因素。结论:CYP3A5*3基因多态性对肾移植患者CsA所致肝损伤有明显影响,携带*3突变基因...     

CYP3A5基因型的差异对环孢素药代动力学影响的体外研究

目的体外明确CYP3A5基因多态性对CYP3A5蛋白酶表达量的影响;不同的CYP3A5基因型对环孢素体外代谢的影响。方法采用PCR-RFLP方法和测序分析了21份肝脏标本的CYP3A5*3基因型;Western-blot方法对蛋白质进行定量;将CYP3A4特异性抑制剂酮康唑和环孢素一起孵育后,采用LC/MS-MS检测AM9/CsA浓度。结果CYP3A5*1/*1、CYP3A5*1/*3基因型和CYP3A5*3/*3基因型样本的蛋白表达量分别为:260.10±136.89nmol.g-1,85.44±55.22nmol.g-1和19.88±17.33nmol.g-1。各基因型蛋白表达量存在差异的同时,也存在一定程度的性别差异。采用AM9/CsA来评估CYP3A5活性,人肝微粒体孵育环孢素,CYP3A5*1/*1的活性明显强于CYP3A5*3/*3;量化校正CYP3A5后,此活性不存在性别差异。结论CYP3A5基因多态性可引起蛋白酶表达量的差异,因而对携带有CYP3A5*3个体,应用比CYP3A5*1/*1个体更小剂量的环孢素就能达到所需要的治疗血药浓度。     

钙通道阻滞剂对肾移植患者环孢素血药浓度/剂量的影响与CYP3A5基因多态性有关

目的:研究CYP3A5基因多态性对合用钙通道阻滞剂(CCBs)患者环孢素(CsA)血药浓度/剂量(C/D)的影响。方法:利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术对69例肾移植患者CYP3A5基因进行分型,研究患者在合用CCBs后CsAC/D的差异及与CYP3A5基因型的关系。结果:CYP3A5基因型为*1/*1、*1/*3和*3/*3型的患者分别有8例、23例和38例。肾移植患者的CYP3A5A6986G多态性(CYP3A5*3)发生频率为71.74。未用CCBs的CYP3A5*1/*3和CYP3A5*3/*3患者其CsAC/D分别是野生型患者的1.73倍和2.43倍,CYP3A5*1/*1、*1/*3型患者在合用CCBs前后CsA的C/D明显提高(19.90±7.66vs36.01±8.18,34.33±7.87vs46.16±9.63ng.mL-1permg.kg-1;P<0.01,P<0.05),而CYP3A5*3/*3型患者CsA的C/D无明显变化(48.27±10.60vs46.42±9.24ng.mL-1permg.kg-1)。结论:CCBs对肾移植患者CsA的C/D的...     

安徽地区CHF患者CYP3A4*?18B和CYP3A5*?3基因多态性分布及其对地高辛血药浓度的影响

摘要：目的:观察安徽地区心力衰竭（CHF）患者CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因多态性分布情况及其对地高辛血药浓度的影响。方法:收集92例安徽地区汉族CHF患者的血液样本,进行地高辛治疗药物浓度监测（TDM）,并采用PCR-荧光探针技术检测CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因多态性。结果:安徽地区汉族CHF患者CYP3A4*18B的3种基因型分布为*18/*18（0%）,*1/*18（0%）,*1/*1（100%）,CYP3A5*3三种基因型分布分别为*3/*3（61.9%）,*1/*3（29.4%）,*1/*1（8.7%）。CYP3A4*18B中*1/*1组的地高辛血药浓度为（1.29±0.86）μg·L-1,CYP3A5*3中*3/*3组、*1/*3组和*1/*1组对应的地高辛血药浓度分别为（1.53±0.92）μg·L-1、（1.12±0.59）μg·L-1和（0.65±0.29）μg·L-1,差异均有统计学意义（P<0.05）,而在不同性别中CYP3A4*18B和CYP3A5*3不同基因型对应的地高辛血药浓度差异无统计学意义（P>0.05）。结论:安徽地区92例CHF患者中CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因型分别以*1/*1和*3/*3型为主,其中CYP3A5*3基因多态性可影响地高辛血药浓度。     

细胞色素P-450 CYP2D6基因分型与表型的吻合率

目的:研究细胞色素P-450 2D6基因分型测定方法及其与表型的吻合率。方法:利用等位基因特异扩增法基本原理,对CYP2D6酶缺陷等位基因CYP2D6*3,*4,*6和*7进行测定。结果:通过168例基因分型,并将结果与表型对照,发现同时测定CYP2D6*3,*4,*6和*7等位基因时,125例快代谢者和43例慢代谢者的基因分型结果与表型结果的吻合率为100％。快代谢者至少有一个野生型CYP2D6等位基因,基因型为*1/*1,*1/*3和*1/*4。发现慢代谢者是CYP2D6突变型纯合子,基因型为*3/*4,*4/*4,*3/*6,*4/*7,*4/*6和*6/*6。结论:对CYP2D6*3,*4,*6和*7等位基因的测定能够准确预测其表型。     

环孢素注射液在肾移植患者中的血药浓度与基因多态性的相关性研究

目的 观察环孢素注射液在肾移植患者亚临床或临界排斥反应治疗中的临床疗效,研究与环孢素药动学相关的9个单核苷酸多态性（SNPs）和环孢素注射液剂量校正谷浓度（C₀/D''）的相关性,建立环孢素注射液的个体化给药模型。方法 收集并记录144例使用环孢素注射液的成年肾移植患者的血液样本及临床资料,对患者的CYP3A4*18B、CYP3A5*3、ABCB1(C1236T、G2677T/A、C3435T)、POR*28、PXR(C5705T、C39823T)以及NFKB1-94 ins/del ATTG等9个SNPs进行基因分型,比较不同基因型患者之间C₀/D''的差异,并应用多重回归分析方法建立基于基因多态性的个体化给药方案。结果 环孢素注射液可使68.8%发生亚临床或临界排斥反应的肾移植患者血肌酐水平得到改善,稳态血药浓度为（189.50±38.56）ng/ml。CYP3A4*18B基因多态性与环孢素注射液的C₀/D''具有显著相关性,*1/*1基因型患者的C₀/D''显著高于*18B/*18B基因型患者;CYP3A5*3、ABCB1 （C1236T、G2677T/A、C3435T）、PXR（C5705T、C39823T）、NFKB1-94 ins/del ATTG及POR*28基因多态性均与环孢素注射液的C₀/D''无显著相关性。在最终回归模型中,血红蛋白和CYP3A4*18B基因多态性与环孢素注射液C₀/D''显著相关。结论 环孢素注射液可有效改善发生亚临床或临界排斥反应的肾移植患者的血肌酐水平;CYP3A4*18B基因多态性与环孢素注射液的C₀/D''显著相关。     

CYP3A5~*3和CYP3A4~*18B基因多态性对肾移植患者环孢素药代动力学的影响

目的回顾性研究肾脏移植后1mon,CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因多态性对CsA药代动力学参数的影响。方法采用PCR-RFLP方法分析了63名肾脏移植患者CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因型;荧光偏正免疫法用于检测肾移植患者静脉全血中的CsA浓度。结果在63名肾移植患者中,CYP3A5*3和CYP3A4*18B突变等位基因发生频率分别为0.770(95CI:0.767～0.773),0.235(95CI:0.235～0.241),而且这些等位基因表现出完全连锁不平衡。在移植术后1mon内,携带CYP3A4*1/*1野生型纯合子患者的C0以及剂量校正谷血浓度(C0/D)均明显高于携带CYP3A4*1/*18B杂合子或CYP3A4*18B/*18B突变型纯合子患者(P<0.05,Mann-WhitneyUtest);CYP3A5*1/*1基因型组的给药剂量明显高于CYP3A5*1/*3或CYP3A5*3/*3基因型组(P=0.004<0.01,Kruakal-Wallistest);CYP34*18B和CYP3A5*3联合考虑,对于CYP3A5表达组,同样发现C0、C0/D在CYP3A4*1/*1组C0以及C0/D均明显高于CYP3A4*1/*18B或CYP3A4*18B/*18B组(P<0.05,Mann-WhitneyUtest);而其他药动学参数在CYP3A5*3及CYP3A4*18B各组间相比差异则没有统计学意义。结论CYP3A5*3和(或)CYP3A4*18B基因多态性对肾移植后1monCsA药代动力学有一定影响,移植前CYP3A5*3基因型的分析仍需进一步研究。     

CYP3A5 6986A>G基因多态性与中国肾移植术后患者环孢素A血药浓度相关性的Meta分析

目的:系统评价CYP3A5 6986A>G基因多态性与中国肾移植术后患者环孢素A(CsA)血药浓度的相关性。方法:计算机检索Cochrane图书馆、PubMed、Embase、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、维普数据库、万方数据库等,收集肾移植术后使用CsA免疫抑制治疗并进行血药浓度监测的中国患者的病例对照研究或队列研究。筛选文献、提取资料后,采用纽卡斯渥太华量表评分对纳入文献质量进行评价,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入8篇文献,均为队列研究,共计890例患者。Meta分析结果显示,CYP3A5*1/*1型患者CsA剂量校正后的谷浓度(C0/D)显著低于CYP3A5*1/*3型[MD=-6.97,95%CI(-13.18,-0.76),P=0.03];亚组分析结果显示,肾移植术后CsA检测时间≤1个月时[MD=-8.50,95%CI(-12.57,-4.43),P<0.000 1]、检测时间>1~<6个月时[MD=-14.02,95%CI(-26.28,-1.76),P=0.02]CYP3A5*1/*1型患者CsA的C0/D均显著低于CYP3A5*1/*3型患者。CYP3A5*1/*3型患者CsA的C0/D显著低于CYP3A5*3/*3型患者[MD=-6.04,95%CI(-8.99,-3.09),P<0.000 1];亚组分析结果显示,肾移植术后CsA检测时间≤1个月时CYP3A5*1/*3型患者CsA的C0/D显著低于CYP3A5*3/*3型[MD=-6.94,95%CI(-10.21,-3.68),P<0.000 1]。CYP3A5*1/*1型患者CsA的C0/D显著低于CYP3A5*3/*3型[MD=-12.64,95%CI(-21.09,-4.20),P=0.003];亚组分析结果显示,肾移植术后CsA检测时间≤1个月时[MD=-16.69,95%CI(-24.03,-9.36),P<0.000 01]、检测时间>1~<6个月时[MD=-16.78,95%CI(-28.63,-4.93),P=0.006]CYP3A5*1/*1型患者Cs A的C0/D显著低于CYP3A5*3/*3型。CYP3A5*1/*1型与CYP3A5*1/*3型、CYP3A5*1/*3型与CYP3A5*3/*3型、CYP3A5*1/*1型与CYP3A5*3/*3型患者CsA剂量校正后的峰浓度比较,差异均无统计学意义。结论:CYP3A5 6986A>G基因多态性与中国肾移植术后患者CsA的C0/D具有一定的相关性,且在肾移植术后CsA检测时间≤1个月时的大小顺序为CYP3A5*1/*1型1~<6个月时为CYP3A5*1/*1型相似文献   

肾移植病人西罗莫司血药浓度/剂量比与CYP3A5基因多态性的关系

目的:研究肾移植术后病人CYP3A5基因多态性与免疫抑制剂西罗莫司临床个体化给药剂量的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切片段多态性(RFLP)的方法对105例健康受试者和50例肾移植术后病人进行CYP3A5基因分型。使用高效液相色谱(HPLC)测定病人的西罗莫司血药浓度。比较不同基因型之间的西罗莫司的血药浓度与每千克体重的剂量(C/D)比值的差异。结果:健康受试者和肾移植病人的CYP3A5 A6986G SNPs,CYP3A5*3的发生频率分别为72.9％和71％,差异无显著意义(P>0.05)。肾移植*1/*3型病人的C/D比值(362±s108)μg·L~(-1)per mg·kg~(-1)和*3/*3型病人的C/D比值(375±123)μg·L~(-1)per mg·kg~(-1)差异无显著意义(P>0.05),但两者C/D值均明显高于*1/*1型病人(199±65)μxg·L~(-1)per mg·kg~(-1),差异具有显著意义(P<0.05)。结论:肾移植病人的CYP3A5基因多态性与西罗莫司血药浓度具有相关性,*1/*3型和*3/*3型病人拟取得相似的血药浓度要比*1/*1型病人服用更低剂量的西罗莫司。研究肾移植病人的CYP3A5基因型,有利于肾移植病人术后西罗莫司个体化用药方案的制定。     

治疗帕金森病新药:腺苷A_(2A)受体拮抗剂

腺苷A2A受体在基底神经节选择性表达并与运动行为有关。流行病学研究和实验室研究均表明阻断腺苷A2A受体能减轻多巴胺能神经元的退行性病变。腺苷A2A受体拮抗剂在改善PD症状的同时还能减缓疾病的进程。因此,腺苷A2A受体拮抗剂很可能成为治疗PD的新药物。     

SCH 58261: A selective A2A adenosine receptor antagonists

The recent discovery of selective antagonists for the A_2A adenosine receptors has been of great help to further research in this field. One compound, SCH 58261, 5- amino-7-(β-phenylethyl)-2-(8-furyl)pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]pyrimidine, is playing a key part in a variety of studies. This review describes its pharmacological characteristics as they are emerging in various laboratories. The compound has an affinity in the low nM range (Ki value of 1–2 nM) for A_2A receptors located on membranes from a variety of tissues and cell types, including rat and bovine brain striatum, human platelets, lymphocytes and neutrophils, porcine coronary arteries, and CHO cells transfected with the cloned human A_2A receptors. SCH 58261 has little or no affinity up to the μM range for adenosine A_2B, A₃, or other G protein-coupled receptors. Selectivity for A_2A vs. A₁ receptors varies from 53- to 750-fold, depending on membranes or type of assay. SCH 58261 blocks A_2A-receptor mediated increase of cyclic AMP formation with high potency (e.g., IC₅₀ values between 15 and 20 nM in human white blood cells). The tritiated form of SCH 58261 specifically labels A_2A receptors in discrete regions of the rat brain such as caudate-putamen, nucleus accumbens, and tuberculum olfactorium. In classic in vitro bioassays, such as A_2A-receptor-mediated vasodilation in coronary arteries, SCH 58261 displays competitive antagonistic properties (e.g., pA₂ value of 9.5 in porcine coronary arteries). In assays involving responses mediated by A₁ or A_2B receptors, SCH 58261 shows little or no activity up to concentrations about 100-fold higher than those affecting A_2A receptors (higher concentrations not being testable due to its poor water solubility). In the rat, SCH 58261 enhances locomotor activity (at 3.7 mg/kg ip), increases wakefulness (10 mg/kg ip) and slightly increases both blood pressure and heart rate (10 mg/kg ip). These activities appear to be specifically mediated by A_2A receptors since the drug counteracts the effect of A_2A receptor agonists in some experimental paradigms. In models mimicking CNS disorders, SCH 58261 potentiates the activity of L-DOPA or dopamine receptor agonists in the 6-hydroxydopamine-lesioned rat model. Moreover, the compound reduces brain infarct size in a rat model of cerebral ischemia. Altogether, SCH 58261 and its radiolabeled form have emerged as interesting tools for better understanding the function of A_2A receptors in physiological or altered conditions. Moreover, the neuroprotective properties of SCH 58261 indicate that drugs of this class have a potential for treatment of brain damage produced by Parkinson's disease or stroke. Drug Dev. Res. 42:63–70, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

葛根黄豆甙元-PVP分散物的研究

本文采用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为载体,制备了葛根黄豆甙元固体分散物。经差热分析、X-射线衍射、偏光显微镜观察实验证明黄豆甙元-PVP 1∶9固体分散物为固体溶液或共沉淀物,其胶囊在人工胃液中最高累积释放百分量和人工肠液中平衡溶解度均是普通胶囊的8倍左右。     

β-淀粉样蛋白和载脂蛋白E4升高神经元胞内游离钙

目的　研究 β 淀粉样蛋白 (Aβ)和载脂蛋白E4(ApoE4)对神经元胞内游离Ca2 +浓度的影响 ,探索它们对神经元的毒性效应。方法　制备 0～ 3d新生SD大鼠的海马和皮层神经元悬液 ,负载上fura 2 /AM ,实验组分别加入Aβ2 5～ 3 5、ApoE4以及Aβ2 5～ 35+ApoE4孵育液温孵 3min后 ,用荧光双波长分光光度计测定神经元 [Ca2 +]i;采用显微准弹性激光散射技术 (MQLS) ,分析Aβ2 5～ 35及ApoE4对单个神经元散射光强度自相关函数 (ACF)的影响 ,通过公式由ACF拟合出反映细胞膜流动性的频移线宽Г。结果　Aβ2 5～ 35和ApoE4均能升高海马和皮层神经元静息 [Ca2 +]i(P <0 0 5 ) ,其中 5 μmol·L-1Aβ2 5～ 35的作用大于 1μmol·L-1Aβ2 5～ 3 5的作用 (P <0 0 5 ) ;Aβ2 5～ 35和ApoE4也能增强KCl去极化诱导的海马和皮层神经元 [Ca2 +]i 升高 (P <0 0 5 )。Aβ2 5～ 3 5(1μmol·L-1) +ApoE4(0 1μmol·L-1)共同作用也使神经元静息 [Ca2 +]i及KCl去极化诱导的神经元 [Ca2 +]i升高 (P <0 0 5 ) ,但两者共同作用未见其升 [Ca2 +]i 效应进一步增大。Aβ2 5～ 3 5和ApoE4均降低海马和皮层神经元的频移线宽Г。结论　Aβ2 5～ 35和ApoE4均能升高神经元静息[Ca2 +]i 及降低神经元膜流动性 ,但两者共同作用未能显示升 [C