胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原395例临床体会

目的:建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗—HBs),制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果:GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1ng/ml。用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99.0％。结论:GICA检测血清中的HBsAg特异性强,灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测中的应用评价

<正>胶体金免疫技术是20世纪80年代继三大标记技术(荧光素、放射性同位素和酶标记)发展起来的固相标记免疫测定技术,该法优点是可单份测定,简单快速。2005年卫生部门要求所有做胃镜与肠镜的患者检测前必须进行乙型肝炎     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动。与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应,检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1ng/ml。用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99%,结论GICA检测血清中的HBsAg特异性强、灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

胶体金免疫层析试验快速检测HBsAg

0　引言　胶体金免疫层析试验是 2 0世纪 90年代初在免疫渗滤技术[1 ] 的基础上建立的一种快速简便的免疫检测技术 .我国有 40 %左右的人感染过乙型肝炎病毒 ,其中约有 1 0 %的人携带 HBs Ag,因而快速准确地检测和普查 HBs Ag,对于乙型肝炎的预防、诊断和治疗 ,具有极大的实用价值 .为此 ,我们研究建立了快速检测 HBs Ag的胶体金免疫层析试验 (GI-CA) ,取得了较为满意的结果 .1　材料和方法1 .1　材料　氯金酸购于上海试剂一厂 ;免疫层析的材料由吸水玻璃纤维、吸附胶体金的玻璃纤维纸、硝酸纤维素薄膜和塑料支持物四部分构成 ;抗 - H…     

胶体金免疫层析法检测HBsAg在无偿献血中的应用研究

目的 :利用胶体金免疫层析法 (GICA)筛查无偿献血者HBsAg ,探讨GICA法的影响因素 ,为实验室选用胶体金试剂提供参考。方法 :采用 4种品牌的胶体金试剂检测献血者标本、定值HBsAg阳性血清 ,在不同的温度、时间、加样量下 ,结合其物理现象作观察 ,并与ELISA法检测结果比较。结果 :4种品牌的胶体金试剂质量差异较大 ,同时GICA法受温度、时间、加样量的影响。结论 :GICA法适合献血员采血筛查 ,建立评价胶体金试剂的方法和室内质控的方法 ,可有效的提高检测质量     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原应用评价

目的对胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原（HepatitisBsurfaceantigens,HBsAg）的敏感性、特异性进行分析和初步评价。方法采用胶体金免疫层析（G01dImmunoehromatographyAssay,GICA）法,酶联免疫吸附（Enzyme—linkedimmunosorbentAssay,ELISA）法,对HBsAg定值血清和200份待测血清标本同时测定,对GICA法的测定结果进行分析评价。结果GICA法的最小检出量≥1．0ng／ml,ELISA法的最小检出量≥0．5ng／ml,GICA法的敏感性低于ELISA法。与ELISA法相比,GICA法敏感度为91．1％,特异性为99．4％。结论GICA法适用于HbsAg的急诊和初筛检查。     

胶体金免疫层析法检测HBsAg的临床价值

乙型肝炎的病毒(HBV)携带者及其慢性持续感染者是乙型肝炎传染的主要来源.全世界约有3亿人感染HBV,我国HBsAg携带率0.1%～15%.因此临床上检测HBV标志显得非常重要,血液中的HBsAg仍然是HBV感染的重要标志.目前实验室常用酶联免疫法(ELISA)检测HBsAg.     

霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条的应用

今年，我们试用了江苏省疾控中心推广使用的霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条(下称金标法)，并与国标法进行了分析比较，报告如下。     

乙型肝炎病毒表面抗原检测的准确性分析

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测的安全性和可靠性。方法收集经检查HBsAg阴性的血清983份,采用雅培ArchitectⅠ2000电化学发光仪定量检测HBsAg;巢式聚合酶链反应PCR扩增乙肝病毒S区、C区、X区。诊断为隐匿性乙肝病毒感染者,巢式PCR扩增病毒PreS/S区,产物直接测序并与标准病毒序列对比分析病毒株变异。结果经雅培ArchitectⅠ2000复检HBsAg弱阳性率为6.5%（64/983）,HBsAg滴度中位数为0.17 U/ml;60.9%（39/64）病毒2个区扩增阳性,4.0%（39/983）为隐匿性HBV携带者血清;35.9%（14/39）病毒PreS/S区段扩增阳性,未发现＂a＂决定簇内的变异株。结论目前经常规检测HBsAg为阴性的血液,用敏感性更高的试剂仍能检测出HBsAg及HBV DNA。     

乙型肝炎病毒表面抗原单链抗体细菌内免疫抗乙型肝炎病毒基因治疗研究

目的：研究乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg)人源单链可变区抗体（ScFv)细胞内免疫抗乙型肝炎病毒（HBV）基因治疗的作用。方法：用噬菌体表面展示技术筛选特异性的HBsAg人源单链可变区抗体，聚合酶链反应（PCR）法扩增HBsAg单链抗体基因，并构建表达HBsAg ScFv基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-HBsAg ScFv,转染PA317细胞，将转染细胞分泌的假病毒颗粒感染2．2．15细胞，酶联免疫吸附法（ELISA）检测其上清HBsAg和HBeAg，定量检测HBV DNA。结果：成功筛选出HBsAg ScFv,PCR扩增出750bp的全基因，构建HBsAg ScFv基因的逆转录病毒载体，转染PA317细胞，在上清中检测出含HBsAg ScFv假病毒颗粒的存在，上清感染2．2．15细胞后第3、5、7、14天，HBsAg,HBeAg逐渐下降，到第14天时HBsAg已变为阴性，DNA定量检测无明显变化。结论：HBsAg ScFv能成功地在逆转录病毒载体中表达，并有抑制HBsAg,HBeAg表达的作用。     

胶体金法检测HBsAg漏检原因分析

目的:采用酶联免疫方法对胶体金试纸法检测HBsAg的结果进行复检,以防漏检而造成医源性传播。方法:采用卫生部临检中心已明确预期阴、阳结果的HBsAg质控血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)对胶体金试纸条检测5 970份阴性血清进行复检。结果:5 970份胶体金试纸条阴性标本,经ELISA法检测,其中有47份血清为阳性结果,漏检率为0.79%。再次用胶体金试纸条对47份阳性血清(ELISA)进行检测,检出7份标本为阳性,占漏检数的14.89%,其中10~20 min内检出6份阳性标本,25 min检出1份阳性标本。41份两种方法检测结果不符的样本中,3份样本ELISA法结果OD值≥3.0,占漏检数的7.32%,29份样本OD≤0.5,占漏检数的70.73%,经统计学分析,两种方法检出率有显著性差异。P<0.05,χ2=43.57。结论:胶体金试纸检测法受环境和人为因素影响较大,灵敏度较ELISA法低。     

胶体金检测抗环瓜氨酸肽抗体性能评价

目的对胶体金免疫层析（GICA）技术检测患者血清抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体进行性能验证和评价。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和GICA,同时对104例可疑类风湿性关节炎（RA）患者进行抗-CCP抗体检测,计算两种方法检测结果的阴性符合率、阳性符合率、总符合率以及Kappa值。用±20％临界值浓度标本各重复检测20次,记录阴性和阳性结果数,验证GICA法重复性。结果两种方法检测结果比较,阴性符合率、阳性符合率、总符合率、Kappa值分别为92％、100％、96％、0．92。GICA法检测＋20％临界值浓度标本结果阳性数为20次,阳性率100％;-20％临界值浓度标本结果阴性数为15次,阴性率为75％。结论GICA法与ELISA法检测抗-CCP抗体结果一致性良好,而且GICA方法简单、快速,敏感性和特异性较高,是早期筛查类风湿性关节炎值得推广的方法。     

胶体金免疫层析法快速检测霍乱弧菌的初步应用

目的 为检验胶体金免疫层析法(GICA)试纸条检测霍乱弧菌(VC)的灵敏性及其实际应用意义。方法 以VC菌株模拟标本检验GICA的检测灵敏度,并与培养法平行检测流行期间的霍乱标本进行比较。结果 GICA检测纸条检出VC的下限为10^5cfu/ml,比培养法灵敏度低,但已达到检测条原定技术指标;实际应用检出率比培养法稍低,其差异无显性意义。结论 应用GICA试纸条检测VC的方法具有快速、简便、特异和适合基层单位使用的优点。     

胶体金免疫层析法检测心肌标志物在诊断急性心肌梗死中的应用

目的 评价胶体金免疫层析法检测心肌标志物血清肌钙蛋白Ⅰ/肌酸激酶同工酶(CK-MB)/肌红蛋白诊断急性心肌梗死(AMI)的效能.方法 采用双盲、自身对照的试验设计方法,分别采用科卫公司研制生产的肌钙蛋白Ⅰ/CK-MB/肌红蛋白三合一诊断试剂盒和艾康公司生产的试剂盒对140例AMI患者的血液标本进行检测.结果 两种试剂检...     

胶体金法与ELISA法在检测丙型肝炎病毒抗体中的比较

目的探讨胶体金法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法在检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体中的应用价值。方法选择2012年3月至2013年3月泸州医学院附属医院收治的860例HCV患者,采用胶体金法和ELISA法进行HCV抗体检测。结果胶体金法和ELISA法检测HCV抗体的阳性检出率分别为3.60%和3.72%,差异无统计学意义(P>0.05)。以ELISA法作为检测HCV抗体阳性的标准,胶体金法对于HCV抗体检测的灵敏度为93.75%,特异度为99.88%。结论胶体金法进行HCV抗体检测与ELISA法并无差异,且胶体金法具有快速简便的优点,值得在临床检测中进行推广。     

鱼类致病性迟钝爱德华氏菌胶体金快速检测试纸的研制

制备迟钝爱德华氏菌胶体金快速检测试纸并对其性能进行检测。以柠檬酸三钠作为还原剂制备胶体金颗粒,标记迟钝爱德华氏菌多克隆抗体,将羊抗兔IgG和纯化后的迟钝爱德华氏菌多克隆抗体包被于NC膜上作为质控线和检测线,以检测样品中的迟钝爱德华氏菌(E. tarda)。结果表明：所研制的试纸特异性良好,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌等常见细菌或病原菌进行测试未出现交叉反应;敏感度达到105 CFU/mL,反应时间仅为5~10 min,可以用于感染迟钝爱德华氏菌大菱鲆腹水的现场检测,具有操作     

浅谈胶体金早孕试纸尿检中的阳性与阴性

胶体金早孕试纸是通过检测β—HCG水平快速诊断早孕的常用临床检测手段，β-HCG水平的升高或降低还可见于早孕之外的其他情况。文章就临床HCG尿检中的阳性与阴性的常见情况做个简要分析，以供读者参考。     

HBsAg携带者中的抗-HBe检测结果

报告299名3～53岁HBsAg阳性携带者以ELISA法检测抗—HBe的结果,总检出率为39.13％。在各年龄组中,<10岁组的检出率明显低于其他各组,经分别与40～岁和≥50岁组相比,差异均显著(P均<0.05)。不同HBsAg阳性滴度的各个抗—HBe检出率之间的变化粗粗看来似无明显的规律性,但高滴度组的抗—HBe检出率仍可见到下降趋势,经统计学处理,各组间的差异仍具有非常显著的统计学意义(x~2=27.23,P<0.01)。