Extended Culture of Early Stage Embryos in Frozen-thawed Cycles

Objective To investigate the impact of extended culture of early stage embryos on pregnancy outcome of frozen embryo transfer （FET）. Methods The survival rates of embryos after thawing and pregnancy outcome following FET were compared retrospectively between zygote and cleavage embryos which cultured to cleavage stage or extended cultured to blastocysts. Results A total of 425 zygote embryos in 67 cycles were thawed. After thawing, the survival rate was 94.4% and with an average transfer of 2.8 embryos, the clinical pregnancy rate was 55.2% （37/67）. In 222 FET cycles, totally 1 270 cleavage stage embryos were thawed and the overall survival rates were 80.3%. With an average transfer of 2.7 embryos, the clinical pregnancy rate was 55.4% （123/222）. A significantly lower percentage of degenerated embryos were found for zygotes （5.6%） than that for cleavage stage embryos （19.7%） （P〈0.01）. The clinical pregnancy rate was 53.4% （116/217） in the group of transfer at cleavage stage, while the clinical pregnancy rate was 61.1% （44/72） in the group of transfer at blastocyst stage （P〉0.05）. Conclusion Although the clinical pregnancy rate was not different between patients with freeze-thaw zygote and cleavage stage embryo transfer, higher survival rate for zygote was shown compared with that for cleavage stage embryo. However, the present studies did not demonstrate that extended culture thawing embryos to blastocyst could achieve favor clinical outcome.     

囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用探讨

目的探讨囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用价值.方法对2002年10月～2003年12月在湘雅医院生殖医学中心接受囊胚培养并行囊胚期冷冻胚胎移植的病例进行分析,了解囊胚期与卵裂期冷冻胚胎解冻后的胚胎成活率、植入率及妊娠率.结果冷冻囊胚解冻后胚胎数、胚胎成活率、植入率和妊娠率与卵裂期冷冻胚胎无显著差别(P＞0.05),囊胚解冻后经15 h过夜培养,42枚中有22枚成活,其中8枚Ⅰ,Ⅱ级继续发育或囊胚腔扩张,3例获得妊娠,妊娠率为37.5%.结论囊胚期冷冻胚胎移植同样能达到卵裂期冷冻胚胎移植的临床效果,同时增加解冻与移植间隔时间可更好地选择冻融囊胚移植,对提高妊娠率可能有一定意义.     

体外受精治疗周期中剩余胚胎囊胚培养的临床价值

目的探讨体外受精治疗周期中d3移植和冷冻后剩余胚胎的体外发育潜能。方法对剩余胚胎继续培养至囊胚期,观察其囊胚发育率和质量,并分析治疗周期中剩余胚胎囊胚形成情况和妊娠结局的关系。结果收集115个IVF／ICSI-ET周期中的603枚剩余胚胎,囊胚培养后获得了222枚囊胚（36．82％）,其中优质囊胚49枚（8．13％）;36个周期（31．30％）共获得53枚冷冻囊胚（8．79％）;12例含有剩余胚胎来源囊胚的解冻移植周期,临床妊娠4例;≥6细胞、2PN来源胚胎囊胚形成率显著高于其他组（P〈0．05）;剩余胚胎有囊胚形成的周期临床妊娠率显著高于无囊胚形成组（P〈0．05）。结论根据d3胚胎形态学评分预测其发育潜能有一定局限性;通过囊胚培养筛选出剩余胚胎中具有发育潜能的并冷冻保存,是提高病人每个治疗周期可用胚胎数的可行方法;剩余胚胎囊胚形成情况可有效预测妊娠结局。     

非优良胚胎形成的囊胚与卵裂期优良胚胎的冻融胚胎移植的临床结局比较

目的探讨不同发育天数胚胎的发育潜能,为D3非优良胚胎进行囊胚培养及其冻融移植提供依据。方法回顾性分析687
例复苏周期胚胎移植患者的资料,根据胚胎冷冻时间不同,分为3 组：D5 冷冻组（n=87）、D6 冷冻组（n=111）和D3 冷冻组（n=
489）,采用外源性雌孕激素或自然周期准备内膜,比较各组间的临床妊娠率、流产率、种植率等指标。结果每组移植周期临床
妊娠率、流产率、种植率分别为：D5 冷冻组58.6%、9.8%、42.9%;D6 冷冻组32.4%、19.4%、23.3%;D3 冷冻组44.9%、16.4%、
26.9%。D5冷冻组的临床妊娠率和种植率均明显高于另外两组,且差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论D3的非优良胚胎
继续培养,若能够形成囊胚,所形成的D5囊胚冻融移植的临床结局优于D3的优良胚胎和非优良胚胎形成的D6囊胚冻融移植
的临床结局。因此D3的非优良胚胎的囊胚培养及其冻融移植具有临床应用价值,且在冻融胚胎移植周期若有不同冷冻时间的
胚胎可供选择时,可以优先选择非优良胚胎来源的D5囊胚,其次选择D3的卵裂期胚胎。
     

不同氧浓度对单精子卵浆内注射技术胚胎发育及妊娠结局的影响

【目的】 探讨取卵后第1-3天体外培养时不同氧浓度对于单精子卵浆内注射技术(ICSI)胚胎发育和妊娠结局的影响?【方法】 回顾性分析了645例于2011年1-12月期间中山大学附属第一医院生殖中心行ICSI授精后第3天(D3)胚胎移植的周期的胚胎发育情况和临床结局,根据体外培养的氧浓度将其分为5%低氧浓度组和20%高氧浓度组?【结果】 低氧组D3可用胚胎率(72.02%与68.73%)和移植胚胎评分(22.53与20.10)较高氧组更高,但新鲜胚胎移植的临床结局没有显著性差异?累积妊娠率低氧浓度组(60.44%与51.67%)显著高于高氧浓度组?在预后差如高龄和/或取卵数少的病人中,低氧组移植胚胎评分(20.66 与 16.71)?可利用胚胎率(76.11% 与 64.55%)和胚胎植入率(22.27% 与 10.08%)更高?【结论】 低氧培养环境对于ICSI授精短期体外培养胚胎优于高氧培养环境?     

复苏周期单囊胚移植的影响因素分析

目的研究玻璃化复苏囊胚移植后的妊娠结局与冷冻前囊胚质量、发育速度的相关性,探讨单囊胚移植的可能性。方法回顾分析105例复苏周期单囊胚移植患者的临床资料,观察发育速度、囊胚质量、内细胞团(ICM)/滋养外胚层(TE)评分对妊娠结局的影响。结果第5、6天囊胚间复苏后存活率、移植后妊娠率的差异均无统计学意义(98.0%,54.5%vs 97.0%,52.5%)。优质囊胚移植后妊娠率(44/70,62.9%)显著高于非优质囊胚(12/35,34.3%)。ICM评分为A、B级的囊胚移植后妊娠率差异无统计学意义(70.6%vs 58.0%),但均显著高于C级胚胎(21.1%)。TE评分越低,妊娠率有下降趋势但差异无统计学意义。结论复苏周期单囊胚移植妊娠率与囊胚质量有关,与囊胚发育速度无关。ICM评分而非TE评分与妊娠结果显著相关。复苏周期单个优质囊胚移植后妊娠率高,提示单囊胚移植可行。     

玻璃化冷冻人卵母细胞体外受精－胚胎移植9例临床分析

目的：探讨人卵母细胞玻璃化冷冻在体外受精－胚胎移植（ IVF-ET）中的应用效果。方法行IVF-ET 治疗、因取卵日男方因素无法进行受精的患者9例,对其成熟卵子进行玻璃化冷冻保存,解冻后进行卵胞浆内显微授精（ICSI）,记录卵子复苏、受精、卵裂及移植后妊娠情况。结果9例患者共解冻复苏58枚卵子,复苏率68．2％（58／85）;复苏后进行ICSI的成熟卵子中,受精40枚,形成胚胎34枚,受精率69．0％,卵裂率85．0％。7个移植周期共移植胚胎15枚,临床妊娠3例,临床妊娠率42．9％。结论人卵母细胞玻璃化冷冻可以获得一定的临床妊娠率,在IVF-ET中可作为临床治疗的选择之一。     

两种助孕方式下D5、D6囊胚行冻融移植后妊娠结局的比较

目的 比较体外受精-胚胎移植(IVF-ET)与胚胎植入前遗传学诊断或胚胎植入前遗传学筛查(PGD/PGS)周期中D5、D6囊胚形成情况及妊娠结局,同时探究D5、D6囊胚的发育潜能及两种助孕方式的优劣.方法 回顾性分析行IVF-ET助孕的138个周期及PGD/PGS筛查助孕的148个周期,按移植胚胎的发育天数分为IVF-D5组、IVF-D6组、PGD/PGS-D5组和PGD/PGS-D6组,分析比较各组的一般情况、囊胚形成情况及冻融移植后的种植率、临床妊娠率、流产率等.结果 IVF-D5组与IVF-D6组相比、PGD/PGS-D5组与PGD/PGS-D6组相比,D5组囊胚形成率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率均高于D6组(P＜0.05);PGD/PGS周期中D5组整倍体囊胚检出率高于D6组(p＜0.05);IVF-D5组与PGD/PGS-D5组相比、IVF-D6组与PGD/PGS-D6组相比,两组间的囊胚形成率、优质胚胎率、种植率及临床妊娠率均差异无统计学意义.结论 两种助孕方式下冻融移植D5囊胚比D6囊胚可获得较好的临床妊娠结局;与IVF相比,PGD/PGS并未明显改善患者的妊娠结局.     

人羊水用于小鼠体外受精和胚胎移植的初步报告

孕16～21周人羊水上清液用于小鼠体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植,结果体外受精率、8细胞期胚胎发育率和胚泡发育率与Ham’s F-10培养液的培养结果,无显著的统计学差异;但胚泡孵出率.活胎率及产仔率都非常显著地高于Ham’s F-10培养液的培养结果.存放14天的羊水仍有良好的培养结果.     

辅助孵化对高龄妇女IVF-ET临床结局的影响

目的探讨辅助孵化对高龄妇女体外受精-胚胎移植临床结局的影响。方法回顾性分析96例高龄妇女体外受精-胚胎移植周期,其中行激光辅助孵化后移植52周期（AH组）,常规胚胎移植44周期（常规组）,比较两组患者临床妊娠率和胚胎种植率。结果AH组的临床妊娠率为28.85%（15/52）,胚胎种植率为18.10%（19/105）;常规组的临床妊娠率为20.45%（9/44）,胚胎种植率为8.93%（10/112）。当基础卵泡刺激素(FSH）≥10（IU/L）或透明带厚度≥18?μm时,AH组胚胎种植率明显高于常规组（P＜0.05）。结论对于高龄妇女,尤其对于合并基础FSH≥10（IU/L）或移植胚胎透明带厚度≥18?μm的患者在胚胎移植前行辅助孵化有助于提高胚胎种植率。     

Effect of the P1 Medium and the ECM Medium on Embryo Quality in IVF

Objective To investigate the effect of the glucose-free preimplantation stage one （P1） medium and the ECM medium on embryo development quality in IVF. Methods The patients with ≥4 zygotes of 2PN were studied. A total of 201 retrieval cycles were included in a prospective randomized study. Each patient was herself control. Half of zygotes of 2PN were transferred into ECM medium （group A） and half into P1 medium （group B）for further culture. Embryo development was evaluated on the day of embryo transfer. The efficacy of ECM was compared with P1 as culture medium for the development of preimplantation embryos. Results No statistically significant differences were noted between the two groups regarding embryo-cleavage rate （97.13% vs 97.55%） and rate of normal-cleaving embryos （58.29% and 58.37%）. The rate of top-quality embryos was statistically higher in group A than in group B （27.59% vs 19.75%, P〈O.05）. Embryo quality, as assessed by morphological parameters （the amount of detached anuclear fragments 〉30%）, was better in group A than in group B （19.86% vs 21.75%）, however, there was no statistically significance. Both the rate of good-quality embryos （47.95% vs 46.17%） and available embryos （63.22% vs 61.19%） were higher in group A than in group B, but there was also no statistically significance. Conclusion The ECM medium may be associated with a better embryo quality compared with the P1 medium.     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法应用玻璃化冷冻保存技术冻存了22例患者的96枚4-16细胞期的早期胚胎。结果对82枚冷冻胚胎进行了解冻,存活65枚,胚胎存活率为79.27%（65/82）,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法。     

胚源性IL-1β与人类胚胎发育及种植的关系

目的探讨胚胎培养液中胚胎分泌的白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）水平与胚胎发育及植入潜能的关系。 方法选取首次行卵胞浆内单精子显微注射－胚胎移植（intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer,ICSI-ET）手术的新鲜周期不孕患者80例,胚胎在体外采用单液滴单胚胎培养,在取卵受精后第3天进行胚胎移植,且移植胚胎数量均为2枚。收集新鲜周期移植胚胎相对应的卵裂期培养液微滴,采用酶联免疫吸附试验测定其上清的IL-1β水平。根据每周期胚胎种植率,将入组患者分A组43例（种植率为0%）、B组27例（种植率为50%）、C组10例（种植率为100%）。比较3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数、在移植胚胎培养液中分泌的IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分;分析IL-1β水平、移植胚胎形态学累积评分之间的相关性。 结果80例患者中临床妊娠37例,临床妊娠率为46.3%,其中单胎妊娠27例,双胎妊娠10例。3组主要临床资料与胚胎实验室相关参数差异均无统计学意义（P＞0.05）。B组移植胚胎卵裂期培养液中IL-1β水平高于A组,C组高于A组和B组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3组移植胚胎形态学累积评分差异无统计学意义（P＞0.05）。IL-1β水平与胚胎形态学累积评分呈正相关（r=0.587,P＜0.05）。 结论胚胎培养过程中胚胎分泌的内源性IL-1β与胚胎发育及植入存在密切相关性,其对胚胎的评估以及早期胚胎干预的研究可提供参考意义。     

PGT-A及PGT-SR在辅助生殖中的应用

目的探讨胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)在辅助生殖中应用的价值,为PGT的临床应用提供依据。 方法回顾性分析行非整倍体筛查（PGT for aneuploidies,PGT-A）和染色体结构异常检测（PGT for structural rearrangements,PGT-SR）助孕夫妇的临床资料、实验室资料及妊娠结局资料。采用囊胚期外滋养层细胞活检及基因检测技术,挑选检测结果正常的胚胎行单囊胚移植。比较年轻女性（＜35岁）组与高龄女性（≥35岁）组的一般资料、胚胎培养情况、胚胎活检结果及妊娠结局。 结果共纳入PGT-A 194个周期,635个胚胎,101个移植周期;共纳入PGT-SR 92个周期,399个胚胎,40个移植周期。PGT-A及PGT-SR中≥35岁组获卵数均少于＜35岁组(P＜0.05),胚胎发育情况差异无统计学意义(P＞0.05),PGT-A及PGT-SR中≥35岁组正常胚胎率明显低于＜35岁组(P＜0.05)。随着年龄的增加,PGT-A胚胎活检正常率逐渐下降;PGT-A 101个移植周期中活产44例（43.56%）,各组间妊娠结局差异无统计学意义（P＞0.05）;PGT-SR 40个移植周期中活产19例（47.50%）,妊娠结局差异无统计学意义（P＞0.05）;子代均健康。 结论PGT是解决复发性流产、高龄女性、染色体异常夫妇的有效治疗手段,能够有效改善高龄女性的生育状况,但40岁以后的女性是否行PGT助孕,应权衡利弊后决定。     

移植胚胎选择的量化指标

【目的】探讨胚胎累计评分（ECS）预测胚胎发育潜能及胚胎种植率（IR）和临床妊娠率(PR)的价值。【方法】782个IVF周期及223个ICSI周期分别计算ESC,并依据ESC及种植率和妊娠率做频数表,并分别分为妊娠与非妊娠组进行比较ESC。【结果】 IVF周期在ESC大于18且不大于32时和ICSI周期在ESC大于22且不大于32时可以达到50%以上妊娠率,此范围外ESC均致使妊娠率降低;IVF周期在ESC大于28且不大于32时和ICSI周期在ESC大于26且不大于32时可以达到35%以上种植率,此范围外ESC均致使种植率降低;两种周期妊娠组ESC均高于未妊娠组（P<0.01）。【结论】ESC可以预测胚胎移植后的临床妊娠率,并为临床移植胚胎挑选提供量化标准。     

囊胚解冻过夜培养后移植对妊娠结局的影响

【目的】 比较行囊胚移植的复苏周期中,解冻后经2 ~ 3 h培养或过夜培养后移植对妊娠结局的影响?【方法】 回顾性分析本中心2010年9月至2012年10月进行复苏周期囊胚移植的523个周期资料,按照解冻后至移植前时间不同分为2组:解冻2 ~ 3 h后当天移植(0TET,n = 247)?提前1 d解冻过夜培养后移植(1TET,n = 276),对其妊娠结局进行比较?【结果】1TET组与0TET组相比移植了较少的胚胎个数(1.6 vs. 1.8,P < 0.001),获得较高的妊娠率(57.6% vs. 56.3%)?种植率(46.3% vs. 44.1%)和较低的流产率(9.4% vs. 12.2%)?多胎率(28.3%vs. 36.7%)?但除移植胚胎个数外,其他各妊娠结局指标的差异无统计学意义?人工周期(HRT)作内膜准备获得较高的妊娠率(62.8% vs. 53.0%,P = 0.027)?单囊胚移植周期分析发现,第5天发育为囊胚的胚胎比第6天的囊胚具有较高的种植率 (57.6% vs. 36.1%, P = 0.004)【结论】 提前1 d解冻囊胚过夜培养后再移植不会影响主要妊娠结局?影响妊娠率的因素有内膜准备方法和发育为囊胚的天数?降低多胎率可考虑D5单囊胚移植?     

改良Hemi straw与Cryoleaf法对人卵和胚胎玻璃化保存效果的比较

目的比较改良的Hemi straw与Cryoleaf法对人卵子和胚胎的玻璃化保存效果。方法 将接受体外受精-胚胎移植周期中剩余的98枚未受精卵和76枚废弃胚胎，分别采用Cryoleaf(A组)与改良的Hemi straw（B组）为载体进行玻璃化冷冻，复苏后观察并计算两种玻璃化载体的卵子存活率，24?h继续存活率与卵裂率；胚胎存活率，24?h继续存活率及囊胚形成率。结果Cryoleaf与改良的Hemi straw法保存人未受精卵分别为43、55枚，复苏存活分别为29（67.4%）、31（56.4%）枚，24?h继续存活分别为23（53.5%）、25（45.5%）枚，卵裂分别为3（7.0%）、1（1.8%）枚，两种载体差异不明显（P＞0.05）。Cryoleaf与改良的Hemi straw法保存废弃胚胎分别为39、37枚，复苏存活分别为29（74.4%）、33（89.2%）枚，24?h继续存活分别为28（71.8%）、33（89.2%）枚，形成囊胚分别为5（12.8%）、1（2.7%）枚，两种载体差异不明显（P＞0.05）。结     

冻融胚胎移植98周期结果分析

目的分析冻融胚胎移植后结局,探索提高冻融胚胎移植妊娠率的方法。方法采用慢速冷冻-快速融冻方法行胚胎移植,子宫内膜的准备分自然排卵周期及激素替代周期,移植前融胚过程分为辅助孵化组和未辅助孵化组,对移植融胚的妊娠结局进行分析。结果冻融胚胎移植98周期,妊娠率24.5%。自然周期与激素替代周期比较妊娠率无统计学意义,流产率亦无统计学意义。辅助孵化组与对照组相比妊娠率有差异,流产率相比无显著差异。结论自然周期与激素替代周期作为冻融胚胎移植前子宫内膜的准备可获得相近的妊娠率。应用激光辅助孵化技术可提高冻融胚胎移植妊娠率。     

囊胚发育速度和形态学参数与整倍体状态及妊娠结局的相关性

目的:研究胚胎植入前遗传学检测周期中,囊胚发育速度、囊胚扩张程度、内细胞团等级和滋养层细胞等级对其整倍体状态及整倍体胚胎移植后妊娠结局的影响.方法:回顾性分析2017年10月至2021年1月南京医科大学附属妇产医院生殖医学中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing...     

生殖道支原体感染与IVF 临床结局的相关性分析

目的 探讨接受体外受精- 胚胎移植（IVF-ET）治疗的患者中生殖道支原体检测阳性对IVF 临床结局的影响及术前进行支原体检查的临床意义。方法 回顾性分析2012 年5 月-2015 年4 月唐山市妇幼保健院生殖中心接受IVF-ET 治疗的不孕患者1 237 例,按分泌物支原体培养结果分为双方阴性（A 组）、仅女方阳性（B 组）和仅男方阳性（C 组）3 组。分析统计3 组的正常受精率、异常受精率、卵裂率、D3 优质胚胎率、临床妊娠率、种植率、流产率、早产率、低体重儿出生率等数据;将移植后剩余胚胎进行囊胚培养,统计分析囊胚形成率、优质囊胚率及冷冻率。结果 阳性组与阴性组相比各组数据差异均无统计学意义（P >0.05）。结论 不管女方还是男方支原体培养结果阳性对IVF 的最终临床结局无明显影响,在患者无主观症状的情况下,支原体检查不是必须的。