PEG塑化七叶一枝花平面标本技术研究

目的:研究药用植物七叶一枝花平面标本塑化制作技术。方法:将七叶一枝花植物标本在一定浓度的醋酸铜溶液中浸泡复绿后塑化处理,干燥后再固定在大小适当的台纸上,选择合适的边框装饰,将已装饰好的七叶一枝花标本放入玻璃镜框内保存使用。结果:七叶一枝花通过上述方法处理后制成的标本,外形美观,植物色泽、形态与自然状态比较,接近药用植物原始形态,便于教学、科研、陈列、观赏和学习。结论:该方法可以应用于药用植物七叶一枝花平面标本的保色美化制作。     

七叶一枝花甾体皂苷种类及含量差异研究进展＊

重楼是我国传统的名贵中药，七叶一枝花为历版《中国药典》收载的重楼药材两个基原植物之一，具有清热解毒、消肿止痛、活血化瘀等功效，其主要活性成分为甾体皂苷类物质。由于重楼市场需求量剧增和七叶一枝花成药时间较长，导致大量依靠人工种植。然而，人工种植过程中产地、采收年限和采收月份都会影响七叶一枝花的甾体皂苷含量。本文系统地总结了七叶一枝花中主要活性成分甾体皂苷的种类，以及不同产地、不同生长年限及不同采收月份的七叶一枝花根茎中甾体皂苷含量差异的研究现状，以期为进一步研究七叶一枝花品质差异、野生资源驯化及规范化种植提供参考。     

七叶一枝花类商品药材总皂甙含量测定

本文对全国12省区的七叶一枝花类商品药材作了分析鉴定,结果表明目前全国主流商品为七叶一枝花和滇重楼,另外尚有黑籽重楼、南重楼、狭叶重楼、球药隔重楼。并用分光光度法测定了22种商品药材中总甾体皂甙的含量。     

七叶一枝花的民族植物学研究

从药用民族植物学的角度介绍珍稀濒危药用植物七叶一枝花的文献记载、植物学形态、生态习性、民族民间用法,论述国内外对七叶一枝花化学成分、药理作用等方面的研究状况,通过对资料的收集整理和分析,有助于充分开发和利用这一丰富的民族药用植物资源。     

七叶一枝花酊治疗蛇伤所致肿痛80例疗效观察

蛇毒的主要成分是神经毒、血循毒和酶.被毒蛇咬伤后,伤处红肿疼痛.严重者蛇毒扩散至全身,引起机体功能损伤甚至多器官功能衰竭,伤口迅速变黑坏死,形成溃疡;有的因失治、误治而导致肢体伤残.2008年6月～10月,我们应用七叶一枝花酊治疗蛇伤引起的肿痛进行临床观察,疗效满意,现报告如下.     

七叶一枝花基于ITS序列的DNA条形码构建研究

目的 为便于准确鉴定七叶一枝花品种,控制药材质量,进行基于ITS序列的条形码构建研究.方法 在对怀化野生七叶一枝花、大理重楼、华重楼及花叶重楼进行表型比较的基础上,进一步对ITS序列进行克隆测序,并用MEGA4.0软件进行聚类分析.结果 供试种质表型相似,仅在植株高度,叶片数目,叶片形状与颜色等方面略有不同,怀化野生七叶一枝花ITS序列长为660 bp,GC含量为56%,聚类分析表明,与其他3个材料为重楼属同一个种.结论 ITS序列的长度在属内种间较为保序,碱基组成有明显差异,可用于七叶一枝花DNA条形码的构建.     

七叶一枝花野生变人工栽培的技术研究

七叶一枝花ParispolyphyllaSimth ,异名有重楼,蚤休,白蚤,独叶一枝花等。为百合科重楼属多年生草本植物。同属植物有10余种,分别为华重楼,金线重楼,轮叶王孙等。分布于我国的浙江、江苏、江西等地。其药用部分为根茎,有小毒,具有清热解毒,消肿止痛等功效。临床用于流行性乙型脑炎,阑尾炎,蛇虫咬伤等。近年的医药研究结果,证实该品对多种癌症具有良好疗效,临床医治肝癌,胃癌,白血病等。由于该药药用价值高,民间滥挖严重,野生资源....     

七叶一枝花酊治疗蝮蛇咬伤致肢体肿胀100例

目的观察七叶一枝花酊治疗蝮蛇咬伤致肢体肿胀的临床疗效。方法将患者随机分为两组,均采用注射抗腹蛇毒血清等常规治疗,治疗组加用七叶一枝花酊涂擦。结果治疗组临床疗效优于对照组,且肢体肿胀消退时间明显缩短。结论七叶一枝花酊治疗蝮蛇咬伤具有确切的疗效,且治疗方便。     

七叶一枝花碧玉散外敷治疗流行性腮腺炎265例

笔者于1964年~1998年根据彝族民间验方,应用七叶一枝花磨酸醋外擦治疗腮腺炎的方法进行了改进,对265例腮腺炎患儿进行治疗,数十年临床观察实验屡效.为了宏扬民间民族医药,为农村缺医少药地区患儿解除疾苦起到积极作用.现报道如下:1 临床资料分为观察组和对照组.观察组265例,男140例,女125例,年龄3~8岁;对照组100例,男62例,女38例,年龄3岁~8.5岁.发病至就诊时间均为1~3天,据病情分为轻型、重型.重型高热39℃以上,烦躁,多为双侧腮腺炎肿痛.轻型发热38℃,精神正常,多为单侧腮腺肿痛.观察组265例中轻型占67例,重型198例;对照组100例     

华重楼皂苷类化学成分与生态因子的相关性

目的:明确华重楼皂苷类成分与生态因子的相关性。方法:利用HPLC测定了不同华重楼样品中重楼皂苷的含量;利用数字高程模型和Arc GIS软件提取生态因子数据(年平均气温,海拔,相对湿度,年日照时数,年降水量,7月最高气温,7月平均气温,1月最低气温和1月平均气温);应用主成分分析方法确定了偏诺皂苷-3-O-β-D-glu(1→3)[α-L-rha(1→2)]-β-D-glu(PGGR),重楼皂苷Ⅶ,H,Ⅰ和Ⅴ是华重楼的主要有效成分;采用回归分析法分析了这些生态因子与重楼药材皂苷类化学成分之间的相关性和变量投影重要性,应用SPSS 22.0偏最小二乘回归方法建立了回归方程。结果:青川、洪雅、巴中的重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ的总量达到了2015年版《中国药典》重楼项下0.6%的最低限量标准,认为这几个产地华重楼品质较优;生态因子中日照时数,7月最高气温,7月平均温度与重楼皂苷Ⅶ和PGGR呈负相关关系,1月最低气温和1月平均气温与重楼皂苷Ⅶ和PGGR呈正相关关系。日照时数,7月最高气温,7月平均气温与重楼皂苷H,I和V呈正相关关系,海拔高度,相对湿度,年均降水量,1月平均气温与重楼皂苷H,I和V呈负相关关系。结论:明确了华重楼化学成分与气象因子之间的相关性,为培育质优、高产的华重楼提供理论基础,同时为华重楼的规范化生产提供理论支持。     

华重楼植株的快速繁殖研究

目的以华重楼Paris polyphylla var.chinensis根茎为外植体,建立华重楼植物的快速繁殖技术。方法以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA、IBA、KT、IAA和头孢曲松钠、活性炭等对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出组培苗诱导培养的最佳培养基配方。结果华重楼最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+KT 1.0 mg/L+头孢曲松钠300 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.5%。当组培苗长出第1片叶且不定根长出4条以上时将组培苗取出,先放在无菌水中栽培5 d,再移栽至松软土壤中,组培苗生长健壮,成活率为100%。结论在获得愈伤组织的基础上,进一步完成对不定芽的诱导与无根苗生根培养,筛选出了培育华重楼组培苗的最佳条件。     

不同遮阴处理对七叶一枝花生长 光合特性及品质的影响

目的 七叶一枝花是典型的阴生植物,研究不同遮阴条件对七叶一枝花叶片光合作用、生长和代谢产物含量的影响。方法 在85%和95%遮阴条件下,采用紫外-可见分光光度法测定七叶一枝花叶片的光合色素含量,运用便携式光合作用测定仪测定叶片净光合速率（P_n）、胞间二氧化碳浓度（C_i）、蒸腾速率（T_r）、气孔导度（G_s）并拟合光响应曲线,测定植株的生长指标并利用超高效液相色谱-紫外法（UPLC-UV）与高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）测定不同部位皂苷类及糖类成分含量。结果 95%遮阴条件下叶绿素含量与植株生长指标均优于85%遮阴;95%遮阴条件下叶片的日光合速率低于85%遮阴,但C_i、T_r和G_s的光响应差异无统计学意义;不同遮阴条件对重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷含量有极显著影响,且往年生根茎和须根中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅶ总量在2种遮阴条件下差异有统计学意义（P<0.01）,85%遮阴较高;不同遮阴条件对根部的蔗糖含量影响较大,95%遮阴处理蔗糖含量较高。七叶一枝花移栽到北京后极喜阴,在95%遮阴下植株农艺性状得到改善。结论 研究结果为开展优化遮阴度和遮阴时间以平衡植物生长、增加活性代谢产物的积累研究提供参考。     

重楼根际及药用部位内生真菌多样性与群落结构差异分析

目的寻找能促进宿主植物活性代谢产物合成的微生物,为后续功能菌群的建立及功能基因的发掘,提供理论支持。方法应用IlluminaMiseqPE250高通量测序技术对重楼根际土壤真菌、根及根茎内生真菌ITS1区进行序列测定,并进行生物信息学分析。结果测序结果共获得154228条序列,这些序列对应的根际土、根茎、根分别被聚类为408、119、57个OTUs。结论重楼根际及内生真菌多样性的关系为根际土根茎根,在重楼药用部位根茎中发现Mucoromycota门较非药用部位根中的门为特有门,Ascomycota门为优势门,Roseodiscus属真菌为重楼根茎内生真菌优势菌群,根茎和根部的特有种群及优势菌群可能与重楼活性产物合成密切相关。     

基于16 S rRNA序列研究华重楼植株可培养内生细菌的多样性

目的分析华重楼Paris polyphylla健株和茎腐病感病植株内生可培养内生细菌的多样性。方法用牛肉膏蛋白胨培养基分离华重楼茎腐病及健康植株根茎、茎、叶等不同部位的细菌,采用16 S rRNA通用引物27F/1492R进行PCR扩增结合DNA测序技术,对分离自华重楼健株及茎腐病植株不同部位的细菌进行初步鉴定。结果从华重楼的健康植株和感病植株中分离到11属23种细菌。从健株分离到4属11种内生细菌,其中根茎、茎、叶分别分离到9、10和5种内生细菌。从病株分离得到10属14种内生细菌,其中根茎、茎、叶分别分离到11、8和3种内生细菌。华重楼健株的根茎部内生细菌量最高,达2.999×105 cfu/g,叶部内生细菌量较低,为7.32×104 cfu/g,华重楼健株根茎、茎、叶中的芽孢杆菌量最高,比例分别为73.3%、67.1%和81.8%。华重楼病株的茎部内生细菌量最高,达2.817×105 cfu/g,叶部内生细菌量较低,为2.76×104 cfu/g,华重楼病株的根茎、茎、叶部的假单胞菌量最高,比例分别为35.6%、50.3%和60.5%。华重楼健株不同部位的多样性指数和均匀度指数均高于病株。结论华重楼健康植株以芽孢杆菌为优势细菌类群,华重楼茎腐病植株以假单胞菌为优势细菌类群。华重楼健株相比病株具有更为丰富的内生细菌群落多样性。     

七叶一枝花种子萌发不同阶段生理生化变化研究

目的探讨七叶一枝花Paris polyphylla var.chinensis种子萌发不同阶段的酶和内源激素调控机制,为其种子解除休眠、萌发不同阶段采取有效处理措施,提高出苗率提供科学依据。方法通过观察和测定变温层积处理后七叶一枝花种子萌发不同阶段形态差异,采用常规的生理生化方法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苹果酸脱氧酶(MDH)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)5种酶活性,采用质谱定量方法测定吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、反玉米素(TZ)、茉莉酸(JA)量;研究种子萌发过程中胚率与酶活性和内源激素量变化之间的相关性。结果七叶一枝花种子从未萌动、上胚轴休眠到即将出苗阶段,种子质量和胚率逐步上升;SOD和POD活性逐步升高;CAT和MDH活性逐步减弱,G-6-PDH活性出现双峰,未萌动阶段和萌动后上胚轴未伸长阶段显著高于其他阶段;IAA、GA3、ABA、JA的量逐步升高,IAA和JA量在即将出苗阶段显著高于其他阶段(P0.01);TZ和SA的量先升高后降低,TZ的量在子叶分化形成期和胚乳成熟期显著高于其他阶段(P0.01),SA出苗前期量最高,已萌动胚根刚突破种皮阶段和胚乳形成阶段量次之;CAT酶活性变化与胚率呈显著负相关,IAA和JA的量变化与胚率呈显著正相关。结论CAT对种胚的生长有抑制作用,IAA与JA对种胚的生长有正向促进作用。     

滇重楼丛枝菌根的研究

目的:研究滇重楼根部丛枝菌根真菌(AMF)侵染情况及根际土中AMF孢子的种类与数量.方法:采用Phillips和Hayman染色法挑选滇重楼丛枝菌根.同时,采用Gendemann的湿筛倾析法获得AMF孢子,进行形态学鉴定.结果:丛枝菌根真菌能侵染滇重楼根系并形成典型的丛枝菌根(AM),侵染率在35.3%～98.6%,且侵染强度较强.从滇重楼根际采集的10个土样中共分离出24种AMF,Acaulospora属11种,Glomus属7种,Gigaspora属3种,Scutellospora属3种,分别是附柄无梗囊霉、双网无梗囊霉、凹坑无梗囊霉、孔窝无梗囊霉、浅窝无梗囊霉、光壁无梗囊霉、柯氏无梗囊霉、多果无梗囊霉、波兰无梗囊霉、瑞氏无梗囊霉、细凹无梗囊霉、白色球囊霉、双型球囊霉、沙荒球囊霉、草莓球囊霉、纯黄球囊霉、微丛球囊霉、凹坑球囊霉、微白巨孢囊霉、珠状巨孢囊霉、分支巨孢囊霉、美丽盾巨孢囊霉、透明盾巨孢囊霉、吉尔莫盾巨孢囊霉.其中,双网无梗囊霉是滇重楼的优势种.结论:AMF是滇重楼丰产栽培中的一种潜在应用价值的生物资源.     

解钾菌对滇重楼根际土壤微环境影响

目的 研究接种解钾菌对滇重楼根际土壤微环境的影响。方法 通过室温盆栽实验,研究接种不同解钾菌对滇重楼根际土壤理化性质,微生物群落结构及土壤酶活性的影响,并进行相关性分析。结果 接种不同解钾菌能显著性影响滇重楼根际土壤理化性质,其中速效氮的质量分数为24.5~90.5 mg·kg^-1、速效磷质量分数为2.53~25.9 mg·kg^-1、速效钾质量分数为132~312 mg·kg^-1。土壤pH为7.08~7.75,均符合滇重楼种植最适范围。接种不同解钾菌可不同程度影响根际土壤中细菌、放线菌和真菌数量,土壤由真菌型向细菌型转化,标志着土壤肥力得到提高。同时也会影响根际土壤酶活性,中性磷酸酶、蛋白酶和多酚氧化酶活性呈现增强的趋势。相关性分析发现,细菌数量与真菌数量呈负相关（r=-0.856,P<0.01）,与放线菌数量、速效氮、速效钾含量呈正相关,土壤pH呈负相关性。结论 接种解钾菌能有效提高滇重楼根际土壤中速效钾、速效氮、速效磷等养分含量,提高土壤肥力,对滇重楼连作障碍起到了一定的缓解作用,为滇重楼的绿色可持续发展奠定理论基础。     

田间施加丛枝菌根真菌剂对滇重楼根际土壤理化性质的影响

目的:探究田间条件下接种丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌对滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)根际土壤的影响,为指导滇重楼的规范化栽培,培育优质的滇重楼品种提供参考。方法:通过小规模的大田接种试验与室内分析相结合的方法,观察滇重楼根际土壤结构受田间接种菌根真菌所带来的影响,采用土壤农化法对各土壤指标进行测定。结果:接种外源AM真菌处理组对滇重楼根系AM真菌的侵染率以及侵染强度等方面具有调控作用;添加AM真菌后,土壤pH基本不受影响,有机质、速效氮、速效磷、速效钾含量增加;真菌的数量下降,细菌、放线菌的数量增加;根际土壤酶活性增加。相关性分析结果表明,各土壤理化指标之间存在显著正相关,特别是细菌数量与3种磷酸酶均极显著的相关性(r=0.849,0.800,0.804,P0.01)。结论:2种混合菌剂的施加能使滇重楼根际土中微生物数量、酶活性增加,各土壤因子之间具有一定的协同作用。在3个大田试验点中,贵州安顺和重庆万州的效果更为理想,这为大规模的推广大田栽培滇重楼提供理论和实践基础。     

滇重楼贮藏期间化学成分的变化

目的:研究滇重楼贮藏期间化学成分的变化,为指导滇重楼采收、经营、贮藏、加工提供依据。方法:将9份滇重楼密封后在室温下贮藏1年;运用HPLC测定重楼皂苷在贮藏前后的变化。结果:滇重楼药材贮藏1年后化学成分发生了很大变化,必然引起药材质量和功效的变化。重楼皂苷Ⅵ含量有所增加,重楼皂苷Ⅱ含量有所减少,重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅶ含量变化无规律,增减均有。结论:为保证药材的质量和药用功效,滇重楼不宜久藏。