高凝状态与恶性肿瘤

高凝状态亦称血栓前状态,是指多种病理因素引起的机体血管内皮细胞损伤、凝血、纤溶以及体内抗凝系统等功能失调,血液的凝固性增高,有利于血栓形成的病理状态[1]。大量的研究表明,随着年龄的增长,血液的凝固性增高而纤溶性降低,肿瘤病人普遍存在高凝状态,静脉血栓发生率也很高,所以高凝状态引起了医学界的重视,成为近年来研究的热     

光化学法诱导大鼠脑皮质微血管梗塞凝血系统动态变化的研究

目的 :探讨大鼠脑皮质微血管梗塞模型凝血系统的动态变化及意义。方法 :5 0只SD雌性大鼠 ,应用光化学法诱导脑皮质微血管梗塞模型 ,观察正常对照组、血栓形成 2h、4h、6h、2 4h等不同时相大鼠血浆中组织因子 (TF)含量、血管性血友病因子 (vWF)含量、凝血酶原时间 (PT)、部分凝血活酶时间 (APTT)、纤维蛋白原 (Fbg)的动态变化。结果 :光镜和电镜的病理形态学显示大鼠脑皮质微血管内皮损伤和血栓形成。血浆中TF含量 4h、6h组显著高于正常对照组 (P均 <0 .0 1) ;vWF含量 2h、4h组显著高于正常对照组 ,P值分别小于 0 .0 1～0 .0 5。PT 4h组比正常对照组明显缩短 (P <0 .0 1) ;APTT 4h、6h组比对照组显著缩短 (P <0 .0 5 )。结论 :光化学法可诱导脑皮质微血栓形成。TF、vWF含量增高 ,PT和APTT缩短是血栓形成的促发因素和病理表现。     

53例糖尿病血液流变学观察

本文对53例Ⅱ型糖尿病患者作血液流变学检测,并与92例健康人比较;红细胞压积,全血比粘度,血浆比粘度有极显著差异(P<0.01)。体外血栓形成,血小板聚集率有显著性差异(P<0.05)。提示糖尿病患者血液呈高粘、高凝、高聚状态,并对其产生机理作简要讨论。     

大鼠冠脉原位血栓模型中纤维介素的表达及意义

目的：探讨在大鼠冠脉原位血栓模型中纤维介素(fgl2)的表达及意义。〖HJ1.8mm〗方法:雄性SPF级SD大鼠78只，随机分到模型组36只，假手术组36只和正常对照组6只，模型组与假手术组术后1 h、1 d、1周、2周、3 周、4周各6只。模型组经主动脉根部注入月桂酸钠，假手术组注入生理盐水，正常对照组不予处理，分别用HE与纤维素快速染色(MMSB)、ELISA、RT-PCR法、免疫组化法观察冠脉微血管原位血栓的形成及血管性假血友病因子(vWF)与fgl2的表达。结果:模型组大鼠心肌微血管可见血小板纤维蛋白性原位血栓，有原位血栓形成的微血管数量显著增加；血浆中vWF水平明显升高；RT-PCR示fgl2表达明显增加，免疫组化示fgl2分布于心肌微血管壁。假手术组和正常对照组未见明显变化(P>0.05)。结论:在冠脉微血管内皮细胞功能紊乱的基础上，冠脉微血管壁fgl2表达显著增加并促进以血小板纤维蛋白沉积为主的原位血栓形成。     

血栓微颗粒诱导大鼠冠状动脉微血栓形成的机制探讨

目的:探讨大鼠自身血栓微颗粒诱导其心脏心内膜下微血管内血栓形成的机制。方法:通过向大鼠主动脉根部注入自身血栓微颗粒建立冠状动脉微血栓模型,于术后1h、1天、1周、2周、3周和4周取标本。HE染色观察心内膜下微血管内血栓形成情况;酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测血清中vonWillebrand因子(vWF)含量。结果:HE染色结果显示心内膜下微血管内有血栓形成,部分血栓与内膜紧密粘连。向大鼠体内注入自身血栓微颗粒后1h,血浆中vWF水平显著增高。结论:大鼠自身血栓微颗粒能够诱导其冠状动脉微血栓形成,其心脏心内膜下微血管内皮细胞活化是可能参与机制之一。     

检测血浆D-D在COPD中的意义探讨

在我国,慢性阻塞性肺疾病(chronic obstruvtive pulmonarydisease,COPD)的发病率约占15岁以上人口的3%。血浆D-二聚体(D-D)是在纤溶酶作用下所产生的一种特异性降解产物,其水平增高提示体内有继发纤溶活性增强,可作为体内高凝状态、血栓形成以及纤溶亢进的分子学标志物。本文对2008年1月～2010年12月收治的COPD急性加重期和COPD稳定期患者以及同期健康体检者,分析其血浆D-D的变化,以探讨血浆D-D在COPD中的变化。     

心肌宁对慢型克山病血液流变性的影响

对１７例慢型克山病服用自制中药“心肌宁”治疗前后的血液流变性进行观察。结果表明：慢型克山病为高粘滞状态下的血栓形成能力增强及红细胞聚集性增强。用心肌宁治疗后各项参数均有降低，以血浆粘度和血栓形成的长度、湿重、干重以及血小板粘附率降低最为显著（Ｐ＜０．０５）。提示心肌宁对慢型克山病的血液流变性异常有明显的改善作用。     

遗传变异决定血浆甘油三酯浓度与高血凝固性

本文研究和论述了遗传变异对血浆甘油三酯浓度与高血凝固性的决定作用,同时又受环境因素的影响;高甘油三酯血症受控于遗传因素,引起动脉粥样硬化,损伤动脉血管,促进血管内血栓形成,致高血凝固性,与IHD发生密切相关;apoE、apoB、apoCⅢ和LPL诸基因多态性均可升高血浆甘油三酯浓度,其发生分别与基因突变(碱基的颠换或者转换)有关,致多肽链顺序中氨基酸替换。本研究也为IHD病理学的发生机理奠定了基础。     

蝮蛇毒抗栓酶的促纤溶和抗凝血作用的实验研究

本工作利用大鼠衄管灌流及异丙肾上腺素(ISP)性AMI模型,以体外纤维蛋白溶解活性、纤溶酶原激活剂(PA)活性,血浆纤溶酶(PL)活性、凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)等变化,观察蛇毒抗栓酶(SVATE)的促纤溶、抗凝血和心肌保护作用。结果表明,SVATE有缴活纤溶怍用,它能逆转ISP性AMI大鼠PL活性的降低,这种作用是由于激活PA导致PL生成增加。同时对内源凝血系统有一定抑制作用。此外保护心肌、降低死亡率。     

胰高血糖素样肽1通过Keap1-Nrf2信号通路减轻糖尿病大鼠心肌微血管损伤

目的:探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)对糖尿病大鼠心肌微血管的保护作用及分子机制。方法:腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,予以艾塞那肽(GLP-1类似物)连续干预3个月,干预前后检测各组大鼠体重、血糖和血压的变化;硝酸镧灌注大鼠离体心脏,采用透射电镜观察心肌微血管通透性变化;酶消化法体外分离培养心肌微血管内皮细胞,分别给予高糖(25 mmol/L葡萄糖)和GLP-1(10~(-8 )mol/L)处理;体外血管通透性测定试剂盒评估内皮细胞通透性变化;超氧化物检测试剂盒和超氧化物阴离子荧光探针检测细胞超氧化物的生成;Western blot法检测GLP-1受体(GLP-1R)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)等蛋白表达。结果:(1)艾塞那肽干预3个月可降低糖尿病大鼠心肌微血管通透性;(2)心肌微血管内皮细胞表达GLP-1R;(3)与单纯高糖组相比,GLP-1干预后心肌微血管内皮细胞活性氧簇生成显著降低(P0.05);(4)与单纯高糖组相比,给予GLP-1处理的心肌微血管内皮细胞Keap1表达显著降低(P0.05),Nrf2和HO-1表达显著升高(P0.05)。结论:GLP-1可抑制高糖诱导的大鼠心肌微血管内皮细胞氧化应激反应,改善心肌微血管屏障功能,这些保护效应可能是通过Keap1-Nrf2信号通路介导实现的。     

多胺在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及意义

目的： 研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶（SSAT）在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法: 异丙肾上腺素（ISO）皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱（RP-HPLC）、RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测ISO作用不同时点大鼠心肌组织多胺含量、ODC和SSAT mRNA和蛋白的表达。结果: 与对照组比较,心脏重量参数在ISO注射后7 d时显著增加,ISO注射后1 d时腐胺含量增加（P<0.05）,5 d、7 d时显著增加（P<0.01）;精脒含量在ISO注射后3 d时开始增加,ISO注射后7 d时增加显著（P<0.01）,精胺含量略有增多（P<0.05）,总多胺池显著增加。心肌组织ODC和SSAT的 mRNA表达在ISO注射后1 d时升高(P<0.05或P<0.01）,并持续在较高水平。心肌组织ODC和SSAT的蛋白表达分别在ISO注射后1 d和ISO注射后5 d时升高,ISO注射后7 d时显著升高（P<0.01）。结论: 大鼠心肌组织多胺含量增加和ODC、SSAT的表达增强可能参与ISO所致心肌肥厚的病理过程。     

硫氢化钠对慢性心力衰竭大鼠心脏功能和肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性的影响

目的:探讨硫氢化钠(Na HS)对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心脏功能和肾素(renin)-血管紧张素(Ang)-醛固酮(ALD)系统(RAAS)活性的影响。方法:本研究通过腹主动脉缩窄术构建CHF大鼠模型,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Na HS低剂量组和Na HS高剂量组,每组6只。采用超声心动图检测每组大鼠治疗前及治疗结束后的左心室舒张末内径(LVEDD)、左心室收缩末内径(LVESD)和左心室射血分数(LVEF)。治疗结束后,采用ELISA试剂盒检测各组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD的浓度。采用q PCR和Western blot实验分别检测各组大鼠心肌组织中血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的mRNA和蛋白表达。结果:经Na HS治疗后,与模型组和治疗前相比,Na HS低剂量组和Na HS高剂量组的LVEDD和LVESD均明显降低,而LVEF明显升高(P0.05);与Na HS低剂量组相比,Na HS高剂量组的LVEDD和LVESD降低,而LVEF升高(P0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD浓度显著升高(P0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05);与模型组相比,Na HS低剂量组和Na HS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度显著降低(P0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著下调(P0.05);Na HS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度及心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著低于Na HS低剂量组(P0.05)。结论:Na HS可通过抑制RAAS的活性改善CHF大鼠的心功能,且高剂量组的改善效果优于低剂量组。     

四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化和TGF-β_1表达的影响

目的:观察四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化的干预作用并探讨其相关机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,而对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组测定左室心功能、心肌羟脯氨酸水平;测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;通过免疫组化方法检测心肌TGF-β1蛋白的表达;RT-PCR法检测TGF-β1mRNA表达。结果:(1)模型组羟脯氨酸水平明显高于对照组和四逆汤组,而四逆汤组明显高于对照组(P0.05);(2)四逆汤组与模型组比较,明显改善心肌舒张功能(P0.05);(3)模型组血浆AngⅡ及TGF-β1水平明显高于四逆汤组和对照组(P0.05);(4)模型组心肌TGF-β1蛋白和mR-NA表达明显高于四逆汤组和对照组(P0.05)。结论:四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与减少AngⅡ生成,抑制大鼠心肌TGF-β1的表达有关。     

降钙素基因相关肽对大鼠心肌缺血损伤的影响

目的:观察降钙素基因相关肽对大鼠缺血心肌的保护作用。方法:用单剂量异丙肾上腺素皮下注射复制大鼠心肌缺血损伤模型,单剂量降钙素基因相关肽静脉注射治疗,2 h后采血测定血清心肌酶及血清MDA、SOD水平,同时取心肌组织匀浆测组织MDA、SOD水平,并观察心肌组织结构改变。结果:(1)异丙肾上腺素致缺血心肌损伤大鼠血清和心肌组织MDA升高、SOD下降,而CGRP治疗能逆转上述改变(P＜0.05)。(2)CGRP治疗组心肌酶CK、LDH明显低于损伤组(P＜0.05)。(3)心肌光镜、电镜结果示CGRP组细胞损伤程度明显低于损伤组(P＜0.05)。结论:CGRP对异丙肾上腺素所致大鼠缺血心肌有保护作用,抗膜脂质过氧化可能是其重要机制。     

Apocynin抑制慢性心力衰竭兔心肌纤维化的实验研究

目的:探讨NADPH氧化酶抑制剂Apocynin对心衰兔心肌纤维化的影响及其机制。方法:32只兔随机分为假手术安慰剂组、假手术Apocynin组、心衰安慰剂组、心衰Apocynin组。通过容量超负荷联合压力超负荷建立家兔心衰模型。安慰剂或Apocynin以15mg/天口服。8周后,行超声心动图检查,观察动物的心脏结构和功能变化。通过细胞色素C还原试验测定心肌NADPH氧化酶活性。通过组织形态学分析心肌纤维化程度。运用Real-timePCR检测心肌转化生长因子β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9基因表达。结果:与假手术安慰剂组比较,心衰安慰剂组心脏明显扩大,心功能明显降低(P<0.05),心肌NADPH氧化酶活性增加(P<0.05),心肌纤维化显著(P<0.05),TGF-β、CTGF、MMP-2和MMP-9表达上调(P<0.05)。与心衰安慰剂组比较,心衰Apocynin组心功能显著改善(P<0.05),心肌NADPH氧化酶活性明显降低(P<0.05),心肌纤维化显著减轻(P<0.05),心肌TGF-β、CTGF、MMP-2和MMP-9表达明显降低(P<0.05)。结论:Apocynin可通过下调心肌TGF-β、CTGF、MMP-2和MMP-9基因表达,改善心衰兔心肌纤维化。     

慢性肾衰竭患者心肌标志物、感染标志物和凝血功能的变化及意义

目的 探究不同期慢性肾衰竭患者心肌标志物、感染标志物和凝血功能指标的变化及意义,为慢性肾衰竭患者的临床治疗提供帮助.方法 选取我院收治的103例慢性肾衰竭患者,根据相关指标分为代偿期组(27例)、失代偿期组(36例)和尿毒症期组(40例),选取同期我院检测的30例健康入选者作为对照组,检测各组患者心肌标志物、感染标志物和凝血功能指标变化,并分析相关意义.结果 与对照组相比,不同期慢性肾衰竭患者凝血功能指标活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)与血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)水平均显著低于对照组,心肌标志物肌钙蛋白(troponin I,CTnI)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶-II (creatine kinase MB-II,CKMB-II)、和感染标志物降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)水平则均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);随着慢性肾衰竭患者病情恶化,感染标志物(CRP和PCT)、FIB、心肌标志物(CTnI、CKMB-II、LDH和CK)水平依次显著升高,凝血功能指标APPT和PT水平依次显著降低,尿毒症期组患者感染标志物(CRP和PCT)、FIB、心肌标志物(CTnI、CKMB-II、LDH和CK)水平最高,凝血功能指标APPT和PT水平最低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 随着慢性肾衰竭患者病情恶化,患者感染标志物、心肌损伤逐渐加重同时血凝状态逐渐降低,为慢性肾衰竭患者的临床治疗提供参考.     

Factor XI is a substrate for oxidoreductases: Enhanced activation of reduced FXI and its role in antiphospholipid syndrome thrombosis

Factor XI (FXI), a disulfide-linked covalent homodimer, circulates in plasma, and upon activation initiates the intrinsic/consolidation phase of coagulation. We present evidence that disulfide bonds in FXI are reduced to free thiols by oxidoreductases thioredoxin-1 (TRX-1) and protein disulfide isomerase (PDI). We identified that Cys362-Cys482 and Cys118-Cys147 disulfide bonds are reduced by TRX-1. The activation of TRX-1-treated FXI by thrombin, FXIIa or FXIa was significantly increased compared to non-reduced FXI, indicating that the reduced factor is more efficiently activated than the oxidized protein. Using a novel ELISA system, we compared the amount of reduced FXI in antiphospholipid syndrome (APS) thrombosis patients with levels in healthy controls, and found that APS patients have higher levels of reduced FXI. This may have implication for understanding the contribution of FXI to APS thrombosis, and the predisposition to thrombosis in patients with elevated plasma levels of reduced FXI.     

阿托伐他汀对糖尿病大鼠急性心肌梗死后心功能及HGF/c-Met信号通路的影响*

 目的： 糖尿病患者急性心肌梗死（AMI）后的心室重构及心功能恶化较非糖尿病者更为明显。本研究旨在观察阿托伐他汀对糖尿病大鼠AMI后心肌细胞凋亡、心室重构及心功能的影响,并探讨其作用是否与肝细胞生长因子及其受体 (HGF/c-Met)信号通路有关。方法: 70只雄性SD大鼠经链脲霉素 (STZ, 65 mg/kg)腹腔注射,诱导糖尿病大鼠模型。8周后对糖尿病大鼠结扎左冠状动脉前降支构建AMI大鼠模型,术后存活32只大鼠随机分为2组：AMI对照组(n=16)和阿托伐他汀干预组(n=16, 阿托伐他汀20 mg·kg-1·d-1),并在糖尿病大鼠中设假手术组(n=11),术后24 h予以灌胃给药。2周后比较各组大鼠心功能、心肌组织病理改变、心肌细胞凋亡、HGF和c-Met mRNA及蛋白表达差异。结果: (1) AMI对照组心功能显著低于假手术组（P<0.05）,胶原容积分数、心肌细胞凋亡指数、HGF及c-Met mRNA及蛋白表达均显著高于假手术组（P<0.05）;(2) 阿托伐他汀干预组的胶原容积分数和心肌细胞凋亡指数显著低于AMI对照组（P<0.05）,心功能、HGF及c-Met mRNA及蛋白表达均显著高于AMI对照组（P<0.05）。结论: 阿托伐他汀对糖尿病大鼠AMI后心肌细胞凋亡、心室重构及心功能具有显著改善作用;HGF/c-Met信号通路在AMI后会激活,阿托伐他汀的上述作用机制可能与其进一步增强HGF/c-Met信号通路有关。     

GRP78在肝硬化大鼠肠源性内毒素血症引发心脏病变中的作用

目的: 探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在肝硬化大鼠肠源性内毒素血症引发心脏病变中的作用。方法: 51只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化模型4周组、6周组、8周组和同期正常对照组。于第8周检测大鼠心功能;检测各组心肌组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和丙二醛(MDA)水平;甲苯胺蓝染色和van Giesan染色分别观察心肌细胞数量的变化和计算心肌胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测心肌组织GRP78和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达情况。结果: 随肝硬化病程进展:(1)肝硬化8周组大鼠左室舒张末期压(LVEDP)及左室内压最大上升和下降速率(±LV dp/dt_max)均较对照组降低(P<0.05);(2)心肌组织中TNF-α、MDA、CVF、GRP78蛋白和HIF-1α蛋白水平均逐渐升高并显著高于正常对照组(P<0.05);(3)甲苯胺蓝染色显示模型各组心肌细胞数量逐渐减少并显著低于正常对照组(P<0.05);(4)血浆中内毒素水平分别与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、同型半胱氨酸(Hcy)、TNF-α、GRP78和MDA呈显著正相关(P<0.05);(5)GRP78蛋白分别与HIF-1α、Hcy、MDA、ALT和CVF呈显著正相关(P<0.05)。结论: 肝硬化大鼠伴发的肠源性内毒素血症通过直接或间接作用引起内质网应激和GRP78表达增加,后者可能是引起心肌重构、导致心脏功能变化的关键分子。     

坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉均减轻大鼠心肌肥厚

目的比较坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉(OMA)对大鼠心肌肥厚的保护作用。方法注射1 mg/kg异丙肾上腺素(ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,随机分为对照组、心肌肥厚组、坎沙曲组、缬沙坦组、OMA组与坎沙曲+缬沙坦(半量及全量)组,每组n=8,染色后测定心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积;免疫组化学检测心肌组织p-PI3K和p-Akt表达;放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心房利钠肽(ANP)、缓激肽(BK)水平。结果 1)坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低心肌肥厚组大鼠心脏重量指数(分别为3.64±0.30、3.62±0.28和4.32±0.58)、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积的明显上升(P<0.01),两组间无明显差异。2)与心肌肥厚组相比,坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低血浆AngⅡ含量[分别为(741±89)、(682±66)和(479±62)ng/L],并显著上调ANP[分别为(117±33)、(298±91)和(288±95)μg/L]及BK[分别为(124±12)、(232±21)和(309±24)ng/L]水平(P<0.01),但坎沙曲+缬沙坦(全量)较OMA组BK的上调幅度低。3)坎沙曲+缬沙坦(全量)与OMA均下调心肌肥厚组心肌组织p-PI3K和p-Akt蛋白表达,且两者间无明显差异。结论坎沙曲联合缬沙坦与OMA均可减轻大鼠心肌肥厚,但对血浆激素水平的影响有差异。