广州某动物市场从业人员SARS-CoV感染状况的调查分析

目的了解某动物市场从业人员SARS—CoV感染状况，初步探讨其影响因素。方法对广州市某动物市场环境卫生状况进行现场观察，并对市场从业人员进行血清学调查和问卷调查。结果调查共获得有效问卷293份，其中男性209例，女性84例。SARS—CoV抗体阳性率为27．3％，接触动物类别和SARS—CoV感染情况有关，各类人员的抗体阳性率由高到低排列依次为：主营野生畜类、市场管理部员工、主营家禽家畜类、主营野生蛇类和主营冷冻食品类。另外环境较差的第二、三通道从业人员SARS—CoV抗体阳性率也较高。结论初步发现经营动物的种类是SARS—CoV感染的重要影响因素，动物市场从业人员SARS—CoV感染与环境因素可能也有关系。     

SARS病人特异性抗体的检测及其与T细胞亚群计数和激素治疗的相关性

目的：了解SARS病人抗SARS—CoV的检出与病程、T淋巴细胞亚群数值变化及激素治疗间的关系。方法：用ELISA和流式细胞术分别检测SARS病人系列血清标本的抗SARS—CoV和血液T淋巴细胞亚群的绝对值，并进行动态观察。结果：大多数SARS病人的抗SARS—CoV，需在发病10d后的系列血清可检出，其不随T淋巴细胞亚群计数的减少，和激素治疗而转为阴性或明显降低。结论：SARS病人抗SARS—CoV的检出与病程有关，但与T淋巴细胞亚群数值的变化和激素治疗均无显著相关。     

SARS-CoV病毒抗体对恒河猴SARS-CoV的感染保护作用

目的研究了实验感染产生中和抗体以及输入SARS-CoV中和抗体对SARS-CoV感染恒河猴的保护作用。方法动物分3组，分别为SARS感染恢复动物组，输入抗SARS阳性血清动物组和SARS模型对照组，分别接种病毒，1—7d进行病毒检测和血清学检测，7d后安乐处死动物，进行病理检测。结果实验感染产生中和抗体，输入SARS-CoV中和抗体的恒河猴体内SARS-CoV复制得到一定程度的抑制，病理变化也比模型组轻。结论SARS—CoV中和抗体（包括被动免疫）是一种有潜力的SARS治疗方法。     

SARS恢复猴和灭活疫苗免疫实验猴再次感染SARS-CoV研究

目的研究SARS-CoV实验感染恢复猴，以及灭活疫苗免疫猴对SARS—CoV再次感染的疾病状况。方法动物分四组，分别为SARS感染恢复动物组，灭活疫苗免疫不同时间2组和SARS模型对照组。动物分别接种病毒，1～7d进行病毒检测和血清学检测，7d后安乐处死动物，进行病理检测。结果实验感染SARS-CoV猴和灭活疫苗免疫猴均产生了中和抗体，猴体内SARS-CoV复制得到一定程度的抑制，病理变化也比SARS-CoV模型组轻。结论SARS-CoV感染恢复猴对SARS-CoV再次感染有一定抵抗作用；灭活疫苗免疫是预防实验猴感染SARS—CoV的有效方法。     

SARS肺纤维化发病机制的比较医学研究

目的初步探讨SARS病毒（SARS-CoV）感染动物模型是否适用于SARS肺纤维化发生机制的研究，阐述SARS肺纤维化发生的可能机制。方法用比较医学的研究的方法，将SARS病人肺纤维化的发病特点及可能的机制同目前已经建立的SARS动物模型进行比较。结果不同病种的肺间质纤维化性改变都是从肺泡炎开始，在发展和修复过程中导致的肺纤维化倾向有共同之处。SARS中大约有7．8％的康复者中出现比较严重的肺纤维化后遗症。SARS肺纤维化发生早，病情进展快，病人可于数日内死亡，病理改变严重。SARS-CoV感染动物模型已经建成，出现了拟人SARS的临床、病理学和血清学改变。SARS肺纤维化在模型动物中表现也比较明显，纤维母细胞及胶原纤维明显增多。结论SARS—CoV感染动物模型可以用于SARS肺纤维化发病机制的实验研究。     

严重急性呼吸综合征病毒相关受体在不同器官组织微血管内皮细胞的表达

目的研究严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（CoV）相关受体血管紧张素转换酶2（ACE2）和CD209L在人8种不同器官组织微血管内皮细胞上的表达,分析两种受体表达水平与SARS器官病变之间的相关性。方法应用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）、Western印迹、免疫细胞化学3种方法分析比较SARS—CoV相关受体,ACE2、CD209L在人8种不同器官组织微血管内皮细胞上的表达。结果人的各种器官组织的血管内皮细胞均表达SARS—CoV相关受体ACE2与CD209L,其中ACE2在肺微血管内皮细胞表达最高,在淋巴内皮细胞表达最低,而CD209L在淋巴内皮细胞表达相对较高。结论人的微血管内皮细胞是SARS-CoV作用的重要靶点,肺微血管内皮细胞和淋巴内皮细胞的损伤可能分别由两种不同的SARS—CoV受体介导。     

严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体

目的：建立特异性的检测严重急性呼吸综合征(SARS)相关抗体的血清学方法。方法：制备SARS患者肺组织包被抗原，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SARS患者血清中特异性抗体。结果：SARS患者血清中存在SARS相关的抗人肺组织抗体，其阳性率达92．86％(26／28)，正常献血员为11．43％(12／105)，统计学分析表明，SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。结论：SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程；检测该抗体可能有助于SARS的早期诊断。     

高致病性禽流感(H5N1)实验流行病学初探——感染途径

目的观测不同感染途径实验性感染BALB／c小鼠后的感染状况，了解H5N1病毒的感染特点，为更深入的流行病学研究提供理论基础。方法分别通过口腔接种、污染饲料、腹腔注射、皮肤损伤途径感染6—8周龄BALB／c小鼠，定期安乐动物采血及各器官组织进行血清学、病原学、病理学检查，记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变。结果各途径感染小鼠感染后出现竖毛、弓背、觅食减少、体重减轻、精神呆滞及神经系统症状，肺组织病毒分离及RT-PCR阳性，病理表现间质性肺炎。感染后第7d动物血清中可检测到H5N1抗体。结论通过口腔接种、污染饲料、腹腔注射及皮肤损伤多种途径感染BALB／c小鼠，均能发生感染，提示呼吸道以外的感染方式不容忽视，有益于人类更好的防控禽流感；可通过多种方式建模，深入研究禽流感的发病机制。     

江门市某医院职工SARS血清流行病学调查

目的了解江门市定点收治SARS患者的某医院职工SARS血清流行病学情况。方法分别在流行终止后半年和1年半采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测医院职工血清SARS冠状病毒抗体IgG。结果半年后的检测结果中，临床确诊病例组阳性率为82．6％，疑似及医学观察病例组5．9％，SARS病区医务人员组和其余人员组均为阴性，临床确诊病例组与其它组之间阳性率的差异有显著性（P〈0．01）；1年半后临床确诊病例组阳性率为73．9％，其他各组SARS—CoV抗体IgG阳性率无明显变化。结论临床确诊病例血清SARS—CoV抗体IgG阳性率较高，1年半后仍有89．47％检出SARS—CoV抗体。     

严重急性呼吸综合征患者肺组织包被抗原的特异性研究

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。方法：匀浆SARS患者尸检肺组织、非SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)，同时检测SARS患者及正常献血员血清中的IgG。结果：SARS患者及正常献血员血清用SARS尸检患者与非SARS患者肺组织包被抗原检测，两种组织包被抗原检测的阳性率间无统计学差异；而用非SARS患者肺组织包被抗原检测的阳性率和用羊、猪、大鼠肺组织包被抗原检测的阳性率均具有统计学差异。结论：SARS患者肺组织及非SARS患者肺组织中存在相同的抗原；其他动物中可能也存在该抗原，但可能因为其他抗原干扰而不适于用该方法检测。     

SARS冠状病毒N蛋白在免疫荧光诊断技术中的应用

目的 应用基因工程技术,在昆虫细胞中表达SARS—CoV N基因,产生无感染性的核蛋白,作为诊断抗原,用于检测血清中SAILS特异性抗体。方法 从一例输入性SARS病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SAILS—CoV N基因,将它插入昆虫杆状病毒,构建重组昆虫杆状病毒,转染sf 9昆虫细胞,经丙酮固定,制成SARS特异性诊断抗原,建立检测病人血清抗SARS-CoV抗体的免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)。结果 此抗原仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常人及其他发热病人血清不起反应。经双盲试验,与空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)阳性的2003年SAILS病人血清的符合率为97．8％;检测2004年广东新发4例SAILS病人进展期血清均阳性,发病后第6天即可检出抗体1：40阳性,至第9天,升至1：640.结论 此法用于检测病人血清中SARS抗体,具有特异性强、敏感性高,试剂制备简单、安全,不需P3实验室,为诊断与研究SAILS提供新的途径和手段。     

SARS患者康复期肺功能评价

目的研究严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)患者康复期肺功能状态。方法随访康复出院的SARS患者89例,了解其症状、体征和并发症,测定肺功能。并对肺功能各项指标与临床指标作相关性分析。结果复查的时间距离发病时间平均为(2.90±0.44)个月(1.8～4.2个月),距离出院时间为(1.75±0.53)个月(0.5～3.4个月)。48例(53.9%)存在肺功能异常,多数为轻度异常,其中,单纯弥散障碍38例(42.7%),弥散障碍合并限制性通气功能障碍7例(7.9%),弥散障碍合并阻塞性通气功能障碍1例,单纯限制性通气功能障碍1例,单纯1秒钟呼气容积(forcedexpiratoryvolumeinthefirstsecond,FEV1)下降1例。病程中有呼吸困难症状和康复期胸部CT异常者一氧化碳弥散量(diffusioncapacityforcarbonmonoxide,DLCO)和肺总量(totallungcapacity,TLC)下降更明显。结论SARS患者康复期存在轻度的肺功能损害,以弥散障碍为主,其次是限制性通气功能障碍。     

SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究

【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白。【结果】10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应。【结论】本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件。     

RT-PCR对SARS患者粪便SARS冠状病毒RNA的连续测定及其临床意义

目的采用RT-PCR方法,观察SARS冠状病毒(SARS-associatedcoronavirus,SARS-CoV)在SARS患者粪便中的排出状况。方法以2003年5月16日至23日在本院住院的46例临床确诊SARS患者为研究对象,连续留取粪便标本共103份,提取RNA后采用14对SARS-CoV特异性引物,对每份标本同时进行7次套式RT-PCR扩增,只要有1次RT-PCR结果阳性即判定该标本为阳性。结果在46例患者中,有17例(37.0%)患者的粪便SARS-CoV套式RT-PCR扩增结果为阴性,29例(63.0%)为阳性。粪便SARS-CoVRT-PCR结果阳性时SARS患者的病程为(31.76±10.78)d(12～64d),其中最长1例为64d,系2次连续留取的粪便标本均为阳性、每次标本用2个不同引物RT-PCR扩增结果均为阳性。结论SARS-CoV在患者粪便中排出的时间可长达发病后64d,平均32d,对SARS患者恢复期的消毒隔离应该予以足够的重视。     

严重急性呼吸综合征合并下呼吸道感染对患者康复期的影响

目的通过对严重急性呼吸综合征(SARS)患者出院后血清特异性抗体IgG、胸片和肺功能的跟踪观察,了解SARS急性期合并下呼吸道感染对其的影响。方法定期跟踪77例SARS患者出院后的血清特异性抗体IgG、胸片和肺功能,将其分为两组继发下呼吸道感染组和非继发下呼吸道感染组,比较两组IgG的动态变化和出院后胸片与肺功能恢复的差异性。结果继发感染组的特异性抗体IgG于第2周高于非感染组,于第8周和第10个月感染组低于非感染组。两组数据均于发病后逐渐增高,于第4个月达最高峰,随后逐渐下降,与发病后时间呈高度相关(r=0811),配对t检验显示感染组的IgG明显低于非感染组。病程第6个月,非感染组66例中,42例胸片已恢复正常;感染组19例中,仅1例胸片正常。10例非感染组中,仅1例有轻度弥散功能障碍;7例感染组中,重度限制性通气功能障碍和重度弥散功能障碍1例,中度1例,轻度3例。结论SARS患者急性期合并下呼吸道感染者,康复期血清特异性抗体比非感染组低,肺部病灶吸收速度和肺功能恢复速度较均缓慢。     

严重急性呼吸综合征康复期患者血清抗体、肺功能和影像学资料动态分析

目的对北京地区临床诊断的严重急性呼吸综合征(SARS)康复者出院后进行定期临床随访,动态观察SARS冠状病毒特异性IgG抗体、肺功能和肺部影像学的变化。方法383例SARS患者康复后1年内定期进行SARS冠状病毒特异性IgG抗体、肺功能和肺部影像学检查,合并有肺弥散功能异常的康复者定期进行肺功能和胸部影像学复查,动态观察肺功能的恢复情况。部分合并有骨关节疼痛的患者进行股骨头磁共振检查。结果383例中有311例SARS冠状病毒特异性IgG抗体为阳性(812%),1年内动态观察康复者血清特异性抗体有明显下降。特异性IgG抗体为阳性的康复者中有85例(273%)合并有弥散功能(DLCO)异常,67例合并有肺部影像学异常。其中40例DLCO异常的康复者1年内肺功能和肺部影像学动态观察均有不同程度改善。78例进行股骨头磁共振检查的康复者中18例发现股骨头缺血性坏死改变(231%)。结论临床诊断为SARS的康复者中可能有部分为误诊病例,SARSCoVIgG抗体水平在出院后1年内逐渐降低,合并有肺纤维化改变的SARS康复者在一定时期内可明显吸收和好转,部分康复者合并有股骨头缺血性坏死改变。     

早期无创正压通气对SARS病人氧合功能影响

为总结对严重急性呼吸综合征(SARS)合并呼吸功能不全病人使用无创正压通气(NIPPV)治疗的经验与体会,评价其在早期对SARS病人呼吸功能改善的作用,收集并比较因呼吸功能不全而使用持续无创双相正压面罩通气(BiPAP)治疗的25例SARS病人,治疗前与治疗24h内相关呼吸参数和生理指标的变化,初步分析NIPPV早期对SARS病人氧合功能影响。结果NIPPV后24h内多数病人的气促和呼吸困难有不同程度缓解,心率(HR)和呼吸频率(RR)明显减慢,脉搏血氧饱和度(SpO2)和氧合水平用改良呼吸指数(MRI)显著升高(P<0.05)。提示NIPPV早期应用对SARS合并呼吸功能不全病人的氧合功能有明显的改善作用。     

严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究

目的：检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中SARS相关抗体的抗原特异性。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体，并采用抗原抗体的预孵育，吸附血清中抗原特异性抗体，检测其抗原特异性。结果：SARS患者血清与SARS患者肺组织以及非SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非SARS患者肺组织孵育后，其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收，吸收率为100％。结论：本组SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，其对SARS致病机制的意义值得进一步研究。