小鼠联会复合体标本制备的改良方法

小鼠联会复合体标本制备的改良方法预防医学院放射损伤临床教研室姜杰第一临床学院检验科张曼关键词生殖细胞，联会复合体，改良方法中图号Ｒ３３１Ｒ３９４．３联会复合体（Ｓｙｎａｐｔｏｎｅｍａｌｃｏｍｐｌｅｘ，简称ＳＣ）是生殖细胞减数分裂时，同源染色体配对过程...     

TA3系和TB1系小鼠自发肿瘤的发生率

我室继TA 1和TA 2系小鼠之后,又培育出两系近交系小鼠,命名为TA 3和TB 1系小鼠。该两系小鼠的遗传学检测结果表明,纯合度很高。本文报告两系小鼠的自发瘤,供使用单位参考。材料及方法一、动物来源:TA 3系小鼠来源于天津市,1956年始按兄妹(B×S)交配繁殖。采用第83～84代。共580只((?)273,(?)307)。 TB 1系小鼠,以615×TA 3杂交系严格按兄妹交配育成。采用第26～27代。共394只((?)122,(?)272)。二、实验方法:每系小鼠设两组,即未生殖组和生殖组,每组(?)(?)兼有,分开饲养于塑料盒内,喂给     

TA1和TA2系小鼠乳腺肿瘤组织学分型

TA 1和TA 2系小鼠已被我国卫生部定为国际通用实验动物,在国内已广泛使用。低癌系TA 1和高癌系TA 2小鼠的生物学特性业已报道,但该两系小鼠自发性乳腺肿瘤病理组织学分型及转移的资料还是空白。为了便于同国外同类资料进行比较,和提供必要数据,我们对1977年以来所积累的两系小鼠自发乳癌的尸检材料进行病理组织学分型及转移病例的分析。     

非梗阻性无精子症的精母细胞同源染色体联会分析

目的:探讨Y微缺失与同源染色体联会异常在精子发生障碍中的意义?方法:选择无Y微缺失的单纯精子发生障碍患者3例?合并有Y微缺失和AZFc缺失的精子发生障碍患者3例?无Y微缺失的精子发生正常者(3例)为对照组;利用免疫荧光技术比较3组睾丸组织中精母细胞的同源染色体联会情况,包括联会复合体(synaptonemal complexes,SC)上gap和split出现的数目?结果:SC中出现gap的频率在对照组为10%?单纯精子发生障碍组为22%?合并有Y微缺失的精子发生障碍组为25%?两个精子发生障碍组与对照组相比均有显著性差异(P < 0.05),两个精子发生障碍组之间无统计学差异?SC中出现split的频率对照组为1%?单纯精子发生障碍组为13%?合并有Y微缺失的精子发生障碍组为15%?两个精子发生障碍组与对照组相比均有显著性差异(P < 0.01),两个精子发生障碍组之间无统计学差异?结论:精母细胞中同源染色体联会异常是影响精子发生的重要机制之一,Y微缺失的睾丸组织精母细胞中同源染色体联会异常有加重的趋势?     

小鼠初级精母细胞染色体的制备

小鼠初级精母细胞染色体制备技术已广泛运用于细胞畸变的检测和医学细胞学实验中,传统的秋水仙素和沉淀软化法分离精原细胞和初级精母细胞尚不够完善,本文介绍不用秋水仙素处理小鼠的改进方法。1 材料与方法试剂:2.2%柠檬酸三钠缓冲液;1%柠檬酸钠低渗液;甲醇:冰醋酸=3:1固定液,Giemsa染色液(pH=6.8,磷酸缓冲液稀释10倍),所用试剂均临用前配制。动物:雄性小鼠8～12周龄。     

防老剂D对TA1系和ICR小鼠致癌作用的比较

TA1系(原称津白1号)对D防的反应以肾血管内皮肉瘤为主,不同于任何种系动物,故器官亲和性的改变不单纯由于二甲亚砜作为溶媒,可能同TA1系本身的遗传特点有关关。 TA1系雄鼠成年后不易集体饲养,是个不足,应在育种时加以改良。     

银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变

目的 对人白细胞介素-3（hIL-3）基因突变体进行分析和进一步鉴定,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法-即银染单链构象多态性技术（Single strand confornation polymorphism,SSCP）。方法 将野生型和突变型的人白介素-3（hIL-3）cDNA连接到PUC9和PUC19质粒载体上,转化入大肠杆菌,扩增质粒,用常规方法抽提,酶切,然后将酶切后的DNA片段进行PAGE胶电泳,银染检测野生型和突变型的异同。结果 以野生型hIL-3 cDNA作为对照,连接到PUC9和PUC19的电泳结果均为一致,突变型hIL-3 cDNA的电泳带明显比野生型的电泳带靠后。结论 SSCP方法具有简便,快捷较灵敏的特点,对人白细胞介素-3(hIL-3）基因的点突变得到进一步的鉴定。     

小鼠粗线期精母细胞钙离子通道膜片箝方法的建立

应用机械分离获得小鼠单个精母细胞，采用全细胞膜片箝技术记录Ca^2 离子通道电流。结果表明：①阻断K^ 电流后，当钳制电位－90mV、指令电压－60～＋10mV、步阶电压10mV时，可记录到内向电流；②内向电流在－30～－40mV达到最大值；③在细胞外液中加入4μmol/L TTX，对记录电流无影响，表明此电流不含有Na^ 电流成分，为Ca^2＋电流。     

小鼠表皮TA细胞的细胞周期研究

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术,对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ）,１２ ｈ 后注射３Ｈ－ＴｄＲ,再经１２ ｈ 后处死动物,取皮肤作切片,光镜下观察。结果：成年小鼠表皮未见ＩＣＣ－ＴｄＲ双标细胞;新生小鼠表皮上有大量的双标细胞;毛囊双标细胞集中在毛母质区域。结论：小鼠表皮ＴＡ细胞在增殖状态下细胞周期缩短到２４ ｈ 以内。     

小鼠麦皮TA细胞的细胞周期研究

目的：观察小鼠表皮ＴＡ细胞的增殖特性。方法：采用ＩＣＣ－ＴｄＲ双标技术，对成年小鼠和新生小鼠腹膜内注射５－溴尿嘧啶（ＢｒｄＵ），１２ｈ后注射＾３Ｈ－ＴｄＲ，再经１２ｈ后处死动物，取皮肤作切片，光镜下观察。结果：成年小鼠肯皮未见ＩＣＣ－ＴｄＲ双标细胞；新生小鼠表皮上有大量的双标细胞；毛囊双标细胞集中在毛母南区域。结论：小鼠表皮ＴＡ细胞在增殖状态下细胞周期缩短到２４ｈ以内。     

铅和乙醇对雄性小鼠初级精母细胞的致突变性研究

目的观察铅、乙醇染毒对雄性小鼠初级精母细胞致突变性的影响,研究铅和乙醇对雄性小鼠联合生殖毒性。方法健康雄性小鼠,随机分为9组,每组8只。A～H组经灌胃分别给予醋酸铅15mg/kg体质量、30mg/kg体质量,乙醇1g/kg体质量、2g/kg体质量,醋酸铅15mg/kg体质量 乙醇1g/kg体质量,醋酸铅15mg/kg体质量 乙醇2g/kg体质量,醋酸铅30mg/kg体质量 乙醇1g/kg体质量,醋酸铅30mg/kg体质量 乙醇2g/kg体质量,对照组给等量蒸馏水,1次/d,每周5次,连续3周。所有动物均于染毒第25d处死,取双侧睾丸作初级精母细胞染色体畸变分析。结果高铅染毒组、高乙醇染毒组、铅和乙醇联合染毒组初级精母细胞染色体畸变率与对照组相比显著增加(P<0.05),析因分析表明醋酸铅和乙醇之间存在交互作用。结论铅和乙醇对于雄性小鼠初级精母细胞具有致突变性,并且存在协同作用。     

影响小鼠孤雌胚胎干细胞的建系效率因素初探

目的为了解替米考星在肉鸭体内的药代动力学特性及生物利用度,为替米考星在临床应用作出正确评价与指导。方法8只健康成年北京肉鸭,采用静脉注射和口服两种途径分别以替米考星5mg／kg和20mg／kg体重剂量给药,进行体内药代动力学研究,计算其生物利用度。动物给药后72h内分点采血,用反相高效液相色谱法测定不同时间点血浆中的药物浓度。采用3p97药代动力学软件处理数据,替米考星两种给药途径的药时数据均符合二室开放模型。结果静脉注射给药（5mg／kg体重）的主要药代动力学参数：t1/2α为0．076±0．0098h、t1/2β为7．31±0．63h、AUC为4．50±0．30/μg·ml^-1·h^-1、CL（s）为1．12±0．069／L·kg^-1·h^-1;口服给药（20mg／kg体重）的主要药代动力学参数：t1/2α为1．76±0．49h、t1/2β为25．70±4．74h、t1/2Ka为0．090±0．0092h、AUC为14．03±2．54／μg·ml^-1·h^-1、CL（s）为1．46±0．22／L·kg^-1·h^-1、tmax为0．47±0．035h、Cmax为0．75±0．056μg／ml、F为78．47％±0．15％。结论通过剂量较正法计算出口服给药后在肉鸭体内的生物利用度为78．47％±0．1483％,表明替米考星口服给药在肉鸭体内吸收良好。     

膜片钳技术和酶法分离豚鼠初级精母细胞的比较

应用膜片钳技术与酶法分离细胞技术,分别获得豚鼠单个初级精母细胞,观察了光镜下不同浓度伴刀豆蛋白A、不同时间对精母细胞贴壁及经膜表面清洁后封接和破膜的影响.结果表明,膜片钳技术优于酶法分离,细胞贴壁采用0.125g/L伴刀豆蛋白A作用10min为宜,膜表面清洁处理以0.35g/L胶原酶作用5min易于封接和破膜.     

微波辐射对小鼠精子头部银染形态的影响(简报)

近年来国内外已将微波辐射加温用于节制生育。关于微波的遗传学效应,尤其是微波对人体可能损害的问题,受到学者们密切关注。故评价微波节育的潜在遗传危害,保护人类基因库的纯洁性,进一步研究微波避孕对生殖细胞的效应有其特殊的意义。已知精子头部形态由多种基因控制,诱变剂作用于生精细胞时,可损伤生精细胞的遗传基因,能引起精子头部形态异常。近年来,分析精子头部形态改变作为检验药物对生精细胞遗传效应的敏感指标。本研究旨在观察了WB-S-3型实验动物微波杀生器所发射的微波对     

自噬在电离辐射诱导的小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用

目的 探讨自噬在电离辐射诱导小鼠精母细胞GC-2凋亡过程中的作用.方法 将小鼠精母细胞GC-2分为空白对照组和不同剂量(2、4和8 Gy)60Co辐射处理组.采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡情况,通过蛋白质印迹实验观察自噬相关蛋白LC3(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)和Beclin1表达水平的改变,使用荧光显微镜观察C,C-2细胞内自噬小体的变化.用5mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,观察自噬抑制剂联合电离辐射对细胞凋亡率的影响以及自噬相关蛋白表达水平的改变.结果 与空白对照组相比,GC-2细胞经60Co辐射处理后细胞凋亡率升高(P＜0.05),荧光显微镜下可见细胞自噬体明显增多,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平增加(P＜0.05).预先用5mmol/L 3-MA处理GC-2细胞2h再给予60Co辐射处理,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ以及Beclin1蛋白表达水平与未经3-MA处理组相比降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05).结论 电离辐射可以诱导精母细胞发生自噬,抑制细胞自噬后可增强电离辐射对精母细胞的杀伤作用.     

髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠的构建及应用

目的：通过Cre-loxP基因敲除系统特异性敲除髓系SOCS3基因,构建早期髓系来源抑制细胞（eMDSCs）高浸润荷瘤鼠模型。方法：通过将SOCS3fl/-小鼠与Lyz2-Cre小鼠杂交繁育,获得髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠,PCR法鉴定小鼠基因型,Western印迹验证基因敲除效果,流式细胞术检测髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠骨髓中eMDSCs比例及其对T细胞的抑制作用,并在该小鼠基础上分别构建乳腺癌、肺癌和黑色素瘤3种eMDSCs高浸润荷瘤鼠模型,流式细胞术检测肿瘤组织中eMDSCs浸润情况。结果：PCR鉴定和Western印迹检测证实髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠构建成功,流式细胞术结果表明髓系SOCS3基因敲除小鼠骨髓中eMDSCs比例显著升高（t=17.94,P<0.001）,且该群eMDSCs抑制T细胞增殖（t=14.21,P<0.001）、促进T细胞凋亡（t=13.53,P<0.001）。在黑色素瘤、乳腺癌、肺癌3种髓系特异性SOCS3基因敲除荷瘤鼠的肿瘤组织中eMDSCs数量显著增加（t=24.14、24.56、14.93,均P<0.00...     

3种微生物学级别SSB系小鼠主要脏器的解剖学比较

我所培育的近交系SSB小鼠,到1988年底已繁殖到第35代(F_(35))。本文报告对普通级(CV)、清洁级(CL)和无菌(GF)SSB系小鼠的主要脏器进行解剖学比较结果,藉以积累一些基础生物学数据,为该系小鼠在生物医学研究领域中应用时作参考指标。材料和方法 1.动物 CV-SSB F_(34)～F_(35),CL-SSB F_(23+7+4)～F_(23+7+5),GF-SSB F_(23+11)～F_(23+12)核心群和谱系扩大群小鼠,按1～2、10、20、30、45、60、100和200等日龄,分成雌雄各8组。CV、CL每组取样20只;GF每组约10只,60日龄以上GF小鼠因供应紧张,取样较少。饲养条件如前文介绍。