肿瘤坏死因子和干扰素对大鼠骨骼肌细胞的作用研究

目的：探讨肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor,TNF)和干扰素（Interferon,IFN)对大鼠骨骼肌细胞的细胞毒性作用。方法：用原代培养的Wister大鼠的骨骼肌细胞作为靶细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）试验法分别观察TNF、IFN两种细胞因子以及二者混合使用在不同的浓度和不同的时间下对大鼠骨骼肌细胞生长的影响。结果:TNF大500－16000U/ml范围内对大鼠骨骼肌细胞的生长起抑制作用，在8000U/ml时细胞的抑制率最大。IFN对大鼠骨骼肌细胞的生长起促进、增殖作用，在2000U／ml时细胞增殖率最大。TNF＋IFN对大鼠骨骼肌细胞的生长具有促进、增殖作用，在500U／ml时细胞增殖率最大。结论：TNF对大鼠骨骼肌细胞的生长具有抑制作用，IFN对大鼠骨骼肌细胞的生长具有促进、增殖作用，IFN与IFN联合使用可以明显降低TNF对大鼠骨骼肌细胞生长的抑制作用，提高机体免疫力。     

β-1,4半乳糖基转移酶-I对雪旺氏细胞增殖的影响

目的 :探讨周围神经雪旺氏细胞表达 β -1,4-半乳糖基转移酶 -Ⅰ (β -1,4-galactosyltransferaseⅠ ,β -1,4-GalT -Ⅰ )对其增殖的影响。方法 :构建正、反义 β -1,4-GalT -Ⅰ表达质粒 ,将其转染到分离培养的雪旺氏细胞中 ;运用细胞计数分析转染细胞倍增时间、培养细胞 3H -TdR掺入检测转染细胞增殖程度 ;应用流式细胞仪分析转染细胞的细胞周期变化。结果 :转染正义 β -1,4-GalT -Ⅰ后雪旺氏细胞的增殖受到抑制 ,且这种抑制作用随转染浓度增大而增强。而转染反义 β -1,4-GalT -Ⅰ有相反的作用。转染正义 β -1,4-GalT -Ⅰ后 ,雪旺氏细胞周期主要被阻滞在G1/G0期。 结论 :β -1,4-GalT -Ⅰ对雪旺氏细胞的增殖有抑制作用 ,可能在周围神经雪旺氏细胞的有序增殖过程中发挥重要作用     

低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响，为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定，将培养至第三代的细胞分为3组，分别为对照组，10组和3%O2组。对各组细胞记数；测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降，细胞培养液中的氧含量也逐渐下降（P〈0.05），而乳酸浓度逐渐升高（P〈0.05）。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加，尤以10%O2组更为明显（P〈0.05），3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组，低氧4时，增殖指数增加；而10%O2组增殖指数一直高于常氧组（P〈0.05）。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响,为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定,将培养至第三代的细胞分为3组,分别为对照组,10%02组和3%O2组。对各组细胞记数;测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降,细胞培养液中的氧含量也逐渐下降(P<0.05),而乳酸浓度逐渐升高(P<0.05)。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加,尤以10%O2组更为明显(P<0.05),3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组,低氧4时,增殖指数增加;而10%O2组增殖指数一直高于常氧组(P<0.05)。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

低氧对鼠雪旺氏细胞增殖的影响

目的观察低氧对鼠雪旺氏细胞体外增殖的影响,为雪旺氏细胞扩增培养探索新方法。方法原代分离培养雪旺氏细胞并鉴定,将培养至第三代的细胞分为3组,分别为对照组,10%02组和3%O2组。对各组细胞记数;测定培养液中氧含量和乳酸浓度及各组细胞的增殖指数。结果随着环境氧浓度的下降,细胞培养液中的氧含量也逐渐下降（P〈0.05）,而乳酸浓度逐渐升高（P〈0.05）。低氧组雪旺氏细胞数目比常氧组明显增加,尤以10%O2组更为明显（P〈0.05）,3%O2组在低氧1d和2d时增殖指数低于常氧组,低氧4时,增殖指数增加;而10%O2组增殖指数一直高于常氧组（P〈0.05）。结论轻中度低氧有利于鼠雪旺氏细胞的体外增殖。     

β-1，4半乳糖基转移酶-Ⅰ对雪旺氏细胞增殖的影响

目的：探讨周围神经雪旺氏细胞表达β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(β-1，4-galactosyltransferase Ⅰ，β-1，4-GalT-Ⅰ)对其增殖的影响。方法：构建正、反义β-1，4-GalT-Ⅰ表达质粒，将其转染到分离培养的雪旺氏细胞中；运用细胞计数分析转染细胞倍增时间、培养细胞3H-TdR掺入检测转染细胞增殖程度；应用流式细胞仪分析转染细胞的细胞周期变化。结果：转染正义β-1，4-GalT-Ⅰ后雪旺氏细胞的增殖受到抑制，且这种抑制作用随转染浓度增大而增强。而转染反义β-1，4-GalT-Ⅰ有相反的作用。转染正义β-1，4-GalT-Ⅰ后，雪旺氏细胞周期主要被阻滞在G1／G0期。结论：β-1，4-GalT-Ⅰ对雪旺氏细胞的增殖有抑制作用，可能在周围神经雪旺氏细胞的有序增殖过程中发挥重要作用。     

雪旺氏细胞源活性物质对周围神经再生影响的实验研究

采用１６４０培养液体外培养ＳＤ乳鼠雪旺氏细胞，吸取其培养液，内含雪旺氏细胞分泌的活性物质。以硅胶管桥接３组ＳＤ大白鼠２ｃｍ有神经缺损，第一组硅胶管内注入雪旺氏细胞培养液，第２组注入１６４０培养液，第３组空白对照，术后４个月第１组，第２组髓鞘直径，动作电位传导速率比较差异有极显著性（Ｐ〈０．０１），实验结果显示雪旺氏细胞泊活性物质对周围神经再生有益。     

肿瘤坏死因子、干扰素和化疗药物对正常骨骼肌细胞的作用研究

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN)和顺铂(DDP)、表阿霉素(EPI)联合应用对正常骨骼肌细胞的细胞毒作用,为骨恶性肿瘤的治疗提供理论基础.方法:用原代培养的Wister大鼠的骨骼肌细胞作为靶细胞,采用四甲基偶氮唑蓝试验法(MTT)观察TNF、IFN和DDP、EPI联合应用,在不同浓度和不同时间对正常骨骼肌细胞生长的影响.结果:TNF、DDP和EPI联合应用对正常骨骼肌细胞的生长起抑制作用,TNF、IFN、DDP和EPI联合应用,在浓度为250 U/ml 0.000 5 g/L 0.000 5 g/L时可促进骨骼肌细胞的生长与增殖,从浓度为500 U/ml 0.001 g/L 0.001 g/L时转为抑制骨骼肌细胞的生长.结论:TNF、IFN、DDP和EPI联合应用,在低浓度时对正常骨骼肌细胞的生长具有促进、增殖作用,高浓度时可抑制正常骨骼肌细胞的生长作用.     

干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用

目的:研究干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用.方法:MTT法检测干扰素-γ(IFN-γ)、干扰素-α2b(IFN-α2b)单独及联合应用,作用不同时间对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用.结果:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用均对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用:单独用药时,作用48h的抑制作用较为明显(P<0.05);联合用药时,作用72h效果显著(P<0.05).结论:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用对MCF-7乳腺癌细胞增殖均有不同程度的抑制作用,二者联合应用药效作用时间延长、作用效果更佳.     

白藜芦醇合阿糖胞苷对HL-60细胞的增殖抑制作用

目的：观察白藜芦醇（resveratrol，Res）体外单独及联合阿糖胞苷（Ara-c）对白血病HL-60细胞的抑制作用。方法：在体外培养条件下观察不同浓度Res、Ara-c作用48小时后分别对HL-60细胞增殖的影响。然后根据以上抑制结果，选择对HL-60细胞抑制率15％～30％的Ara-c药物浓度，再与不同浓度的Res联合用药。在联合药物处理HL-60细胞48小时后，同样用MTT法检测联合用药对细胞增殖抑制作用。结果：Res、Ara-c体外单独用药均能显著抑制HL-60细胞的生长增殖，Res联合Ara-c（2．5μg／m1）后，对HL-60细胞的增殖抑制作用显著提高，与单独用药组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：Res体外能显著抑制人HL-60细胞的增殖，Res联合Ara-c能显著提高对HL-60细胞的增殖抑制作用。     

干扰素α-2b联合5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞生物学行为的影响

目的检测干扰素(IFNα-2b)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)在体外对肝癌细胞株HepG2的杀伤抑制作用,并探讨可能的作用机制。方法体外复苏、培养人肝癌细胞,并单用IFNα-2b或5-FU,以及不同浓度的IFNα-2b联合5-FU对其进行干预。用MTT法测定IFNα-2b联合5-FU对体外培养的人肝癌细胞生长的抑制率;用HOECHST染色法检测药物对人肝癌细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学法检测用药后人肝癌细胞中突变型p53、c-myc表达的变化。结果 IFNα-2b和5-FU都能抑制HepG2细胞生长,并随着作用时间的延长而增强,IFNα-2b与5-FU联合用药比单用IFNα-2b或5-FU抑制效果更明显,并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强;IFNα-2b和5-FU均能诱导肝癌细胞凋亡,二药联用时细胞凋亡更明显,可呈剂量依赖性地诱导肝癌细胞凋亡,不同浓度下的凋亡率均明显高于对照组;IFNα-2b和5-FU均可明显抑制突变型p53、c-myc蛋白的表达,二药联用抑制作用更明显。结论IFNα-2b和5-FU联用可呈剂量和时间依赖性地抑制肝癌细胞的增殖,呈剂量依赖性地诱导肝癌细胞凋亡,下调突变型p53、c-myc蛋白的表达,表现出协同作用。这些可能是IFNα-2b和5-FU联合抗癌的部分机制。     

NF-κB抑制剂PDTC增敏TNF-α对乳腺癌细胞的毒性作用

目的 :探讨核因子κB(nuclearfactorkappaB)活化抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (pyrro1idinedithiocarbamate,PDTC)对肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF -α)细胞毒性作用的影响。方法 :用MTT法观察TNF -α、PDTC及二者联合作用对乳腺癌细胞系MCF - 7、MDA -MB - 4 35s体外生长的影响。将MDA -MB - 4 35s细胞接种于雌性BALB/c纯系小鼠肾包膜下复制出移植乳腺癌动物模型 ,观察TNF -α、PDTC及联合作用对体内移植肿瘤生长的影响。结果 :单用TNF -α(小于或等于 2 0 0 0U/ml)或PDTC均不影响两种乳腺癌细胞的体外生长 ,但是先PDTC(5 0 μmol)作用 1h ,再应用TNF -α(2 0 0 0U/ml)即可明显地抑制乳腺癌细胞的生长。动物实验中治疗组应用TNF -α(7.5× 10 6U/kg/次 ,2次 /日 ,ip) +PDTC(5 0mg/kg/次 ,2次 /日 ,ip) ,肿瘤平均体积为 1.0 8± 0 .32mm3 ,明显小于对照组平均瘤体 11.6 7± 0 .5 3mm3 (P <0 .0 1) ,单用TNF -α组(10 .96± 1.0 4mm3 )及PDTC组 (11.72± 0 .73mm3 )与对照组比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :NP -κB抑制剂PDTC能够显著增敏TNF -α对乳腺癌细胞的毒性作用 ,抑制乳腺癌细胞的生长。     

体外细胞培养观察咖啡酸锗对U14瘤细胞增殖抑制作用的研究

目的：探讨咖啡酸锗对U14瘤细胞增殖的抑制作用。方法：通过体外培养U14瘤细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测0.01～10μg/ml终浓度咖啡酸锗对U14瘤细胞生长的抑制程度;台盼兰拒染法计算24h和48h后的细胞数量及细胞死亡率。结果：MTT比色法显示,咖啡酸锗各浓度对U14瘤细胞均有增殖抑制作用,增殖抑制率以1μg/ml时最显著（45.58%）,且呈一定的剂量依赖性。台盼兰染色计数培养24h及48h各用药组肿瘤细胞死亡率均升高,与阴性对照组比较具有明显差异（P〈0.01）。结论：咖啡酸锗对U14瘤细胞的增殖有明显抑制作用。     

生长抑素联合黄芪体外抑制SW480细胞的实验研究

目的:探索研究生长抑素联合黄芪对人结肠癌细胞株SW480的生长抑制作用.方法:实验设空白对照组、奥沙利铂对照组、生长抑素组、黄芪组、联合用药组,MTT法检测生长抑素联合黄芪对SW480细胞生长增殖的影响.结果:与空白对照组相比,生长抑素及黄芪对SW480细胞生长增殖均有明显的抑制作用,且在联合用药各组中,联合应用有增强作用,抑制率显著高于单纯用药组,与作用浓度呈正比(P=0.000<0.01).结论:生长抑素、黄芪均能抑制SW480细胞生长,且两者联用的抑制率明显高于单用组,联用有增强抑制作用,抑制结肠癌细胞增殖.     

IFN-γ、TNF-α测定对结核性和癌性胸液鉴别诊断的研究

目的 :探讨IFN -γ、TNF -α测定对诊断结核性、癌性胸液的价值。方法 :采用双抗体夹心ELISA法对结核性及癌性胸液IFN -γ、TNF -α测定。结果 :结核性胸液组IFN -γ、TNF -α与癌性胸液组有显著性差异 (P <0 0 1) ;二项指标对诊断结核性胸膜炎的敏感性分别是 91 1%、85 3% ,特异度分别是 86 6 %、83 3% ;同时测得诊断阳性率为 85 3%。结论 :IFN -γ、TNF -α联合测定对结核性胸膜炎的诊断及与癌性胸液的鉴别具有一定临床意义 ,可用于二者的鉴别诊断     

细胞因子对小牛晶体上皮细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究白介素6（IL－6）、白介素1受体拮抗剂（IL－1ra),γ干扰素（IFN－γ）对小牛晶体上皮细胞（BELC）增殖和胶原合成的影响，探讨它们在后囊浑浊形成中的作用。方法：采用MTT比色法测定不同浓度的IL－6，IL－1ra及IFN－γ对体外培养的BLEC增殖的影响，用^3H-脯氨酸掺入法检测这些细胞因子对体外培养的BLEC胶原合成的影响。结果：IL－6 10^2-10^4U/ml显著促进细胞增殖和胶原合成，IL－1ra 10^2-10^4 μg/L显著抑制细胞增殖而对胶原合成无影响，IFN－γ 10^2-10^5U/ml显著抑制细胞增殖，10^3-10^5U/ml显著抑制胶原合成。结论：这些细胞因子可能参与了后囊浑浊的形成；IFN－γ与IL-1ra可用于防治后囊浑浊。     

紫杉醇联合肿瘤坏死因子α对腺样囊性癌细胞的抑制作用

目的:探讨人肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合紫杉醇对人腺样囊性癌细胞系SACC-83的抑制增殖作用及与细胞凋亡的关系,为化疗与生物治疗联合应用治疗腺样囊性癌提供实验依据。方法:将人腺样囊性癌细胞系SACC-83和对照组原代培养鼠肺成纤维细胞根据不同药物浓度分为9组,药物作用72 h。3H-TDR法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期改变;透射电镜观察凋亡细胞形态变化。结果:联合用药组的细胞增殖抑制率显著高于单独用药组(P<0.05)。L929细胞各组的细胞增殖抑制率显著低于SACC-83细胞(P<0.05)。结论:TNF-α联合紫杉醇对SACC-83细胞增殖的抑制作用以及诱导凋亡具有协同作用。     

β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制

目的:探讨β1,4-半乳糖基转移酶I影响雪旺氏细胞增殖的机制。方法:将不同浓度的β-1,4-GalT-I表达质粒转染雪旺氏细胞,采用Westernblot方法检测增殖相关信号分子cyclinD1、p16INK4以及p27Kip1的表达水平,North-ernblot方法检测p19ARF的表达变化。结果:随着β-1,4-GalT-I在雪旺氏细胞中的表达增加,cyclinD1表达降低,而p16INK4a和p19ARF呈现相反的变化;p27Kip1变化不明显。结论:β-1,4-GalT-I影响雪旺氏细胞增殖可能与cyclinD1、p16INK4a和p19ARF介导的信号传导途径有关。     

干扰素对肾癌细胞生长影响的体外研究

目的：了解γ干扰素（interferon-γ IFN-γ)对肾癌细胞生长的影响及其分子生物学机制。方法：采用MTT法检测INF－γ对肾癌细胞株786－0的抑制率，运用流式细胞仪检测IFN－γ对肾癌细胞株786－0凋亡的影响。结果：INF－γ作用于肾癌细胞786－024h后，INF－γ浓度为10U/ml,10^2U/ml时，786－0的抑制率分别为27％，42％，FACS检测IFN－γ对肾癌细胞786－0凋亡的影响发展，同一时间的实验组与对照组的细胞凋亡数量无明显差异；IFN－γ作用于肾癌细胞786－0，其细胞凋亡与时间，INF－γ浓度无明显相关性。结论：IFN－γ对肾癌细胞786－0有明显抑制作用，呈剂量依赖；但凋亡检测发现细胞凋亡与时间，INF－γ浓度无明显相关性，IFN－γ对肿瘤细胞作用机制的深入研究，将为肾癌的免疫治疗提供实验依据。     

脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞影响的观察

目的：了解脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞的影响。方法：酶消化法培养的雪旺氏细胞分烃 加脑组织提取液组,对细胞形态和数量进行观察比较。结果：体外培养的五氏细胞在加入脑组织提取液后细胞增殖加快,并出现细胞突出起细长（为对照组的２－３倍）,互相延伸等形态学改变。结论：雪旺氏细胞在接触脑组织提取液后,表现为细胞增殖加快,突起生长明显的功能活跃状态。