CA242免疫放射分析的稳定性研究

本文报道了以单克隆抗体C241作为捕捉抗体, 以C242为标记抗体的碘标固相双位点夹心式CA242免疫放射分析(IRMA)的稳定性研究. 实验结果表明, 包被珠、标记抗体、加入稳定剂后的标准及缓冲液在4℃存放8周仍可获得理想的实验结果.而未加入稳定剂的标准, 当存放条件为4℃、室温和37℃时, 分别在第7周、第2周第第1周失活.37℃存放包被珠时, 各标准点的结合率降低, 并且非特异性吸附升高. 37℃存放标记抗体到第3周时仍很稳定, 到第4周时略有下降.     

单克隆抗体的免疫测定技术

抗血清是多克隆性的不均一抗体,单克隆抗体则与其相反,它的化学和免疫学性状是均一的,对一种抗原决定簇有很高的特异性.而且可以长期连续获得同一单克隆抗体(McAb).下面介绍应用McAb设计的新免疫测定技术.一、双侧同时结合法(Simultaneoustwo Site):双侧结合法(夹心法)一般是被检材料(包括被检抗原)和固相抗体及标记抗体的反应分两阶段进行.用针对抗原上不同的抗原决定簇的两种McAb同时与     

CA－125免疫放射分析的稳定性研究

本文报导了以抗卵巢癌肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，以ＯＶ１８５为标记抗体的碘标固相双位点夹心式ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）的稳定性研究。实验结果表明，固相抗体珠、标记抗体、标准及保温液在４℃存放４周仍可获得理想的实验结果。３７℃存放固相珠时，各标准点结合率降低，并且非特异性吸附升高。     

CA—125免疫放射分析的稳定性研究

本文报导了以抗巢癌肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，以ＯＶ１８５为标记本的碘标固相双位点夹心式ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）的稳定性研究。实验结果表明，固相抗体珠、标记抗体、标准及保温液在４℃存放４周仍可获得理想的实验结果。３７℃存放固相珠时，各标准点结合率降低，并且非特异性吸附升高。     

DiI在人体神经解剖学中的应用

免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光标记抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体).在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光,可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术测定含量.     

介绍一种新的相分离免疫测定技术

免疫标记技术是一项微量免疫测定技术,它把标记物的高灵敏度和血清学反应的高度特异性结合起来,大大提高了方法的敏感性和特异性。目前,这项技术已广泛地应用于各个领域。常用的免疫标记技术有:放射免疫测定法(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光技术等等。这些方法首先需要把已知的抗原或抗体固定在特定的固相上,然后加上含有相应抗体或抗原的溶液,因此,溶液中的抗体或抗原只能与包被于固相上的抗原或抗体的游离的结合部位发生反应,这就限制了抗原抗体作用的面     

BAS─时间分辨荧光免疫测定中的一些实验条件

本文综述ＢＡＳ─时间分辨荧光免疫测定技术的实验条件。包括链亲合素的Ｅｕ（３＋）标记，抗体或抗原生物素化方法，固相抗体或抗原包被等最佳实验条件。并观察了Ｅｕ（３＋）链亲合素的稳定性以及影响测定结果的主要因素。     

CA—125免疫放射分析的动力学研究

以抗卵巢肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，ＯＶ１８５作为标记抗体，建立了特异性和灵敏度高的碘标固相双位点夹心式的ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）。本文报导了ＣＡ－１２５ ＩＲＭＡ的动力学研究。ＣＡ－１２５例抗原捕捉抗体ＯＶ１９７室温３￣４小时达到平衡；而固相ＯＶ１９７抗体结合的ＣＡ－１２５抗原与标记抗体ＯＶ１８５室温孵育２￣３小时达到平衡。反应时振荡与否、振汇频率大小以及捕捉抗体和标     

DiI在人体神经解剖学中的应用

免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光标记抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光，可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术测定含量。     

CA－125免疫放射分析的动力学研究

以抗卵巢癌肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，ＯＶ１８５作为标记抗体，建立了特异性和灵敏度高的碘标固相双位点夹心式的ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）。本文报导了ＣＡ－１２５ＩＲＭＡ的动力学研究。ＣＡ－１２５抗原与捕捉抗体ＯＶ１９７室温３～４小时达到平衡；而固相ＯＶ１９７抗体结合的的ＣＡ－１２５抗原与标记抗体ＯＶ１８５室温孵育２～３小时达到平衡。反应时振荡与否、振荡频率大小以及捕捉抗体和标记抗体的量等都对ＩＲＭＡ有一定影响。这就为ＩＲＭＡ的理论研究提供了基础，并对ＩＲＭＡ的实际操作起到了指导作用。     

酶连免疫吸附剂测定

酶连免疫吸附剂测定(Enzyme LinkedImmunosorbent Assay,简称ELISA)是70年代出现的新的免疫测定技术。在这种测定中应用两种试剂:一种是将抗原(或抗体)吸附于载体上成为免疫吸附剂,另一种是用酶标记的抗体(或抗原)。这两种试剂与标本中的待测物(抗体或抗原)起特异的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度,可使之达到与放射免疫测定相接近的水     

C-myc标记肽对单链抗体与抗原结合活性的影响

目的 探讨在不同的免疫学检测方法中，与单链抗体相连的亲和标记肽对单链抗体与抗原结合活性的影响。方法 在制备“VH-连接链-VL”型结构抗乙酰胆碱受体单链抗体时，将c-myc标记肽与单链抗体的VL连接，应用先将抗c-myc抗体固定单链抗体的固相放射免疫测定法、直接将单链抗体与乙酰胆碱受体结合的液相放射免疫测定法，分别测定单链抗体与乙酰胆碱受体的结合活性。结果 在固相放射免疫测定法中，单链抗体不能与乙酰胆碱受体结合；在液相放射免疫测定法中，单链抗体则能与乙酰胆碱受体结合。结论 在应用不同的免疫学检测方法中，与单链抗体相连的c-myc标记肽可影响单链抗体与抗原的结合活性。     

传统的ELISA方法不宜于用来筛选杂交瘤培养上清液中的小鼠单克隆抗体

最常用来筛选分泌特异性McAb杂交瘤的方法是将抗原固定在塑料板表面,加入杂交瘤培养上清与之反应,而后用标记同位素或标记酶(ELISA)的抗小鼠Ig来检测与固相抗原结合的McAbs.作者用此种ELISA方法筛选,制备了抗人肌酸激酶(CK)和抗人乳酸脱氢酶(LDH)的McAbs.当用液相RIA(~(125)I标记抗原与待测McAbs共育,用偶联有羊     

固相放射免疫法测定单纯疱疹病毒Ⅱ型单克隆抗体

随着杂交瘤技术的发展和应用,测定杂交瘤细胞分泌的特异性抗体需要微量敏感而快速的方法,放射免疫测定可以满足这一要求。基于蛋白质能紧紧地吸附于某种类型的塑料上,固相放射免疫法最适合于测定细胞融合之产物。本文建立~(125)Ⅰ标记兔抗鼠免疫球蛋白固相放射免疫双抗原夹心法,对单纯疱疹病毒Ⅱ型单克隆抗体(抗HSV-2 McAb)的效价及特异性进行分析。     

用双夹心酶联免疫吸附试验检测胃肠道癌症病人血清中肿瘤相关抗原的研究

用单克隆抗体Hb3作为固相和标记抗体,建立双夹心酶联免疫吸附试验(Sand-wich ELISA),检测胃肠道肿瘤病人血清中相关抗原CA-Hb3。以55u为阴性阈值,结果表明,正常献血员和消化道良性疾病阳性     

高度敏感与特异的微量固相放射免疫分析法检测人IgE

应用两个针对不同抗原决定簇的抗人IgE单克隆抗体分别作为固相抗体和标记~(125)I,建立了一步法微量固相放射免疫分析系统。该系统灵敏度为12.5-15.0pg/ml,特异性强,与100μg/ml人IgG,IgA,IgM和IgD均无反应;标准曲线的线性范围宽,为25-51200pg/ml。批内变异系数为2.4-17.1%。全部材料均可采用国产品,可用于定量测定人淋巴细胞体外培养上清及外分泌液中的微量IgE。     

用放射免疫分析方法测定表面抗原阳性急性乙型肝炎的e抗原及e抗体

本文用固相放射免疫分析方法对70例乙型肝炎表面抗原阳性的急性肝炎病人检测了乙型肝炎e抗原及e抗体。结果发现病后二周内的16例病人中有15例检出e抗原(HBe Ag)。10例疑诊或确诊为慢性肝病病人,其中5例患者e抗原检出是在发病后的10周以上。血清中e抗原转为e抗体(抗-HBe)的33例病人中,有27例(82％)是在e抗原消失后二周内出现e抗体。因此e抗原似乎是     

特制试管固相二抗法在人SOD-1 RIA中的应用比较

试管固相二抗竞争法是将二抗IgG包被于特制试管中，实验时将样品、^125Ⅰ标记抗原和-抗加至固相二抗试管内，经温育后洗涤，直接测量管中的放射性。我们应用特制试管固相二抗法与液相双抗体法对人SOD作放射免疫检测比较，现将结果报告如下。     

一种应用单克隆抗体进行免疫检测的新方法

由于大多数抗原呈可溶状态,根据抗原抗体复合物原理,可将单克隆抗体应用于免疫检测。多数情况下必须在实验系统中提供固相,一般是采用抗原或抗体包被在玻璃珠、试管壁等因相上,或加入PEG将抗原抗体复合物沉淀等方法,操作较繁琐。根据分泌抗体的细胞膜上嵌有大量具免疫活性的抗体,本文提出一种将抗体直接固于分泌抗体的杂交瘤细胞上的新方法。具体作法是将活跃分泌单抗的杂交瘤细胞悬浮于磷酸缓冲液中,加入戊二醛,终浓度为2.5%(V/V)。置4℃固定30分钟,然后加入甘氨酸,     

EB病毒衣壳抗原IgA抗体胶体金快速检测法的建立及应用

目的建立了一种快速检测人血清中EB病毒衣壳抗原(VCA)IgA抗体的胶体金免疫层析(GICA)方法。方法预先将EB病毒衣壳抗原(EB-VCA)包被在硝酸纤维素膜上,将鼠抗人IgA抗体免疫金固化在金标垫上。检测时,样本通过层析作用向上流动,样本中的IgA抗体首先被胶体金标记的鼠抗人IgA抗体捕获,其中的EB-VCAIgA抗体再与包被在硝酸纤维素膜上的EB-VCA特异性结合,最后形成包被固相上的EB-VCA与EB-VCAIgA抗体及胶体金标记鼠抗人IgA抗体的三元复合物,通过检测线胶体金沉淀颜色的变化来定性判定样本中是否存在EB-VCAIgA抗体。结果采用自制的GICA试纸条进行了1028份临床标本的盲法检测,并与酶联免疫吸附试验的EB-VCAIgA抗体诊断试剂盒进行比对,结果表明两种试剂检测的总符合率达到94.56%,阳性符合率为93.40%,阴性符合率为95.17%,Kappa值为0.873,两种诊断试剂具备一致的诊断价值。结论用于检测血清中的EB-VCAIgA抗体的GICA试纸条的制备条件已基本建立,其检测结果特异性强、稳定性好、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备。