蚌埠市2000～2004年肠出血性大肠杆菌 O157:H7监测研究

目的了解蚌埠市腹泻病人、动物宿主携带肠出血性大肠杆菌O157H7(EHEC O157H7)情况,为防治工作提供决策依据.方法采集我市市区和怀远县部分乡镇的现症腹泻病人和动物宿主(牛、羊、猪等)的粪便标本,用免疫磁珠法和血清学等方法检测EHEC O157H7.结果5年间共采集各种标本2 502份,经检测检出9株EHEC O157H7,检出率为0.36%.结论蚌埠市部分腹泻病人和动物存在着EHEC O157H7感染.     

蚌埠市2000～2004年肠出血性大肠杆菌O157∶H7监测研究

目的：了解蚌埠市腹泻病人、动物宿主携带肠出血性大肠杆菌O157 ：H7（EHEC O157 ：H7）情况，为防治工作提供决策依据。方法：采集我市市区和怀远县部分乡镇的现症腹泻病人和动物宿主（牛、羊、猪等）的粪便标本，用免疫磁珠法和血清学等方法检测EHEC O157 ：H7。结果：5年间共采集各种标本2502份，经检测检出9株EHEC O157 ：H7，检出率为0.36％。结论：蚌埠市部分腹泻病人和动物存在着EHEC O157 ：H7感染。     

蚌埠地区2000～2010年肠出血性大肠杆菌O157:H7感染状况的研究

目的了解2000-2010年沿淮地区肠出血性大肠杆菌O157:H7感染情况,为防控措施制订提供科学依据。方法采集蚌埠市市区和怀远县部分乡镇的现症腹泻病人和动物宿主(牛、羊、猪、鸡等)的粪便标本,用免疫磁珠富集法进行检测,血清凝集和生化试验对菌株进行鉴定。结果 2000～2010年共采集各类标本5 374份,经检测EHEC O157:H7阳性标本10份,阳性率0.19%,其中鸭、兔中检出阳性标本较少见。结论本次研究表明了EHEC O157:H7感染的普遍性,但阳性率较低,在公共卫生资源有限情况下,EHEC O157:H7防控目前不需成为沿淮地区传染病防控方面的主要公共卫生问题。     

安徽省肠出血性大肠杆菌O157:H7宿主动物监测研究

目的了解安徽省肠出血性大肠杆菌O157:H7在宿主动物中的分布及其毒力基因携带状况,为控制O157:H7感染提供依据。方法用免疫磁珠分离法(IMS)对安徽省3个监测点的宿主动物粪便标本进行0157:H7的分离培养,并用多重引物PCR方法(MPCR)检测分离菌株的毒力基因。结果采集宿主动物粪便标本5 560份,检出O157:H737株,阳性率为0.7%,其中牛的阳性率最高,为1.1%。106株O157:H7菌株经过毒力基因测定,65.1%的菌株携带SLT、hly基因。O157:H7感染性腹泻的发病与家禽家畜的带菌正相关(R=0.87,P=0.01)。结论安徽省宿主动物中能检出肠出血性大肠杆菌O157:H7,且菌株携带毒力基因。提示要加强对宿主动物进行O157:H7的流行病学调查和监测工作。     

河南省新发传染病EHEC O157:H7监测研究

[目的]了解河南省肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染性腹泻的发病情况、宿主带菌状况、食品污染程度及志贺毒素(stx)基因型,为制订有效的防治对策提供依据。[方法]采集河南省监测点腹泻病人、家畜、家禽粪便,水和肉食品等标本分离EHEC菌株,应用分子生物学技术检测分析菌株rfbO157、rfbO111、hlyA、eaeA、stx2和stx1等毒力基因和突变基因。[结果](1)从腹泻病人、家畜、家禽、食品、水、蜣螂和苍蝇中均分离出EHEC菌株共275株,总分离率7.88%;其中O157︰H7菌株为232株(84.36%),携带stx2基因EHECO157︰H7菌株88株(37.93%);非O157︰H7菌株43株(15.64%)。(2)宿主动物中羊带菌率最高(6.96%),是河南省EHEC最主要宿主动物;多重PCR检测出8种不同毒力基因组合型,主要为rfbO157 、hlyA 、eaeA 、stx2 组合。stx2变种毒素GK探针检测出3种毒素变种杂交带型,其中stx2原毒素 stx2vha型占7.4%,stx2vha型的占72.2%,未知新杂交带型占20.4%。(3)EHECO157︰H7菌株可分为9个PFGE型,自羊、牛、鸡和蜣螂和腹泻病患者中分离的携带stx2vha菌株同属一个PFGE型。(4)144株不携带志贺毒素的O157菌株中发现O157︰H38、O157︰H42和O157︰Hund(未确定型)新菌株。[结论]河南省家禽、家畜中普遍携带EHECO157︰H7大肠杆菌,羊是最主要的宿主动物;EHECO157︰H7为我省优势菌型,其毒素基因型为stx2-eaeA-hlyA并以stx2vha亚型为主。EHEC在外环境中污染严重并可在人与人、动物与人之间传播,家畜、家禽携带stx2 EHECO157︰H7率的高低与EHEC人群感染发病呈相关关系。     

徐州市大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻爆发因素分析

目的研究O157∶H7感染性腹泻疫情爆发与腹泻病人、宿主动物、苍蝇、食品携带(污染)O157∶H7状况的相关程度。方法调查1999—2011年O157∶H7感染性腹泻疫情资料,采集疫情爆发点和监测点腹泻病人、宿主动物粪便标本和苍蝇、食品标本分离菌株。采用趋势χ2检验和Spearman’s等级相关进行统计分析。结果腹泻病人、宿主动物粪便标本、苍蝇、食品带菌连续性监测结果证实了其与O157∶H7感染性腹泻爆发的关系。结论江苏省徐州市O157∶H7感染性腹泻爆发与腹泻病人带菌率、苍蝇带菌率、食品带菌率关联强度大。苍蝇与污染的食品对疾病的传播作用明显。     

动物宿主的EHECO157H7带菌调查

O157H7大肠杆菌是出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic EColi EHEC)的一个重要血清型.该菌可导致腹泻、出血性结肠炎(HC)、溶血性尿毒综合症(HUS)[1].自1982年在美国首次报道了由O157H7大肠杆菌引起的出血性肠炎的暴发以来,EHEC的感染已成为世界性的问题. WHO已确认O157H7为食源性疾病的病原体[2].近年来我国防疫部门也开始致力于对O157H7的检测工作,有自腹泻病人、猪粪、鸡肉、牛肉、卤肉等检出本菌的报告,但EHECO157H7 在本地区动物宿主中的带菌调查尚未见报道,其流行病学资料尚属空白.为了解EHECO157H7在本地区禽畜粪便中的带菌状况,为预防O157H7等致泻性大肠杆菌引起爆发流行提供依据,我们于2000年6-10月,在石家庄市所管辖各县采集牛、猪、鸡粪便,苍蝇体表样品共计170份.对致泻性大肠杆菌EHECO157H7进行调查,现将结果报告如下:     

芜湖地区肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7流行病学调查

目的　了解芜湖地区动物宿主携带肠出血性大肠杆菌 (EHEC)O1 57∶H7的情况 ,为防治工作提供依据。方法　选择芜湖县境内畜禽粪便标本、水样以及各类养殖场饲料等标本 1 6 2 7份 ,以免疫磁珠法和血清学方法检测EHECO1 57∶H7。结果　 1 6 2 7份标本中检出 4株EHECO1 57∶H7,检出率为 0 .2 5 %。结论　芜湖地区部分动物携带EHECO1 57∶H7。     

郑州市2005年肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染状况调查

目的：了解郑州市肠出血性大肠杆菌O157∶H7在腹泻病人中的检出情况和宿主动物带菌及毒力基因情况.方法：对采集的宿主动物和腹泻病人粪便及食品应用免疫磁珠富集分离法进行大肠杆菌O157∶H7分离和鉴定.结果：郑州市内共发现3例肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染病例,首次从腹泻病人中检出产毒O157∶H7菌株,采集5种以上动物粪便标本共计475份,从牛粪（247份）中分离到16株O157∶H7,检出率为6.48%,从羊粪（33份）中分离到3株O157∶H7,检出率为9.10%,并检出3株产毒O157∶H7菌株.采集5类市售食品共146份,未分离到O157∶H7.结论：郑州市存在发生肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染暴发或流行的潜在危险.     

2008-2012年南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7监测结果

目的 了解南宁市肠出血性大肠杆菌0157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据.方法 2008-2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型等方法进行检测.结果 在2 139份腹泻患者标本中未检出阳性标本;在3 088份外环境标本中检出阳性标本20份.南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染阳性率呈现逐年下降趋势;不同动物粪便肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性率不同,以牛粪检出阳性率最高.结论 南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7仍有散在的动物感染,应加强对动物粪便的管理及肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测工作.     

肠出血性大肠埃希菌O157：H7引起的溶血性尿毒综合征患者血清抗体调查

目的 对1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭（肾衰）的患者进行血清学调查和诊断。方法 使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌（EHEC）-溶血素（Hly)和EHECO157脂多糖（LPS）为抗原，对采集自42例肾衰患者的血清标本进行蛋白印记试验。结果 EHEC-Hly的检测发现，IgG抗体阳性21份，阳性率50.0%；IgM抗体阳性16份，阳性率38.1%；在11份标本中同时检测到IgG和IgM抗体，阳性率26.2%；检测到IgG或IgM抗体阳性的标本26份，阳性率61.9%，EHECO157LPS的检测发现，24份标本分别检测到IgG和IgM抗体，阳性率各为57.1%；在29份标本中检测到IgG或IgM抗体，阳性率69.0%;在20份标本中检测到IgG和IgM抗体，阳性率47.6%，在42份血清标本中同时检测到EHEC-Hly和O157LPS的特异性抗体的标本22份，阳性率52.4%；检测到EHEC-Hly或O157LPS的特异性抗体的标本34份，阳性率81.0%。结论 结合细菌学和血清学诊断结果，临床症状和流行病学分析。可以认为这些患者感染了EHECO157：H7，在分离不到病原菌的情况下，检测患者血清标本的EHEC-Hly和/或EHECO157LPS的特异性抗体，不失为一种可以考虑的诊断方法。     

徐州市2000年肠出血性大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻的调查

目的 了解徐州市丰县和铜山县肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7引起的出血性结肠炎（HC）在腹泻病患者中所占的比例，以及临床症状和肾功能变化的情况。方法 使用EHECO157胶体金快速检测试剂筛选粪便标本，阳性者使用免疫磁珠方法分离病原菌。对经过细菌学证实的EHECO157：H7引起的HC患者，进行临床症状的观察和生化检验指标分析。结果 2000年5月份，丰县由EHECO157：H7引起的HC占腹泻病患者0.98%，6月份铜山县的HC患者占腹泻病患者5.89%。在出现腹泻病症状的同时，18.5%患者的肾功能已经出现异常，表现为尿蛋白，血清肌苷或血尿素氮等指标的升高，在27例HC患者中，有14和13例分别分离到不产生志贺毒素和产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株，根据分离菌株是否产生志贺毒素将患者分为两组进行比较，尿蛋白阳性患者的比例分别为4/13和1/14，血小板减少患者的比例分别为6/13和3/14，统计学分析有显著意义。提示分离到产生志贺毒素的EHECO157：H7菌株的患者，发生肾功能异常的可能性较大，结论 此次调查证实了EHECO157：H7感染所引起的HC在整个腹泻病患者中所占的比例随季节的变化而不同，感染产生志贺毒素EHECO157：H7菌株的患者，发生肾功能异常的可能性要比不产生志贺毒素的大，还证实了在该菌感染的初期，患者的肾功能就已经出现了异常。     

大肠埃希菌O157:H7分离鉴定过程中赫尔曼埃希菌的鉴别

目的：鉴别大肠埃希菌O157：H7和赫尔曼埃希菌。方法：观察菌株在山梨醇麦康凯，营养琼脂及Chromagar O157培养基上菌落形态。生化试验检测菌株的生化特性，血清凝集试验检测菌株的O157和H7抗原，聚合酶链反应法检测O157和H7特异性基因。结果：在营养琼脂培养基上，5株赫尔曼埃希菌均产黄色色素，2株O157：H7菌不产色素；在Chromagar O157培养基上，2株O157：H7菌株呈紫红色，2株赫尔曼埃希菌株呈蓝色，其余3株赫尔曼埃希菌株呈黄绿色。O157：H7菌株KCN试验均为阴性，而赫尔曼埃希菌阳性。O157和H7抗血清坡片凝集试验，7析均为强凝集。O157：H7菌株与O157单克隆抗血清玻片凝集试验均为强凝集，而赫尔曼埃希菌均不凝集。O157：H7菌株O157和H7特异性基因均为阳性，赫尔曼埃希菌均为阴性。结论：赫尔曼埃希菌与O157多克隆抗血清有交叉反应，但单克隆抗血清能区分O157：H7和赫尔曼埃希菌。KCN试验和特异性基因检测亦能鉴别这两种菌。在营养琼脂和Chromagar O157培养基上的菌落形成也有助于两菌的区分。     

Hamburger-associated Escherichia coli O157:H7 infection in Las Vegas: a hidden epidemic.

OBJECTIVES: This study sought to determine whether a multistate fast food hamburger-associated outbreak of Escherichia coli O157:H7 infection involved Las Vegas residents as well and, if so, why public health officials had not detected it. METHODS: A matched case-control study was conducted among persons with bloody diarrhea and their healthy meal companions. Hamburger production, distribution, and cooking methods were reviewed. Unused hamburger patties were cultured, and E. coli O157:H7 isolates were characterized. Local laboratory stool culture practices were reviewed. RESULTS: Fifty-eight cases of bloody diarrhea were identified. Illness was associated with eating regular hamburgers (matched odds ratio [OR] = 9.0, 95% confidence interval [CI] = 1.02,433.4), but 25% of ill persons reported eating only jumbo hamburgers. Regular and jumbo hamburger patties yielded E. coli O157:H7 indistinguishable from the lone clinical isolate. No local laboratory cultured routinely for E. coli O157:H7 until after the outbreak. CONCLUSIONS: A large outbreak of E. coli O157:H7 infections escaped timely notice in Las Vegas because local laboratories did not culture for this pathogen. Health officials should encourage laboratories to screen at least all bloody stools on sorbitol-MacConkey medium.     

浙江省肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7动物宿主带菌情况调查

目的了解浙江省肠出血性大肠杆菌O157∶H7在动物宿主中的带菌情况。方法采集浙江省2006-2008年监测点的动物粪便进行病原菌培养和毒力基因及耐药性检测。结果共采集动物粪便3915份,检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7阳性20份,带菌率为0.51%,其中以羊和牛的带菌率最高,分别为1.46%和1.43%,散养动物带菌率高于圈养动物(χ2=5.771,P=0.016)。阳性菌株stx2、hly和eaeA3种毒力基因均呈阳性,stxl均呈阴性。对红霉素和利福平耐药,耐药率达90%以上,对其他受试抗生素敏感。结论浙江省动物宿主有一定的带菌率,且菌株具有毒力基因,散养动物的带菌率高于圈养动物,应进一步加强监测,防止O157∶H7引起人群的爆发流行。     

上海市闵行区家禽畜大肠杆菌O157∶H7带菌状况监测

[目的 ]　了解闵行区家禽畜中大肠杆菌O15 7∶H7的带菌情况。　 [方法 ]　对采集的禽畜粪便应用免疫磁珠富集分离法进行大肠杆菌O15 7∶H7分离和鉴定。　 [结果 ]　 3 5 4份样品中检出 2 2份大肠杆菌O15 7∶H7,检出率为6.2 1% ,经鉴定均非产毒株。　 [结论 ]　闵行区家禽畜粪便中大肠杆菌O15 7∶H 7检出率较高 ,应引起重视     

福建省O157大肠杆菌调查

目的 探索Ｏ１５７大肠杆菌在福建省人兽及食物中的存在情况,并了解这些检出菌的生物学特性。方法 １９９７～１９９８年选莆田、福州等地检查腹泻患粪便、畜食粪便标本及肉类标本２７２５份,以血清学方法检测Ｏ１５７大肠杆菌。结果 先从猪、鸽、牛、鸡、鸭等动物及腹泻中检出７６株Ｏ１５７大肠杆菌。据血清学及动力试验结果分类,３３株Ｏ１５７：Ｈ７,２１株Ｏ１５７：ＮＭ,２２株Ｏ１５７：Ｈ？,其中以猪检出率最高     

Detection of Escherichia coli O157:H7 and Listeria monocytogenes in beef products by real-time polymerase chain reaction

Rapid methods for the detection of Escherichia coli O157:H7 and Listeria monocytogenes in food products are important to the food industry and for public health. Conventional microbiological methods and newly developed molecular-based techniques such as polymerase chain reaction (PCR)-based methods are time consuming. In this study, a faster method based on utilization of a hybridization probe with real-time PCR, was developed and applied for detection of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes from artificially contaminated raw ground beef and fully cooked beef hotdogs. Target genes for E. coli O157:H7 and L. monocytogenes were rfbE and hylA, respectively. An analysis of 169 bacterial strains showed that the chosen primers and probes were specific for detection of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes by real-time PCR. The assay was positive for nine of 10. E. coli O157:H7 strains, and all L. monocytogenes (7/7) strains evaluated. Bacterial strains lacking these genes were not detected by these assays. Detection limits of real-time PCR assays ranged from 10(3) to 10(8) colony forming units (CFU)/ml for E. coli O157:H7 in modified tryptic soy broth and 10(4) to 10(8) CFU/mL for L. monocytogenes in Fraser Broth. Detection sensitivity ranged from 10(3) to 10(4) CFU/g of raw ground beef or hotdog without enrichment for E. coli and L. monocytogenes. Approximately 1.4-2.2 CFU/g of E. coli O157:H7 in raw ground beef were detected following an enrichment step of 4 h. Approximately 1.2-6.0 CFU/g of L. monocytogenes in beef hotdogs were detected following an enrichment step of 30 h. The real-time PCR assays for detection of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes in raw ground beef and beef hotdogs were specific, sensitive and rapid.     

不同来源产志贺毒素大肠埃希菌分布特征

目的探讨不同标本中产志贺样毒素大肠埃希菌（STEC）的分布特征。方法采集动物粪便、肉类食品和排污口污泥样品，常规分离大肠埃希菌，血清学分型，PCR鉴定产志贺样毒素（stx1，stx2）菌株。结果293份标本中鉴定出8株STEC，1株为产志贺毒素O157：H7型，2株为不产志贺毒素O157：H7型，5株为产志贺毒素非O157：H7型。结论STEC存在于不同来源的标本中，菌株表型与毒力因子存在一定差异。     

河南省睢县一起腹泻后并发急性肾功能衰竭爆发的调查

目的 调查大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻的分布特征，临床特点及家畜、家禽的带菌状况和外环境污染程度，方法 用现患调查方法，描述大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻的发病情况，分析引起流行的原因，用O157特异性筛查方法进行病原体分离培养，应用分子生物学，微生物学，细胞学技术进行病人，家畜、家禽的病原学分离，培养，毒素因子测定。结果 睢县是河南省首先发现的疫区，从3月17日至7月6日共发生病人35例，合并急性肾功能衰竭32例，死亡28例，病死率87.50%，60岁以上发病占91%；从家畜，家禽分离出107株O157：H7菌株，从腹泻病人中分离出48株；微生物学，分子生物学及细胞学技术鉴定67株具有毒素基因；显示有5个毒素因子组合型。结论 大肠埃希菌O157：H7感染性腹泻并发急性肾功能衰竭是病人死亡的主要原因，家畜、家禽的高速 菌率可通过污染水，食物传染给人，亦可通过蝇和日常生活接触感染，睢县疫情是一起大肠埃希菌O157：H7感染引起的溶血性尿毒综合征的爆发。