探针药物法评价柴胡生品及醋炙品对细胞色素P450酶的影响（英文）

目的：研究柴胡生品及醋炙品对细胞色素P450酶的影响。方法：采用多探针技术,应用高效液相色谱三重四级杆串联质谱（HPLC-MS/MS）测定连续给予7天柴胡生品或醋炙品前后大鼠血浆中相应的探针药物咪达唑仑、奥美拉唑、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、右美沙芬和咖啡因的浓度及其药代动力学参数。结果：连续7天给予柴胡生品或醋炙品后,咪达唑仑、氯唑沙宗和右美沙芬的血药浓度均显著下降,AUC和T1/2显著减小（P〈0.05）,清除率增大,而咖啡因的血药浓度无明显变化;连续7天给予柴胡生品后,奥美拉唑的消除明显加快,而连续7天给予柴胡醋炙品正常剂量后,奥美拉唑的代谢无明显变化;连续7天给予柴胡生品高剂量后,甲苯磺丁脲的代谢加快。结论：柴胡生品及醋炙品对CYP2E1、CYP2D6和CYP3A4均产生诱导作用,对CYP1A2不产生诱导作用;柴胡生品及醋炙品对CYP2C9和CYP2C19的影响存在差异,这种差异可能是柴胡经炮制后作用发生变化的原因。     

混合探针法评价天龙通心方对大鼠代谢酶活性的影响

目的为预防药物相互作用导致的临床合并用药隐患,初步探讨复方天龙通心方对大鼠体内药物代谢酶的影响。方法实验大鼠随机分为空白对照组和天龙通心组,连续灌胃给药14d后再给予CYP1A2(咖啡因)、CYP2C6(氯沙坦)、CYP2C11(奥美拉唑)、CYP2D2(右美沙芬)和CYP3A1/2(咪达唑仑)混合探针药,检测给药后不同时间点各探针药及其特异代谢底物的血药浓度,通过比较各探针药与代谢物药代动力学参数及代谢率(AUCmetablite/AUCprobe)变化,评价连续给予天龙通心方对大鼠体内CYP450代谢酶活性的影响。结果与空白对照组比较,连续给予大鼠天龙通心方后奥美拉唑峰浓度、体内暴露量均显著下降,代谢率明显升高,差异有统计学意义(P0.05);探针药咖啡因达峰时间显著推迟,代谢物和探针药AUC之比(AUCratio)下降30%,但差异无统计学意义(P0.05);咪哒唑仑及代谢产物1-羟基咪达唑仑达峰时间均延迟,而峰浓度、体内暴露水平均显著下降,原型药咪哒唑仑清除率显著升高。其他各组探针底物及其代谢产物主要药代动力学参数及代谢率差异均无统计学意义(P0.05)。结论重复给予复方天龙通心方对大鼠体内CYP2C11(人体CYP2C19)可能存在一定的诱导作用,而对CYP1A2、CYP2C6、CYP2D2和CYP3A1/2无显著影响,初步提示临床应用天龙通心方时应避免与经CYP2C19代谢的药物合并使用。     

中药复方双参宁心胶囊及其配伍组分对大鼠细胞色素P450酶的影响

目的：为预防药物相互作用可能导致的临床合并用药隐患,初步探讨中药复方双参宁心胶囊及其组方药物对大鼠细胞色素P450酶的影响。方法：30只大鼠随机分为空白对照组、丹参组、人参组、延胡索组及双参宁心组,每组6只,连续灌胃14d,给予大鼠混合探针药：咖啡因、氯沙坦、奥美拉唑、右美沙芬和咪达唑仑,分别对应大鼠体内5种CYP450s酶亚型CYP1A2、CYP2C6、CYP2C11、CYP2D2和CYP3A1/2。检测探针药及特异代谢物不同时间点的血药浓度,比较探针药及代谢物的药代参数及代谢率的变化,评价重复给予双参宁心胶囊对大鼠CYP450酶活性的影响。结果：与空白对照组比较,双参宁心胶囊和各组方药对5种探针药的体内代谢率均没有显著性影响。同时双参宁心组咖啡因代谢物PXT达峰时间显著推迟（P<0.05）,奥美拉唑的末端消除半衰期显著延后（P<0.05）,右美沙芬代谢物的峰浓度和AUC值显著增加（P<0.05,P<0.01）,这与人参和延胡索给药后趋势较一致;丹参组和延胡索组咖啡因表观分布容积均显著升高（P<0.01,P<0.05）;人参和延胡索组氯沙坦及其代谢...     

利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内CYP450亚酶的活性变化

目的:运用Cocktail探针法测定利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内6种细胞色素P450(CYP450)亚酶活性变化,从药物代谢相互作用的角度探寻抑郁症的发病机制。方法:建立利血平诱导的急性抑郁模型,大鼠随机分为空白组(记为A组),模型组(记为C组)和西药文拉法辛组(记为H组),适应1星期后,H组连续给药2周,A组和C组给予清水2周,第21天C组和H组按4 mg·kg~(-1)腹腔注射利血平注射剂,A组注射等体积生理盐水,第22天禁食不禁水12 h,第23天各组大鼠按10 m L·kg~(-1)灌胃给予混合探针药物。选取茶碱、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲、右美沙芬、奥美拉唑以及咪达唑仑作为大鼠CYP1A2,CYP2C6,CYP2D1,CYP2D2,CYP2E1和CYP3A2的探针底物,采用LC-MS/MS测定大鼠体内6种混合探针的血药浓度,计算药动学参数。结果:造模后甲苯磺丁脲在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢;咪达唑仑在大鼠体内浓度显著降低、代谢加快。给予抗抑郁文拉法辛后,茶碱、氯唑沙宗和咪达唑仑在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢。结论:利血平诱导的急性抑郁模型状态对大鼠CYP2D1和CYP2D2有中强抑制作用,对CYP3A2有中强诱导作用;给予文拉法辛后对模型大鼠CYP1A2,CYP2C6,CYP2E1,CYP3A2为中强抑制作用。     

单次不同剂量PEG400对大鼠体内细胞色素P450 3A活性的影响

 目的研究单次不同剂量聚乙二醇(PEG)400对大鼠体内细胞色素P4503A活性的影响。方法以咪哒唑仑为探针,HPLC测定咪哒唑仑及其代谢物1′-羟基咪哒唑仑在大鼠体内的血药浓度并计算其药动学参数,以不同剂量PEG400处理组与阴性对照组的AUC_0-4h比值为指标,研究它们对大鼠体内细胞色素P4503A药酶活性的影响。结果与生理盐水组相比,PEG400(15mg·kg^-1)、PEG400(60mg·kg^-1)分别显著增加咪哒唑仑AUC_0-4h 1.98,1.75倍(P<0.05),显著降低1′-羟基咪哒唑仑与咪哒唑仑AUC_0-4h的比值,分别从1.09降至0.26和0.28(P<0.05)。结论两种剂量PEG400对CYP3A均有明显的抑制作用。     

胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学

目的：研究胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠单剂量静注给予胡黄连苷Ⅱ后，采用HPLC-MS法测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液及胆汁中的胡黄连苷Ⅱ。色谱柱为Hypersil ODS2柱，（5μm，150mm×4．6mm），流动相为甲醇：水（47：53），内标为替硝唑。ESI选择正离子检测：检测离子为[M＋Na]^＋m/z535．00（胡黄连苷Ⅱ）、[M＋H]^＋m／z247．90（内标）。结果：血浆样品中，胡黄连苷Ⅱ的线性范围为0．05．20．0μg·mL^-1（r=0.9998）；各浓度的提取回收率均大于76％；最低定量限为0．05μg·mL^-1。静注给予2.5、5.0、10.0mg·kg^-1后，大鼠体内胡黄连苷Ⅱ浓度快速降低，平均消除半衰期仅为19．6min。AUC与剂量呈现良好的线性相关性，提示胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的处置属于线性动力学。静脉注射给药后胡黄连苷Ⅱ广泛分布于各组织，其中肾和肝组织中浓度最高。胡黄连苷Ⅱ主要通过尿液和胆汁排泄，在尿液中的平均累积排泄百分率为11．79％；胆汁中平均累积排泄百分率为7．80％；粪便中未检测出胡黄连苷Ⅱ。胡黄连苷Ⅱ平均血浆蛋白结合率为30．0％。结论：静注给药后，胡黄连苷Ⅱ迅速从大鼠体内消除，并可在体内广泛分布。有约19．59％以原型形式从胆汁和尿液排泄。     

黄芩提取物对细胞色素P450酶的影响

目的:研究黄芩提取物对大鼠细胞色素P450同工酶CYP1A2,CYP3 A4,CYP2E1,CYP2C19活性的影响.方法:建立同时测定大鼠血浆中4种探针药物的高效液相色谱方法,用Cocktail探针药物法,将雄性SD大鼠随机分为2组,给药组灌胃给予黄芩提取物混悬液,对照组灌胃给予相同剂量的生理盐水.给药10 d后尾静脉注射4种探针药物,眼眶取血,通过测定4种探针药物的代谢以评价CYP1 A2,CYP3A4,CYP2E1,CYP2C19的活性,采用Kinetica5.0计算药代动力学参数.结果:4种探针药物的T1/2较对照组均有增加,其中氨苯砜、氯唑沙宗和奥美拉唑的T1/2增加显著;氨苯砜、氯唑沙宗和奥美拉唑的MRT0→∞均有增加,其中氯唑沙宗和奥美拉唑的MRT0→∞增加显著.结论:黄芩提取物对CYP1A2,CYP3 A4,CYP2E1,CYP2C19均有抑制作用,其中对CYP3A4,CYP2E1,CYP2C19抑制作用显著.     

疏血通注射液对大鼠细胞色素P450酶6种亚型活性的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究疏血通注射液对大鼠细胞色素P450酶(CYP450)6种亚型活性的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分组,实验组给予疏血通注射液,空白组给予生理盐水,诱导7 d,分别以咖啡因、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔、氯唑沙宗、氨苯砜作为CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A1/2的探针药物。HPLC法检测探针药物的血药浓度,DAS软件估算药动学参数。结果与空白组相比,咖啡因和氨苯砜的t1/2、AUC0-t、AUC0-∞均显著增大,CL/F显著降低(P<0.05);氯唑沙宗的AUC0-t、AUC0-∞显著降低,CL/F显著增大(P<0.05);而甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔的药代动力学参数无显著性差异。结论疏血通注射液对大鼠CYP1A2、CYP3A1/2亚型的活性有抑制作用,能诱导CYP2E1亚型的活性,而对CYP2C9、CYP2C19和CYP2D6亚型的活性无显著影响。     

CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4探针间的药动学相互作用

目的 研究茶碱、氯唑沙宗和氨苯砜在大鼠体内的药动学相互作用,以评价3药作为Cocktail探针的可行性.方法 21只大鼠随机均分成3组,分别单独灌胃给予茶碱(30 mg·kg-1)、氯唑沙宗(50 mg·kg-1)和氨苯砜(20mg·kg-1),用HPLC测定各组大鼠的血药浓度;经过14d的清洗期和恢复期后,以相同的给药剂量,3组大鼠均同时灌胃给予3个探针药物,用HPLC法同时测定大鼠体内3个探针底物的血药浓度,DAS2.0软件计算药动学参数.结果 大鼠单独和同时给予茶碱、氯唑沙宗和氨苯砜后,各探针的t1/2、AUC、CL和Cmax等药动学参数在统计学上均无显著性差异(P>0.05).结论 茶碱、氯唑沙宗和氨苯砜在同时给药时,彼此之间不会发生药动学上的相互作用,可作为Cocktail探针分别用于评价药物对CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响.     

参麦注射液对大鼠细胞色素P450酶亚型活性的影响

目的用Cocktail探针药物法研究参麦注射液对大鼠细胞色素P450酶(CYP450)6种亚型活性的影响。方法将SD大鼠随机分组,实验组ip给予参麦注射液(10 m L/kg),对照组ip给予等量生理盐水,诱导7 d,分别以非那西丁、安非他酮、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔和咪达唑仑作为CYP1A2、CYP2B1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的探针药物。UPLC-MS/MS法检测大鼠血浆中探针药物的血药浓度,采用DAS3.0软件估算药动学参数。结果与对照组相比,非那西丁、安非他酮和奥美拉唑的AUC0~∞、CL和Cmax显著降低(P0.05),甲苯磺丁脲、美托洛尔和咪达唑仑的AUC0~∞、CL和Cmax无显著性差异。结论参麦注射液对大鼠CYP1A2、CYP2B1和CYP2C19亚型的活性有明显的抑制作用,而对CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4亚型的活性无显著性影响。     

血栓通注射液对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

 目的 用Cocktail探针药物法,研究血栓通注射液对大鼠肝细胞细胞色素P450（CYP450）的影响。方法 分别以茶碱、氯唑沙宗和咪哒唑仑作为CYP1A2,CYP2E1及CYP3A4的探针药,将大鼠随机分为低剂量和高剂量两组,每日尾静脉注射血栓通注射液,采用高效液相色谱法测定连续使用血栓通注射液前后大鼠血浆中相应的探针药物的浓度及其药动学参数。结果 连续注射14 d后,与用药前比较,茶碱、氨苯砜的血药浓度及其药动学参数未见显著性改变;但低剂量组和高剂量组中氯唑沙宗的AUC_0-t减少,ρ_max明显降低,CL/F显著增加,t1/2和V_d/F变化不明显。高剂量组中tmax有所降低(P<0.05)。结论 连续注射血栓通注射液14 d后,对CYP2E1酶活性有显著诱导作用,而对CYP3A4、CYP1A2酶活性无影响。     

扶正化瘀方对正常及肝纤维化大鼠体内CYP450酶的影响

使用Cocktail探针药物法,研究扶正化瘀方(FZHY)对正常和肝纤维化大鼠细胞色素P450(CYP450)5种同工酶的影响。正常和二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)腹腔注射诱导的肝纤维化模型大鼠,以FZHY浸膏粉连续灌胃2周后,单剂量尾静脉注射由CYP450 5种同工酶的特异性探针底物非那西丁(CYP1A2)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、奥美拉唑(CYP2C19)、氢溴酸右美沙芬(CYP2D6)和咪达唑仑(CYP3A4)配置的Cocktail探针溶液后,通过建立的LC-MS/MS法同时检测血浆中5种探针药物的浓度,采用PK solution 2TM对数据进行处理,并计算主要药动学参数。正常大鼠灌胃FZHY后,非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑和氢溴酸右美沙芬的AUC0-t均出现不同程度的增加,CL也均出现降低趋势,提示FZHY能明显抑制正常大鼠CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6的活性,但对CYP3A4的活性影响不明显;肝纤维化大鼠灌胃FZHY后,甲苯磺丁脲的AUC0-t显著增加,Vd显著降低,其他4种探针药物的药动学参数未见显著改变,提示在肝纤维化大鼠体内FZHY仅对CYP2C9有抑制作用,对CYP1A2,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A4活性影响不明显。CYP450酶在肝纤维化条件下活性的改变可能是FZHY对正常和肝纤维化大鼠CYP450酶影响不同的原因。     

Effects of unprocessed versus vinegar-processed Schisandra chinensis on the activity and mRNA expression of CYP1A2, CYP2E1 and CYP3A4 enzymes in rats

Ethnopharmacological relevance

Schisandra chinensis (SC) is a well-known traditional Chinese herbal medicine that has been used in clinical practices for thousands of years. However, the differences between the effects of unprocessed and vinegar-processed Schisandra chinensis (VSC) on cytochrome P450 (CYP450) activities are poorly understood.

Aim of the study

To evaluate the differences between processed and unprocessed SC on the metabolism of CYP1A2, CYP2E1 and CYP3A4 substrates in rats using a cocktail method based on a developed and validated HPLC method. We also investigate the influence of processing on the levels of CYP mRNA.

Materials and methods

Three probe substrates (theophylline, dapsone and chlorzoxazone) were delivered simultaneously into rats treated with single or multiple doses of processed or unprocessed SC extract. The plasma concentrations of the three probes were profiled by HPLC, and their corresponding pharmacokinetic parameters were calculated. Real-time RT-PCR was performed to determine the effects of processed and unprocessed SC on the mRNA expression of CYP1A2, CYP2E1 and CYP3A4 in the liver.

Results

Treatment with single or multiple doses of either extract of SC induced CYP3A4 enzyme activity and inhibited CYP1A2 enzyme activity in rats. Furthermore, the inhibitory effect of SC was more potent after vinegar processing than without vinegar processing. CYP2E1 enzyme activity was induced after treatment with a single dose but was inhibited after multiple doses. The mRNA expression results were in accordance with the pharmacokinetic results.

Conclusions

These results provide useful scientific data for the safe clinical application of either extract of SC in combination with other drugs, which should lack the side effects induced by other herb–drug interactions.     

大明胶囊对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

 目的用Cocktail探针药物法研究大明胶囊对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响。方法将大鼠随机分组,低剂量和高剂量组分别给予大明胶囊50、100 mg·kg-1,空白对照组给予生理盐水,通过HPLC测定探针药物的血药浓度并计算其药动学参数,评价大明胶囊对相应大鼠细胞色素P450酶活性的影响。结果低剂量和高剂量组中美托洛尔、氯唑沙宗和甲苯磺丁脲的药动学参数与空白对照组相比无显著性差异;高剂量组中咖啡因和奥美拉唑AUC,t1/2,ρmax显著增加,Vd/F和CL/F明显降低,tmax无明显变化,低剂量组各参数与空白对照组无显著性差异;低剂量和高剂量组中氨苯砜AUC,t1/2,ρmax显著增加,Vd/F和CL/F明显降低,tmax无明显变化。结论大明胶囊对大鼠CYP3A4有抑制作用,对CYP2C9、CYP2D6和CYP2E1无显著影响,高剂量大明胶囊对CYP1A2和CYP2C19有抑制作用,低剂量则无明显影响。     

Cocktail探针药物法评价半夏泻心汤及不同配伍组对CYP450酶活性的影响

目的:采用Cocktail探针药物法研究半夏泻心汤及不同配伍组对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响.方法:大鼠连续7d灌胃半夏泻心汤全方组,甘补组,苦降组和辛组的煎煮液(15 mL·kg-1)后尾静脉注射Cocktail探针药物咖啡因(CYP1A2)、甲苯磺丁脲(CYP2C6)、氯唑沙宗(CYP2E1)、咪达唑仑(CYP3A1/2).建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中4种探针药物的浓度,DAS 2.0软件计算其药动学参数.结果:与空白组相比,全方组中甲苯磺丁脲的AUC0-24h值明显增大,CL显著减小,说明全方组对大鼠体内CYP2C6起抑制作用,而氯唑沙宗的AUC明显减少,CL增大,说明对CYP2E1起诱导作用;而对CYP1A2,3A1/2无显著性差异.同理,辛开组仅对CYP2C6起抑制作用,对其他的亚型酶无显著性差异;苦降组对CYP1A2,CYP2C6具有显著抑制作用,对CYP2E1有诱导作用,而对CYP3A1/2无显著性差异;甘补组对CYP1A2,CYP2E1有诱导作用,抑制CYP2C6,而对CYP3A1/2亦无显著性差异.结论:半夏泻心汤及不同配伍组对肝脏CYP450酶的活性影响不同,为阐明半夏泻心汤组方配伍的规律用以推测其在联合用药中可能发生的药物相互作用,指导临床合理用药.     

奥美拉唑对多潘立酮在大鼠体内药动学的影响

 目的 研究奥美拉唑对多潘立酮在大鼠体内药动学的影响。方法 10只健康雄性Wistar大鼠随机分成2组（分别为单独和联合给药组,用LC-MS/MS测定血浆中多潘立酮的浓度。结果 单独用药与联合用药组t_max分别为（0.80±0.11, （1.20±0.45 h, ρ_max分别为（103.0±26.6,（72.6±9.23 μg·L-1,均具有显著性差异(P<0.05,其他药动学参数无显著性差异(P>0.05。结论 联合用药后奥美拉唑延缓了多潘立酮的吸收速度。