白细胞介素6受体的β亚单位基因和蛋白在人白血病细胞中的表达

细胞因子 受体系统介导的靶向杀伤作为新一代导向治疗策略的创立已经引起临床血液学及肿瘤治疗学研究者的极大关注[1] 。我们先前的动物实验结果业已证明 ,重组白细胞介素 6 (ＩＬ 6 ) ＰＥ40外毒素融合蛋白能高度特异性地杀伤高表达人ＩＬ 6受体 (ＩＬ 6Ｒ)的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病细胞 ,明显延长白血病大鼠的生存期 ,而对正常造血细胞无不良反应[2 ,3] 。新近我们的研究结果则显示 ,粒、单、红白血病细胞不但高表达ＩＬ 6Ｒα亚单位的基因和蛋白 ,而且还高表达高亲和力ＩＬ 6Ｒ。鉴于ＩＬ 6Ｒ的 β亚单位在高亲和力ＩＬ 6Ｒ…     

TPA对人白血病传代细胞系中IL-1βmRNA表达的影响

白细胞介素(IL)-1β不仅对免疫系统,而且对造血、神经、内分泌等多个系统发挥多种生物学效应,是一个在机体防御方面起中心作用的细胞因子。IL-1β的异常表达往往与某些疾病密切相关,尤其在白血病的发生、发展中起着重要的作用。我们研究了乙酰豆寇佛波酯(TPA)对人单核细胞白血病传代细胞系U937细胞、人红白血病传代细胞系K562细胞、人T淋巴细胞白血病传代细胞系MT-2细胞中IL-1βmRNA表达的影响,从而探讨IL-1β与白血病细胞分化的相关性。材料和方法     

重组人白细胞介素6在CHO—dhfr^—1中的稳定表达

将含重组人ＩＬ－６ｃＤＮＡ的真核细胞高效表达载体,通过脂质体介导,共转染至ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞中,经选择性培养基培养,氨甲喋呤加压诱导,细胞染色体ＤＤＡｄｏｔｂｌｏｔ鉴定,筛选出能表达ｒｈＩＬ－６的细胞株。     

白细胞介素—6受体亚单位gp80和gp130在骨质疏松症中的基因表达

目的 观察骨质疏松症骨髓白细胞介意—6(IL-6)受体(IL-6R)亚单位gp80和gp130基因表达的变化，探讨IL-6R复合系统在雌激素缺乏所致骨质硫松中的作用。方法 12周龄雌性SD大鼠20只[体重(200&;#177;20)g]随机分为骨质疏松组(10只)和空白对照组(10只)。分别于造模后0、12周，测定大鼠骨髓gp80和gp130 mRNA水平。结果 gp130mRNA水平(pg/μg total RNA)；术后0、12用空白对照组无明显变化[(80&;#177;3)和(82&;#177;4)，t＝0．85，P＞0．05]，骨质疏松组明显增加[(80&;#177;3)和(290&;#177;40)，t=6．46，P＜0.01]。gp80mRNA水平(pg/μg total RNA)：术后O、12周空白对照组无明显变化增加[(85．4&;#177;2．7)和(85．6&;#177;2．8)，t=0.35,P&;gt;0.05]，骨质疏松组明显增加[(85．2&;#177;2.7)和(210&;#177;40)，t＝6．32，P＜O．01]。结论 卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓IL-6R亚单位gp80和gp130基因表达增加。     

肺癌病人外周血IL—6、TNF—α和T细胞亚群活性的研究

我们联合测定了肺癌病人血中IL- 6、TNF- α和T细胞亚群以观察肺癌病人机体免疫功能状态,为肺癌的免疫调节治疗提供理论依据。1 材料与方法1．1 病例选择 肺癌组40例,男26例,女14例,年龄26~72岁,平均61.4岁。均经病理或细胞学检查证实。按THM分期：Ⅰ、Ⅱ期患者18例;Ⅲ、Ⅳ期患者22例。对照组30例为健康献血员。1.2 检测方法 肺癌组及对照组均采血8ml,4ml放入抗凝瓶中用流式细胞分析法测定T细胞亚群,流式细胞仪为美国Coulter公司生产ELITE型。另外4ml离心后取血清用ELISA方法测定IL-6及TNF-α,IL-6试剂盒为比…     

急性淋巴细胞白血病患者糖皮质激素受体及其mRNA水平与预后的关系

急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者白细胞糖皮质激素受体(GR)及其mRNA水平与近期疗效的关系已有较多的临床报道 ,一般认为GR水平与近期疗效呈正相关。但GR水平与长期存活的关系一直未见明确的临床报道。我们采用放射配体结合分析法和以人GRcDNA为探针的分子杂交技术 ,对2 9例ALL患者白细胞GR及其mRNA含量与近期疗效以及长期存活的关系进行了对比观察 ,并对这 2 9例患者的预后进行了跟踪随访 ,现将观察及随访结果报告如下。病例和方法1　病例资料　 2 9例ALL均为我院 1986年 1月～ 1990年 6月的住院患者。按FAB分型标准诊断。其中初…     

端粒酶催化亚单位表达与急性淋巴细胞白血病预后的关系

端粒酶是一种核蛋白质复合体 ,主要由ｈＴＥＲＴ、ｈＴＲ和端粒酶相关蛋白三部分组成。 1997年ｈＴＥＲＴ基因被克隆[1] 。研究表明ｈＴＥＲＴ与端粒酶活性密切相关 ,ｈＴＥＲＴ是控制人细胞端粒酶活性的限速成分[2 ,3 ] ,在肿瘤发生、发展中起重要作用。我们对小儿急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ)ｈＴＥＲＴ基因表达进行了观察 ,现报道如下。对象和方法1　研究对象　 1999年 8月～ 2 0 0 1年 5月我院小儿血液肿瘤科收治的ＡＬＬ病例 ,除外取血前 1周内输过血的患儿及合并有其他肿瘤的患儿。初治ＡＬＬ 35例 ,男 2 3例 ,女 12例 ,年龄5个月～ 1…     

急性白血病患者血清IL-6的测定及意义

白细胞介素 6 (ＩＬ - 6 )在某些肿瘤细胞形成和分化过程中起着重要作用[1] 。我们采用了双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)检测了 4 6例急性白血病患者血清ＩＬ - 6水平 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　病例　急性白血病患者 4 6例 ,男 2 5例 ,女 2 1例 ,年龄 1     

过敏性哮喘外周血细胞因子白细胞介素2、白细胞介素6及其受体的测定和临床意义

目的　动态检测过敏性哮喘外周血血浆中白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 6(IL 6)及其受体 (IL - 2R、IL - 6R)的变化 ,探讨其在哮喘中的作用。方法　采用间接荧光标记、流式细胞仪和酶联免疫夹心法 (ELSA)进行表型及定量分析。结果　过敏性哮喘急性发作期外周血血浆中IL 2、IL 6及其可溶性受体皆升高 (P <0 .0 1) ,至缓解期也未恢复至正常范围 ;膜型白细胞介素 2受体 [mIL 2R ,即白细胞相关抗原 (CD2 5 ) ]在各期均无变化。结论　IL 2、IL 2R、IL 6、IL 6R参与了哮喘的发生、发展 ,动态观察有助于病情评估 ,同时提示哮喘患者缓解期气道炎症仍持续存在     

转铁蛋白受体mRNA在MEL细胞中表达的调节

转铁蛋白受体(TfR)的主要功能是调节细胞的铁摄取量。它的表达除受细胞内铁含量影响外,在红系细胞还与血红素的合成和细胞的增殖状态有关,但在非红系细胞,则仅与细胞的增殖状态相关。本实验通过对小鼠红白血病(MEL)细胞在二甲基亚砜(DMSO)诱导分化前后、不同的铁状态和不同的血红素合成条件下,采用Northern印迹方法,观察TfR mRNA含量的变化。结果为:①在未诱导的MEL细胞,随着细胞的增殖,TfR mRNA含量增加;诱导的MEL细胞,虽然随着细胞分化成熟而丧失增殖能力,但当存在血红素合成时,TfR mRNA含量也增高,且增高幅度较非诱导组高。②在未诱导的MEL细胞,降低细胞内铁含量(培养液中加入去铁胺式抗TfR单克隆抗体),可刺激TfR mRNA表达;增加细胞内铁含量(培养液中加入转铁蛋白),则抑制TfR mRNA的表达;在诱导的MEL细胞,采用相同条件的铁状态时,细胞内TfR mRNA水平发生类似的改变,但变化的程度较小。③在未诱导的MEL细胞,加入血红素合成抑制剂(培养液中加入异烟肼),不改变TfR mRNA的表达;在诱导的MEL细胞,血红素合成抑制剂既抑制红系细胞的分化,也抑制TfR mRNA的表达。④当培养液中加入EPO,则促进诱导的MEL细胞内TfR mRNA的表达。上述结果提示,在红系细胞,TfR mRNA的表达除受细胞内铁调节外,也受细胞内血红素合成的     

逆转录病毒IL-6/IL-2融合蛋白载体构建及其对K562细胞诱导分化作用

我们在构建的人重组ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合蛋白 (ＣＨ92 5 ) [1,2 ] 基础上 ,构建了逆转录ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ融合基因载体 ,并转染Ｋ5 6 2细胞 ,进行ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因对Ｋ5 6 2细胞系增殖、分化调控作用的研究 ,探讨其在慢性粒细胞白血病诱导分化治疗中的应用前景和意义 ,现将有关实验研究结果报告如下。材料和方法1　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ构建　逆转录病毒载体ＬｈＩＬ 6 /ＩＬ 2ＳＮ包含ＩＬ 6 /ＩＬ 2融合基因和一个新霉素抗性(Ｎｅｏ)基因。使用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ从ｐｆＩＬ 6 /ＩＬ 2质粒消…     

内毒素致伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6的mRNA表达及NF-IL6活化研究

目的：研究内毒素（LPS）致伤大鼠肺组织致炎因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）]的mRNA表达以及核转录因子NF-IL6活化情况,探讨这两种致炎因子在肺损伤及全身炎症反应综合征中的作用及其转录调控机制。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）和凝胶阻滞电泳迁移率变动检测技术（EMSA）,检测不同剂量LPS致伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6的mRNA表达和NF-IL6活性。结果：随着LPS剂量增加,TNF-α、IL-6mRNA表达增强表达峰值时间;TNF-α为1小时、IL-6为4小时。低剂量LPS对NF-IL6有弱的激活作用,6mg/kg以上较大剂量LPS可明显诱导NF-IL6活化;NF-IL6活化高峰在TNF-αmRNA峰值同时或其后出现。结论：内毒素致肺损伤中,TNF-α是早期表达的致炎细胞因子,而IL-6对炎症进一步发展起一定作用。NF-IL6对损伤早期的TNF-α转录并不起主要作用。但对IL-6表达增高有一定调控作用。     

急性白血病病人sIL-2R、IL-6水平和细胞免疫功能的研究

本研究检测了急性白血病病人血清中可溶性IL-2R(sIL-2R)、IL-6的水平与T细胞亚群、NK细胞活性的变化，探讨两的临床应用价值及相互关系。     

IL—6及其受体对MM细胞生长的作用机理研究进展

ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ在多发性骨髓瘤（ＭＭ）发病中的作用非常关键。本文对ＩＬ－６的来特别病毒ＩＬ－６的来源,ＩＬ－６Ｒ特性,Ｋ ａｐｏｓｉ肉瘤相关疱疹病毒感民ＭＭ的关系,以及ＩＬ－６对ＭＭ细胞的作用机理等研究进展作一综述。     

抑癌基因PTEN mRNA在白血病细胞中的表达及意义

目的了解白血病细胞中PTEN基因的表达情况及其与临床的关系。方法采用RT-PCR法检测5个白血病细胞系,31例慢性粒细胞白血病(CML),87例初诊急性白血病(AL)[包括59例急性髓系白血病(AML),26例急性淋巴细胞白血病(ALL),2例急性混合细胞白血病],21例完全缓解期急性白血病(AL-CR)患者骨髓标本中PTEN mRNA表达情况,并分析了与临床指标的相关性。结果PTEN基因在K562细胞中有表达,而在Kasum i-1、HL-60、U937、Nalm-1细胞中均无表达。CML组阳性率(61.29%)与正常对照组(78.57%)相比,差异无统计学意义(P>0.05),AL组和AL-CR组阳性率(分别为18.29%和42.86%)均低于正常水平(P<0.01和P<0.05),AL组阳性率又低于AL-CR组(P<0.05)。PTEN基因的阴性表达与外周血高白细胞计数(≥20×109/L)、染色体异常呈显著的正相关。结论AL患者存在PTEN基因的表达缺失,PTEN基因在AL的发病中可能起一定作用。     

急性髓系白血病细胞p16基因结构及mRNA表达分析

为了解p16基因在急性髓系白血病(AML)发病中的意义,用PCR-SSCP和Northern blot方法分析了16例AML细胞p16基因结构及mRNA的表达。研究结果表明,16例未发现p16基因的缺失、突变。初治和复发的12例AML的p16 mRNA表达水平明显低于4例长期缓解者及正常对照者。1例p53突变AML的p16 mRNA有明显升高,提示p16基因在AML发病中可能不占重要地位,而在AML细胞抑制正常造血的逐步恶化中起一定作用,在p53突变时,其表达反馈性升高显示一种反馈环路失衡。     

CXC亚家族趋化因子受体-4在急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨急性白血病（AL）细胞上CXC亚家族趋化因子受体-4（CXCR4）的表达及临床意义。方法采用四色流式细胞仪检测33例AL患者和7例正常对照者骨髓单个核细胞（BMMNC）表面CX—CR4的表达情况，并分析其与临床表现及疗效的关系。结果AL患者CXCR4的表达水平明显高于正常对照组（P〈0．01）；急性淋巴细胞白血病（ALL）的表达又高于急性髓细胞白血病（AML）（P〈0．01）。髓外浸润组CXCR4表达高于无髓外浸润组（P〈0．05）。CXCR4的高表达组髓外浸润发生率高于CXCR4低表达组（P〈0．05）。CXCR4的高表达且外周血白细胞（WBC）增高组髓外浸润的发生率最高，CXCR4低表达且WBC不增高髓外浸润组的发生率最低（P〈0．05）。化疗敏感组CXCR4的表达低于耐药组（P〈0．05）。结论AL患者的BMMNC存在着CXCR4的高表达，不同类型的AL患者CXCR4的表达存在差异，ALL表达高于AML。AL患者CXCR4高表达且WBC增高预示髓外浸润的可能性大。AL患者CXCR4的高表达预示白血病细胞对化疗不敏感，是判断预后的指标之一。     

反转录聚合酶链式反应法检测端粒酶催化蛋白亚单位mRNA

目的：研究端粒酶催化蛋白亚单位（hTERT)mRNA在肿瘤组织中的表达情况,建立一种恶性肿瘤诊断的新方法。方法：提取肿瘤组织总RNA,用反转录聚合酶链式反应（RT－PCR）法进行检测。结果：76例各型肿瘤组织中66例阳性,5例恶性胸腹水全部阳性。结论：RT－PCR法检测hTERTmRNA是一种灵敏、简便的恶性肿瘤辅助诊断的新方法。     

急性白血病患者血清TNF—α，IL—6的含量及临床意义

细胞因子是体内细胞之间相互作用的主要介质 ,能调节细胞的分化和增殖。现已了解许多细胞因子参与肿瘤的发生和发展。为探讨细胞因子 TNF- α和 IL- 6在急性白血病中的作用 ,我们用放射免疫分析法 (RIA)对 2 9例急性白血病患者外周血血清 TNF-α和 IL - 6水平进行动态检测 ,并与临床资料进行分析 ,探讨其在急性白血病的发生和发展过程中所起的作用及临床意义。1　资料和方法1.1　对象　初治急性白血病 2 9例来自本院病房住院及门诊患者 ,其中男 18例 ,女 11例 ,年龄 15～ 70岁 ,中位年龄 35岁。诊断按 1986年全国白血病诊断分型标准 […