急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植的研究

目的探讨外周血中调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植失败之间的相关性。方法用双荧光标记流式细胞分析技术,检测20例原因不明反复体外受精-胚胎移植失败患者、20例正常非孕妇女及18例第一周期体外受精-胚胎移植成功妇女外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的水平。结果反复体外受精-胚胎移植失败患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的百分率分别为（7．89±1．16）%和（1．06±0．33）％,低于正常非孕组的（11．73±1．05）％（P〈0．01）和（1．36±o．53）％（P〈0．05）,也低于第一周期体外受精-胚胎移植成功组的（9．67±1．87）％（P〈0．05）和（1．39±0．37）％（P〈0．05）。结论外周血中调节性T细胞的减少可能与反复体外受精-胚胎移植失败的发生有关。     

CD28分子在系统性红斑狼疮患者Tc/Ts淋巴细胞上异常表达的研究

目的：研究CD28^＋、CD8^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^-淋巴细胞在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞中的表达情况.方法：应用CD3CD4CD8三标抗体和CD8CD28双标抗体对SLE患者淋巴细胞进行标记,用流式细胞仪测定CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD28^＋、CD8^＋CD28^＋和CD8^＋CD28^-淋巴细胞的表达.结果：SLE患者外周血CD3^＋淋巴细胞明显高于健康对照组（P＜0.05）.CD4/CD8T淋巴细胞比例明显倒置（P＜0.01）,CD3^＋CD8^＋淋巴细胞比健康对照组显著增加（P＜0.01）,其中以CD8^＋CD28^-的T淋巴细胞增加为主（P＜0.01）,而CD8^＋CD28^＋淋巴细胞增加不明显（P＞0.05）,SLE患者外周血CD28^＋T淋巴细胞比健康对照组明显降低（P＜0.05）.结论：SLE患者存在明显的T细胞功能失调.CD28^＋、CD8^＋CD28^＋（Tc）、CD8^＋CD28^-（Ts）T淋巴细胞在SLE的发病机制和组织损伤中起重要作用.     

协同刺激分子CD28/CTLA-4:B7在胃癌患者中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4，CD152）及B7分子的表达水平，以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、CD152、CD3、CD4、CD8及B7分子的表达，并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较。结果胃癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋、CD3^＋CD28^＋、B7-1（CD80）、B7～2（CD86）的表达水平及CD4^＋／CD8^＋低于健康对照组及良性肿瘤组，CD3^＋、CD152^＋和CD8^＋水平显著增高。结论胃癌患者外周血淋巴细胞低表达CD28和B7分子，高表达CTLA-4分子，导致了胃癌患者B7：CD28／CTLA-4共刺激通路异常，影响了T细胞彻底清除肿瘤细胞，从而使肿瘤逃避机体的免疫监视、免疫抑制，发生转移。     

类风湿关节炎患者外周血CD23^＋／CD19^＋细胞表达状况的研究

目的研究外周血CD19^＋及CD23^＋／CD19^＋细胞的表达在类风湿关节炎（RA）发病机制和病情进展中的意义。方法RA组和正常对照组各20例,应用流式细胞术检测外周血中CD19^＋及CD23^＋／CD19^＋细胞的表达率,比较两组的差异,并分析其与血沉（ESR）、C反应蛋白（CRP）的相关性。结果RA组外周血CD19^＋及CD23^＋／CD19^＋细胞表达率均高于对照组,（10．236±2．212）％vs（6．870±1．052）％,（5．134±1．069）％vs（2．100±0．652）％（P〈0．05或〈0．01）。CD23^＋／CD19^＋细胞的表达率与实验室指标ESR、CRP均呈正相关（P〈0．01）,CD19^＋细胞表达率与ESR、CRP无明显相关关系（P〉0．05）。结论RA患者外周血存在CD19^＋及CD23^＋／CD19^＋细胞的表达增高,检测CD23^＋／CD19^＋细胞的表达情况可能对RA病情监控具有一定的应用价值。     

胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28表达的检测及临床意义

目的探讨胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28的表达及其临床意义。方法用三色荧光标记流式细胞术检测48例胃癌患者肿瘤组织及切缘组织的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）。结果肿瘤组织TlLCD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞明显低于切缘组织（P〈0．01），CD8＋CD28-细胞则无统计学意义。肿瘤患者淋巴结转移后肿瘤组织TILCD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞明显低于未转移组（分别为P〈0．01，P〈0．05），CD8＋CD28-细胞差异无统计学意义。随着临床分期的进展，CD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞逐渐减少，其中CD8-CD28＋细胞临床期明显高于临床Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期（P〈0．05）；CD8＋CD28＋细胞临床Ⅰ期、Ⅱ期明显高于Ⅲ期、Ⅳ期（P〈0．05）；而CD8＋CD28-细胞差异无统计学意义。结论检测胃癌患者的TIL中的CD8和CD28的表达，对了解患者的免疫状况、疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值。     

大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-调节性T细胞的含量及临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-调节性T细胞（Treg）的变化及意义。方法流式细胞术检测36例大肠癌患者及30例健康人外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg的变化；ELISA检测同一标本血清中转化生长因子β（TGF—β）的表达水平。结果36例大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg占CD4^＋、淋巴细胞的比例为（6．92±1．31）％，与正常对照组（4．91±1，24）％相比差异有显著性（P〈0．05）。20例腺癌、7例黏液癌、9例未分化癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例分别为（6．81±1．52）％、（6.99±1．21）％、（7．08±1．17）％，各组间比较差异无显著性（P〉0．05），均高于对照组的（4．91±1．24）％，差异有显著性（P〈0，05）。IV期大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg高于Ⅱ期大肠癌患者（P〈0．05）。大肠癌组外周血清中TGF—β水平显著高于正常对照组，随着TGF—β水平增加，CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例逐渐增高，两者呈正相关。结论大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg表达增高，与临床分期相关，但与组织学分类无关，导致机体免疫抑制，可能参与大肠癌发生。     

系统性红斑狼疮患者外周血天然调节性T细胞检测及临床意义

目的探讨流式细胞术检测CD4^＋CD25^＋叉头状转录因子（Foxp3）^＋天然调节性T细胞的方法及其在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中改变的意义。方法建立三色流式细胞术检测天然调节性T细胞的方法，并检测了15例SLE患者和15名健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞比例以及CD4^＋细胞中CD25的表达水平。结果SLE患者外周血中天然调节性T细胞为（1．03±0．42）％，显著低于健康对照组的（5．88±1．40）％（P〈0．01）；CD4^＋淋巴细胞中CD25^＋细胞的表达水平[（5．92±3．80）％]也显著低于健康对照组[（32．01±5、70）％，P〈0．01]。结论三色流式细胞术适合检测外周血中天然调节性T细胞，SLE患者存在天然调节性T细胞免疫缺陷。     

CD8^＋CD28^-T细胞在原发性肝癌患者外周血的表达及意义

目的探讨原发性肝癌（PHc）患者外周血中CD8^＋CD28^-T细胞在PHC细胞免疫中所发挥的作用。方法采用流式细胞技术对38例PHC患者及40例健康对照人群外周血中的CD8^＋T细胞表面CD28分子的表达进行检测。结果38例PHC患者与40例正常对照组外周血测定结果比较发现：PHC患者外周血中CD8^＋测定值较正常对照组显著增高;CD8^＋CD28^-较正常对照组明显增高;而PHC患者外周血中CD8^＋CD28^＋与正常组比较明显下降,统计学差异均具有显著性。结论CD8^＋CD28^-T细胞在PHC患者外周血中增生活跃,提示高表达的CD8^＋CD28^-T细胞在肝癌免疫应答中具有重要意义。     

CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。     

CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化

目的探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值水平在胃癌患者外周血中的表达及意义。方法采用血液分析仪技术,检测40例胃癌手术前患者(按临床分期为Ⅰ～Ⅱ级组18例,Ⅲ～Ⅳ级组22例)及25名正常对照组外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平。结果胃癌患者外周血CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值分别为0.78%±0.35%、0.37%±0.21%、0.61%±0.42%,明显低于正常对照组(P<0.05);胃癌Ⅲ～Ⅳ级组CD3+、CD4+细胞CD4+/CD8+比值分别为0.42%±0.27%、0.21%±0.17%、0.29%±0.25%,明显低于Ⅰ～Ⅱ级组(0.95%±0.35%、0.45%±0.19%、0.76%±0.30%,P<0.05)。结论检测胃癌患者手术前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平,可以初步评估胃癌患者机体免疫状态,也为肿瘤的免疫增强治疗提供了理论依据。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28的表达

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28与其病情状态、乙型肝炎病毒复制的关系。方法用流式细胞术检测了24名健康体检者和92例慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86、CD28的表达和CD8^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^-亚群淋巴细胞，并与病毒载量和乙型肝炎e抗原（HBeAg）进行相关分析。结果慢性乙型肝炎CD80和CD86表达明显高于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组（P〈0．01）；肝炎后肝硬化组明显高于慢性乙型肝炎组（P〈0．05）；慢性乙型肝炎轻、中、重度3组间差异也有统计学意义。慢性乙型肝炎组CD28的表达明显低于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组（P〈0．05）。病毒载量高低和HBeAg是否阳性与外周血CD80、CD86、CD28及CD8^＋CD28^＋和CD8^＋CD28^-亚群淋巴细胞差异无统计学意义。结论CD80、CD86及受体CD28可能在慢性乙型肝炎免疫损伤过程中起重要作用，但与血清中病毒载量的变化和HBeAg阳性与否无关。     

CD4~＋ CD25~＋细胞和CD8~＋ CD28~-调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血中的水平变化

目的研究原发性肝癌（HCC）患者外周血中CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞的表达及意义。方法采用流式细胞仪测定93例HCC患者和24名健康人外周血中的CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞水平。结果 HCC患者外周血中的CD4＋ CD25＋细胞[（14.39±4.58）%]和CD8＋ CD28-调节性T细胞[（24.05±5.64）%]表达均显著高于对照组[（8.37±1.73）%、（15.93±4.84）%,P〈0.05];CD8＋CD28-调节性T细胞与HCC的分期呈正相关（r=0.463,P〈0.001）。结论 CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞在HCC患者外周血中呈高表达,且CD8＋ CD28-调节性T细胞与HCC的病情及预后相关。     

2型糖尿病患者外周血中膜型及可溶性CD28分子的表达及意义

目的分析2型糖尿病患者外周血中膜型及可溶性CD28分子的表达及其意义。方法分别收集2012年12月至2013年12月在北京军区联勤部门诊部就诊的30例2型糖尿病患者(糖尿病组)及同期30名健康体检者(对照组)的外周血,通过溶血及流式细胞术检测其外周血T细胞表面CD28分子的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中可溶性CD28的水平,并进行对比分析。结果糖尿病组外周血CD4+CD28+T细胞和CD8+CD28+T细胞显著低于对照组[(28.29±7.71)%比(32.77±4.28)%和(12.18±3.17)%比(18.53±3.27)%,均P0.01],血清中可溶性CD28水平显著高于对照组[(2.86±0.96)比(0.61±0.19)μg/L,P0.01]。结论协同刺激分子CD28很可能参与了2型糖尿病的免疫病理机制。     

肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布及临床意义

目的检测肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布，探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测45例肺癌患者和30例健康对照者外周血中的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化，并通过体外淋巴细胞增殖实验对肺癌患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞进行鉴定。结果（1）肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞比例明显增高（P〈0．05），但治疗后其比例明显下降（P〈0．05）；（2）肺癌患者CD4^＋CD25^＋T细胞能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖和干扰素γ的分泌。结论肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例明显增高，其动态监测有助于肺癌患者免疫状态及疗效评价。     

扁桃体摘除术对IgA肾病患者外周血CD4^＋CD25^＋细胞数及病情的影响

【目的】观察扁桃体摘除对IgA肾病（IgAN）患者外周血CD4^＋CD25^＋细胞数的影响。【方法】研究对象包括37例IgAN病人（A组）及37例非肾炎慢性扁桃体炎病人（B组）,10例正常人（C组）。对A、B两组实施扁桃体摘除术,观察手术前及摘除后1、3个月外周血CD4^＋CD23^＋细胞比例。收集IgAN病人的尿液,检测24h尿蛋白,尿红细胞。【结果】A组CD4^＋CD25^＋细胞数显著低于B、C两组（P均〈0．05）,后两组之间无显著差异（P〉0．05）;A组术后1个月为1．32％±0．313％,3月为3．01％±0．310％,术后1个月与B组及C组有明显差剐（P均〈0．05）,术后3个月与B组及C组无显著差别（P均〉0．05）。A组术后1个月及3个月,血尿及蛋白尿均较术前明显减少;随着血尿、蛋白尿逐渐减少而外周血CD4^＋CD25^＋细胞数逐渐恢复正常水平。【结论】扁桃体切除术可改善IgAN患者免疫功能。     

EB病毒相关性噬血细胞综合征患儿T淋巴细胞CD69的表达及意义

目的探讨外周血T淋巴细胞CD69表达在EB病毒相关性噬血细胞综合征（epsteinbarr virus—associated hemophagocytic syndrome，EBV—AHS）患儿中的变化及意义。方法应用流式细胞术检测EBV—AHS患儿（急性期28例，缓解期21例）及30例健康对照儿童外周血CD3^＋CD4^＋CD69^＋及CD3^＋CD8^＋CD69^＋的表达水平，对检测结果进行统计学分析。结果三组受试者间CD3^＋CD4^＋CD69^＋及CD3^＋CD8^＋CD69^＋的表达水平差异均有统计学意义（P均〈0．01）；急性期组CD3^＋CD4^＋CD69^＋及CD3^＋CD8^＋CD69^＋的表达水平明显高于缓解期组及对照组，且差异均有统计学意义（P均〈0．01）；缓解期组CD3^＋CD4^＋CD69^＋及CD3^＋CD8^＋CD69^＋的表达水平明显高于对照组，且差异均有统计学意义（P均〈0．01）。结论T淋巴细胞的过度活化在EBV—AHS发病过程中起重要作用，是EBV—AHS重要的发病机理之一。检测T淋巴细胞CD69的表达有利于临床判断治疗效果，并为应用免疫调节剂提供理论依据。