2—氯—4—硝基苯—β—D—半乳糖—麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

目的 建立2－氯－4－硝基苯－β-D－半乳糖－麦芽二糖苷（GalG2-CNP）作底物测定淀粉酶的方法。方法 用连续监测法对pH值，Km值及最适底物浓度等反应条件进行实验研究，并对建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含KSCN 200mmol/L,CaCl26.7mmol/L,NaCl400mmol/L；试剂Ⅱ：含GalG2-CNP20mmol/L；均用pH6.0 50mmol/L MES缓冲液。线性范围达1200U/L批内CV＝2.77％，批间CV＝3.56％，与参考方法（BPS－G7）有良好的相关性。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

尿素酰基裂解酶酶偶联法测定血清总钙

目的 介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法 双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺（TEA，pH8.0,200mmol/L）；试剂I：含NaHCO326.0mmol/L,NADPH 0.4mmol/L,α－酮戊二酸8.0mmol/L，尿素酰基裂解酶115U／L，GLDH43．0kU/L；试剂Ⅱ：含NaCO3 26.0mmol/L,ATP6.2mmol/L。结果 方法线性范围为0．5－5．0mmol/L，批内和批间平均变异系数分别为2．13％和2．69％。平均回收率为102．7％ 。本法（Y）与邻甲酚酞络合酮法（OCPC法，X1）比较：r＝0．981，Y1＝1．02X1－0．021，与偶氮胂Ⅲ法（X2）比较：r＝0．978，Y＝0．99X2＋0．03。血清胆红素高达300μmol/L，血红蛋白4g/L，镁2.5mmol/L，NH4^ 2.0mmol/L,Trig 8.0mmol/L对本法无明显干扰。结论 本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。     

液体单试剂检测血氨方法的建立

目的配制液体单试剂，建立酶两点动力法测定血浆中血氨含量。方法在荷兰威图科学公司DPU-41型半自动生化仪和美国贝克曼公司CX5-CE型全自动生化仪上研究酶两点动力法，建立实验参数。结果试剂含量：三乙醇胺缓冲液（pH7．4）0．25mol／L，α-酮戊二酸15mmol／L，还原型辅酶0．3mmol／L，谷氨酸脱氢酶大于160U／L。该法最低检出限为1．9μmol／L，线性范围达321μmol／L（r=0．9961），批内CV=2．2％，批间CV=4．4％，平均回收率=99．3％，胆红素〈175．8μmol／L，血红蛋白〈3．4g／L，对测定结果无显著影响。结论本法灵敏度高，线性、精密度好，结果准确，胆红素、血红蛋白干扰小，操作简便，适用于全自动及半自动生化分析仪，可推广运用。     

血清芳香基酰胺酶连续监测法测定

报道了血清芳香基酰胺酶的连续监测法。酶促反应最适pH为7．6，用0．1mol／LTris—HCl缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围0～400U／L。批内CV1．9％～2．5％，批间CV3．1％～3．8％。121例健康成人血清酶活性为23.8±6．0U/L（x±s），男女性别间无差异（P＞0．05）。临床初步应用表明肝胆疾病时明显升高，特别是肝内外胆道阻塞时升高幅度较大。     

血清鸟嘌呤脱氨酶的连续监测法

利用葡萄糖氧化酶法测葡萄糖，间接测得2．4－二氧酚摩尔吸光因数ε＝3．31×104cm2／mol，再利用trinder反应建立连续监测法测定血清鸟嘌呤脱氨酶的活力，此法不但灵敏度高，同时有很高的精度，批内、批间的CV≤5．98％，最适pH为7．0，在600秒观察期内吸光度变化与时间成正比。Km＝1．09×10－2mmol／L，最佳黄嘌呤氧化酶用量为10U／L，最佳过氧化物酶用量为≥190U／L。120例健康体检者参考范围为0．06～1．02U／L，并对实验条件及鸟嘌呤脱氨酶的临床意义作了探讨。     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根（HCO3^-）。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法，可满足全自动和手工测定，用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50mmol／L，批内变异系数（CV）为2．48％，批间CV为3．24％，平均回收率102．8％，与血气分析仪（X）相关良好，Y=1．019X-0．745，r=0．9903，黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响，健康人静脉血HCO3^-浓度为21．5～32．3mmol／L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定，适用临床检测。     

速率法测定血清二氧化碳

用英国朗道公司的二氧化碳终点法试剂，在日本岛津CL－7200全自动生化分析仪上自行建立连续监测法．该法与美国NOVA16型急诊生化仪的二氧化碳电极法比较，30份患者血清的测定值经配对t检验，P＞0．05，差异无显著性意义；同一份质控血清用该法测定，批内CV：2．1％，批间CV：3．7％；胆红素100μmol／L，血红蛋白10g／L，对测定值无干扰．     

腺苷脱氨酶双试剂测定的全自动分析方法

目的在全自动生化仪上建立双试剂测定腺苷脱氨酶(ADA)活性的方法。方法在全自动生化仪上编写测定程序,孵育时间240s,读空白时间60s,延迟时间30s,连续监测时间120s,主波长340nm,副波长410nm。结果本法试剂稳定,精密度良好,批内CV3.1%,批间CV3.9%,线性范围200U/L,参考范围4～25U/L。结论双试剂全自动分析腺苷脱氨酶,方法设计符合全自动分析条件,精密度高,结果准确。     

结合胆红素酶法测定的一种新方法

目的 建立一种特异性更高的酶法血清结合胆红素(CB)测定的新方法。方法 在pH5．5、有氟化钠(NaF)和N—乙酰半肮氨酸(NAC)的存在下，胆红素氧化酶(BOD)选择性氧化CB，引起450nm吸光度下降，计算CB的浓度。结果 批内精密度，n＝20，-↑x＝17．65μmol／L，s＝1．15，CV＝6．52％和-↑x＝301．49μmol/L，s＝1．01，CV＝0．33％；批间精密度，n＝20，-↑x＝31．50μmol／L，s＝3．12，CV＝9．90％和-↑x＝184．12μmol/L，s＝5．01，CV＝2．72％；线性范围至少可达320μmol／L；选择性抑制物的最适浓度，NaF2．5mmol/L，NAC2．5mmol/L；与重氮法的相关性，Y(酶法)＝0．839X(重氮法)—7．965，r＝0．9690。结论 该研究建立的反应条件，能有效地抑制BOD对游离胆红素的“非特异性”氧化，提高CB测定的准确性。     

人血清假性胆碱酯酶连续监测法测定方法学的建立及其在肝功能评价中的应用

目的 建立一种稳定的人血清假性胆碱酯酶速率测定方法。方法 测定反应的初速度，对反应体系的最佳pH、离子强度、底物用量进行选择，并对所建立方法的性能，包括试剂的稳定性进行评价。结果 采用双试剂连续监测法测定假性胆碱酯酶的活性，试剂Ⅰ的最适组成：含0．25mmol/L DNTB的磷酸盐缓冲液(80mmol/L，pH7．7)；试剂Ⅱ的最适组成为：含60mmol/L碘化正丁酰硫代胆碱水溶液。液体试剂于4℃储存至少可以稳定一年。本法测定线性可达12000U/L，批内和天间变异小于2．5％，和Roche公司出品的假性胆碱酯酶测定试剂所测参考值和对患者测定结果有很好的一致性。结论 本法操作简便，试剂配制容易而且稳定性好，推荐作为常规测定的方法。     

Studies on measurement of plasma magnesium: application of the Magon dye method to the "Monarch" centrifugal analyzer

The "Magnesium Liquid Stable Reagent Set" from Medical Analysis Systems, Inc., is evaluated. The method, which involves Magon dye binding and bichromatic absorbance measurements, was used in a Monarch centrifugal analyzer. Results were compared with those by atomic absorption spectrometry. The calibration curve for the Magon method is linear to 2.5 mmol/L, with a 2-microL sample volume. Analytical recovery of magnesium added to human plasma ranged from 95 to 102%. The working reagent is stable for at least five days at 15 degrees C. At concentrations of 0.54 and 1.20 mmol/L, the respective CVs were 2.15 and 3.60% within batch, and 3.13 and 3.24% between batch. We analyzed 150 clinical samples for magnesium by both methods. Absorbance readings at 520/600 nm rather than 520/690 nm improved the correlation (r = 0.9777 and r = 0.9428, respectively). Calcium, albumin, phosphate, or bilirubin did not significantly interfere.     

血管紧张肽（素）转化酶动力学测定方法的探讨及其初步临床应用

目的建立血管紧张肽（素）转化酶（ACE）自动化分析方法。方法 ACE能催化底物呋喃酰基-L-苯丙氨酰甘氨酰甘氨酸（FAPGG）,产生呋喃酰基苯丙氨酸（FAP）及双甘氨肽（GG）。在pH值8.2的硼酸缓冲液下,在340 nm处测定产物吸光度值的下降速度可计算出ACE活性。采用本法测定50名正常对照者、30例慢性阻塞性肺部疾病加重期（AECOPD）患者、18例肺癌患者血清ACE的活性。结果本法缓冲液最适pH值为8.2,最适基质浓度为1.0 mmol/L,批内、批间平均变异系数（CV）分别为4.07%、5.50%,米氏常数（Km）为0.09 mmol/L。正常对照组ACE活性为（31.1±18.0）U/L;AECOPD患者ACE活性为（22.4±12.6）U/L,低于正常组（P〈0.000 1）;肺癌患者ACE活性为（28.7±11.4）U/L,稍低于正常对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,适宜临床常规应用。ACE可作为评价肺部疾病的一项指标。     

功能性促甲状腺激素受体在人微血管内皮细胞的表达

目的探讨促甲状腺激素受体(TSHR)在人微血管内皮细胞(HMEC-1)的表达及其活性。 方法体外培养HMEC-1,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞TSHR mRNA的表达;将细胞接种在六孔板上,分空白对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,空白对照组给予不含促甲状腺激素(TSH)的基础培养基培养,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予0.10 U/L,1.00 U/L,10.00 U/L的TSH干预。24 h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平,研究HMEC-1细胞中的TSHR是否具有活性。显著性检验采用单因素方差分析,组间比较采用LSD-t法。 结果RT-PCR结果显示HMEC-1表达TSHR mRNA;ELISA结果显示TSH刺激HMEC-1后细胞内cAMP表达增加,低剂量组cAMP水平[(5.23±0.86)mmol/L]与空白对照组[(1.77±0.25)mmol/L]比较,差异有统计学意义(t＝3.47,P<0.01),并且此效应呈剂量依赖性(F＝92.36,P<0.01)。 结论HMEC-1细胞中存在TSHR,且该受体可与TSH特异性结合发挥作用。     

陕西职业学校视力残疾学生患非酒精性脂肪肝病及临床实验室相关指标调查

目的 调查陕西职业学校视力残疾学生非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver,NAFL) 患病现状及相关临床实验室指标。方法 2021 年10 月对陕西省城市经济学校视力残疾学生集中进行了健康体检,根据肝脏超声结果分为NAFL 组（n=15）和健康组（n=51）。比较两组间NAFL 相关体格测量及实验室指标差异,并采用二元Logistic回归方法分析影响NAFL 发生的独立危险因素。结果 66 例（男38 例,女28 例）15 ～ 35（22±5）岁视力残疾学生的NAFL 患病率为22.7%。NAFL 组学生的体重指数25.5±4.9 kg/m2,腰围83（77,97）cm,收缩压128.4±18.8mmHg,舒张压88±9mmHg,三酰甘油1.9（1.1,2.3）mmol/L,总胆固醇5.0（4.8,5.5）mmol/L,门冬氨酸氨基转移酶27（19,37）U/L,丙氨酸氨基转移酶27（21,34）U/L 及尿酸449.0（386.0,512.0）mmol/L 显著高于健康组[（21.2±2.7kg/m2,74（70,79）cm,117.8±14.5 mmHg,80±13 mmHg,0.9（0.8,1.5）mmol/L,3.8（3.4,4.2）mmol/L,17（15,21）U/L,13（10,18）U/L,370.5（299.3,424.3）mmol/L], 差异具有统计学意义（t=-4.4 ～-2.3,U=128.5 ～ 215.5,均P ＜ 0.05）。二元Logistic 回归分析显示体重指数（OR=1.6, P=0.002）和三酰甘油（OR=2.4,P=0.002）差异具有统计学意义。结论 陕西省职业学校视力残疾学生NAFL 患病率较高,体重指数和三酰甘油是发生NAFL 的独立危险因素。     

Effects of divalent cations on the interaction of platelets with tumor cells: aggregation and perfusion studies with two homologous human systems

The effects of chelation of divalent cations in the interaction of platelets and tumor cells has been studied in a homologous human system using human platelet-rich plasma and two tumor cell lines of human origin: SKNMC (neuroblastoma) cells, which cause platelet aggregation by an adenosine diphosphate-dependent mechanism, and U87MG (glioblastoma) cells, which function by a thrombin-dependent mechanism. When added at zero time, citrate 14 mmol/L completely abolished aggregation in heparinized (5 U/ml) platelet-rich plasma by either cell line, but the degree of inhibition was reduced by later addition of the chelating agent. Calcium citrate 8 mmol/L reduced by only 10%, indicating that citrate anion was not responsible for the inhibition. Addition of Ca++ or Mg++ alone or in combination at concentrations up to 1.5 mmol/L did not reverse the inhibition. Addition of higher concentrations of Ca++ (2 mmol/L) caused immediate clotting, whereas concentrations of Mg++ up to 6 mmol/L were without effect. Inhibition could be reversed by washing the platelets free of citrate and resuspending in heparinized platelet-rich plasma. Aggregation by either cell line was inhibited by EDTA and EGTA. In the Baumgartner perfusion apparatus, platelet interaction with subendothelium was increased about 50-fold in the presence of SKNMC cells, but this effect was also abolished after addition of citrate. After addition of U87MG cells to heparinized PRP, there was a 400-fold increase in platelet interaction with subendothelium, and complex thrombi containing red cells, white cells, and fibrin were formed. This stimulation was reduced to control levels by addition of citrate.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Production and certification of an enzyme reference material for adenosine deaminase 1 (BCR 647)

BACKGROUND: We describe the preparation of a lyophilised reference material containing purified human adenosine deaminase 1 and the certification of its catalytic concentration. METHODS: The enzyme was purified from human erythrocytes. RESULTS: The enzyme was >99% pure on polyacrylamide gel electrophoresis. Only trace amounts (<0.4%) of alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase and L-lactate dehydrogenase were detected in the purified fraction. The purified adenosine deaminase had a molar mass of 41600 g/mol and an isoelectric pH at 4.7, 4.85 and 5.0. The material was prepared by diluting the purified adenosine deaminase in a matrix containing 50 mmol/l Tris-HCl buffer pH 7.4 and 30 g/l human serum albumin; dispensing in vials and freeze-drying. The batch was homogeneous and the predicted loss of adenosine deaminase activity per year on the basis of accelerated degradation studies was 0.006% at -20 degrees C and 0.04% at 4 degrees C. The certified value for adenosine deaminase catalytic concentration in the reconstituted reference material is (2.55+/-0.09) microkat/l when measured by the method that uses adenosine as substrate and glutamate dehydrogenase as auxiliary enzyme at 37 degrees C. CONCLUSIONS: The material can be used to verify the comparability of results from different laboratories, for intra-laboratory quality control, or for calibration of the adenosine deaminase catalytic concentration measurements.     

胸腔积液腺苷脱氨酶检测诊断价值的研究

目的探讨胸水中腺苷脱氨酶(ADA)的检测在鉴别结核性、漏出性及恶性胸水方面的临床诊断价值。方法收集患者胸水标本共93例,分为癌性胸水组、结核性胸水组和漏出性胸水组,用酶偶联连续监测法分别测定其腺苷脱氨酶(ADA)水平。结果 3组胸水中腺苷脱氨酶测定值分别为(14.24±12.90)U/L、(49.36±15.75)U/L、(10.12±7.87)U/L,其中结核性胸水中的腺苷脱氨酶(ADA)与漏出液组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论腺苷脱氨酶对结核性胸腔积液的鉴别诊断有较高价值,可作为一种诊断结核性胸腔积液的辅助手段。     

尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶和视黄醇结合蛋白在冠状动脉介入术后的变化及早期预测造影剂肾病的价值

目的 前瞻性研究冠状动脉介入诊疗术后,尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(UNAG)和尿视黄醇结合蛋白(URBP)在造影剂所致急性肾损伤发生前后的差异.方法 收集150例接受冠状动脉造影及介入治疗患者的临床资料.留取患者术前、术后24 h、术后48～72 h尿液和血液.用酶法测血清肌酐(SCr)和尿肌酐(UCr)值;用ELISA法检测UNAG和URBP水平.手术后48～72 h SCr上升基础值的25%或绝对值上升44 μmol/L以上诊断为造影剂肾病(CIN)13例,选择性别、年龄、冠状动脉造影结果 等基础资料匹配的27例为对照组.结果 接受冠状动脉造影及介入治疗患者的CIN发病率为8.7%(13/150).CIN组术前UNAG/UCr水平明显高于对照组[1.97(1.06,2.64)U/mmol与1.07(0.68,1.88)U/mmol,Z=2.076,P=0.039];术后24 h CIN组患者UNAG/UCr值较术前显著上升[2.82(1.88,4.26)U/mmol与1.97(1.06,2.64)U/mmol,Z=2.607,P=0.009];ROC分析显示术前基础UNAG值可用于CIN预测,曲线下面积达0.776(P=0.023);截断值为8.08 U/L时,诊断的敏感性和特异性分别为0.771和0.713.基线UNAG高于8.08 U/L的比例在CIN组中明显高于对照组[77.1%(10/13)与29.6%(8/27),Z=2.564,P=0.011],与发病的相对危险度为5.58,95%GI为1.24～25.08.结论 UNAG检测可用于CIN患病危险度的预测,并且术后24 h水平可用于CIN的早期诊断.     

复方甘草酸苷联合葛根素对非酒精性脂肪性肝病患者血清瘦素及胰岛素抵抗指数的影响

目的 探讨复方甘草酸苷联合葛根素对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者血清瘦素水平及胰岛素抵抗指数的影响.方法 将120例NAFLD患者应用计算机随机分为4组,基础治疗组、复方甘草酸苷组、葛根素组、联合治疗组各30例.基础治疗组采用基础护肝疗法,给予维生素、肝泰乐、多种氨基酸等治疗;复方甘草酸苷组应用复方甘草酸苷60ml入液静脉滴注;葛根素组应用葛根素注射液400mg入液静脉滴注;联合治疗组给予复方甘草酸苷60ml及葛根素400 mg静脉滴注.4组患者疗程均为4周.检测治疗4周前后患者血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆固醇、甘油三酯、瘦素、空腹血糖及胰岛素,并计算胰岛素抵抗指数,应用德国西门子双源CT仪行肝脏CT检查.结果 基础治疗组治疗前、后血清ALT、AST、总胆固醇、甘油三酯、瘦素及胰岛素抵抗指数分别为（83.08±15.68）、（43.32±11.72） U/L,（52.12±15.62）、（36.08 ±7.28） U/L,（6.20±1.30）、（5.60±0.70）mmol/L,（2.70±0.50）、（2.10±0.40） mmol/L,（14.63±3.26）、（7.61±2.46） μg/L,7.9±1.8、7.0±1.2,组内比较差异均有统计学意义（t值分别为12.828、4.244、16.648、21.442、3.341、16.152,P均＜0.01）;复方甘草酸苷组治疗前、后血清ALT、AST、总胆固醇、甘油三酯、瘦素及胰岛素抵抗指数分别为（83.06±14.38）、（43.28±11.06） U/L,（51.68±15.48）、（37.28±7.22） U/L,（6.30±1.50）、（5.70±0.80） mmol/L,（2.60±0.40）、（2.20±0.50） mmol/L,（15.13±3.87）、（7.89 ±2.26） μg/L,（7.8±2.2）、（7.1±1.6）,组内比较差异均有统计学意义（t值分别为8.893、4.225、16.520、24.708、6.353、21.137,P均＜0.01）;葛根素组治疗前、后血清ALT、AST、总胆固醇、甘油三酯、瘦素及胰岛素抵抗指数分别为（82.68±14.36）、（44.26±9.68） U/L,（50.06±15.23）、（36.86±6.88） U/L,（6.20±1.60）、（5.60±0.70） mmol/L,（2.70±0.52）、（2.26±0.48） mmol/L,（15.68±3.26）、（6.89±2.18）μ∥L,7.7±2.8、7.0±1.8,组内比较差异均有统计学意义（t值分别为7.087、8.138、18.159、7.244、7.470、32.283,P均＜0.01）;联合治疗组治疗前、后血清ALT、AST、总胆固醇、甘油三酯、瘦素及胰岛素抵抗指数分别为（84.62±14.88）、（22.28±9.38） U/L,（49.12±16.56）、（28.48±9.06） U/L,（5.70±1.60）、（5.00±0.60） mmol/L,（2.78±0.50）、（1.70 ±0.40） mmol/L,（14.78±3.68）、（4.63±2.36） μg/L,7.6±2.1、6.2±1.6,组内比较差异均有统计学意义（t值分别为14.255、11.272、8.371、9.941、8.102、37.626,P均＜0.01）.4组治疗前各指标比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）,治疗后联合治疗组低于其他3组（P均＜0.05）,基础治疗组、复方甘草酸苷组、葛根素组之间比较差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论 复方甘草酸苷联合葛根素治疗NAFLD通过降低患者血清瘦素水平、改善胰岛素抵抗,增加肝细胞对胰岛素的敏感性,从而调节血脂代谢,达到治疗NAFLD的目的.