急性肺损伤中氧化应激反应的变化和1,6-二磷酸果糖的拮抗作用

背景:1,6-二磷酸果糖是细胞内糖代谢的中间产物,具有改善细胞能量代谢、稳定生物膜、抑制炎症细胞因子释放和抗氧化等多种生物学作用。目的:观察内毒素致大耳白兔急性肺损伤过程中氧化应激反应的变化和1,6-二磷酸果糖的拮抗作用,探讨1,6-二磷酸果糖对急性肺损伤的治疗性作用。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:解放军总医院呼吸科。材料:实验于2003-05/2003-12在解放军总医院呼吸科实验室完成。选用清洁级雄性大耳白兔24只。随机将兔分为3组:对照组、致伤组和干预组,每组8只。方法:①对照组:静脉注射生理盐水2mL/kg。致伤组:将内毒素按500μg/kg溶于2mL生理盐水后于5min内经颈静脉插管一次注射完毕,随后注射生理盐水1次(两次液体总量为2mL/kg)。干预组:内毒素使用剂量和方法同致伤组,随后缓慢经静脉注射1,6-二磷酸果糖(300mg/kg)的生理盐水溶液(2次液体总量为2mL/kg)。②各组均于实验0,0.5,2,4,6h后采外周血和动脉血,采用自动血细胞分析仪进行血细胞计数,采用血气分析仪进行血气分析。测定实验6h末,分别采用巴比妥酸比色法和邻苯三酚自氧化抑制法测定兔肺组织中脂质过氧化物的含量和超氧化物歧化酶的活性。另取右侧膈叶肺组织,采用透射电镜做病理学观察。③符合正态分布和方差齐性等条件者做t检验,否则,做秩和检验。主要观察指标:①实验前及实验0.5,2,4,6h后各组兔血气分析和血细胞计数测定结果比较。②实验后6h兔肺组织中脂质过氧化物含量、超氧化物歧化酶活性和肺组织病理学变化。结果:①实验0.5h后,致伤组动物血氧分压和外周血白细胞计数明显低于对照组(t=-4.27,P<0.01,z=2.64,P<0.01);干预组血氧分压和外周血白细胞计数与对照组差异不明显(P>0.05)鸦干预组血氧分压明显高于致伤组(t=4.32,P<0.01)。②实验4h后,干预组动脉血氧分压明显高于对照组和致伤组(t=4.98,2.40,P<0.01,0.05),致伤组外周血白细胞计数明显低于对照组(z=2.42,P<0.05)。③实验6h后,干预组动脉血氧分压明显高于对照组(t=3.39,P<0.01),致伤组外周血白细胞计数明显低于对照组(z=2.16,P<0.05)。致伤组肺组织脂质过氧化物含量明显高于对照组(t=3.70,P<0.01)、超氧化物歧化酶活性明显低于对照组(t=-4.12,P<0.01),肺组织出现明显的病理损害。实验6h后,干预组肺组织脂质过氧化物含量和超氧化物歧化酶活性与对照组比较,差异不明显(P>0.05),肺组织病理损害较轻。结论:机体氧化应激反应能力的相对不足可以加重氧化损伤,是急性肺损伤发病过程中的重要致病因素;1,6-二磷酸果糖可改善机体的氧化应激反应能力、抑制氧化损伤,对内毒素所致的大耳白兔急性肺损伤具有一定的保护作用。     

1,6-二磷酸果糖对肺微循环和肺功能的保护性作用

目的:观察内毒素致大耳白兔急性肺损伤过程中的肺微循环障碍及1,6-二磷酸果糖对其的影响,探讨1,6-二磷酸果糖对内毒素所致的兔急性肺损伤的保护性作用。方法:①实验于2003-05/12在解放军总医院呼吸科实验室完成。选用清洁级雄性成年大耳白兔24只。随机将兔分为对照组(静脉注射生理盐水2mL/kg)、致伤组(将内毒素按500μg/kg溶于2mL生理盐水后于5min内经颈静脉一次注射完毕,随后注射生理盐水1次)、干预组[内毒素使用剂量和方法同致伤组,静注内毒素后缓慢静脉给予1,6-二磷酸果糖(300mg/kg)的生理盐水溶液],共3组,每组8只。②各组均于静脉注射内毒素前,静脉注射内毒素后0.5,2.0,4.0,6.0h5个时间点观察血压、心率及呼吸频率变化,并进行采用自动血细胞分析仪和血气分析仪检测各组兔动脉血氧分压及外周血白细胞数量。静脉注射内毒素后6.0h按解放军总医院东亚放免所提供试剂盒说明测肺组织血栓烷B2、6-酮-前列腺素F1α和内皮素1的含量。另取右侧膈叶肺组织采用光镜(×100)和透射电镜做病理学观察。③符合正态分布和方差齐性等条件者做t检验,否则,做秩和检验。结果:兔24只均进入结果分析。①静脉注射内毒素后0.5h,致伤组兔呼吸频率和心率明显高于对照组(P<0.01),血压、动脉血氧分压、白细胞计数明显低于对照组(P<0.01)。②静脉注射内毒素后4.0和6.0h,干预组动脉血氧分压明显高于对照组(P<0.01),致伤组外周血白细胞数量明显少于对照组(P<0.05)。③实验后6.0h,致伤组动物肺组织出现明显的病理损害,肺微血管严重受损。干预组动物肺组织和肺微血管损伤较轻,与对照组相似。致伤组和干预组肺组织血栓烷B2含量明显高于对照组(P<0.01)。干预组肺组织6-酮-前列腺素F1α含量明显高于对照组和致伤组(P<0.01)。结论:①经静脉进入体内的内毒素可通过增加血栓烷B2和内皮素1的释放等方式导致肺微循环障碍,进而诱发并加重肺损伤。②1,6-二磷酸果糖则具有改善肺微循环的功能,从而对肺组织起一定的保护作用。     

1，6-二磷酸果糖对肺微循环和肺功能的保护性作用

目的：观察内毒素致大耳白兔急性肺损伤过程中的肺微循环障碍及1,6-二磷酸果糖对其的影响,探讨1,6-二磷酸果糖对内毒素所致的兔急性肺损伤的保护性作用.方法：①实验于2003-05/12在解放军总医院呼吸科实验室完成.选用清洁级雄性成年大耳白兔24只.随机将兔分为对照组（静脉注射生理盐水2 mL/kg）、致伤组（将内毒素按500 μg/kg溶于2 mL生理盐水后于5 min内经颈静脉一次注射完毕,随后注射生理盐水1次）、干预组[内毒素使用剂量和方法同致伤组,静注内毒素后缓慢静脉给予1,6-二磷酸果糖（300 mg/kg）的生理盐水溶液],共3组,每组8只.②各组均于静脉注射内毒素前,静脉注射内毒素后0.5,2.0,4.0,6.0 h 5个时间点观察血压、心率及呼吸频率变化,并进行采用自动血细胞分析仪和血气分析仪检测各组兔动脉血氧分压及外周血白细胞数量.静脉注射内毒素后6.0 h按解放军总医院东亚放免所提供试剂盒说明测肺组织血栓烷B2、6-酮-前列腺素F1α和内皮素1的含量.另取右侧膈叶肺组织采用光镜（&;#215;100）和透射电镜做病理学观察.③符合正态分布和方差齐性等条件者做t检验,否则,做秩和检验.结果：兔24只均进入结果分析.①静脉注射内毒素后0.5 h,致伤组兔呼吸频率和心率明显高于对照组（P＜0.01）,血压、动脉血氧分压、白细胞计数明显低于对照组（P＜0.01）.②静脉注射内毒素后4.0和6.0 h,干预组动脉血氧分压明显高于对照组（P＜0.01）,致伤组外周血白细胞数量明显少于对照组（P＜0.05）.③实验后6.0 h,致伤组动物肺组织出现明显的病理损害,肺微血管严重受损.干预组动物肺组织和肺微血管损伤较轻,与对照组相似.致伤组和干预组肺组织血栓烷B2含量明显高于对照组（P＜0.01）.干预组肺组织6-酮-前列腺素F1α含量明显高于对照组和致伤组（P＜0.01）.结论：①经静脉进入体内的内毒素可通过增加血栓烷B2和内皮素1的释放等方式导致肺微循环障碍,进而诱发并加重肺损伤.②1,6-二磷酸果糖则具有改善肺微循环的功能,从而对肺组织起一定的保护作用.     

1,6-二磷酸果糖药物不良反应分析

对近年来1,6-二磷酸果糖药物不良反应分析如下. 1 临床资料 通过检索中国期刊网全文专题数据库(CNKI)检索年限:1994～2004,收集了250例相关药物不良反应报告;我院自使用1,6-二磷酸果糖以来发生药物不良反应6例,共收集到256例药物不良反应报告为研究对象,并分别对分布资料、用药情况和药物不良反应发生情况进行分类统计.     

1,6二磷酸果糖治疗急性胰腺炎的临床观察

目的:探讨急性胰腺炎的临床药物治疗,减少患者住院费用。方法:急性胰腺炎62例,其中使用1.6二磷酸果糖治疗32例。使用生长抑素(善得定)治疗30例。结果:FDP组与善得定组平均用药时间5.7 d,两者无显著性差异。FDP组血淀粉酶下降至正常时间,平均住院日,病死率,疼痛缓解时间分别为3.84 d,10.7 d,3.13%,3.01 d。善得定组血淀粉酶下降至正常时间,平均住院日,病死率,疼痛缓解时间分别为4.02 d,11.2 d,3.45%,2.89 d。各项做χ2检验,均无显著性差异,两组中均未中转手术。FDP组与善得定组均死亡1例,皆死于多脏器功能衰竭。结论:1.6二磷酸果糖与善得定治疗急性胰腺炎,在患者血淀粉酶下降止正常时间,平均住院日,病死率,疼痛缓解时间无显著性差异。但1.6二磷酸果糖价格便宜,可减少患者住院费用,值得临床推广。     

1,6二磷酸果糖研究的某些进展

１，６－二磷酸果糖量种重要的细胞内糖酵解代谢途径中的中间产物，可参与霜些代谢途径，可视为一种代谢调节剂和高能底物，具有重要的生理功能，已引起国内外有关专家物重视。本文就其１，６－二磷酸果糖的基础和临床研究，特别是对心脏血液动力学指标的改善，作用机理以及１，６－二磷酸果糖制剂等进展做一概述。     

1,6-二磷酸果糖治疗病毒性心肌炎疗效观察

目的：探讨1,6-二磷酸果糖治疗病毒性心肌炎的疗效。方法：124例病毒性心肌炎分两组治疗,对照组给以休息,维生素C,能量合剂和抗病毒治疗 治疗组加用16-二磷酸果糖治疗。结果：两组对病毒性心肌炎治疗均有效,但治疗组疗效明显高于对照组。结论：1,6-二磷酸果糖治疗病毒性心肌炎疗效好。     

1,6—二磷酸果糖在治疗脑卒中和颅脑损伤病例的作用

1989年1月1日至1990年12月本院急诊ICU 共收治脑卒中(包括高血压脑出血和脑出血和脑血栓形成)40例和颅脑损伤伴昏迷21例。全部病例使用该类病的常规疗法,其中约1/2加用1,6一二磷酸果糖(FDP)治疗。对这些病例的回顾性研究发现,FDP 能加快瘫痪肢体肌力的恢复和促进意识障碍者的苏醒。本文就此问题进行讨论。     

低浓度和高浓度1,6-二磷酸果糖对白细胞介素1β损伤胰岛细胞的影响

背景:一定浓度1,6-二磷酸果糖对白细胞介素1β损伤的胰岛具有保护作用,低浓度和高浓度的1,6-二磷酸果糖对白细胞介素1β损伤的胰岛具有不同的作用。目的:探讨低浓度和高浓度1,6-二磷酸果糖对白细胞介素1β损伤胰岛细胞的影响。设计:分组设计、对照动物实验。单位:川北医学院生理教研室。材料:实验于2004-07/2006-02在川北医学院外科肿瘤实验室和风湿免疫中心完成。选择出生1～3d的Wistar大鼠20只。方法:取鼠的胰腺,收集胰岛细胞,分为正常对照组、白细胞介素1β损伤组、白细胞介素1β 1,25,50mmol/L1,6-二磷酸果糖组。应用四唑盐比色法检测细胞活性;放射免疫法检测胰岛素的基础和高糖分泌量;用一氧化氮和一氧化氮合酶试剂盒分别检测各组一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性;采用Fura-2荧光检测技术测定各组[Ca2 ]i。主要观察指标:检测胰岛细胞活性,胰岛素的基础和高糖分泌量,一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性,[Ca2 ]i浓度。结果:①白细胞介素1β损伤组、白细胞介素1β 1,25,50mmol/L1,6-二磷酸果糖组胰岛细胞活性(A值)明显低于正常对照组(分别为0.116±0.012,0.129±0.008,0.125±0.015,0.120±0.016,0.252±0.020,P<0.01);1,6-二磷酸果糖浓度过低(1mmol/L)或过高(25,50mmol/L)时胰岛细胞活性(A值)与白细胞介素1β损伤组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②白细胞介素1β损伤组、白细胞介素1β 1,25,50mmol/L1,6-二磷酸果糖组胰岛细胞基础分泌胰岛素量和葡萄糖刺激分泌量显著低于正常对照组[分别为(237.00±22.21),(230.83±11.58),(225.16±12.46),(220.50±15.63),(425.67±16.85)mIU/L;(90.17±6.11),(96.62±8.64),(87.66±8.24),(85.46±9.59),(204.50±10.78)mIU/L,P<0.01],而低、高浓度1,6-二磷酸果糖组与白细胞介素1β损伤组比较差异无显著性意义(P>0.05)。③白细胞介素1β损伤组细胞上清液中一氧化氮合酶活性与一氧化氮含量明显高于正常对照组[分别为(332.07±25.34),(144.86±12.17)μkat/L;(457.64±19.29),(84.67±10.23)μmol/L,P<0.01],白细胞介素1β 1,25,50mmol/L1,6-二磷酸果糖组细胞上清液中一氧化氮合酶活性和一氧化氮含量与白细胞介素1β损伤组比较差异均无显著性意义。④白细胞介素1β损伤组胰岛细胞[Ca2 ]i浓度明显高于正常对照组[分别为(328.50±26.28),(73.42±1.79)nmol/L,P<0.01]。1,25,50mmol/L1,6-二磷酸果糖组加入白细胞介素1β作用后的胰岛细胞[Ca2 ]i浓度明显低于白细胞介素1β损伤组[分别为(152.72±11.86),(216.39±15.32),(233.61±21.76),(328.50±26.28)nmol/L,P<0.01]。结论:低浓度和高浓度1,6-二磷酸果糖对白细胞介素1β损伤的胰岛细胞不具有保护作用。     

Time profile of oxidative stress and neutrophil activation in ovine acute lung injury and sepsis

The formation of oxidative stress in the lung and activation of neutrophils are major determinants in the development of respiratory failure after acute lung injury and sepsis. However, the time changes of these pathogenic factors have not been sufficiently described. Twenty-four chronically instrumented sheep were subjected to cotton smoke inhalation injury and instillation of live Pseudomonas aeruginosa into both lungs. The sheep were euthanized at 4, 8, 12, 18, and 24 h after injury. Additional sheep received sham injury and were euthanized after 24 h. Pulmonary function was assessed by determination of oxygenation index and pulmonary shunt fraction. In addition, lung tissue was harvested at the respective time points for the measurement of malondialdehyde, interleukin 6, poly(ADP ribose), myeloperoxidase, and alveolar polymorphonuclear neutrophil score. The injury induced severe respiratory failure that was associated with an early increase in lipid peroxidation and interleukin 6 expression. The injury further led to an increase in poly(ADP ribose) activity that reached its peak at 12 h after injury and declined afterward. In addition, progressive increases in markers of neutrophil accumulation in the lung were observed. The peak of neutrophil accumulation in the lung was associated with a severe depletion of circulating neutrophils. The results from our model may enhance the understanding of the pathophysiological alterations after acute lung injury and sepsis and thus be useful in exploring therapeutic interventions directed at modifying the expression or activation of inflammatory mediators.     

Fructose-1,6-diphosphate attenuates acute lung injury induced by ischemia-reperfusion in rats

OBJECTIVE: To determine whether fructose-1,6-diphosphate (FDP) pretreatment can attenuate acute lung injury induced by ischemia-reperfusion in our isolated lung model in rats. DESIGN: Randomized, controlled study. SETTING: Animal care facility procedure room. SUBJECTS: Twenty-four adult male Sprague-Dawley rats each weighing 250-350 g. INTERVENTIONS: Typical acute lung injury in rats was induced successfully by 10 mins of hypoxia followed by 75 mins of ischemia and 50 mins of reperfusion. Ischemia-reperfusion significantly increased microvascular permeability as measured by the capillary filtration coefficient, lung weight gain, lung weight to body weight ratio, pulmonary arterial pressure, and protein concentration of bronchoalveolar lav-age fluid. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Pretreatment with FDP significantly attenuated the acute lung injury induced by ischemia-reperfusion as shown by a significant decrease in all of the assessed variables (p <.05 p <.001). The protective effect of FDP was nearly undetectable when promazine (an ecto-adenosine 5-triphosphatase inhibitor) was added before FDP pretreatment. CONCLUSIONS: Pretreatment with FDP significantly ameliorates acute lung injury induced by ischemia-reperfusion in rats.     

高氧致新生大鼠肺损伤中氧化应激与基质金属蛋白酶的关系

目的探讨氧化应激和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）／基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在高氧肺损伤新生大鼠的肺组织中动态变化以及两者的相互关系。方法将足月新生大鼠在出生后,分别持续吸人90％～95％高氧或空气,于1、3、7、14、21d取肺组织进行HE染色,应用分光光度计比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量、免疫组化技术检测MMP-9和TIMP-1动态表达。结果病理观察高氧3d时出现炎症反应,7d时出现肺泡发育阻滞,最终纤维化;高氧3、7、14d后MDA含量高于空气组（P〈0．05,P〈0．01,P〈0．05）;MMP-9表达主要在上皮细胞胞浆,高氧3d时较空气组增强（P〈0．05）;TIMP-1表达主要在上皮细胞、内皮细胞和肺泡巨噬细胞胞浆,3d后各时间点的表达均高于空气组（P〈0．05,P〈0．05,P〈0．01,P〈0．01）;MDA含量与MMP-9、TIMP-1蛋白表达呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）。结论高氧暴露后可能通过氧化应激上调MMP-9和TIMP-1表达引起基膜的破坏,从而导致毛细血管通透性的增加和以后呼吸道重塑的发生。     

Honokiol rescues sepsis-associated acute lung injury and lethality via the inhibition of oxidative stress and inflammation

Purpose  

Sepsis has a high mortality rate despite the recent advances in intensive care medicine and antibiotics. Honokiol, a low molecular weight natural product, is known to possess anti-inflammatory activity. Here, we investigate whether honokiol can ameliorate acute lung injury and lethal response in murine models of sepsis.