拉米夫定加复方甘草酸苷治疗慢性乙型肝炎的疗效及对HBV DNA变异的影响

慢性乙型肝炎是我国常见的传染病之一。拉米夫定是目前治疗慢性乙型肝炎的有效药物之一，但长期应用后，部分患者会发生HBVDNA变异（主要是YMDD），产生耐药，使病情反复，少数患者可出现病情恶化。为减少HBV对拉米夫定耐药性的产生，提高临床疗效，作者自2002至2005年应用拉米夫定加用复方甘草酸苷联合治疗慢性乙型肝炎，就其疗效和对HBVDNA变异（YMDD）的影响进行分析。报道如下。     

HBsAg及HBV DNA定量检测在慢性乙型肝炎患者不同病程阶段中的应用价值

目的研究慢性乙型肝炎(简称乙肝)患者病程进展中HBsAg及HBV DNA定量水平变化及其相关性,比较其在慢性乙肝不同病程阶段的水平。方法收集2015年1月至2016年12月于该院就诊的302例慢性HBV感染患者血清,分为轻、中及重型慢性乙肝组。采用化学发光法定量检测HBsAg水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清HBV DNA水平。多组间比较采用非参数Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Mann-Whitney U检验,采用Spearman检验进行数据间的相关性分析。结果轻、中、重型慢性乙肝组HBsAg定量水平中位数分别为2 583.96、6 998.34、3 669.91U/mL,3组比较差异有统计学意义(Z=15.50,P0.05);轻型慢性乙肝组与中型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-3.89,P0.05);中型慢性乙肝组与重型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-2.32,P0.05);轻型慢性乙肝组与重型慢性乙肝组HBsAg定量水平比较,差异无有统计学意义(Z=-1.22,P0.05)。轻、中、重型慢性乙肝组HBV DNA定量水平中位数分别为246 500、2 840 000、894 000log copy/mL,3组比较差异有统计学意义(Z=9.33,P0.05);轻型慢性乙肝组与中型慢性乙肝组HBV DNA定量水平比较,差异有统计学意义(Z=-2.96,P0.05);其他两两比较,HBV DNA定量水平差异无统计学意义(P0.05)。HBsAg与HBV DNA在轻型慢性乙肝组、中型慢性乙肝组、重型慢性乙肝组患者中均呈正相关(r=0.68、0.60、0.66,P0.05)。结论 HBsAg及HBV DNA在慢性HBV感染患者不同病程阶段均呈正相关,可作为预测慢性乙肝病程进展的血清学标志物。     

乙型肝炎病毒PreS1抗原检测的临床应用

PreS1抗原位于乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）组成成分之一大分子蛋白的N末端,只存在于具有传染性的完整的HBV颗粒上,它与乙型肝炎病毒S抗原、前S2共同构成HBV的衣壳蛋白。PreS1含有肝细胞膜受体,可直接与肝细胞膜结合,在HBV感染肝细胞和机体免疫应答中起重要作用。近年来,PreS1作为一种新的HBV标志物已广泛应用于临床。     

CCR5阳性细胞CD30阳性细胞检测在乙型肝炎中的临床应用

乙型肝炎是由乙肝病毒感染引起的肝脏疾病。人体感染HBV以后，一部分呈急性自限性病程；一部分呈慢性迁延性病程，在我国HBV携带者就达一亿多，占全世界HBV携带者的1／3以上。HBV作为一种非侵袭性嗜肝病毒，它并不直接损害肝脏，而是由其表达的抗原系统及其抗体所介导的特异性免疫反应和非特异性的以细胞因子为主的炎症介质导致的肝细胞损伤，其中细胞免疫成为HBV感染后的研究热点。     

前S1抗原联合HBV DNA检测在乙型病毒性肝炎诊断中的临床意义

乙型肝炎是我国的常见传染病,其发病机制等许多环节还有待进一步的研究,慢性乙型肝炎的诊断主要依赖各种检测手段。前S1抗原是乙型肝炎病毒（HBV）的衣壳蛋白之一,前S1在病毒侵入体内起重要作用,前S1抗原检测对于临床乙型肝炎的诊断具有非常重要的意义,目前作为一种新型的血清学检测指标,     

六色荧光标记流式细胞术在淋巴细胞亚群检测中的应用

淋巴细胞是机体免疫系统功能中最重要的细胞群,是反应机体免疫状态的重要指标,对多种疾病的辅助诊断、疗效观察及预后检测有重要意义.流式细胞术是对细胞生物学性状、功能等进行定量检测的一种现代细胞分析技术.本科应用六色荧光标记流式细胞术(flow cytometry)对呼吸道感染患儿进行淋巴细胞亚群检验,以了解呼吸道感染患儿的免疫状况,为临床治疗提供参考.     

乙型肝炎病毒核心基因在毕赤酵母中的表达及表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体检测中的应用评价

目的在毕赤酵母中表达出高免疫反应性和特异性的重组乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg),探讨该表达产物在乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)免疫检测中的应用。方法用PCR从含有乙型肝炎病毒DNA模板的质粒中扩增出编码HBcAg的C基因,插入pPIC9酵母表达载体。携带有C片段的pPIC9转化毕赤酵母菌株GS115,经甲醇诱导表达HBcAg。分别用分子筛纯化毕赤酵母表达的HBcAg(A)、单克隆HBcAb特异结合纯化毕赤表达的HBcAg(B)、分子筛纯化大肠杆菌表达的HBcAg(C)、单克隆HBcAb特异结合纯化大肠杆菌表达的HBcAg(D)作为固相抗原,辣根过氧化物酶标记多克隆HBcAb为探测抗体,用竞争抑制法酶联免疫吸附测定(competitiveinhibitionELISA)检测HBcAb标准品及含有乙型肝炎病毒PCR阳性和阴性血清的临床标本。结果聚丙烯酰胺凝胶电泳、immunoblot、ELISA显示HBcAg在毕赤酵母中高效表达;分别用抗原A、B、C、D制备的试剂检测中国药品生物制品检定所HBcAb国家参考品:试剂A与B结果相同:阴性符合率(-/-)15/15,阳性符合率(+/+)15/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品2#=1∶128,3#=1∶16,4#=1∶64。试剂C与D结果相同:阴性符合率(-/-)15/15;阳性符合率(+/+)14/15;最低检出量(稀释度):灵敏度参考品2#=1∶32;3#=1∶16;4#=1∶32;大肠杆菌抗原的灵敏度明显低于毕赤酵母抗原。对乙型肝炎病毒PCR阳性及阴性的临床标本进行检测,结果如下:PCR阳性组HBcAb阳性检出率:试剂A97.8%;试剂B98.1%;试剂C96.6%;试剂D91.4%;A、B、C三组间比较差异无统计学意义(P>0.05);D分别与A、B、C相比较差异均有统计学意义(P<0.005)。PCR阴性组HBcAb阴性检出率:试剂A80.3%;试剂B80.9%;试剂C75.0%;试剂D85.7%;AB两组比较差异无统计学意义(P>0.05);AC、AD、BC,BD、CD相比较差异均有统计学意义(P<0.005);分子筛纯化的大肠杆菌HBcAg含有干扰检测的杂质,结果出现假阳性;大肠杆菌HBcAg存在表位缺失导致结果出现假阴性。结论毕赤酵母表达系统高效表达出具有良好免疫反应性和特异性的HBcAg,用于HBcAb的检测灵敏度及特异性均优于大肠杆菌表达产物。     

ANA及ANA谱联合检测在自身免疫性疾病中的临床价值

抗核抗体（ANA）是将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称,主要存在于血清。ANA可特征性地出现于许多AID中,尤其是风湿性疾病。不同AID可形成各种特征性的抗核抗体谱。ANA及ANA谱的检测为AID的早期诊断、鉴别诊断、疗效观察及临床用药提供重要依据。本文旨在探讨AID患者ANA及ANA谱检测的临床价值。     

流式细胞仪测检外周血树突状细胞及临床应用

目的建立简便可靠的外周血树突状细胞DC1、DC2亚群检测方法,探讨DC1、DC2亚群在慢性乙型肝炎患者中改变的意义。方法用流式细胞仪检测27名健康人、29例慢性乙型肝炎患者及19例肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞亚群。DC1不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3),但高表达HLA-DR及CD11c;DC2不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3),高表达HLA-DR及CD123。结果健康人组外周血DC1为(0.28±0.07)%,绝对计数为(18.6±5.3)×106/L,DC2为(0.22±0.09)%,绝对计数为(14.4±5.8)×106/L。慢性肝炎组DC1变化不明显(P>0.05),DC2百分比和绝对数显著下降(P<0.005),DC1/DC2升高(P<0.005)。肝炎肝硬化患者组DC1、DC2与对照组比较均明显减少(P<0.005)。结论流式细胞仪检测外周血树突状细胞亚群简便、可靠,适合于临床常规开展。DC1、DC2检测在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的疾病进程及机体免疫状况评价方面具有重要的临床价值。     

慢性乙肝患者调节性T细胞的检测及临床价值

目的 通过检测慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞比例以及替比夫定治疗前后调节性T细胞的变化,探讨慢性乙型肝炎的病理机制.方法 荧光标记的单克隆抗体染色外周血淋巴细胞,利用流式细胞仪检测CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞比例.结果 慢性乙肝患者外周血CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞占CD4+T细胞的比例为(7.5%±1.7%),较正常对照组显著增多(6.0%±1.4%,P<0.01),替比夫定治疗后则明显下降(6.5%±1.9%,P<0.01).结论 CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞的增多与乙型肝炎的慢性化有关,替比夫定治疗可有效改善患者的免疫状态.