核因子E2相关因子2在2型糖尿病及其并发症中的作用

高患病率及逐渐增加的发病率使糖尿病及其并发症已经成为全球性健康问题。慢性高血糖是其主要特点,是引起大血管及微血管并发症的根源。高血糖引起的活性氧和活性氮的过度生成导致的氧化应激,是糖尿病并发症的关键因素。在氧化应激相关疾病中核因子E2相关因子2是抗氧化反应的一个关键转录因子,通过表达抗氧化酶及Ⅱ相解毒酶可能会阻止糖尿病及其并发症的发生与发展。     

低氧诱导因子-1α在糖尿病肾病中的表达及其意义

目的 探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在实验性糖尿病肾病中的表达.方法 将30只健康Wister大鼠适应性喂养1周后随机分为模型组和对照组各15只,其中模型组于左下腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型,对照组腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液.两组均自心脏取血,采用全自动生化分析仪测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,并计算内生肌酐清除率（Ccr）;采用免疫组化及westerblot分析法测定肾脏组织中HIF-1α表达.结果 模型组血清BUN显著高于对照组,Ccr显著低于对照组,HIF-1α表达显著高于对照组.结论 HIF-1α在糖尿病肾病发生、发展中起重要作用,此为糖尿病肾病防治及预后判定提供了依据.     

缺氧诱导因子-1α在糖尿病肾病大鼠肾组织的表达及意义

目的探索缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血红素氧化酶-1（HO-1）在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达情况,及其与糖尿病肾脏微血管病变的关系。方法用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病肾病大鼠模型,在制模成功后2、4、8、12、16周取肾脏组织,以年龄匹配正常大鼠作为对照组,采用免疫组织化学sP方法结合图像分析检测糖尿病肾病大鼠石蜡切片中HIF—1α与HO-1的表达量。结果免疫组化显示HIF—1α在两组均有表达,但两组比较有差异（P〈0．01）。HO—1在对照组无明显表达,但模型组有明显表达,两组比较有差异（P〈0．01）。模型组HIF—1α和HO-1表达量均于8周时达高峰。模型组肾小管上皮细胞胞浆中HIF-1α和HO-1表达量呈正相关。结论糖尿病肾病存在HIF—1α和HO-1的表达上调,糖尿病肾脏存在缺氧状态,其缺氧状态可能与其微血管结构的改变有关,并参与了糖尿病肾病的发生发展。     

弥可保肌肉注射对糖尿病周围神经病变疗效观察

糖尿病周围神经病变是糖尿病微血管并发症之一 ,发病率高 ,约 4 0 %～ 6 0 % [1],与视网膜病变、肾脏损害并称为糖尿病的三大并发症 ,是主要的致死及致残因素之一。其病因主要是长期的高血糖导致的代谢障碍、微循环异常和自身免疫紊乱。严格控制血糖可降低和延缓糖尿病周围神经病变的发生和发展。弥可保 (甲钴胺 )是一种活性维生素Ｂ12 制剂 ,在甲基转移过程中起辅酶作用 ,参与卵磷脂和乙酰胆碱的生物合成。ＩｓｈｉｈａｒａＨ等报告指出 ,口服弥可保对糖尿病周围神经病变有治疗作用。我们以 2 0 0 0～ 2 0 0 1年住院患者为对象 ,在血糖控制…     

肾素抑制剂在糖尿病中的应用研究进展

糖尿病是由复杂发病机制引起的体内胰岛素绝对或相对不足,导致糖、蛋白质和脂肪代谢紊乱,并以慢性高血糖为主要临床表现的全身性疾病.其慢性并发症包括微血管病变(糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变),大血管病变(冠状动脉、脑血管、外周血管)及神经病变.很多临床研究显示,局部或整体的肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)失调在糖尿病慢性并发症中发挥重要作用,调节RAS是防治糖尿病并发症的重要途径.本文对肾素抑制剂--阿利吉仑(aliskiren)在糖尿病的心血管和肾脏并发症中的应用及器官保护作用的研究进展做一综述.     

氯化钴干预条件下糖尿病大鼠肾组织HIF-1α的表达及意义

目的研究氯化钴（CoCl2）干预条件下糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠肾组织缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）的表达及意义。方法按数字随机化原则取8只为正常对照组（CTL组）,16只为模型组,建立糖尿病肾病大鼠模型,并随机均分为糖尿病组（DM组）和CoCl2治疗组（CoCl2组）。检测相关生化指标,免疫组化学检测实验大鼠HIF-1α表达和分布,蛋白免疫印迹法（Western Blotting）检测肾脏组织HIF-1α蛋白表达。结果CTL组肾脏组织无HIF-1α表达,DM组HIF-1α主要分布于肾小管上皮细胞的胞浆和胞核;CoCl2组HIF-1α平均光密度显著高于DM组（P〈0.05）,其HIF-1α蛋白表达水平较DM组显著增加（P〈0.05）。结论缺氧参与糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）早期肾小管间质损伤,化学性低氧模拟剂CoCl2可通过上调HIF-α减轻蛋白尿和肾小管间质损伤,延缓DKD进展。     

糖尿病的健康指导

糖尿病及其并发症已成为严重威胁人民身体健康的世界性公共卫生问题 ,其患病率高达 2 0‰[1 ] 。糖尿病是由于胰岛素绝对缺乏或胰岛素的生物效应降低引起的体内代谢失调和高血糖状态。临床上出现多饮、多食、多尿、消瘦 (三多一少 )等表现 ,其并发症为低血糖及酮症酸中毒 ,慢性病变可涉及心血管系统、神经系统、肾脏、视网膜、皮肤等 ,其诱因有肥胖、感染、缺少运动等[1 ] 。作者在临床上通过对糖尿病患者的健康指导 ,可以有效地控制糖尿病的发展。1　心理指导1 1　患者的心理状况 :糖尿病是终身疾病 ,治疗需长期进行 ,且慢性并发症遍及全身…     

应用胰岛素泵治疗2型糖尿病的护理体会

糖尿病是一种以高血糖为主要生化特怔的全身慢性代谢性疾病.胰岛素分泌的绝对或相对不足是其病理和生理的主要特点,能引起脂肪、蛋白质、碳水化合物三大营养代谢紊乱,而高血糖与糖尿病并发症密切相关.每年5%～10%的2型糖尿病患者的血糖控制不达标.英国前瞻性糖尿病研究结果表明:微血管的发生率随糖化血红蛋白的上升而上升.严格控制高血糖不仅能延缓病情进展,也能有效的减少或延缓视网膜病变、肾脏病变和神经病变等各种并发症的发生和发展[1].     

半导体激光治疗糖尿病皮肤感染疗效观察

糖尿病并发症包括糖尿病足、视网膜病变及肾脏病变等,其中糖尿病皮肤感染是最常见的并发症,由于糖尿病的病理生理改变,皮肤微循环障碍使皮肤屏障防御能力下降,皮肤反复发生毛囊炎、疖、痈、蜂窝组织炎[1]。随着糖尿病发病率的逐年升高,糖尿病足患病人数也在逐年增多,甚至已达到糖尿     

缺氧诱导因子1-α在不同血糖浓度糖尿病大鼠视网膜组织中的表达

目的 检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在不同血糖浓度组糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用.方法 将SD大鼠随机分为对照组(CON)和糖尿病(DM)组.其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后用胰岛素使其血糖分别控制在＜10、10～14、＞16.7mmol/L 3个不同水平(分别作为DM1、DM2和DM3组), 8周后处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α的表达变化.结果 免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜几乎不表达HIF-1α,DM1组有少量表达,DM2组阳性细胞数量增多,DM3组表达更强,各组之间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血糖升高会引起HIF-1α的表达增强,提示HIF-1α参与了DR的发生、发展过程.     

雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α及内皮素-1表达的影响

目的研究雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及内皮素-1（ET-1）表达的影响,探讨雷公藤多苷对
糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用及可能机制。方法采用链脲佐菌素（55 mg/kg体质量）诱导致糖尿病大鼠,动物分为正常对照
组,糖尿病对照组,雷公藤多苷低、高剂量治疗组（8、16 mg/kg）及阳性对照组（厄贝沙坦50 mg/kg）,灌胃给药,每日1次,8周末
检测大鼠空腹血糖（BG）,血肌酐（Scr）,尿素氮（BUN）,24 h尿蛋白（24 h Upro）;HE染色光镜观察肾组织形态学的改变;病理图
像分析系统分析平均肾小球面积（MGA）及平均肾小球体积（MGV）;免疫组织化学及Western blot检测肾组织HIF-1α及ET-1蛋
白表达;实时荧光定量PCR检测肾组织HIF-1α及ET-1mRNA表达。结果糖尿病大鼠肾组织HIF-1α及ET-1表达增高。与糖尿
病对照组比较,各治疗组大鼠Scr、BUN、24 h Upro、肾重指数（KW/BW）、MGA、MGV显著降低,肾组织病理形态学明显改善;
HIF-1α、ET-1mRNA及蛋白表达显著减少;雷公藤多苷高剂量组各指标改善较显著。相关性分析显示ET-1表达与HIF-1α表达
呈正显著相关,HIF-1α及ET-1mRNA及蛋白表达与肾重指数（KW/BW）、24 h Upro、MGA、MGV呈显著正相关。结论糖尿病
大鼠肾组织HIF-1α及ET-1表达增加,雷公藤多苷可通过抑制HIF-1α及ET-1的表达,改善糖尿病大鼠肾脏损害,延缓糖尿病肾
病的发生发展。
     

HIF-1α、Glut-1和VEGF在糖尿病合并乳腺癌患者中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF-1α）、葡萄糖转运蛋白1（glucose transporter-1,Glut-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白在糖尿病合并乳腺癌患者中的表达及意义.方法 采用免疫组化技术检测112例乳腺癌组织中HIF-1α、Glut-1和VEGF蛋白表达,通过CD31标记血管内皮细胞评估乳腺癌组织微血管密度（micro vascular density,MVD）,并分析患者血糖控制效果与乳腺癌临床病理特征的相关性.结果 HIF-1α、Glut-1和VEGF蛋白在糖尿病乳腺癌组织中的表达水平均显著高于无糖尿病乳腺癌组织（t=2.255,P=0.030;t =2.154,P=0.038;t=2.225,P=0.032）.糖尿病乳腺癌组织中HIF-1α与Glut-1和VEGF表达均呈显著正相关（r=0.561,P =0.003;r=0.435,P=0.014）.糖尿病乳腺癌组织中MVD水平较无糖尿病乳腺癌组织显著升高（t=9.458,P=0.000）.乳腺癌患者血糖控制效果与淋巴结转移和肿瘤分期显著相关（x2=4.689,P=0.030;x2=5.051,P=0.025）.结论 糖尿病导致乳腺癌组织中缺氧相关指标HIF-1α、Glut-1和VEGF蛋白表达上调及MVD水平升高,且乳腺癌患者血糖控制效果与淋巴结转移和肿瘤分期相关,提示糖尿病可能通过高糖和缺氧促进乳腺癌进展.     

盐酸右旋美托咪啶通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤

目的本研究探讨盐酸右旋美托咪啶（Dex）是否通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注后损伤。方法高 脂高糖饮食8周后的SD大鼠,30 mg/kg链脲佐菌素（STZ）腹腔注射,建立糖尿病大鼠模型。以大鼠双肾动脉结扎60 min再灌注 120 min 的方法制作肾缺血再灌注损伤模型。分为普通大鼠组（Con）,假手术组（sham）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型组 （Con+I/R [ischemia-reperfusion, I/R]）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（Con+I/R+Dex）,糖尿病大鼠组（DM）,糖尿 病大鼠Dex治疗组（DM+Dex）,糖尿病大鼠地高辛（Dig）灌胃组（DM+Dig）,糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型组（DM+I/R）,糖 尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（DM+I/R+Dex）,糖尿病大鼠地高辛灌胃后肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组 （DM+Dig+I/R+Dex）。夹闭双肾动脉前2 h给予腹腔注射Dex,其它组别腹腔注射等量生理盐水。地高辛作为HIF-1α的抑制 剂,对于地高辛组予地高辛片0.05 mg/（kg· d）灌胃1周。所有组别大鼠肾缺血再灌注后取血样,分离血浆,多功能生化仪检测肌 酐（Scr）和尿素氮（BUN）含量,Western blot 测定HIF-1α、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax,ELISA 检测HIF-1α、p-eNOS、eNOS, TUNEL法测定肾小球细胞凋亡比例。结果普通大鼠和糖尿病大鼠在肾缺血再灌注后Scr、BUN、HIF-1α、p-eNOS、eNOS表达 水平及细胞凋亡比例均显著升高（P<0.05）;肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗后Scr、BUN、p-eNOS、eNOS表达水平明显降低, HIF-1α表达水平明显升高,差异有统计学意义（P< 0.05）;与Con+I/R相比,DM+I/R组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS进一步升高;与 DM+I/R组相比,DM+I/R+Dex组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS、cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显降低,HIF-1α 及Bcl-2表达明显升高;与DM+I/R+Dex组相比,DM+Dig+I/R+Dex组cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显升 高,HIF-1α及Bcl-2表达水平显著下降。结论Dex可能通过提高2型糖尿病大鼠HIF-1α的表达,抑制肾脏细胞的凋亡,减轻肾脏 细胞缺血再灌注后损伤。     

HIF-1α在5/6肾切除大鼠慢性肾纤维化模型中的表达

目的：探讨低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α）在慢性肾脏纤维化中的表达及作用,观察培跺普利对其表达的影响。方法：大鼠慢性肾纤维化模型用5/6肾切除法制作,假手术组为对照组,模型组随机分为手术组和培跺普利治疗组。治疗5周后,用天狼猩红苦味酸染色法检测胶原在肾脏的沉积;Western印迹检测HIF-1α蛋白在肾组织中的表达;实时荧光定量PCR法检测HIF-1α与CTGF (connective tissue growth factor) mRNA在肾组织中的表达。结果：与对照组比较,手术组的胶原、HIF-1α蛋白、HIF- 1α与CTGF mRNA表达明显增加（P＜0.01）。与手术组比较,治疗组的胶原、HIF-1α蛋白、HIF- 1α与CTGF mRNA表达明显减少（P＜0.01）。CTGF的表达与HIF-1α呈正相关（r=0.68,P＜0.01）。结论：HIF-1α通过调节CTGF的表达参与肾脏纤维化,培跺普利可通过减少HIF-1α的表达来减轻肾脏纤维化。     

2型糖尿病患者血清缺氧诱导因子-1α与颈动脉粥样斑块的相关性

目的 观察2型糖尿病(T2DM)患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的变化,探讨其与动脉粥样硬化性大血管病变的关系.方法 选择32例T2DM合并颈动脉斑块患者(T2DM+ CP组),24例单纯T2DM患者(T2DM组),24名健康体检者(正常对照组),采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定血清HIF-1α浓度.结果 T2DM+ CP组和T2DM组HIF-1α水平均显著高于正常对照组(均P＜0.01),T2DM+ CP组HIF-1α水平明显高于T2DM组(P＜0.05).血清HIF-1α水平与空腹血糖、糖化血红蛋白C(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)成明显正相关(均P＜0.05).多元线性逐步回归分析表明,HbA1c是血清HIF-1 α水平的独立影响因素.结论 T2DM患者体内高水平的血清HIF-1α与血糖、胰岛素抵抗有关,在大血管并发症的发生发展过程中起着重要的作用.     

HIF-1α对间充质干细胞SDF-1/CXCR4的调控作用研究

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对间充质干细胞基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）/CXC趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）的调控作用。[方法]贴壁法培养ICR小鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）;采用RNA干扰技术用SuperFectinTMⅡ转染HIF-1αsiRNA于MSCs;实验分为五组：常氧组、缺氧组、转染Control siRNA组、转染HIF-1αsiRNA常氧培养组、转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA表达水平;Western blotting检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4蛋白表达水平。[结果]同常氧组比较,缺氧组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平提高（P〈0.05）;同转染Control siRNA组比较,转染HIF-1αsiRNA常氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）;同缺氧组比较,转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）。[结论]缺氧可使MSCs的HIF-1α、SDF-1α、CXCR4的表达提高,常氧与缺氧条件下抑制HIF-1α的表达可使SDF-1α、CXCR4的表达降低,HIF-1α在间充质干细胞中对SDF-1/CXCR4有调控作用。     

氧浓度和钙离子对野生型及突变型低氧诱导因子-1α基因真核表达的影响

目的 对已构建的突变型人低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)真核表达载体pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala(单突变)和pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala-803Ala(双突变)进行进一步的功能鉴定.方法 将pcDNA3.1+/HIF-1α、pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala-803Ala分别用脂质体法短暂转染人胚肾上皮细胞(human embryo kidney 293,HEK293);Western blotting法检测正常氧、低氧无钙离子或有钙离子条件下各组转染细胞HIF-1α蛋白水平:RT-PCR法检测正常氧条件各组转染细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达.结果 正常氧条件下,转染突变体的细胞较转染野生型HIF-1α载体的细胞HIF-1α蛋白和VEGFmRNA水平增高;低氧条件下,转染野生型HIF-1α载体的HEK293细胞HIF-1α蛋白水平增高:Ca~(2+)刺激减少低氧时转染野生型HIF-1α载体细胞HIF-1α蛋白水平,但对转染突变体细胞HIF-1α蛋白水平无明显影响.结论 pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala和pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala-803Ala两种突变体产物在蛋白水平上具耐氧和耐蛋白酶降解的特性.

Abstract：

Objective To study the effects of oxygen and calcium on the expression of eukaryotic vectors harboring wild-type or mutated hypoxia-inducible factor-1α(HIF-1α)in HEK293 cells.Methods HEK293 cells were transiently transfected with pcDNA3.1+/HIF-1α,pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala and pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala-803Ala via lipofectin.Western blotting were used to detect HIF-1α protein after normoxic or hypoxic exposure of the transfected HEK293 cells in the presence or absence of Ca~(2+).The levels of vascular endothelial growth factor(VEGF)mRNA in the transfected cells in normoxic condition was detected using RT-PCR.Results The levels of HIF-1α protein and VEGF mRNA increased in HEK293 cells transfected with the vectors harboring mutated HIF-1α, but not in the cells transfected with wild-type HIF-1α vectors in normoxia.Hyooxia increased the levels of HIF-1α protein in the cells transfected with wild-type HIF-1α vectors,which was inhibited by the application of Ca~(2+). Ca~(2+) showed no inhibitory effect on HIF-1α levels in HEK293 cells transfected with the vectors containing mutated HIF-1α. Conclusion The protein products of pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala and pcDNA3.1+/HIF-1α-564Ala-803Ala in HEK293 cells enhance the cell tolerance to oxygen and protease.     

益肾活血方对UUO大鼠肾脏HIF-1α、PDGF-B、ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的：观察益。肾活血方对单侧输尿管结扎（UUO）大鼠中低氧诱导因子（HIF-1α）、血小板源性生长因子（PDGF—BB）、细胞间黏附因子1（ICAM．1）以及血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达的影响。方法：实验采用UUO大鼠造成肾纤维化动物模型,并以益肾活血方、氯沙坦灌胃治疗。分别在术后第7天、第14天、第21天采集肾脏标本,运用免疫组化法检测HIF—-1α、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM-1在肾脏中的表达。结果：假手术组大鼠各时间点内,肾组织HIF-1仅、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM．1蛋白表达均在正常范围内;模型组大鼠随时间延长,肾组织HIF—-1α、PDGF-BB、VCAM-1蛋白表达逐渐增加,给药组大鼠肾组织HIF-1α、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达有所降低（P〈0．01或P〈0．05）,益肾活血方组降低优于氯沙坦组。结论：益肾活血方能明显改善。肾纤维化过程中的内源性低氧状态、减轻大鼠肾间质的炎症反应,从而达到延缓肾间质纤维进展的作用。     

低氧细胞应激的HIF-1信号通路

低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)由HIF-1α和HIF-1β两个亚基组成,在低氧下其能激活多种靶基因的转录,在细胞、组织生长发育和生理应激,以及某些病理过程中具有重要的作用.近10年来,有关HIF-1在细胞低氧应激时的信号转导通路,特别是HIF-1α介导的基因转录调控的研究取得了巨大进展.