醋纤薄膜电泳蛋白各组分观测方法的探讨

血清醋酸纤维薄膜电泳由于相对快速和经济等优点是临床化学实验室常规化验项目。但是,对各蛋白组分的定量测定因误差太大,不精密,故一般不需定量测定,只要对电泳膜条区带进行目测即能满足临床的需要。     

血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验常见的问题及对策

通过分析、总结学生在血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验中常出现的问题,提出相应的解决措施,以进一步提高实验课的教学效果.     

做好血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验的几点经验

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳具有微量、快速，灵敏度高，电泳图谱清晰等优点，是目前临床化学检验较常用的一种分离技术。     

"血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳"实验须注意的几个环节

“血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳”实验在临床诊断和治疗上有很重要的价值,是生物化学学科最常开设的基本实验项目之一,但实验过程影响因素很多。分析了实验过程中实验仪器、实验药品和载体、实验准备、学生操作等4个主要环节中的一些注意事项。     

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的若干问题及解决方法

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的若干问题及解决方法右江民族医学院生化学教研室农嵩（百色５３３０００）血清蛋白电泳自１９５７年Ｋｏｈｎ开始使用醋酸纤维素薄膜后，经不断改进，已代替纸电泳成为常规方法［１］。醋纤膜电泳由于分辩力高，电泳时间短等优点被广泛应用于...     

回收醋纤薄膜电泳废漂洗液的一种简易方法

<正> 醋纤薄膜蛋白电泳为实验室常规项目,该试验的漂洗液成本较高(每升中含乙醇或甲醇450ml,冰乙酸50ml),漂洗过几次后,染料(氨基黑10B)含量过多成为废液,必须倒掉另换新液,很不经济。为了节约,我们利用活     

待产妇血清蛋白电泳各组分参考值范围的研究

目的:了解待产妇血清蛋白电泳图谱的改变及各组分的参考值范围。方法:采用法国sebia全自动电泳仪,测定300例待产妇(实验组),300例育龄非孕健康女性(对照组)的血清蛋白电泳。结果:实验组白蛋白百分比较对照组低(P<0.01),α1、α2、β球蛋白百分比较对照组明显增高(P<0.01),而γ球蛋白百分比与对照组相比,则明显降低(P<0.01)。实验组血清蛋白电泳各组分大致参考值范围为白蛋白47.9%~65.5%,α1球蛋白2.0%~6.0%,α2球蛋白8.7%~15.1%,β球蛋白10.0%~18.5%,γ球蛋白6.0%~22.2%。结论:待产妇血清蛋白电泳图谱的改变主要表现在白蛋白、γ球蛋白低,而α1、α2、β球蛋白比例增加,和育龄非孕健康女性比较,有其独立的参考值范围。     

孕期尿微量蛋白检测与高血压疾病发生的相关因素探讨

【目的】对311例孕妇从孕中期开始进行尿微量蛋白成分测定并予以追踪,探讨与高血压疾病发生的相关性。【方法】随机抽取初次中期孕检孕妇311例,常规尿检后行蛋白电泳检测并予以追踪至分娩,根据追踪过程中有无血压升高发生分为2组,即高血压组与非高血压组,2组孕妇的年龄、产次、孕周无限定。【结果】(1)发生高血压的孕妇平均年龄低于非高血压孕妇,体块指数、追踪次数及孕周明显高于非高血压孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)孕期高血压97.10%发生在孕晚期(28周后);(3)非高血压孕妇蛋白尿主要以1+为主,占67.24%,高血压组孕妇蛋白尿以2+为主,占46.84%,两者比较有统计学差异(P<0.01);(4)非高血压孕妇尿蛋白电泳条带数主要以2、3条带为主,分别占到41.38%和29.31%,而高血压组孕妇主要以3、4和≥5条带为主,分别占32.91%、24.15%和32.91%,两者比较有统计学差异(P<0.01)。(5)高血压孕妇尿中γ蛋白成分明显增高(P<0.05)。【结论】(1)孕期高血压的发生与年龄、体重指数及孕周具有关联性。(2)孕期尿中蛋白含量和成分增加,高血压疾病的发生几率增高。(3)孕期对孕妇行尿微量蛋白成分监测是早期发现妊娠高血压疾病发生的有效方法。(4)当孕期尿中出现γ蛋白成分时,妊娠高血压疾病发生率极高。     

改良双缩脲法测定血清总蛋白的方法与应用

目的探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验。优选氢氧化钾和酒石酸钾的最佳浓度。结果含氢氧化钾143mmol/L、酒石酸钾钠56.7mmol/L的改良试剂与含TG5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不做标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530～560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.2992,0.3036L.g-1.cm-1。测定线性范围28～140g/L。回归方程y=0.8925 0.2727x,r=0.9995。与Doumas法平行测定外观正常的血清72例,结果无显著差异(t=0.99,P>0.2)。结论改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白,应用效果满意。     

去除血清中高、中丰度蛋白方法的优化

目的：通过比较和优化血清样品制备方法,建立简便、灵敏的去除血清中高、中丰度蛋白的方法。方法：运用盐析法、有机溶剂法和亲和层析柱法去除血清中高、中丰度蛋白,经蛋白浓度测定和SDS-PAGE电泳分析,比较3种方法对高、中丰度蛋白去除效果及小分子蛋白的保留和分布情况。结果：乙腈沉淀法能去除血清样品中90%左右的高、中丰度蛋白,同时可残留更多15 ku以下的小分子蛋白;盐析沉淀法和亲和层析柱法均能去除血清样品中大部分高、中丰度蛋白,但所得的15 ku以下的小分子蛋白少于乙腈沉淀法所得到的相应蛋白。结论：用1.2倍体积乙腈沉淀法处理血清样品可去除绝大部分高、中丰度蛋白,同时收获更多的15 ku以下的小分子量蛋白。     

一种简便的实验室测定母乳总蛋白的方法

对５０例母乳总蛋白进行测定，发现考马斯亮蓝法与微量消化定氮法的结果较为接近（分别为ｘ＝９．６＋２．３ｇ／Ｌｘ＝１１．４＋１．８ｇ／Ｌ），其相关系数为０．９７，相关性好，且ＣＶ值符合实验要求，但微量消化定氮法的操作步骤比较繁琐，而考马斯亮蓝法测母乳总蛋白较为简便、可靠。     

丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达

目的 在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白。方法 将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后，构建重组质粒pVHCV。重组质粒转染BHK21细胞后，再用痘苗病毒vTF7-3株感染，培养48h后收集细胞。Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况。结果 Western blotting结果表明，在细胞中检测到相对分子质量为70000(NS3)和58000(NS5a)的两条带；免疫荧光试验结果表明，无论采用抗NS3单抗还是抗NS5a单抗，大部分转染质粒细胞的细胞质中都具有较强的荧光反应。结论 HCV非结构蛋白NS3和NS5a在BHK21细胞中得到表达。     

丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达

目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白。方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV。重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞。Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况。结果Western blotting结果表明,在细胞中检测到相对分子质量为70 000 (NS3)和58 000 (Ns5a)的两条带;免疫荧光试验结果表明,无论采用抗NS3 单抗还是抗NS5a 单抗,大部分转染质粒细胞的细胞质中都具有较强的荧光反应。结论HCV非结构蛋白NS3和NS5a在BHK21细胞中得到表达。     

层粘连蛋白染色方法的探讨

采用ＰＡＰ法，对乙醇、福尔马林固定的新鲜标本、存档蜡块及福尔马林长期浸泡的标本进行层粘连蛋白（ＬＮ）染色方法的探讨。结果表明：用胃蛋白酶消化后，乙醇、福尔马林固定的新鲜标本及存档蜡块均可获得满意而稳定的染色效果。长时间浸泡于福尔马林的标本ＬＮ的抗原性减弱，染色效果不稳定。     

p16蛋白免疫组化染色方法的探讨

ｐ１６蛋白免疫组化染色方法的探讨高英贤邱雪杉林国宏（基础医学院病理解剖学教研室，沈阳１１０００１）关键词抑癌基因；ｐ１６蛋白；免疫组化；染色ｐ１６是一种新发现的抑癌基因，由于其编码的蛋白质产物是ＣＤＫ４抑制因子［１］在细胞增生和恶性转化过程中起着重要...     

影响蛋白电泳的因素及处理方法探讨

蛋白电泳作为医院的常规检测方法,已广泛应用于临床。但是在实际操作过程中发现影响蛋白电泳的因素较多,为保证蛋白电泳的质量和结果的准确性,我们对其影响蛋白电泳的因素及处理方法进行了探讨,现报告如下。1电场强度电场强度（E）为单位距离（L）内的电位降（thu）E＝rtu·L－‘即电泳介质两端的电压除以介质的长度。约为13－15V／cm长。电场强度与电泳速度成正比。若电场强度增大,通过的电流也会增大,而产生较大的热效应,过多的热量会加速电泳介质上水份的蒸发,从而影响缓冲液的离子强度,引起蛋白质样品热变性,使电泳失败。若…     

医院各区域内空气消毒效果及监测方法的探讨

目的探讨医院各区域内空气消毒效果及监测、培养所需时间.方法对3496份消毒后空气采用"平板暴露法”进行监测.第一组848份采样时平板暴露15min、置35C温箱培养48h,第二组2648份采样平板暴露5min、培养24h.结果第一组检测无菌生长率为2.6%、阳性检出率为97.4%、合格率为83.3%;第二组无菌生长率为l7.5%.阳性检出率为82.5%,合格率为88.4%.结论根据尘粒(1～10μ粒径)自然下降规律和所带细菌受损后修复需要时间,我们认为采用"平板暴露法”监测消毒后空气时以暴露15min培养48h为好.     

关于乙酰螺旋霉素片四组分含量的计算方法和限度的探讨

2005版《中国药典》中乙酰螺旋霉素片四组分总量的计算方法[1]和计算结果,仅仅是一个特例,无法有效控制四组分的真实含量,改进计算方法后,可使计算公式逻辑严密。经推导和通过试验考察确证的限度,客观真实地反映四组分的含     

关于乙酰螺旋霉素片四组分含量的计算方法和限度的探讨

2005版《中国药典》中乙酰螺旋霉素片四组分总量的计算方法和计算结果，仅仅是一个特例，无法有效控制四组分的真实含量，改进计算方法后，可使计算公式逻辑严密。经推导和通过试验考察确证的限度，客观真实地反映四组分的含量，易于控制产品质量。