骨髓干细胞在小鼠糖尿病性肾脏疾病表型转移中的作用

目的 观察骨髓干细胞在糖尿病性肾脏疾病表型转移中的作用。方法采用链脲佐霉素（STZ）腹腔注射复制糖尿病动物模型,分离糖尿病小鼠和正常小鼠骨髓细胞,经尾静脉分别注入受放射后的小鼠体内作为实验组及对照组,移植后第8周测定各组小鼠空腹血糖和葡萄糖耐量、尿白蛋白、肾小球中a1Ⅳ型胶原和TGF-β1 mRNA的表达及肾脏病理改变。结果发现实验组小鼠血糖和葡萄糖耐量基本正常,但尿白蛋白／肌酐比值较对照组高出3．3倍,肾小球体积增大1．2倍,肾小球系膜基质增宽1．98倍,肾内Ⅳ型胶原沉积增多,肾小球中α1Ⅳ型胶原mRNA和TGF-β1 mRNA表达明显增强。结论骨髓干细胞在STZ复制的糖尿病小鼠肾脏病变表型转移中具有重要作用。     

老年人尸检正常肾肾小球系膜区Ⅳ型胶原定量研究

目的肾小球系膜区细胞外基质进行性积聚是肾小球硬化的重要特征，Ⅳ型胶原是系膜基质的重要成分。本研究评估老年人尸检正常肾肾小球系膜区基质中Ⅳ型胶原的分布。方法应用标记的链亲和素－生物素（ＬＳＡＢ）免疫组化技术，检测了８１例老年人尸检肾的肾小球系膜基质中Ⅳ型胶原分布情况，并且采用真彩色图像分析系统对Ⅳ型胶原进行定量研究。结果显示肾小球系膜Ⅳ型胶原的数量及染色强度随年龄的增长而增加。结论老年人肾小球已具有肾小球硬化的早期病理基础。     

自发性高血压大鼠肾小球胶原含量的早期变化

采用胶原特异性的苦味酸天狼猩红（PSR）染色法和计算机图像分析技术，检测不伴肾小球硬化的27周龄雄性自发性高血压大鼠（SHR）和同样年龄、性别的Wistar—Kyoto大鼠（WKY）肾小球胶原含量。结果显示：SHR肾小球胶原面积和胶原密度均显著高于WKY（SHR：1763±403um2，024±0．06；WKY：1224±443um2，0．18±0．05，P＜0．05）。提示（1）SHR肾小球胶原沉积增加，（2）累积的肾小球胶原可能是肾小球硬化的早期病变。     

老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原测定的意义

目的 探讨老年人群及老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原测定的变化意义。方法 随机选取96例老年2型糖尿病患者、90例非老年2型糖尿病患者（尿微量白蛋白阴性）和93例老年非糖尿病人，采用ELISA法测定尿Ⅳ型胶原，分析其在老年糖尿病患者中的意义。结果 （1）老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原[（13．37±6．42）ng／ml]明显高于老年非糖尿病患者[（10．52±6．44）ng／ml]（P〈0．05）。（2）老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原与非老年糖尿病组尿Ⅳ型胶原[（10．41±7．53）ng／ml]有显著差异（P〈0．05），2组间糖尿病病程无明显差异。结论 （1）老年糖尿病患者相对于非老年糖尿病，以及老年非糖尿病患者尿Ⅳ型胶原显著性增高。（2）老年2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原的升高早于尿微量白蛋白，检测尿Ⅳ型胶原有助于早期发现老年糖尿病患者肾损害。     

脱氢表雄酮对大鼠增龄过程中动脉一氧化氮信号途径的影响

目的 观察大鼠动脉一氧化氮（NO）信号途径的增龄性变化及脱氢表雄酮（DHEA）的干预作用。方法 实验用Wistar大鼠，分3组：18月龄组；DHEA干预组（18月龄，12月龄时开始在喂养基础饲料中添加DHEA1mg·kg^-1·d^-1）；12月龄组。每组各6只。取胸主动脉，western blot法测一氧化氮合酶（eNOS）蛋白，Griess法测定NO含量，放射免疫法测环磷酸鸟苷（cGMP）含量，比色法测超氧化物歧化酶（SOD）的活性和丙二醛（MDA）含量。结果 18月龄鼠组与12月龄鼠组比较主动脉中（1）eNOS的蛋白表达（0．58±0．07）降低，（2）SOD的活性（（179±20）对（253±25）U·mg pro^-1]降低，MDA含量（（6．89±0．54）对（4．88±0．27）mol／mg pro]升高，（3）NO含量（（3．42±0．68）对（4．80±0．65）nmol／mg pro]和cGMP含量（（8．46±0．46）对（10．00±0．50）pmol／mg pro]降低，均为P〈0．01。给予DHEA干预的18月龄鼠组上述变化均明显改善。结论 随着增龄，大鼠动脉eNOS表达降低，抗氧化功能减弱，血管平滑肌对NO反应性明显减弱，血管发生了老化。DHEA能改善大鼠动脉因增龄引起NO信号途径的变化，延缓血管老化的进展。     

低密度脂蛋白对体外培养的肾小球系膜细胞表型转化的影响

目的研究低密度脂蛋白(LDL)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)表型转化的诱导作用。方法采用不同浓度的LDL(O，25，50，100，150μg／mL)刺激体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的方法，以MTT比色法检测细胞增殖，透射电镜观察系膜细胞的形态学变化，免疫细胞化学染色及Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)及纤维连接蛋白(FN)的表达。结果在LDL作用下，系膜细胞形态发生明显变化，细胞变为长梭形，透射电镜下出现肌动蛋白样结构。免疫细胞化学染色及Western blot显示α-SMA、CTGF、ColⅣ及FN表达增强(P＜0．05)。结论LDL具有诱导肾小球系膜细胞发生表型转化的作用。     

辛伐他汀和西拉普利对人肾小球系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ表达的影响

目的 探讨辛伐他汀和西拉普利对人肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子Ⅰ(ICF-Ⅰ)表达的影响。方法 体外培养人胎肾小球系膜细胞，在低糖(5．6mmol／L)和高糖(30mmol／L)环境下，加入辛伐他汀(10μmol／L)、西拉普利(10μmol／L)及辛伐他汀 西拉普利培养48h后，分别测定细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原(酶免法和放免法)浓度及系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ mRNA表达水平(RT-PCR法)。结果 与低糖比较，高糖环境中系膜细胞过度增殖，TGF-β1和IGF-Ⅰ mRNA表达明显增高，细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原含量也显著升高。加入辛伐他汀和西拉普利后，高糖环境下系膜细胞TGF-β1和ICF-Ⅰ mRNA的表达明显降低，细胞上清液中TGF-β1和基质蛋白含量也亦显著下降。合用辛伐他汀和西拉普利对系膜细胞TGF-β1表达的抑制作用较单独用上述两药更强。结论 高糖可促进系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ的表达，辛伐他汀和西拉普利可一定程度逆转高糖环境中系膜细胞TGF-β1和IGF-Ⅰ的过度表达，并降低细胞上清液中TGF-β1和基质蛋白的含量。     

氨氯地平对SHR肾小球系膜细胞的保护作用

目的 观察氨氯地平是否能抑制SHR肾小球系膜细胞的肥大与增殖。将氨氯地平与苯那普利拉及氯潲坦比较其单用或合用时的不同效应。方法 采用SHR系膜细胞培养技术，以^3H-亮氨酸或^3H-胸苷的cpm值反映蛋白或DNA合成。结果 （1）SHR系膜细胞在AngⅡ，PDGF刺激后引起的肥大与增殖，均可被氨氯地平所抑制；（2）在AngⅡ组，对于肥大与增殖三种药物单用时抑制作用无差异。PDGF引发的肥大，氯沙坦，普那普利拉明显优于氨氯地平，且普那普利拉比氨氯地平强；PDGF引发的增殖，仅氯沙坦比氨氯地平强。（3）氨氯地平与普那普利拉或氯沙坦联合后均有协同的抗肥大作用。抗增殖方面，氨氯地平与普那普利联合在AngⅡ组无协同作用，在PDGF组有协同作用。氨氯地平与氯沙坦配伍后对增殖有协同拮抗作用。结论 （1）氨氯地平能抑制SHR系膜细胞的肥大与增殖。（2）在AngⅡ组，抗系膜细胞的肥大与增殖，氨氯地平与普那普利拉，氯沙坦互相之间无差异；由PDGF引发的肥大与增殖，氯沙坦明显优于氨氯地平；（3）氨氯地平与普那普拉或氯水坦联合后有协同抗系膜细胞肥大作用；在抑制增殖方面，氨氯地平＋氯沙坦可能优于氨氯地平＋普那普利拉。     

全反式维甲酸对TGF—β诱导肾小球系膜细胞CTGF及信号通路的影响

目的探讨全反式维甲酸（atRA）在转化生长因子β（TGF—β）／Smad信号通路中诱导系膜细胞表达结缔组织生长因子（CTGF）的作用。方法培养第4代大鼠。肾小球系膜细胞分组：对照组;TGF—β（5、10ng／ml）组;TGF—β＋Staurosporine组;药物组：atRA（10^-3、10^-6、10^-9mol/L）预处理24h后,再加TGF—β（10ng／ml）共培养。分别提取4、12、24h细胞总蛋白,用Western blot法测CTGF蛋白和Smad2蛋白的表达。结果在外源性TGF—β刺激下,CTGF、Smad2蛋白的表达明显增加（P〈0．05）。与TGF—β组比较,药物组CTGF、Smad2蛋白表达明显减少（P〈0．05）,呈时间和浓度依赖性;各组不同时间段内Smad2蛋白和CTGF蛋白表达呈正相关（P〈0．05）。结论TGF-β可刺激大鼠肾小球系膜细胞CTGF和Smad2蛋白的表达,atRA可以抑制其表达,且此作用可能与Smad2信号通路有关。     

甘草酸对胰腺星状细胞细胞外基质代谢调节作用的研究

目的观察甘草酸对胰腺星状细胞（PSC）合成分泌Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶（MMP）及其抑制物（TIMP）的影响，探讨其抗胰腺纤维化的作用机制。方法采用组织块培养法分离培养活化的PSC，培养基中添加0、1、2．5、5和10mg／ml不同剂量的甘草酸，培养24h后分别留取上清和细胞。采用放射免疫法测定上清中Ⅰ型胶原含量；明胶酶谱和反式明胶酶谱测定浓缩上清中MMP-2、MMP-9和TIMP1、TIMP-2的表达；RT-PCR测定MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和I型胶原mRNA的表达。结果甘草酸可明显抑制PSC中Ⅰ型胶原含量，以5mg／ml时抑制最明显[从（52±10）ng／ml降至（35±8）ng／m1]。明胶酶谱和RT-PCR显示，PSC有MMP-2、MMP-9和TIMP-2基因和蛋白表达，而TIMP-1仅有基因表达。甘草酸可抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达，而MMP-9基因表达未受明显抑制；甘草酸对TIMP-1和TIMP-2基因表达无明显作用，对TIMP-2蛋白的表达仅在10mg／ml浓度时有部分抑制。结论甘草酸可能通过抑制Ⅰ型胶原合成、减少MMP-2和MMP-9表达等途径抑制PSC中细胞外基质的代谢。     

Progredient subclinical changes of the behaviour

The author describes serious subclinical deviations of behaviour in longevity (80-90 years) in connection with 36 cases of a homogenous group of aged persons. In 4 cases she observed normal behaviour, in 13 cases the syndrome of loss of prestige, in 7 cases milder anomalies of the behaviour, in 12 cases grave deviations. The matter of the present article is to review the graver subclinical anomalies. They include unjustified intermittent depression, pathological avarice, forgetfulness regarding the daily routine (putting away articles for personal use, etc.). At the same time there is the maintained interest in and knowledge of the domain of sciences, music, latest scientific results; but also temporary uncritical behaviour, rages in consequence of which the aged person becomes amnesic before long. The deviations described are of temporary character at first (in cerebral, vascular decompensation, exhaustion). When anatomic alterations develop in the neurocytes, they will become manifest.     

老年化大鼠的新陈代谢变化

从水代谢，肝组织胸谱方面研究了动物机体老化过程的新陈代谢的变化，通过重水分布实验直接证明老年动物体内水分子的自由度明显减小，肝脏细胞各有关亚细胞结构的标志酶研究证明，老年组动物的肝脏微粒体的辅酶Ⅱ，细胞色素Ｃ还原酶，粗面内质网的葡萄糖－６－磷酸酶及细胞浆膜的５′核苷酸酶等活性都明显低于青年组动物，而肝脏线粒体中琥珀酸细胞色素Ｃ还原酶活生未见明显变化，这些规律对于老年疾病的预防和治疗，将有一定启示。