HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

聚合酶链反应限制酶切分析及病毒分离检测巨细胞病毒感染

在人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）直接早期蛋白Ｅｃｏ ＲＩＪ ＤＮＡ片段内,自行设计两对引物,建立套式ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ ＤＮＡ,同时结合病毒分离检测临床标本。结果发现２３例新生儿肝炎综合征患儿中,１０例病毒分离及套式ＰＣＲ均阳性;１例病毒分离阴性,但套式ＰＣＲ阳性。对５８例妊娠早期孕妇血标本进行检测,套式ＰＣＲ阳性率９％,病毒分离阳性率则为７％。     

柳州市急性散发性戊型肝炎病毒（HEV）部分核苷酸序列分析

应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）法检测柳州市７例散发性戊型肝炎病人急性期血清,６例ＨＥＶＲＮＡ阳性（８５．８％）。对其中２份阳性ＰＣＲ产物纯化后,直接测定其核苷酸序列,并与ＨＥＶ墨西哥株（Ｍ）、缅甸株（Ｂ）、中国流行株ＣＨ１．１进行比较。该２株ＨＥＶ散发株与ＨＥＶ（Ｍ）、ＨＥＶ（Ｂ）、ＨＥＶＣＨ１．１的核苷酸同源性分别为８０．８％、９２．４％～９２．７％、９７．５％～９７．７％。结论,该２株ＨＥＶ散发株与ＨＥＶ（Ｂ）和ＣＨ１．１为同一亚型。     

巨细胞病毒对孕产妇造成异常妊娠结局的研究

采用ＰＣＲ技术和ＥＬＩＳＡ法对５１７６例孕产妇及新生儿进行巨细胞病毒（ＣＭＶ）检测。结果表明：有异常妊娠史妇女ＣＭＶ平均感染率为１５．６％，前３位依次为畸胎史（２９．２％）、习惯性流产史（１９．２％）、先兆流产史（１５．６％）；早孕至中孕期，孕妇ＣＭＶ感染率为１９．２％；孕前妇女ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为８．７％；对１５５例新生儿进行ＣＭＶ检测，得知ＣＭＶ感染患儿以合并肺炎最为常见，其次为黄疸、溶血性贫血、先心病等；对４６５０份新生儿脐血检测ＣＭＶ，结果表明先天性ＣＭＶ感染率为１．７％。     

PCR技术检测尿中人巨细胞病毒的方法学研究

应用ＨＣＭＶ早、晚期两对ＤＮＡ引物，建立了聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测尿中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的方法。肾移植术后ＨＣＭＶ感染的临床尿样检测结果表明，该方法具有快速、特异性强、灵敏度高等优点，与血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ检测结果符合率为８３．３％。使用早、晚期基因组的双引物分别对临床尿样进行ＰＣＲ扩增，减少了由于自然点突变所致的假阴性，且引物与ＨＣＭＶ同属其它病毒及组织ＤＮＡ间无交叉反应；以ＨＣＭＶ组织培养液作模板，灵敏度可达６２５ｆｇ。本方法为诊断肾移植受者ＨＣＭＶ感染提供了新的手段，适于临床推广。     

舟山海岛地区孕早期妇女ＴＯＲＣＨ 感染情况调查研究

摘要：目的　了解舟山海岛地区孕早期妇女ＴＯＲＣＨ 感染状况,为有效预防ＴＯＲＣＨ 感染提供参考。方法 　以２０１３年６月至２０１６年３月于舟山医院进行孕期检查的１９７２例孕早期妇女为试验对象。采用酶联免疫 吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清ＴＯＲＣＨ ＩｇＭ 与ＴＯＲＣＨ ＩｇＧ 抗体水平。结果　舟山海岛地区ＴＯＲＣＨ ＩｇＭ 总阳性率为０．６６％。９９．９５％的研究对象至少检出１项ＩｇＧ 抗体阳性,以单纯疱疹病毒（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉ ｒｕｓ,ＨＳＶ）Ⅰ 型和巨细胞病毒（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＣＭＶ） 阳性率最高, 均为９４．５２％。ＩｇＧ 抗体分布以 ＨＳＶⅠ＋ＣＭＶ＋ＲＶ 模式最多见。ＲＶ ＩｇＧ、ＴＯＸ ＩｇＧ 抗体阳性率在各年龄段间差异无统计学意义（χ ２＝ ０．３５５、０．４９７,犘＝０．５５１、０．４８１）;ＨＳＶⅠ ＩｇＧ、ＨＳＶⅡ ＩｇＧ、ＣＭＶ ＩｇＧ 这三种病原体阳性率随着年龄增 大而上升,差异有统计学意义（χ ２ 趋势＝７．８０９、３５．３４３、１１．７２６,犘＝０．００５、０．０００、０．００１）。结论　舟山 海岛地区孕早期妇女ＴＯＲＣＨ 感染情况不容忽视, 应加强孕妇对ＴＯＲＣＨ 危害认知的宣传工作, 将 ＴＯＲＣＨ 筛查作为孕前和孕早期常规检查项目,ＩｇＭ 抗体和ＩｇＧ 抗体同时检测很有必要,高龄孕妇更应加 以关注。 关键词：ＴＯＲＣＨ;感染;免疫球蛋白Ｍ;免疫球蛋白Ｇ;抗体;孕早期 中图分类号：Ｒ１７３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１７）０９ ０７０３ ０４     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正,负链的…

选择ＨＣＶ基因组５＇非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患的血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负莲ＨＣＶ ＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦ     

急性散发性戊型肝炎病毒（HEV）部分核苷酸序列分析

应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测杭州市散发性成型肝炎病人的急性或血清，３例ＨＥＶＲＮＡ阳性（３／１０），对其中一份扩增产物用荧光法测序，并与ＨＥＶ墨西哥株、缅甸流行株和散发株以及中国流行株ＣＨ１．１序列比较表明，该株散发性ＨＥＶ与墨西哥株核昔酸和氨基酸序列的同源性分别为７９．４％和９５．０％，与缅甸流行株和散发株的核苷酸同源性分别为ｇ３．５％和９５．１％，氨基酸同源性分别为９６．６％和９８．３％，与中国新疆流行株ＣＨ１．１核苷酸和氨基酸同源性分别为９５．９％和９５．８％。提示该ＨＥＶ散发株与新疆流行株一样，与ＨＥＶ缅甸株可能为同一亚型。     

聚合酶链反应标记输血传播病毒(TTV)地高辛素探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针，并与巢式ＰＣＲ法（ｎＰＣＲ）比较。结果该探针具有ＴＴＶ特异性，其灵敏度为１０ｐｇＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲～庚型肝炎病人的血清标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为１８５％（２０／１０８）；检测２２份病人的粪便标本，ＴＴＶＤＮＡ阳性率为２７３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率为９６９％（１２６／１３０）。结论：用ＰＣＲ法直接制备地高辛素标记ＤＮＡ探针简便、快速、灵敏度高，特异性好。应用该法从６名病人的粪便中检出ＴＴＶＤＮＡ，提示ＴＴＶ有可能通过粪口途径传播。     

妊娠妇女巨细胞病毒及单纯疱疹病毒感染与免疫状态研究

为了解妊娠期间巨细胞病毒（ＣＭＶ）及单纯疱疹１８３名妊娠妇女、２２名反复自发流产妇女和３２名非妊娠妇女进行病毒分离、抗体测定、病毒抗原特异性淋巴细胞增殖反应（ＬＰＲ）测定。早期和晚期妊娠妇女ＨＳＶ阳检率分别为２．７％（５／１８３）和１．０％（１／１０１），ＣＭＶ阳检率为１．１％（２／１８３）和２．０％（２／１０１）。妊娠妇女、反复自发流产妇女和非妊娠妇女ＣＭＶ抗体阳检率为５１．６％、５０％和３４．     

水厂源水与出厂水肠道病毒污染状况研究

本研究采用ＮａＣｌ·ＡｌＣｌ３·６Ｈ２Ｏ沉淀法浓集病毒，细胞接触法接种标本。从６份水厂出厂水中分离到１株ＰＶＩ（脊髓灰质炎病毒Ｉ型），１株肠道病毒（ＥＶ）；８份源水分离到ＰＶＩ３株，ＰＶⅢ１株，ＥＶ２株。表明源水和自来水中均有病毒污染。所分离的ＰＶ经ＲＴ－ＰＣＲ和Ｔ特征试验，为疫苗相关株。鉴于自来水中ＥＶ的存在，为保证饮水安全，对病毒应作常规监测。     

母婴柯萨奇B组病毒感染的研究

用ＥＬＩＳＡ方法对孕妇静脉血及脐血血清进行柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）抗体检测。孕妇血ＣＶＢ－ＩｇＧ阳性率为６９．９％（１００／１４３例），孕妇血ＣＶＢ－ＩｇＭ阳性率为２６．３％（５９／２２４例），脐血ＣＶＢ－ＩｇＭ阳性率为６．０％（７／１１６例）。孕妇ＣＶＢ感染存在母婴传播问题。     

母婴间乙型肝炎与丙型肝炎双重感染的研究

从流行病角度，利用分子生物学技术及免疫学方法，对２１０例产妇血清及新生儿 脐带血清，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ） 及丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，其结果为：ＨＢｓＡｇ阳性产妇的新生儿阳性率为６５．５％，ＨＢｅＡｇ阳 性产妇的新生儿阳性率为８１．８％，抗－ＨＣＶ阳性产妇的新生儿阳性率为７５．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ及 ＨＣＶ－ＲＮＡ双重阳性产妇的新生儿阳性率为１００．０％，说明母婴间存在乙型肝炎（ＨＢ）、丙型肝炎 （ＨＣ）及双重感染，其垂直传播可发生于宫内及围产期，是婴幼儿患病毒性肝炎的主要感染途径。 由于乙型肝炎及丙型肝炎的临床表现无特异性，不能从临床症状和体征中得以诊断，所以建立敏 感、特异的实验检测方法，为临床提供早期诊断依据，建立围产期保健制度，分娩过程中对婴儿加 强保护，阻断传播途径，是目前可行的有效措施。控制和降低病毒性肝炎的母婴间传播，有利优生 优育，提高人口素质的基本国策。”     

山西省特殊人群丙型肝炎病毒抗体调查和基因分型

目的 了解山西省特殊人群中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的流行现状和基因分布规律。方法 １９９７～１９９９年采集山西省妇女教养所劳教人员、性病门诊病人和饮食服务行业从业人员血清１４８７份,用ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ,抗体阳性的４２份标本进一步用型特异性引物ＲＴ－ＰＣＲ进行基因分型,并对３份标本进行了ＰＣＲ产物的直接序列测定。结果 １４８７份标本中,妇女教养所劳教人员、性病门诊病人和从业人员的抗－ＨＣＶ检出率分别为４．４９％、２．１７％、０．９５％,三者间的差异有统计学意义。但妇教所劳都人员 有性伴侣和无性伴侣者间,性病门诊的性病患者和非性病患者间的检出率差异无统计学意义。选择４２份抗－ＨＣＶ阳性标本进行ＨＣＶ基因分型,仅检出了Ⅱ／１ｂ型、Ⅲ／２ａ型和Ⅱ／Ⅲ混合型。３份标本ＨＣＶ核心区部分核苷酸序列与日本株相应区段的差     

我国部分地区献血员庚型肝炎病毒感染情况调查

用蛋白工程的方法，合成了庚型肝炎病毒（ＧＢＶＣ／ＨＧＶ）ＮＳ３区一段多肽，并用该条多肽初步建立了抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ酶联免疫试验方法（ＥＩＡ）。用该法检测我国部分地区２８７０份ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性的健康献血员血清。结果：抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ的流行率为３．４８％（１００／２８７０）。其中１００份抗ＧＢＶＣ／ＨＧＶ阳性血清用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴＰＣＲ）检测，ＧＢＶＣ／ＨＧＶＲＮＡ的阳性率为６２．０％（６２／１００）。     

聚合酶链反应标记输血传播病毒（TTV）地高辛霉探针的初步应用

用聚合酶链反应法（ＰＣＲ）制备地高辛素标记的输血传播病毒（ＴＴＶ）探针,并与巢式ＰＣＲ法比较。结果 该探针具有ＴＴＶ特异性,其灵敏度为１０ｐｇ ＤＮＡ。应用该法检测１０８份非甲￣庚型肝炎病人的血清标本,应用该法检测１０８份非甲￣庚型肝炎病人的血清标本,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为１８．５％（２０／１０８）;检测２２份病人的粪便标本,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率为２７．３％（６／２２）。该法与ｎＰＣＲ法的总符合率     

广西肝癌高发区壮族自然人群中流行的HCV,HBV的分子生物学研究

在广西肝癌高发区壮族自然人群中采集血清标本１７７６人份，采用ＥＬＩＳＡ方法检测抗－ＨＣＶ、ＨＢｓＡｇ，ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ－ＲＮＡ、ＨＢＶ－ＤＮＡ，并对ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的６９份标本采用型特异性引物进行基因分型。结果显示：（１）研究人群中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为３．８８％；（２）流行的ＨＣＶ基因以Ｉ型或与其它型别的混合感染为主；（３）Ｉ型感染者中ＬＡＴ的异常率高于其它型别的感染者；（４）当地ＨＣＶ伴     

聚合酶反应在HBV感染诊断中的意义──附544例检测结果分析

为探讨多聚酶链反应（ＰＣＲ）在评价乙肝病毒（ＨＢＶ）感染中的意义，笔者分析了５４４例ＰＣＲ检测结果。按每六届全国病毒性肝炎学术会议诊断标准分类：慢活肝１１５例、慢迁肝８６例、肝硬化１８例、无症状病原携带者３２５例。据乙肝五项（ＥＬＩＳＡ法）结果分类：１．３．５阳性者２１６例，１．３阳性者４２例，１．４．５阳性者８３例，１．５阳性者９２例，单项ＨＢｓＡｇ阳性者６５例，单项抗ＨＢｓ阳性者４６例。结果：１．３．５和１．５阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为９９．１％；１．４．５和１．５阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别３４．９％、６０．１％：单项ＨＢｓＡｇ阳性和单项抗ＨＢｓ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为１８．５％；６．５％。肝功能正确组和肝功能异常组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为５４．６％（１６６／３４０）、９２．６％（１８９／２０４），其差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。慢活肝、慢迁肝、肝硬化、无症状组ＨＢＶＤＮＡ阳性率分别为８８．７％（１０２／１１５）、８０．２％（６９／８６）、１００％（１８／１８）、５１．１％（１６６／３２５）。经统计学分析，前三组与无症状组之间的差异均具显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示：（１）用ＰＣＲ     

河南省某农村丙型肝炎病毒感染的随访研究

于１９９４年１月对河南省某农村进行了ＨＣＶ感染的横断面调查，并于其后第８和第１４个月进行了２次随访调查。结果表明，１９９４年１月该人群抗－ＨＣＶ阳性率为２６．６％（１６４／６９２），其中，有献浆史者抗－ＨＣＶ阳性率（８６．６％）显著高于无献浆史者（３．２％，Ｐ＜０．０１）；献浆次数、年限与抗－ＨＣＶ阳性率之间存在正效应剂量，反应关系（Ｐ＜０．０１）。随访期间，有献浆史者ＨＣＶ的新感染率（２２．６％）显著高于无献浆史者（０．２％，ＲＲ＝９５．０，Ｐ＜０．０１）；一方为抗，ＨＣＶ阳性的配偶的ＨＣＶ新感染率（１１．１％）较双方均为抗－ＨＣＶ阴性的配偶（３．５％）高３倍以上（ＲＲ＝３２２，Ｐ＞０．０５）；３名新感染者与其配偶（原为ＨＣＶＲＮＡ阳性）的ＨＣＶ基因型一致，且其中１名新感染者无经血暴露史，提示经性传播的可能性。该人群抗－ＨＣＶ年阴转率为１．０％，年阳转率为１．６％；２７．５％￣４１．６％的ＨＣＶ感染者伴有ＡＬＴ异常。结论：献血浆是当地人群ＨＣＶ感染的主要危险因素，并可能存在性传播。     

逆转录—聚合酶链反应在丁型肝炎病毒感染的应用及意义

本项技术选取丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ的非抗原编码区的相对保守区为靶序列,设计两对引物,进行巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＤＶＲＮＡ。血清及肝组织采用蛋白酶消化法提取ＲＮＡ。结果发现９８例各型病毒性肝炎血清中,ＨＤＶ—Ｍ阳性组ＨＤＶＲＮＡ检出率为５６６％（３０／５３）,ＨＤＶ—Ｍ阴性组为８９％（４／４５）（Ｐ＜００１）;ＨＤＡｇ或／及抗ＨＤＩｇＭ阳性血清测定ＨＤＶＲＮＡ的阳性率为５７１％（２８／４９）,抗ＨＤ阳性血清的阳性率为５００％（２／４）;９例ＨＤＶ—Ｍ阳性肝组织测定ＨＤＶＲＮＡ阳性者６例,２例ＨＤＶ—Ｍ阴性肝组织均阴性。本项技术是在分子水平上检测病毒核酸、操作简便、稳定、可靠、特异性高、重复性好,可以作为ＨＤＶ血清学指标的佐证和补充,肝组织ＨＤＶＲＮＡ的测定可应用于回顾性研究,在临床病原诊断、抗病毒疗效判定、病毒复制、重叠感染等研究方面提供重要实验依据。