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光动力疗法主要依靠光敏剂活化产生的活性氧来杀伤细菌细胞，可作为一种安全、有效的消毒方法应用于根管治疗。光动力疗法的杀菌效果受到光敏剂及其浓度、光源与照射参数、暗处理时间、光纤的使用、细菌的种类与状态、组织抑制因子等多方面影响。而光动力疗法对细菌生物膜的消毒效果也有望得到提高。     

中药桂皮醛体外抑菌和抗炎活性的研究

目的 检测桂皮醛的体外抗菌及抗炎活性.方法 采用美国临床实验室标准化委员会推荐的液体稀释法将P.gingivali ATCC33277、A.viscosus ATCC15987、F.nucleatum ATCC10593、S.mutans ATCC25175等4种标准菌株配成1×108菌落形成单位/mL和1×106菌落形成单位/mL的细菌悬液,分别检测桂皮醛对其的抑菌浓度.通过大鼠双侧耳廓二甲苯致炎建立肿胀模型,进行桂皮醛对肿胀抑制的体外抗炎活性实验,观察比较大鼠双侧耳廓肿胀抑制厚度以及肿胀抑制率.结果 ①桂皮醛对P.gingivalis及F.nucleatum的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度均为32 μgmL-1,对A.viscosus和S.mutans的抑菌浓度分别是64 μgmL-1和128 μgmL-1.②与对照组相比, 24 h、 48 h后桂皮醛对大鼠耳廓的肿胀抑制率分别为73.77%、 68.42%.结论 桂皮醛对口腔标准致病菌有抑菌活性,有体外抗炎活性.     

多孔HAPw/n-ZnO骨修复材料的抗菌机理及抗生物膜研究

目的:评估多孔羟基磷灰石晶须/纳米氧化锌(HAPw/n-ZnO)骨修复材料在抑制细菌生物膜中的作用,并探讨其抗菌机理。方法:分别建立金黄色葡萄球菌、变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌生物膜体外模型。无光条件在相同的多孔HAPw/n-ZnO浓度梯度(0~2 g/L)下分别进行生物膜抑制试验与细胞内活性氧(ROS)检测,并利用扫描电子显微镜分析材料性能,未加入材料组作为对照。结果:无光条件下随着材料浓度递增,各浓度多孔HAPw/n-ZnO组(1.00、1.25、1.50、1.75、2.00 g/L)相对于对照组(0 g/L),3种细菌的生物膜形成量(A值)逐渐减少以及细胞内活性氧(ROS)水平(荧光强度)逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。扫描电镜图片显示,复合材料组细菌黏附减少,生物膜形成受到抑制;细胞形态异常,细胞膜受损导致内容物泄露。结论:无光条件下多孔HAPw/n-ZnO材料对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌生物膜均有一定程度的抑制作用,其抗菌机理之一是活性氧(ROS)的形成。     

生物活性玻璃对3种细菌和龈下早期混合菌斑抗菌效果的研究

目的研究不同浓度生物活性玻璃(bioactive glass,BG)对3种浮游细菌及其形成的单菌种菌斑、三菌种早期龈下混合菌斑的抗菌效果。方法测定血链球菌(Streptococcus sanguinis,Ss)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)、伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)、最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)、最小菌斑清除浓度(minimal biofilm eradication concentration,MBEC)。20、40、80 mg/m L的生物活性玻璃和惰性玻璃二氧化硅(Si O2)处理24 h早期三菌混合菌斑,于激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)下摄片观察分析生物膜厚度和平均荧光强度。结果 BG对菌斑的MBEC明显大于对浮游菌的MIC和MBC,MBEC为MIC的2~16倍。随着生物玻璃浓度加大,混合菌斑生物膜厚度变薄,团块减小,菌斑活性比减低,与空白对照组和阳性对照Si O2组有显著统计学差异(P<0.05)。结论 BG可抑制和杀灭血链球菌、聚合梭杆菌、伴放线放线杆菌浮游菌及其单菌种菌斑生物膜,对浮游细菌效果优于菌斑生物膜。低浓度BG对龈下混合菌斑有一定抗菌效果。     

尼古丁和美卡拉明对牙周致病微生物的影响

目的 探讨尼古丁和美卡拉明对主要牙周致病微生物生长及生物膜形成的影响.方法 采用二倍稀释法,研究尼古丁对牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).通过酶标仪测定吸光度值,研究在1/16 MIC、1/8 MIC、1/4 MIC、1/2 MIC、MIC等不同浓度的尼古丁对这2种细菌生物膜形成的影响.结果 尼古丁对2种细菌的菌悬液的MIC均为8 mg·mL-1,MBC为16 mg·mL-1.尼古丁浓度逐渐增加时,生物膜吸光度值逐渐增大;继续增加浓度,吸光度值减小;在8 mg.mL-1时,吸光度值减小到最低值,最低生物膜抑制浓度为8 mg.mL-1.添加尼古丁受体拮抗剂美卡拉明组较对照组吸光度值高.结论 小剂量的尼古丁能增加牙龈卟啉单胞菌和伴放线放线杆菌的生物膜形成,浓度继续增加则抑制生物膜形成,加入美卡拉明后降低尼古丁浓度,更能明显观察到尼古丁对两种细菌生物膜的促进作用.     

一种新型光敏剂对牙周致病菌的体外抗菌研究

目的:研究一种新型光敏剂(ZnPC-PL)对牙周病主要致病菌牙龈卟啉菌的抑制作用,以期寻找治疗牙周炎的新手段。方法:在体外环境中分别用涂板计数法分析不同药物浓度和不同激光强度下新型光敏剂的光动力治疗对牙龈卟啉菌的抑制效果,实验设计分实验组、空白对照组和阳性对照组。结果:光动力治疗中应用光敏剂Zn-PC-PL,在浓度为10μmol/L以上、光强为6 J/cm2时具有良好的杀菌效果。结论:在一定浓度和激光强度下,Zn-PC-PL光敏剂对牙龈卟啉菌具有良好的抑制作用。     

杨梅黄酮对变形链球菌毒力因子及生物膜的抑制作用研究

目的:探讨杨梅黄酮对变形链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)ATCC 25175毒力因子和生物膜的作用。方法:用液体稀释法准确测定杨梅黄酮对变形链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和耐酸性;用结晶紫染色法检测药物对变形链球菌生物膜形成的抑制率;用乳酸试剂盒检测药物对变形链球菌产酸的影响;用蒽酮法检测药物对不溶性多糖生成量的影响;利用场发射扫描电子显微镜(FESEM)和激光共聚焦显微镜(CLSM)观察及分析药物对生物膜的抑制作用。结果:杨梅黄酮对变形链球菌的最小抑菌浓度为0.8 mg/mL,0.2～0.4 mg/mL的药物对生物膜的生成抑制作用明显,同时乳酸、不溶性多糖的生成量明显降低,0.4 mg/mL的药物对细菌耐酸性以及成熟生物膜的影响有显著性差异。结论:杨梅黄酮对于变形链球菌毒力因子和生物膜有显著的抑制作用。     

光动力金属有机框架PCN对粪肠球菌杀灭效果的体外研究

目的:探索光动力金属有机框架PCN对粪肠球菌的体外杀灭效果。方法:通过扫描电子显微镜和全波长酶标仪等对PCN进行物象表征。通过细胞活力检测等方法验证PCN生物安全性。通过梯度稀释计数等方法验证PCN的体外抗菌性能。结果:PCN纳米粒子活性氧生成能力强,生物安全性好。体外实验表明50μg/mL的浓度即可彻底杀灭10⁸ CFU/mL量级的粪肠球菌,具有优异的体外抗菌性能。结论:本研究验证了光动力金属有机框架PCN对粪肠球菌的杀灭效果,为临床根管感染控制提供了一种新思路。     

载银氧化石墨烯对变异链球菌生长及生物膜形成的影响

目的探讨载银氧化石墨烯（GO/Ag）纳米复合物对变异链球菌（S.mutans）生长及生物膜形成的抑制作用。 方法应用梯度稀释法检测GO/Ag、氧化石墨烯（GO）、纳米银（AgNPs）对变异链球菌的最小抑菌浓度（MIC）;菌落形成单位计数法比较GO/Ag、GO、AgNPs对变异链球菌的抑制作用;采用结晶紫染色法和XTT法测定变异链球菌24 h生物膜的生成量和活性;激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）观察生物膜形态和计算24 h生物膜的活菌比例。数据以单因素方差分析（One-Way ANOVA）和LSD-t检验进行统计分析。 结果GO/Ag对变异链球菌的MIC为0.16 mg/mL。0.64 mg/mL GO/Ag对变异链球菌的抑菌率为（82.90 ± 4.87）%,与对照组间的差异有统计学意义（t= 30.804,P<0.001）。而GO和AgNPs材料浓度提升至2.56 mg/mL时,肉眼观察细菌仍未见明显减少。在0.16 mg/mL GO/Ag浓度下,变异链球菌生物膜生成量和活性的减少率分别为（25.12 ± 0.01）%和（38.90 ± 3.42）%,活菌比例为（42.76 ± 19.48）%,与空白对照组间的差异均有统计学意义（t_生成量= 7.274,P_生成量<0.001;t_活性= 7.765,P_活性<0.001;t_活菌比例= 10.412,P_活菌比例<0.001）。 结论与AgNPs和GO相比,GO/Ag新型纳米复合物对变异链球菌的生长具有较好的抑制作用,并能抑制其生物膜形成。     

基于人源性成骨细胞的预血管化细胞膜片构建研究

目的:探索新的体外构建血管网络的方法以解决工程化骨组织预血管化的问题。方法:冻存颌骨来源成骨细胞(human osteoblasts, HOBs)和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)用0,5,25,50μg/mL四氧化三铁纳米颗粒(Fe₃O₄ MNPs, magnetic nanoparticles)孵育;CCK-8试剂盒、普鲁士蓝染色检测不同浓度Fe₃O₄ MNPs对冻存颌骨来源HOBs和HUVECs生长、内吞的影响。采用50μg/mL Fe₃O₄ MNPs孵育HOBs和HUVECs,第0,1,3天用活/死细胞双染色试剂盒检测细胞存活情况。采用50μg/mL Fe₃O₄ MNPs孵育HOBs和HUVECs不同时间(0,30 min, 1 h, 2 h)后,N41超磁铁皿底吸引,鬼笔环肽(phalloidin)细胞骨架染色检测HOBs和...     

不同功率密度的姜黄素-光动力疗法对白色念珠菌生物膜的影响

目的：探讨不同功率密度的姜黄素-光动力疗法对白色念珠菌生物膜的杀伤效果。方法：以白色念珠菌标准株和临床株为研究对象,进行体外不同功率密度（12、 22、 42、 62、 82、 102 mW/cm²）的姜黄素-光动力实验,通过XTT检测和激光共聚焦显微镜观察不同功率密度的姜黄素-光动力疗法对白色念珠菌生物膜的杀伤效果。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析。结果：当姜黄素浓度为40 μmol/L,光照时间为4 min时,标准株和临床株的杀菌率均随着功率密度的增加而增大;功率密度增加至102 mW/cm²时,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：姜黄素-光动力疗法杀伤白色念珠菌生物膜的效果与功率密度密切相关,建议将82 mW/cm²作为最佳功率密度。     

抗菌光动力疗法在种植体周疾病中的应用

抗菌光动力疗法(antimicrobial photodynamic therapy,aPDT)的基本原理是通过特定波长的可见光与光敏剂相互作用,产生单线态氧等细胞毒性物质,以杀死目标细菌/细胞.在种植体周疾病的治疗中,因单纯使用机械清创术存在一定局限性,aPDT作为一种新型辅助疗法在临床上逐渐展开应用.尽管单个研究表...     

口腔多菌种生物膜对防龋中药敏感性的实验研究

目的采用MBECTM-Device研究防龋中药五倍予多酚性化合物(GCE)、五倍子B(GCE-B)、蜂房95%组分(NVEI)对多菌种生物膜细菌的生长抑制作用,建立防龋中药药效学的药物敏感实验方法,为临床实验提供客观的药物作用的浓度范围。方法选择与龋病发生密切相关的4种口腔细菌形成多菌种生物膜,药物为GCE、GCE-B、NVEl,扫描电镜观察口腔细菌在MBEC州一Device上形成细菌生物膜的能力和形成情况;采用MBECn._HTP_Assav测定药物对口腔细菌的最小抑菌浓度(MIC)和对细菌生物膜的最小生物膜清除浓度(MBEC)。结果在MBFCm_Device提供的桩钉表面上I]腔细菌能形成良好的生物膜结构,从不同时段取出酌样本可以观察到细菌从定植粘附到生物膜形成以及生物膜成熟结构。GCE. GCE-B、NVEl对口腔细菌均有良好的抑制作用。GCE、GCE-B对口腔生物膜细菌有很好的抑制作用,但是NVEI对口腔生物膜细菌的抑制作用较差。药物对口腔生物膜细菌的MBEC是MIC的2-16倍。结论中药五倍子多酚性化合物和五倍子B对口腔生物膜细菌有很好的抑制和清除效应,MBEC比MIC能更客观地反映药物作用的浓度范围     

积雪草酸抑制变异链球菌生物膜形成及致龋能力的研究

目的:研究积雪草酸对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)生物膜的抑制作用及对其产酸和产胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)的影响.方法:通过药敏试验测定积雪草酸对S.mutans浮游菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC);结晶紫试验和MTT试验分别探究积雪草酸对S.mu-tans生物膜的总量和代谢活性的影响;采用蒽酮-硫酸法,场发射扫描电镜(Field emission scanning electron micros-copy,FESEM)和激光共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)测定积雪草酸对S.mutans生物膜EPS的产生和结构形貌的影响;pH计测定积雪草酸对S.mutans产酸的影响;CCK-8法检测积雪草酸的细胞毒性.结果:积雪草酸对S.mutans的最低抑菌浓度为20μg/mL,在亚抑菌浓度(10μg/mL和5μg/mL)下均能有效抑制S.mutans生物膜形成以及产酸和产EPS.同时,积雪草酸无明显的细胞毒性.结论:积雪草酸在一定浓度下能有效抑制S.mutans生物膜形成,并能降低其产酸和产EPS等致龋毒力.     

不同种植体表面改性对细菌生物膜的影响

目的:研究临床常用的3种钛种植体不同表面处理对口腔内常见菌群牙龈卟啉单胞菌(Porphyromanusgingivalis,P.gingivalis)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)及血链球菌(Streptococcus sanguis,S.sanguis)生物膜黏附的影响。方法:将钛片分成3组进行表面改性处理,分别为:电解沉积羟基磷灰石(HA)组、微弧氧化(MAO)组和大颗粒喷砂酸蚀(SLA)组,进行表面性能检测;在3组钛片上分别培养Pg、Fn及Ss 4 d,通过菌落形成单位(CFU)法、噻唑蓝(MTT)法和扫描电子显微镜(SEM)探究细菌的黏附情况。结果:(1)SEM观察表面形貌可见HA组表面大量不规则的棒状结构;MAO表面“火山口”样结构,孔径在0.1~1μm之间;SLA表面为不规则凹陷,大小不一且边缘锋利。3组表面粗糙度Ra值:SLA组0.05);Pg生物膜在MAO组钛片上活性最高,与另外2组有统计学差异(P<0.01)。(3)利用SEM观察显示,细菌活性与种植体表面形态结构有关。结论:细菌在种植体表面黏附受到表面形貌影响,与粗糙度及物理构型有关。对于Pg、Ss和Fn 3种细菌,SLA在3种表面处理中细菌粘附量最少。     

五倍子不同组分对口腔细菌生物膜的清除效应

目的:研究五倍子不同提取组分对5种主要与致龋密切相关的生物膜细菌生长抑制及清除的作用,为临床试验提供药物作用的浓度范围。方法:选择与龋病发生密切相关的5种口腔细菌,五倍子不同提取组分为五倍子多酚性化合物(GCE)、五倍子B(GCE-B,300ml/L乙醇提取物1.80g/L)、五倍子C(GCE-C,500ml/L丙酮提取物4.67g/L)、五倍子D(GCE-D,1000ml/L丙酮提取物0.80g/L)、没食子酸、没食子酸甲酯。扫描电镜观察观察口腔细菌在MBECTM-Device上形成细菌生物膜的能力和形成情况;测定五倍子不同组分对5种口腔细菌的最小抑菌浓度MIC(minimalinhibitoryconcentration)和对5种细菌生物膜的最小生物膜清除浓度(minimalbiofilmeradicationconcentration,MBEC)。结果:在MBECTM-Device提供的桩钉表面上口腔细菌能形成良好的生物膜结构,不同时段取出的样本可以观察到细菌从定植黏附到生物膜形成以及成熟生物膜结构。五倍子不同提取组分对5种口腔浮游细菌均有良好的抑制作用。五倍子多酚性化合物、五倍子B对5种口腔生物膜细菌抑制作用的效果最好,其次为五倍子C和五倍子D,没食子酸和没食子酸甲酯对口腔生物膜细菌的抑制作用较差。五倍子不同提取组分对5种口腔细菌生物膜的MBEC是MIC的2～16倍左右。结论:中药五倍子不同提取组分中五倍子多酚性化合物和五倍子B对口腔生物膜细菌有很好的抑制和清除效应,MBEC比MIC能更客观的反映药物作用的浓度范围。     

甲苯胺蓝为光敏剂的光动力疗法对龈上菌斑灭菌效果的研究

目的:比较不同浓度甲苯胺蓝对龈上菌斑的灭菌效果.方法:从门诊20例牙周病病人下前牙区取龈上菌斑一份,放入10mL生理盐水中振荡均匀,在2 h内送到微生物室,用微量移液器取25 ul放在琼脂培养皿中,在37℃恒温箱中培养24 h后,分别滴人0.01,0.1,0.5,1.0,2.5,5.0 ms/mL甲苯胺蓝,用12 J/cm2,159mW/em2波长为630衄的二极管激光照射57 s后,观察比较各种浓度的灭菌效果.结果:在相同的光波长、光剂量、光强度和光照时间下,1.0mg/mL的甲苯胺蓝的灭菌效果最好,灭菌率为79%.结论:以甲苯胺蓝为光敏剂的光动力疗法对龈上菌斑有灭菌作用.     

细菌素免疫蛋白调控变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的实验研究

目的 观察细菌素免疫蛋白相关基因对变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的影响,探讨细菌素免疫蛋白与细菌抗菌剂耐受性的关系,为生物膜抗菌敏感性的研究提供基础数据.方法筛选培养细菌素免疫蛋白基因突变株,绘制生长曲线.酶标仪检测不同质量浓度氨苄青霉素(0.04、0.05、0.06、0.07及0.08 mg/L)、氟化钠(50、100、150、200及250 mg/L)及不同质量分数的次氯酸钠(0.078%、0.156%、0.313%、0.625%及1.250%)作用下变形链球菌标准株、△immA-和△immB-突变株菌液的吸光度值.应用最小生物膜清除浓度(minimal biofilm eradicatin concentration,MBEC)桩钉96孔板以连续稀释法检测醋酸氯己定对3种菌株生物膜的MBEC.应用激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)定量分析标准株和突变株生物膜结构.结果 △immA-和△immB-突变株的迟缓期和稳定生长期均比标准株延时1 h.氨苄青霉素为0.06 mg/L时,标准株、△immA-突变株和△immB-突变株菌液吸光度值分别为0.334±0.016、0.027±0.016及0.047±0.018;氟化钠质量浓度为150 mg/L时,3种菌株菌液吸光度值分别为0.254±0.018、0.129±0.011及0.167±0.01;当次氯酸钠质量分数为0.313%时,3种菌株菌液吸光度值分别为0.467±0.008、0.017±0.006及0.050±0.006,以上各组抗菌剂中,标准株与突变株吸光度值差异均有统计学意义(P<0.01).醋酸氯己定对3种菌株的MBEC分别为6.25、1.57及3.13 mg/L.标准株生物膜厚度显著高于△immA-和△immB-突变株(P<0.01);标准株各层活菌比例均高于△immA-突变株(P<0.05);标准株中、外层活菌比例高于△immB-突变株(P<0.01),但内层活菌比例差异无统计学意义(P=0.191).结论细菌素免疫蛋白参与调控浮游细菌生长,尤其在生长初期;细菌素免疫蛋白相关基因缺陷使浮游态变形链球菌抗菌敏感性提高、抗菌剂MBEC降低及生物膜结构不成熟.     

具核梭杆菌黏附和侵入上皮细胞的初步研究

目的:本研究以P.gingivalisATCC33277为阳性对照,用KB细胞体外模拟牙龈上皮细胞,初步研究F.nucleatum对上皮细胞的黏附和侵入能力。方法:将实验菌株P.gingivalisATCC33277、F.nucleatumATCC10953以及F.nucleatumWCD05-1分别配制成2×107CFU/mL的菌悬液,加入培养有KB细胞的24孔细胞培养板中。在37℃,50 mL二氧化碳的细胞培养箱中孵育2 h,以P.gingivalisATCC33277为阳性对照,观察F.nucleatum对KB细胞的黏附和侵入。结果:两种F.nucleatum均能黏附和侵入KB细胞。与P.gingivalisATCC33277相比较,F.nucleatumATCC10953的黏附和侵入能力稍弱,而F.nucleatumWCD05-1的黏附和侵入能力更强。结论:F.nucleatum能黏附和侵入上皮细胞,至少在短时间内能保持一定的黏附和侵入量,在细胞内保持一定的活力。F.nucleatum的不同菌株之间黏附和侵入能力存在差异,临床株的毒力明显强于标准株。     

二硫化钼基钛表面抗菌涂层在口腔种植领域研究进展

细菌影响人类生活,口腔细菌感染还会引起牙周炎和种植体周围炎等疾病。纳米材料的抗菌作用已被广泛研究,对于口腔种植而言,种植体表面材料改性已成为预防细菌感染的一种方法,其中二硫化钼(MoS₂)基材料抗菌主要是通过电子转移从而导致活性氧(reactive oxygen species,ROS)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)的氧化还原作用破坏细菌,通常为多重抗菌方式协同作用。文章就MoS₂基钛表面抗菌涂层在口腔种植领域相关研究进展做一综述。