PI3K/AKT信号通路与缺血性脑损伤引起的细胞凋亡研究进展

PI3K/AKT信号通路是细胞内调控信号转导的一个重要途径,其组成较为复杂,参与细胞增殖、凋亡、代谢等活动。缺血性脑损伤是一个复杂的病理过程,而细胞凋亡在此过程中发挥重要作用。PI3K/AKT信号通路是细胞存活的关键通路,在缺血性脑损伤、神经退行性疾病及肿瘤等诸多疾病中起调控作用。因此,研究该通路并探讨其在缺血性脑损伤中的作用对进一步探寻此类疾病的治疗具有重要意义。     

PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移关系的探讨

目的观察PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移之间的对应关系。方法选择我院及遵义医学院所收集的存档石蜡标本共计50例作为分析对象,25例标本为无淋巴道转移的鼻咽癌组织,25例标本为有淋巴道转移的鼻咽癌组织,分别设置为对照组以及观察组。所有标本均进行HE染色以及免疫组化染色处理,对处理结果进行观察分析。结果对照组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系,AKT与E-cad表达呈负相关关系,P0.05,具有统计学意义;观察组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系,P0.05,具有统计学意义。AKT与E-cad表达无明显相关性关系,P0.05,无统计学意义。结论 PI3K/AKT信号传导通路的激活与鼻咽癌侵袭转移之间存在相关关系,值得临床重视。     

竹节香附素A通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察竹节香附素A（RDA）对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 分别使用0、5、10、20及40μmol/L的RDA干预HeLa细胞48 h,CCK-8实验测定细胞增殖率,计算半抑制浓度（IC₅₀）,确定药物浓度。流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测细胞中B细胞淋巴瘤2家族蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化胱天蛋白酶-3（Cleaved-caspase-3）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的蛋白表达水平。将HeLa细胞分为4组,即空白对照组、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组、RDA组和联合用药组,检测及比较各组细胞增殖率、凋亡率和p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量。结果 随着RDA浓度的增加,HeLa细胞的增殖率降低、凋亡率升高（P均< 0.05）,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量升高（P均< 0.05）,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量降低（P均< 0.05）;IGF-1激活PI3K/Akt/mTOR信号通路后,RDA仍然能抑制HeLa细胞增殖（P均< 0.05）,降低p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量（P均< 0.05）。结论 RDA可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对人宫颈癌HeLa细胞产生抑制增殖与促进凋亡的效果。     

FOXN2通过PI3K/AKT信号通路对肾癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 研究FOXN2通过PI3K/AKT信号通路对肾癌增殖、凋亡的影响.方法 实验分FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组三组;检测FOXN2在人正常肾上皮细胞HK-2和肾癌细胞786-O中的表达;检测FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组细胞的增殖情况和凋亡情况;检测FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组细胞P...     

丙泊酚调控PI3K/AKT信号通路对肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的 探讨丙泊酚调控PI3 K/AKT信号通路对肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 传代培养人肺癌A549细胞株,根据细胞培养基中添加丙泊酚浓度的不同分为control组(未添加丙泊酚)、pL组(添加丙泊酚1.5μg/ml)和pH组(添加丙泊酚2.2μg/ml);克隆形成实验、细胞划痕实验及流式细胞术检测丙泊酚对肺癌...     

VEGFR-2在鼻咽癌中的表达与PI3K/AKT信号通路相关性的探索

目的 分析VEGFR-2在鼻咽癌中的表达与PI3K/AKT信号通路相关性。方法 入选收治鼻咽癌患者50例,标本均由病理科提供。选择同期病理科所提供鼻咽部炎性组织标本50例作为对照。对比鼻咽癌标本与鼻部炎性组织标本在VEGFR-2、PI3K、以及AKT方面的表达情况,同时应用回归分析对鼻咽癌VEGFR-2与PI3K、VEGFR-2与AKT相关性进行研究。结果 鼻咽癌组织VEGFR-2表达显著高于鼻部炎性组织,差异具有统计学意义(P0.05)。鼻咽癌组织PI3K表达显著高于鼻部炎性组织,差异具有统计学意义(P0.05)。鼻咽癌组织AKT表达显著高于鼻部炎性组织,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 鼻咽癌VEGFR-2与PI3K、VEGFR-2与AKT均有显著直线相关关系(P0.05)。鼻咽癌组织中VEGFR-2、PI3K、AKT表达与鼻黏膜炎性组织表达水平有显著差异,提示VEGFR-2、PI3K、AKT分子均在鼻咽癌的发生、发展、转移中起作用。同时,鼻咽癌VEGFR-2与PI3K、VEGFR-2与AKT呈正相关关系,提示VEGFR-2可能通过PI3K/AKT信号通路在鼻咽癌发生、发展、转移中发挥作用。     

布比卡因通过PI3K/AKT/mTOR通路对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响

目的 探讨布比卡因对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响及其机制。方法 常规培养人膀胱癌细胞(T24和5637)和人尿路上皮细胞(SV-HUC-1),MTT实验检测布比卡因细胞毒性,筛选合适处理浓度,将T24和5637细胞分为对照组、0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因组、布比卡因+铁死亡激动剂(Erastin)组、布比卡因+铁死亡抑制剂(Fer-1)组细胞和布比卡因+PI3K激动剂(740Y-P)组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,相应试剂盒检测Fe²⁺、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平,Western blot检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、xCT、GPX4和磷脂酰肌醇3/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)相关蛋白表达。结果 0.25、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L布比卡因均可明显抑制T24和5637细胞的活性(P<0.001),选择仅对癌细胞有毒性的0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因进行后续研究。与对照组比较,随着布比卡因浓度增加,T24和5637细胞凋亡率、Fe^2+...     

PI3K/AKT信号通路与鼻咽癌的预后关系

目的对PI3K/AKT信号通路与鼻咽癌的预后关系进行研究分析。方法选取2011年1月～11月在院治疗的48例鼻咽癌患者,另选取15例鼻咽黏膜慢性炎症患者作为对照组,共63例患者作为研究对象。48例鼻咽癌患者中已发生转移19例,未发现浸润或转移性29例。将所有患者的活检标本进行HE染色和免疫组化检测,对PI3K、AKT、pAKT的阳性表达进行数据统计和分析。结果鼻咽黏膜慢性炎与鼻咽癌组织中PI3K、AKT、pAKT阳性表达有显著差异（P〈0.05）,具有统计学意义;转移组与非转移组中PI3K、pAKT阳性表达有显著差异（P〈0.01）,具有显著统计学意义。结论鼻咽癌的发生、发展与PI3K/AKT信号传导通路有密切的关系,其中PI3K、AKT、pAKT对鼻咽癌的转移和预后有关。     

异甘草酸镁诱导乳腺癌细胞凋亡及对PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探究异甘草酸镁通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)对乳腺癌细胞的影响。方法 在美国典型培养物保藏中心(ATCC)细胞库购买乳腺癌细胞株,随机分为三组：高浓度组采用500μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;低浓度组采用50μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;对照组不做其他处理,正常培养。分析三组乳腺癌细胞凋亡、增殖情况,以及PI3K、AKT的蛋白含量和mRNA的表达含量的差异性。结果 高浓度组细胞凋亡率明显高于低浓度组和对照组,低浓度组细胞凋亡率高于对照组(χ²分别=3.42、4.98、6.78,P均<0.05);高浓度组细胞增殖OD值低于低浓度组和对照组,低浓度组细胞增殖OD值低于对照组(t分别=3.12、3.80、6.45,P均<0.05);高浓度组乳腺癌细胞中PI3K、AKT蛋白含量低于低浓度组和对照组,低浓度组蛋白含量明显低于对照组(t分别=3.16、4.12、5.18、3.12、3.65、4.12,P均<0.05);高浓度组PI3K、AKT mRNA含量明显低于低浓度组和对照组,低浓度组PI3K、AKT mRNA表...     

缺血后处理对心肌缺血再灌注大鼠心肌功能和PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨缺血后处理(I-postC)对心肌缺血再灌注大鼠心肌功能及磷酸肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响,并对其中可能存在的机制进行研究。方法选择24只SD大鼠,随机均分为4组,每组6只。正常组:无缺血再灌注损伤。缺血再灌注组:采用Langendorff离体大鼠心脏建立缺血再灌注损伤模型。缺血后处理组:大鼠施行缺血后处理,缺血前灌注K-H液平衡20 min后,灌注4℃ST. Thomas停跳液,使全心停跳缺血40 min,然后续灌K-H液60 min。缺血后处理+抑制剂组:大鼠施行缺血后处理+LY294002(PI3K信号通路抑制剂)。观察各组大鼠平衡末及灌注末的心功能指标变化情况,TUNEL法及电子显微镜下观察各组大鼠心肌细胞凋亡与超微结构变化,Western-Blot检测细胞凋亡相关蛋白及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果缺血再灌注组、缺血后处理组与缺血后处理+抑制剂组于灌注末时的心率(HR)、左室发展压(LVDP)、心脏收缩性和效率(dP/dt max)水平均较平衡末降低,左心室舒张末期压力(LVEDP)含量较平衡末升高;与正常组相比,其他3组大鼠的HR、LVDP、+dP/dt max水平降低,LVEDP含量、Flameng评分、心肌细胞凋亡率、Caspase-9/3/6/7、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白水平升高(P 0. 05);与缺血再灌注组相比,缺血后处理组、缺血后处理+抑制剂组的HR、LVDP、+dP/dt max、p-AKT、Bcl-2蛋白上升,LVEDP含量、Flameng评分、心肌细胞凋亡率、Caspase-9/3/6/7、细胞色素-C(Cyto C)、Bax蛋白降低(P 0. 05)。结论缺血后处理可以改善心肌缺血再灌注大鼠心肌功能损伤,可能与降低心肌细胞凋亡、调节PI3/Akt信号通路有关。     

长链非编码RNA-TUC338通过PI3K/AKT信号通路对淋巴瘤细胞迁移和增殖的影响

目的:探讨长链非编码RNA-TUC338对淋巴瘤细胞增殖和迁移的影响.方法:采用荧光定量PCR检测不同淋巴瘤细胞中TUC338表达,磺酰罗丹明B实验检测细胞增殖能力,细胞迁移侵袭实验检测淋巴瘤细胞迁移能力,蛋白免疫印迹实验检测PI3 K/AKT信号通路蛋白表达情况.结果:与人正常T淋巴细胞H9相比,淋巴瘤细胞Daudi...     

PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究

本研究探讨PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中与正常人中表达的差异,以期查明PI3K/AKT通路在白血病中是否存在通路失调。随机收集16例骨髓标本,其中白血病12例(AML 6例,ALL 6例),正常骨髓标本4例。用实时定量RT-PCR方法检测PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因的表达变化;以管家基因GAPDH为内参,按2-△△Ct法计算目的基因相对表达量。结果表明:PTEN、mTOR、RICTOR在AML、ALL中总体呈低表达趋势,PTEN在12例标本中有10例低表达,mTOR在12例标本中9例低表达,RICTOR在12例标本中7例低表达;FOXO1,CCND1在AML、ALL中则呈高表达趋势,FOXO1在12例标本中有9例高表达,CCND1在12例标本中7例高表达。结论:PI3K/AKT信号通路基因在白血病细胞中被激活。     

PI3K/Akt信号传导通路与肿瘤多药耐药研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B[phosphatidylinositol-3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt),PI3K/Akt]信号传导通路作为细胞生存重要通路之一,在促进细胞生长、增殖,促进细胞运动、侵袭,抑制细胞凋亡,促进血管生成,抵抗化疗和放疗等方面起重要作用.近年来,关于PI3K/Akt 信号通路与药物耐药性关系的研究越来越多,并被认为是化疗耐药治疗的新靶点.Akt是PI3K/Akt 通路中的关键性效应分子,多种肿瘤组织中都有Akt 的过度表达和活化.多项实验表明,化疗药物可增加Akt 磷酸化水平,使肿瘤细胞产生化疗耐受,深入研究其作用机制,可能为肿瘤的基因治疗、抗肿瘤药物开发提供新靶点.     

基于PI3K/AKT信号传导通路探究骨痹合剂对膝关节骨关节炎小鼠细胞凋亡和相关蛋白水平表达的影响

目的 观察具有活血通络作用的骨痹合剂对膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)小鼠关节软骨细胞凋亡和PI3K/AKT信号传导通路相关蛋白表达水平的影响.方法 采用前交叉韧带切断法建立KOA模型小鼠,造模8周后分别予骨痹合剂、氨糖美辛肠溶片溶于同体积蒸馏水、等体积的生理盐水灌胃,取双膝关节软骨进行...     

PI3K/AKT信号传导通路与肠道炎症

磷酸肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3kinase,PI3K)是生长因子超家族信号传导过程中的重要分子,可被多种细胞因子和理化因素激活,调节多种细胞功能,如凋亡、增殖、代谢、生长转化、膜转运、分泌和趋化等,并在炎症、肿瘤、代谢和心血管疾病的发病机制中起重要作用[1]。炎症性肠     

MiR-144-3p对口腔鳞癌Cal27细胞增殖、侵袭、凋亡和PTEN/PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-144-3p对口腔鳞癌CAL27细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的CAL27细胞分为miR-144-3p模拟物(mimics)组、mimics阴性对照(NC-mimics)组、miR-144-3p抑制剂(inhibitor)组、inhibitor阴性对照(NC-inh...     

温针灸对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡及MiR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的 观察温针灸对早期膝骨关节炎（KOA）模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。于造模前3 d对抑制剂组及联合组大鼠给予局部miR-27a抑制剂药物干预;除对照组以外,其余各组大鼠均通过局部注射木瓜蛋白酶方法制成早期KOA大鼠模型。待造模完成后,联合组及温针灸组大鼠均给予内、外侧膝眼穴温针灸治疗,每次治疗30 min,共治疗14 d。模型组及抑制剂组大鼠则同期在固定器上制动30 min。于干预2周后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠软骨组织病理学改变,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况,采用ELISA法检测软骨组织白介素（IL）-1β和IL-6水平;采用WB技术检测软骨组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ及Beclin1蛋白表达,采用qRT-PCR技术检测软骨组织中miR-27a含量。 结果 干预结束后发现温针灸组软骨细胞形态较模型组明显改善,抑制剂组及联合组软骨细胞形态较温针灸组进一步改善;温针灸组软骨细胞凋亡率明显低于模型组（P＜0.05）;与温针灸组比较,抑制剂组及联合组软骨细胞凋亡率均显著降低（P＜0.05）,抑制剂组与联合组软骨细胞凋亡率组间差异无统计学意义（P＞0.05）;温针灸组、抑制剂组和联合组IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ、Beclin1、miR-27a蛋白表达及mRNA水平均较模型组明显降低（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述指标均较温针灸组显著降低（P＜0.05）;温针灸组、抑制剂组和联合组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平均较模型组明显升高（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述指标水平亦显著高于温针灸组（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述蛋白表达及mRNA水平组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论 温针灸可能通过下调miR-27a表达,促进PI3K/AKT/mTOR信号通路激活,能抑制早期KOA模型大鼠软骨细胞过度自噬及凋亡,有助于减轻关节炎症反应及损伤,延缓关节退变进程。     

shRNA干扰AKT基因对Jeko-1细胞增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响

目的:探讨RNA干扰沉默AKT基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响。方法:设计针对AKT基因短发夹RNA,将其连入pGPU6/GFP/Neo质粒中,构建AKT shRNA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞,应用RQ-PCR及Western blot鉴定其干扰效果,MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白信号及通路相关蛋白p-AKT、Notch1、HES1的变化。结果:AKT shRNA转染Jeko-1细胞后,AKT的mRNA和蛋白表达均明显下降,有统计学意义(P0.05);转染组细胞增殖率明显低于Neg-shRNA组和空白对照组(P0.05),AKT shRNA传染48 h后,凋亡率为(37.72±4.39)%,而NegshRNA组和空白对照组分别为(2.62±1.53)%、(1.57±0.42)%,差异有统计学意义(P0.01);凋亡相关蛋白BCL-2表达下降,而BAX、caspase-3、caspase-9表达上升;PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT磷酸化水平下降、Notch1信号通路相关蛋白Notch1、HES1表达下调。结论:干扰沉默AKT基因可抑制套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是特异性抑制PI3K/AKT信号通路也能下调Notch1信号通路的活性。     

电针对去神经支配骨骼肌萎缩大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:研究电针对去神经支配骨骼肌萎缩大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响,探讨电针延缓去神经支配骨骼肌萎缩的治疗机制。方法:SD雄性大鼠63只随机分为假手术组(n=21)、模型组(n=21)和电针组(n=21)。模型组、电针组通过暴露并切断坐骨神经的方法制作去神经支配腓肠肌动物模型,假手术组暴露坐骨神经但不切断。术后1d,电针组术侧进行电针治疗,其余两组不做任何处理。分别在术后7d、14d和21d取材,测定术侧腓肠肌湿重比,Masson染色测定腓肠肌纤维直径、截面积,Western Blot检测PI3K、Akt以及mTOR蛋白表达、Akt以及mTOR蛋白磷酸化,PCR检测PI3K、Akt和mTOR基因表达。结果:模型组与电针组大鼠腓肠肌的湿重比、肌纤维截直径以及面积均显著低于假手术组(P0.001),且模型组与电针组比较,差异具有显著性(P0.05);电针组的PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达量均高于模型组与假手术组(P0.05);电针组的PI3K、Akt、mTOR m RNA表达也明显高于其余两组(P0.05)。结论:电针可延缓去神经性骨骼肌萎缩,其作用机制可能与电针激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。