甘露糖及其相关分子对小鼠精子与透明带结合的影响

为探讨甘露糖及其受体在小鼠精子－透明带结合中的作用，小鼠附睾尾精子经Ｍ１６工作液获能培养２ｈ后，分别用ＤＭＡ（甘露糖基化的牛血清白蛋白）、Ｄ－甘露糖处理１５ｍｉｎ，然后与未作处理的带透明带卵子共培养３０ｍｉｎ；另２组卵子分别用甘露糖苷酶、Ｃｏｎ Ａ（植物凝集素）处理１５ｍｉｎ后分别与未作处理的获能精子共培养３０ｍｉｎ。卵子固定，在相差显微镜下计数各组卵子的精子结合数。结果表明：ＤＭＡ、Ｄ－甘露糖、     

吗啡戒断大鼠脊髓和脑干以及前脑皮层胶质细胞源性神经营养 …

观察吗啡依赖或戒断时大鼠脊髓,脑干和皮层胶质细胞源性神经营养因子（ｇｉａｌｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）以及受体ＧＤＮＦＲ－α和ＧＤＮＦＲ－β基因的表达以及毒蕈碱乙酰胆碱受体（ｍＡｃｈ）、Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗或一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂处理后对它们合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,以β－ａｃｔｉｎｍＲＮＡ作为内标检测ＧＤＮＦ,ＧＤＮ     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖（ＧＬＢ７）体外对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性的影响,采用反相离子对高效液相色谱法测定ＭΦ中ＲＫＡ活力。结果表明ＧＬＢ７（４０ｍｇ／Ｌ）能引起小鼠腹腔ＭΦ中ＰＫＡ活性明显升高,１０ｍｉｎ达峰值,３０ｍｉｎ恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强ＭΦ中ＰＫＡ活性有关。     

小鼠巨噬细胞内吞体的形态学研究

小鼠巨噬细胞内吞体的形态学研究采用电镜形态学方法，观察胶体金（Ａｕ）标记的ＣｏｎＡ（ＣｏｎＡ－Ａｕ）与腹腔巨噬细胞（ＭΦ）表面ＣｏｎＡ受体结合，内吞及内吞体（ｅｎｄｏｓｏｍｅ）的形态学演变过程。连续４天采用糖元注入法诱导小鼠腹腔ＭΦ增生，第５天将小鼠...     

桂枝浸出物对小鼠巨噬细胞内α—TNF基因表达的影响

目的：检测小鼠应用桂枝浸出物后腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ含量的变化。方法：雌雄小鼠随机分组，口服给药后制备巨噬细胞涂片。克隆人ＴＮＦ－ＤＮＡ的ＰＧＥＭ－１质料转化Ｅｃｏｌｉ ＪＭ１０３，选择培养扩增。随机引物法制备地高辛标记的探针，利用原位杂交技术检测巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ的表达。结果：抗肿瘤中草药桂枝等浸出物可增强小鼠腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ表达。结论：分子生物学的方法与手段     

巨噬细胞正常极低密度脂蛋白受体的配体特异性的初步研究

正常极低密度脂蛋白ｎ－ＶＬＤＬ）经胰蛋白酶降解后，载脂蛋白（Ａｐｏ）Ｅ在电泳图谱上消失，ＡｐｏＢ－１００水解成数个分子量小于１０万的片段。酶解的ｎ－ＶＬＤＬ仍可竞争性抑制小鼠腹腔巨噬细胞（ＭＰＭ）结合、摄取与降解＾１２５Ｉ－ｎ－ＶＬＤＬ，且与ｎ－ＶＬＤＬ同等有效。抗ＡｐｏＢ－１００单抗有抑制＾１２５Ｉ－ｎ－ＶＬＤＬ与ＭＰＭ的相互作用，结果表明ＡｐｏＢ－１００在ＶＬＤＬ受体摄取ｎ－ＶＬＤＬ的过程中起     

抗人胰岛素受体单克隆抗体对不同种属胰岛素受体的识别

对抗人体胰岛素受体的四种单克隆抗体（ＭＡ－５，ＭＡ－１０，ＭＡ－２０，ＭＡ－５ｌ）和一种多克隆抗体（ＡＲＳ－２）用于免疫沉淀多种动物的胰岛素受体。所有单克隆抗体均不能免疫沉淀大白鼠、小鼠、仓鼠、南美栗鼠的胰岛素受体。相反，多克隆抗体ＡＲＳ－２可免疫沉淀所有实验动物的此受体。ＭＡ－５ｌ和￣（１２５）Ⅰ标记胰岛素分别与豚鼠、家兔肝浆膜胰岛素受体结合，显示相似的结合方式。在分离的家兔脂肪细胞实验中，ＭＡ－５１也模仿胰岛素的作用，刺激脂生成和胰岛素受体β亚单位的自磷酸化作用。实验证明哺乳动物的胰岛素受体与人胰岛素受体共有被单克隆抗体ＭＡ－１０和ＭＡ－５１所识别的相同结合位点，而啮齿类动物则不同。     

低剂量辐射增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的IL—1β和TNFαmRN …

目的：探讨低剂量辐射（ＬＤＲ）对荷瘤机体巨噬细胞（ＭΦ）内白细胞介素Ｉ（ＩＬ－１）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）ｍＲＮＡ转录水平的影响。方法：采用Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠右后肢腓肠肌内接种Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞做为实验动物模型，在荷瘤后１０ｄ给予７５ｍＧｙＸ射线全身照射，照射后１８ｄ冲洗腹腔，用贴壁法分离ＭΦ，应用原位杂交组织化学方法检测ＭΦ内ＩＬ－１β和ＴＮＦα的ｍＲＮＡ转录水平，结果用病理图像密度扫描仪测定     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

人肝脏星状细胞糖基化终产物受体表达的研究

目的　研究人肝脏星状细胞（ ＨＳＣ） 上糖基化终产物受体（ＲＡＧＥ） 的表达。方法　用生物素将体外制备的糖基化终产物（ ＡＧＥｓ － ＢＳＡ） 标记成配基,以细胞化学法显示细胞表面受体高亲和性结合。用反转录聚合酶链反应（ ＲＴ－ＰＣＲ） 检测ＡＧＥｓ 受体基因的表达。结果　细胞化学法显示ＡＧＥｓ － ＢＳＡ 与ＨＳＣ 呈高亲和性结合,部分被内化。用按人ＲＡＧＥ 基因序列设计的引物,反转录扩增出２８３ ｂｐ ＤＮＡ 片段。结论　人肝脏星状细胞表达的ＡＧＥｓ 受体可能在糖尿病人加速的肝纤维化过程中起一定作用     

血小板激活因子受体mRNA在小鼠附睾精子内的表达

①目的检测血小板激活因子受体(PAFR)mRNA在小鼠附睾精子内的表达,探讨PAFR对受精过程的影响.②方法分离提取小鼠附睾精子mRNA,经逆转录(RT)合成PAFR-cDNA.利用聚合酶链反应(PCR)扩增PAFR-cDNA,DNA序列分析验证扩增产物的准确性.③结果小鼠附睾精子表达PAFR-mRNA;DNA序列分析验证PCR产物为小鼠PAFR-cDNA.④结论小鼠附睾精子有PAFR-mRNA的表达.     

低渗膨胀试验对人精子头部影响的表面复型电镜初步观察

了解低渗膨胀试验对人精子头部超微结构的影响，以便进一步理解ＨＯＳ对精子功能检测的意义。方法正常生育力人精子经ＨＯＳ处理后固定于盖玻片上，冷却干燥后进行表面复型，透射电子显微镜观察。结论ＨＯＳ可能反映精子产生获得帮顶体反应的潜能。     

精子受精机能的实验研究

本实验应用 Balb/c 小鼠卵代替仓鼠卵作人精子穿透试验;用 ConA-Au 探针显示精子和卵表面的 ConA 受体。实验表明人精子穿透率,能育者为14.8%,不育者为10.32%,经抗精子抗体处理的为5.5%。小鼠精子表面 ConA-Au 标记主要分布在头部,特别是顶体前端和顶体后区,当获能和顶体反应时,前者标记减少;在此相当时期,人精子顶体外膜、内膜及顶体后区也出现标记。结果提示顶体后区在受精中具有重要意义。经 D-甘露糖或抗精子抗体处理及免疫不育者的精子均未被 ConA-Au 标记。小鼠卵透明带表面见有少量 ConA-Au 标记,去透明带后,卵膜上未见标记。本文对精子与卵识别机制作了讨论。     

窒息胎鼠血浆组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的变化

目的 探讨窒息对胎鼠血浆中组织型纤溶酶原激活剂（t－PA）及其抑制物（PAI）活性的影响。方法 通过“延迟剖宫产术”致胎鼠宫内窘迫,实验分5个组：空白对照组、窒息15min组、窒息30min组、窒息15min复氧30min组、窒息30min组。分别测试各组血浆t－PA和PAI的活性。结果 窒息后t－PA活性升高（P＜0．05）,窒息后复氧PAI活性升高（P＜0．01）。结论 窒息可致血浆纤溶酶活性改变。     

重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子体外抗血管内皮细胞增殖的活性

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子（VEGI）体外抗血管内皮细胞增殖的活性。方法：MTT法检测重组人可溶性VEGI对血管内皮细胞及肿瘤细胞增殖的抑制活性。结果：在体外,重组人可溶性BEGI可强烈抑制人脐静脉内皮细胞ECV304、大鼠肺源毛细血管内皮细胞（MPCEC）及新生牛主动脉内皮细胞（BAEC）的增殖,不能报制黑色素瘤细胞B－16和小鼠成纤维细胞L－929的增殖。结论：重组人可溶性VEGI能作用于不同来源的血管内皮细胞,而对肿瘤细胞增殖无抑制作用,提示其可能通过抗肿瘤新生血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

瘤内注射“99-Star”治疗肝癌实验病理研究(肿瘤坏死面积测定)

目的　测定人肝癌 SMMC- 772 1裸小鼠模型经中药“99- Star”治疗后肿瘤出现坏死灶的面积。　方法　于裸小鼠背部移植肝癌中注射“99- Star”中药组 11只 ,注射酒精组 3只和注射生理盐水组 4只。每隔 5 d注射一次 ,每次剂量 0 .1m L ,第 2 0天处死动物。　结果　各实验组裸小鼠移植癌均有不同程度坏死 ,经统计学处理各组之间坏死面积无明显差别。　结论　中药“99- Star”与酒精等注射后肿瘤坏死面积相似     

缺氧缺血时新生鼠脑内t-PA活性的变化

目的：探讨缺氧缺血时新生鼠脑不同源性组织型纤溶酶原激活物（t-PA）活性的变化及其临床意义。方法：一日龄新生SD大鼠分为空白对照组、假手术组和3个缺氧和复氧时间不同的实验组（n=4);体外培养鼠脑 微血管内皮细胞和星形胶质细胞,并分为空白对照组和缺氧组;取鼠脑组织和培养液测t-PA活性。结果：在动物组中以缺氧缺血组的t-PA活性最高,随着复氧时间的增加而下降（P＜0．01）;缺氧时鼠脑微内皮细胞t－PA活性增高,而星形胶质细胞t-PA活性无变化。结论：缺氧导致新生鼠脑内t-PA活性增高;随着缺氧改善,t-PA活性在一定程度上可以下降;缺氧时新生鼠脑内可能主要是微血管内皮细胞产生的t-PA活性增高,降解微血管基膜,破坏微血管的完整性,最终导致脑出血。     

超滤膜分离技术在植酸酶浓缩中的应用

目的 利用超滤法在低温下操作,生物活性物质不易失活的特点,探讨超滤法代替薄膜蒸发法浓缩植酸酶发醇液的技术可行性,以降低能耗。方法 采用截留分子量为２００００的ＰＵ－２０Ｋ－ＰＳ管式超滤膜系统浓缩１～５批次的植酸酶发醇液,测定浓缩倍数、浓缩收率和截留率并观察超滤过程的膜通量及其变化。结果 植酸酶的浓缩倍数为６．５３倍,浓缩收率为９９．６９％,截留率为９９．９３％,系统可以在植酸酶的工艺条件下连续浓缩〉１０ｈ,且经过简单清洗后,膜通量基本恢复。结论 用ＰＵ－２０Ｋ－ＰＳ管式超滤膜系统缩植酸酶发醇液在技术上可行。     

超滤-纳滤集成技术提纯浓缩卡那霉素

目的：采用超滤－纳滤集成膜分离技术代替传统的薄膜蒸发法提纯浓缩卡那霉素树脂解吸液，以提高收率，降低能耗，减少污染。方法：将卡那霉素解吸液先经Suntar-A超滤膜提纯后再用Suntar-12纳滤膜浓缩，测定浓缩倍数，浓缩收率和损失率并考察浓缩过程的膜通量及其变化。结果：浓缩倍数，浓缩收率，损失率，平均膜通量等指标均优化，结论：用超滤－纳滤集成技术是纯浓缩卡那霉素树脂解吸液在技术上可行。     

一氧化氮对人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2生长增殖的影响

目的：应用两株人肝癌细胞（SMMC-7721和HepG2）为实验模型，以硝普钠（SNP）为NNO供体，探讨NO对人肝癌细胞生长增殖的影响。方法：应用MTT、荧光染色技术和电子显微技术、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术定性和定量地检测SMMC-7721和HepG2细胞凋亡情况。结果：NO供体SNP能抑制人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2的生长增殖，并诱导其凋亡，在一定范围内呈时间-剂量依赖关系，同时也引起细胞坏死；SMMC-7721细胞对NO作用的敏感性较HepG2高。结论：NO可抑制人肝癌细胞生长增殖，诱导细胞凋亡，并引起死亡，且两株细胞对其敏感性不同。