环氧乙烷处理同种异体皮质骨板移植组织学研究

目的 研究环氧乙烷处理同种异体皮质骨板移植组织学表现。方法 分别移植经过零下70℃深低温冷冻4周、零下70℃深低温冷冻4周+48℃环氧乙烷灭菌处理的山羊同种异体皮质骨板,对移植骨板以及周围软组织进行组织学检查。结果 术后3～6周深低温冷冻组移植骨板周围软组织少量炎性细胞浸润,环氧乙烷+深低温冷冻组移植骨板周围软组织较多炎性细胞浸润,但炎细胞浸润评分差别无统计学意义(P>0.05);术后6～24周两组移植骨板周围软组织炎性细胞浸润进一步减轻。深低温冷冻组和环氧乙烷+深低温冷冻组术后3周部分移植骨板原哈佛式管扩大,其内有少量间充质组织和新生血管;6周间充质细胞分化为破骨细胞和成骨细胞,破骨细胞使移植骨板哈佛式管进一步扩大以及出现骨吸收隙窝,在哈佛式管和骨吸收隙窝边缘出现成骨细胞贴附和新骨形成;12周移植骨板骨吸收隙窝缩小,成骨细胞和新骨形成增多,部分新骨改建形成板层骨:24周移植骨板基本完成吸收替代和改建塑形。两组移植骨板内无炎细胞浸润,组织学表现相似。结论 环氧乙烷灭菌同种异体皮质骨板移植周围软组织出现炎细胞浸润,不影响移植骨板爬行替代和内部改建塑形。     

墨汁血管灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态

目的 探讨采用血管墨汁灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态的可行性。方法12只山羊右侧股骨移植深低温冷冻同种异体皮质骨板,分别在术后3、6、12、24周处死动物取材,通过血清骨钙素检测,大体观察、X线照片、移植骨板组织学检查、血管墨汁灌注和四环素荧光标记,对移植骨板再血管化以及成骨活性进行评价。结果术后3周血清骨钙素开始升高,12周达到最高水平,与术前比较,血清骨钙素差别有极显著性统计学意义(P<0.01)。术后3、6、12、24周移植骨板墨汁灌注血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值(IOD)升高,与术前比较,血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值差别有极显著性统计学意义(P<0.01),术后12周血管面积比率和四环素荧光标记累积光密度值达到顶峰,与术后3、6、24周比较(P<0.01)。结论深低温冷冻同种异体皮质骨板移植具有较强生物学活性,术后12周移植骨板完全再血管化,24周完成爬行替代和塑形改建。血管墨汁灌注和四环素荧光标记是判定移植骨板活化状态较好的方法之一。     

墨汁血管灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态

目的探讨采用血管墨汁灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态的可行性. 方法 12只山羊右侧股骨移植深低温冷冻同种异体皮质骨板,分别在术后3、6、12、24周处死动物取材,通过血清骨钙素检测,大体观察、X线照片、移植骨板组织学检查、血管墨汁灌注和四环素荧光标记,对移植骨板再血管化以及成骨活性进行评价.结果术后3周血清骨钙素开始升高,12周达到最高水平,与术前比较,血清骨钙素差别有极显著性统计学意义(P<0.01).术后3、6、12、24周移植骨板墨汁灌注血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值(IOD)升高,与术前比较,血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值差别有极显著性统计学意义(P<0.01),术后12周血管面积比率和四环素荧光标记累积光密度值达到顶峰,与术后3、6、24周比较(P<0.01).结论深低温冷冻同种异体皮质骨板移植具有较强生物学活性,术后12周移植骨板完全再血管化,24周完成爬行替代和塑形改建.血管墨汁灌注和四环素荧光标记是判定移植骨板活化状态较好的方法之一.     

不同力学环境影响同种异体皮质骨板移植生物学转归的实验研究

16只山羊造成右侧股骨骨折,双侧股骨分别进行同种异体皮质骨板移植,右侧移植骨板承受生理应力,左侧不承受应力。分别在术后3、6、12、24周处死动物取材,通过组织学检查以及血管墨汁灌注率、孔隙率、四环素荧光标记和新骨形成积分光密度值图像分析,对移植骨板修复进行检测。结果显示,未承受应力侧术后3周,承受应力侧术后6周移植骨板出现再血管化。术后3~6周,不承受应力侧移植骨板血管面积比率、孔隙率、四环素荧光标记和新骨形成积分光密度值大于承受应力侧(P<0.05);而6周以后则承受应力侧大于未承受应力侧(P<0.05)。结果表明,同种异体皮质骨板移植术后早期承受应力延缓了移植骨板再血管化;患肢术后制动6周,待骨折端骨痂连接、移植骨板再血管化以及部分骨板与宿主骨发生骨性连接后,患肢承受生理载荷有利于移植骨板新骨形成和内部改建。     

自体及同种异体听小骨移植的长期组织学变化

一例自体砧骨移植后达21年,一例同种异体砧骨移植后达20年。因再手术,得以取出做组织学观察。肉眼观察,西块听小骨皆无腐蚀。组织学观察见,哈弗氏管内有活的纤维组织。自体砧骨内一些哈弗氏管内血管周围有单核炎细胞浸润。但这例患者于手术时发现有残余胆脂瘤。二块砧骨均无活动的破骨性骨吸收。在自体砧骨近骨内、外膜部,约有50～75％骨质被新骨所取代。但同种异体砧骨内,新生成的骨很少,大部是死骨和空虚的骨腔隙。偏振光检查,见胶原基质仍保持其正常的层状排列。上述结果证实了这样的看法。     

深低温冻储同种异体气管移植并骨髓间充质干细胞移植后气管上皮细胞血管内皮生长因子的表达

背景：深低温冷冻后的组织可以保持其原有的活力和组织完整性,并能消减抗原性。 目的：静脉移植骨髓间充质干细胞合并深低温处理供体气管后进行同种异体气管移植,观察骨髓间充质干细胞在促进上皮再生和再血管化后的作用。 方法：用深低温冻储2 周和6 周的气管进行Wistar大鼠同种异体气管移植后,用PKH-26标记的3~5代骨髓间充质干细胞经鼠尾静脉移植入受体内,等量的磷酸盐缓冲液注射作为实验对照。观察供体气管的组织学和血管内皮生长因子蛋白表达。 结果和结论：骨髓间充质干细胞移植合并深低温冻储后的移植气管结构完整,软骨无变性坏死;深低温6 周的移植气管上皮再生情况优于2 周。骨髓间充质干细胞移植组的上皮细胞表达血管内皮生长因子水平高于磷酸盐缓冲液对照组。结果提示,骨髓间充质干细胞移植合并深低温冻储6 周后移植气管存活期好于深低温冻储2周;骨髓间充质干细胞能够促进移植物周围新生血管的增加,从而促进气管损伤的修复。     

大段异体骨支撑复合自体髂骨移植修复肱骨良性骨缺损

大段骨缺损的临床处理仍是一个棘手的问题。随着同种异体骨免疫学研究的进展和现代冷藏技术的提高,深低温冷冻保存大段同种异体骨日益广泛地应用于修复各种原因引起的大段骨缺损。我们自1996年以来,采用深低温冷冻大段同种异体骨支撑复合自体髂骨移植修复肱骨良性大段骨缺损3例,效果满意。     

髓芯减压和骨髓基质细胞移植对家兔股骨头缺血性坏死的治疗作用

目的:探讨髓芯减压和体外培养的同种异体骨髓基质细胞移植,对兔股骨头缺血性坏死的治疗作用和修复机制。方法:采用新西兰大白兔液氮冷冻法造模,随机分为髓芯减压(A)组和同种异体细胞移植(B)组。术后标本做X-线和组织学观察。结果:(1)X-线观察2周时A、B组股骨头钻孔区边缘密度增加;8周时A组钻孔区呈低密度,边缘形成硬化线,B组钻孔区出现骨小梁结构。(2)组织学观察2周时A组钻孔区边缘出现较多的成骨细胞,并有骨组织形成;8周时钻孔区形成骨髓组织;2周时B组钻孔区有大量的成骨细胞,边缘有较多的骨组织形成。4周时钻孔区内充满新生骨小梁结构;8周时钻孔区内骨小梁趋于成熟。结论:髓芯减压和同种异体骨髓基质细胞移植,对兔股骨头缺血性坏死,有良好的治疗作用,且无明显地排异反应。     

深低温保存的节段性部分脱钙异体骨关节移植修复兔骨关节缺损*

目的研究对深低温冷冻保存的同种异体骨关节在与宿主骨结合部行部分脱钙处理对其与宿主骨愈合的影响。方法从健康新西兰兔截取近端桡骨骨关节2cm,去除软组织及骨髓组织,用生理盐水冲洗干净。实验组行桡骨骨关节远端5mm部分脱钙:4℃下桡骨骨关节远端5mm浸入0.6mol/L HCl中脱钙4h,去离子水反复冲洗;对照组不行脱钙处理。用10%的二甲基亚砜浸泡30 min后,冷冻保存1月后使用。在新西兰大白兔双侧桡骨近端造成2cm骨关节缺损模型,左侧为实验侧,右侧为对照侧,分别移植深低温冷冻并且远端部分脱钙的异体骨关节以及单纯深低温冷冻的异体骨关节。在术后1、2、3个月时做大体标本、X线、ECT以及组织学检查,观察异体骨关节与宿主骨结合部。结果实验组X线和组织学评分在术后1、2、3个月时均高于对照侧,差异具有显著性。ECT显示术后第1个月骨代谢活跃,2、3个月有下降趋势,实验侧部分脱钙段骨代谢高于周围骨及对侧对照侧。结论在深低温保存的同种异体骨关节与宿主骨结合部行部分脱钙有利于异体骨关节与宿主骨的愈合,适合大段骨关节缺损的修复。     

胸腺内注射异基因抗原诱导鼠异体骨移植的免疫耐受

背景:同种异体骨同其他异体组织一样具有抗原性,移植后可引起以细胞免疫为主的排斥反应,应用免疫抑制剂可抑制免疫排斥反应的发生,但对机体有一定的不良影响。目的:探讨胸腺内注射异基因抗原在建立特异性骨移植免疫耐受中的作用。方法:取60只Wistar大鼠随机分为3组,均制作骨缺损模型,供体异基因胸腺内注射组于同种异体骨移植前胸腺内注射受体大鼠脾细胞MHC抗原,同时另设自体骨移植组、同种异体骨移植加用免疫抑制剂组为对照,移植后观察切口情况。移植后1,2,4,6周进行X射线检查,苏木精-伊红染色,可溶性白细胞介素2受体、混合淋巴细胞培养免疫学检测。结果与结论:大体表现、X射线及组织学检查见供体异基因胸腺内注射组、自体骨移植组表现相近,均有炎性细胞浸润及新骨形成。同种异体骨移植加用免疫抑制剂组再生血管较少,骨愈合延迟,炎性细胞浸润明显,移植骨逐渐吸收,无新骨形成。证实了异基因MHC抗原注入小鼠胸腺内,能成功诱导受体对供体鼠骨移植物的耐受。免疫学检查各项数据表明供体异基因胸腺内注射的成骨效果接近于自体骨移植组,优于同种异体骨移植加用免疫抑制剂,证实了胸腺内注射异体MHC抗原可诱导对供体骨移植物的免疫耐受。