扛板归对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-1基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的:研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝组织中MMP -1,MMP -2及TIMP -1蛋白表达的影响.方法:用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,取肝脏常规制片并HE染色,观察各组大鼠肝组织病理学改变,免疫组织化学方法检测各纽大鼠肝组织MMP -1,MMP -2及IMP -1蛋白表达的情况.结果:扛板归高、中剂量组中大鼠肝组织MMP -2及TIMP -1蛋白表达较模型组明显降低(P＜0.05),扛板归高、中剂量组中大鼠肝组织MMP-1蛋白表达较模型纽明显升高(P＜0.05).结论:扛放归具有显著的抗肝纤维化作用,其机制可能通过提高MMP -1表达,降低TIMP -1,MMP -2蛋白的表达而调控细胞外基质的代谢.     

扛板归对肝纤维化大鼠肝组织瘦素蛋白表达的影响

目的研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝组织中瘦素蛋白表达的影响。方法 72只雄性SPF级SD大鼠随机分为6组:正常组(12只)、模型组(9只)、秋水仙碱组(10只)、扛板归高剂量组(11只)、扛板归中剂量组(10只)、扛板归低剂量组(10只),用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,肝脏常规取材、制片,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织瘦素蛋白表达的情况。结果模型组大鼠肝组织瘦素蛋白染色强度和范围明显高于正常组,两组比较差异具有统计学意义(χ2=14.32,P<0.05);与模型组比较,扛板归高剂量组、扛板归中剂量组大鼠肝组织瘦素蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(χ2=12.80,15.21,P<0.05)。结论扛板归抗肝纤维化的作用机制可能是通过降低瘦素蛋白的表达而调控细胞外基质的代谢。     

扛板归抗二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化作用的研究

目的:研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的作用.方法:用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,分别测量大鼠体重、大鼠血清AST、ALT、HA、LN含量,肝脏常规制片并HE染色观察组织病理学改变.结果:扛板归高、中剂量组与模型组比较,能显著降低大鼠血清AST、ALT、HA、LN含量(均P＜0.05),病理形态学观察扛板归高、中剂量组中大鼠肝纤维化程度明显减轻.结论:扛板归对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化,具有较好的作用.     

中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠血清转氨酶的影响

目的:探讨中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化血清转氨酶的影响.方法:用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST).结果:扛板归高、中剂量组能显著降低AST、ALT.结论:扛板归能通过降低转氨酶,保护肝细胞,对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化具有较好的作用.肝损伤和肝纤维化时,血清中AST、ALT含量升高,AST、ALT是诊断肝脏疾病中应用最广泛的酶,一般而言,AST和ALT增高反应了某些器官和组织受到了一定程度的损害.     

金纳多合阿米洛利对大鼠肝纤维化模型的干预作用

目的 现察银杏叶提取物金纳多合阿米洛利对大鼠肝纤维化模型的干预作用.方法 以二甲基亚硝胺造成大鼠肝纤维化模型,分别现察金纳多与阿米洛刺干预后,羟脯氨酸、透明质酸度层粘连蛋白含量的变化.结果 各给药组(除阿米洛刺组外)大鼠肝功能均较模型组有明显改善;阿米洛利和金纳多给药组较模型组的血清透明质酸、层粘连蛋白和肝组织羟脯氨酸含量降低(P＜0.05);肝组织内SOD较模型组升高,而MDA低于模型组(P＜0.01);金阿合用组效果最佳.结论 金纳多(银杏叶提取物)与阿米洛利对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤堆化模型均有预防作用,两者合用有一定的协同作用.     

肝纤维化大鼠TGF-β1与TIMP-1 mRNA的表达及补肾柔肝方的治疗作用

目的:探讨中药复方补肾柔肝方对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导大鼠肝纤维化后肝脏组织金属蛋白酶抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的影响,以了解其对肝纤维化的治疗作用和分子机制.方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,对模型组和治疗组运用DMN诱导大鼠肝纤维化.治疗组在造模4周后给予补肾柔肝方灌胃,剂量10 g·kg-1·d,共治疗4周.第8周末处死全部大鼠,对肝组织进行HE和天狼猩红染色观察,并采用RT-PCR半定量方法,检测大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1mRNA的表达水平.结果:肝组织病理学研究结果显示DMN可以成功诱导大鼠肝纤维化,模型组肝组织TIMP-1和TGF-β1mRNA表达明显增强,中药复方治疗组与模型组相比明显减弱,而正常对照组表达较少.结论:TIMP-1与TGF-β1mRNA的表达与肝纤维化的发生密切相关,中药复方补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1具有明显的抑制作用,可达到抗肝纤维化的作用.     

冬虫夏草菌丝对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的作用

目的:探讨冬虫夏草菌丝对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的作用。方法:将SD大鼠分为正常对照组、模型组、冬虫夏草菌丝治疗组。采用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型。每组大鼠给予相应的药物。4周后,大鼠肝脏用胶原染色观察胶原纤维沉积的变化,盐酸水解法检测肝组织羟脯氨酸含量,Envi-sion两步法测定肝组织Ⅳ型胶原含量和金属蛋白酶组织抑制因子2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)含量;酶图法检测肝组织基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinases-2,MMP-2)活性,Western印迹法检测肝组织Ⅰ型胶原。结果:模型组大鼠肝组织羟脯氨酸、Ⅳ型胶原和TIMP-2含量,I型胶原蛋白表达,较正常对照组均增加,而MMP-2含量降低;冬虫夏草菌丝治疗组大鼠肝组织羟脯氨酸、Ⅳ型胶原和TIMP-2含量,I型胶原蛋白表达较模型组均有不同程度的下降,而MMP-2含量升高。结论:冬虫夏草菌丝有显著的抗肝纤维化作用,其作用机制与促进胶原降解有关。     

γ-干扰素对肝纤维化大鼠肝Fas、Fas-L表达的影响

目的:研究Fas、Fas-L蛋白在四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达以及γ-干扰素(IFN-γ)对其表达的影响.方法:用CCl4诱导制作大鼠肝纤维化模型,使用IFN-γ(20 mu·kg-1·d-1,肌肉注射)对该模型肝纤维化大鼠治疗12周,设正常对照组和模型对照组,用免疫组织化学法(EnVition法)检测各组大鼠肝组织Fas、Fas-L的表达情况.结果:Fas和Fas-L在正常对照组大鼠肝细胞质表达极低,在模型对照组大鼠肝组织主要表达在纤维间隔、肝窦中,表达的量均明显高于正常对照组(P＜0.01).IFN-γ治疗组大鼠肝组织Fas和Fas-L的表达低于模型对照组(P＜0.05～P＜0.01).结论:肝纤维化时Fas和Fas-L表达加强,IFN-γ对肝纤维化大鼠肝组织Fas和Fas-L表达有明显的抑制作用.     

抗纤颗粒治疗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的实验研究

目的　观察抗纤颗粒治疗大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机理。方法　采用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型 ,观察抗纤颗粒治疗前后 TNF- α、γ- IFN含量的变化。结果　抗纤颗粒治疗组较模型组 TNF- α含量下降 (P<0 .0 5 ) ,γ- IFN含量上升 (P<0 .0 5 )。结论　抗纤颗粒对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化有治疗作用 ,其部分机理为通过调节细胞因子的含量 ,而达到抗肝纤维化的目的。     

抗纤软肝方抑制二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化形成的研究

目的观察抗纤软肝方抑制二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化形成的作用效果并探讨其作用机制。方法采用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型，用高、中、低三种剂量（42．0g／kg，21．0g／kg，10．5g／kg）的抗纤软肝方水提液进行干预治疗，并与秋水仙碱进行对照，检测大鼠肝功能、肝组织羟脯胺酸（Hyp）、超氧化物歧化酶（SOD）、血清透明质酸（HA）含量及肝脏病理组织学改变。结果抗纤软肝方高、中、低剂量组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）水平均显著低于模型组和秋水仙碱组（P〈0．05）。抗纤软肝方各剂量组大鼠肝组织Hyp含量均明显低于模型组（P〈0．01），而肝组织SOD含量均明显高于模型组（P〈0．01）。抗纤软肝方高剂量组大鼠血清HA含量明显低于模型组，差异有显著性意义（P〈0．01）。抗纤软肝方高、中、低剂量组肝组织纤维化病变明显减轻，与模型组比较，差异均有显著性意义（P〈0．01）。结论抗纤软肝方对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化形成具有明显的抑制作用，其机制与抗脂质过氧化损伤、保护肝细胞和抑制胶原纤维合成有关。     

黄芪甲苷抗二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠效应研究

目的探讨黄芪甲苷对二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠模型的作用。方法选取27只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组和黄芪甲苷组。模型组和黄芪甲苷组大鼠,采用腹腔注射DMN诱导肝纤维化模型,持续4周。于造模第3周开始,黄芪甲苷组在继续造模的同时予以黄芪甲苷干预,正常组和模型组给于等容量蒸馏水灌胃。4周末(即药物干预两周)处死全部大鼠,观察各组大鼠一般情况、肝组织病理学;检测各组大鼠血清肝功能水平、肝组织中羟脯氨酸(Hydroxypro鄄line,Hyp)含量;免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组肝脏明显缩小,组织炎细胞浸润增加,胶原沉积明显增多,肝功能指标明显异常(P<0.01),提示纤维化形成。与模型组比较,黄芪甲苷可以显著改善肝脏病理,减轻肝脏胶原沉积及肝脏Hyp含量,降低血清ALT、AST、GGT水平及TBil含量,升高ALB含量,显著抑制肝组织α-SMA蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪甲苷具有显著保肝降酶抗肝纤维化形成作用,其机制可能跟抑制肝星状细胞的活化相关。     

荔枝核总黄酮预防大鼠肝纤维化的初步研究

目的观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)预防大鼠肝纤维化作用及活化肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)凋亡的变化,从细胞凋亡角度研究二者之间的关系。方法以二甲基亚硝胺腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,同时以秋水仙碱为阳性对照,TFL[100、200 mg/(kg.d)]灌胃给药,6周后处死大鼠,放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)蛋白水平,取肝脏同一部位行HE、Masson染色观察大鼠肝纤维化程度,采用α-SMA及TUNEL免疫组化双重染色标记活化HSC凋亡。结果 TFL高剂量组和秋水仙碱组血清肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ)均明显低于模型组(P<0.05)。与模型组比较,TFL高剂量组可明显增加活化的HSC凋亡指数,改善大鼠肝纤维化程度(P<0.05)。结论荔枝核总黄酮可抑制肝纤维化大鼠HA、LN、PCⅢ表达,诱导HSC凋亡并改善二甲基亚硝胺所致肝纤维化程度,且具有一定量效关系。     

红丝线草对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1及TIMP-1表达的影响

目的:观察中药红丝线草对肝纤维化大鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、红丝线草高、中、低剂量组共6组,每组10只;除正常组外,其余各组大鼠用二甲基亚硝胺(DMN)制作肝纤维化模型;正常组和模型组大鼠用等体积生理盐水喂养,秋水仙碱组、红丝线草高、中、低剂量组分别给予秋水仙碱0.1 mg/kg和高、中、低剂量红丝线草喂养各组大鼠,4周后处死,取大鼠肝脏,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肝组织中MMP-1及TIMP-1蛋白的表达。结果:模型组MMP-1表达明显低于正常组(t=2.57,P<0.05),TIMP-1表达明显高于正常组(t=7.26,P<0.05);与模型组比较,红丝线草高、中剂量组大鼠肝组织中MMP-1蛋白表达明显升高(t=2.77和2.68,P<0.05),TIMP-1蛋白表达明显降低(t=2.76和3.63,P<0.05);红丝线草低剂量组MMP-1及TIMP-1蛋白表达与模型组比较,差异无统计学意义(t=1.16和1.41,P>0.05);红丝线草高、中剂量组肝组织中MMP-1及TIMP-1蛋白表达与秋水仙碱组比较,差异无统计学意义(t=1.29、2.68、0.05、0.16,P>0.05)。结论:红丝线草抗肝纤维化机制可能与MMP-1及TIMP-1表达水平有关。     

扶正化瘀方对肝纤维化大鼠间质性基质金属蛋白酶活性的影响

为探讨扶正化瘀方影响间质性基质金属蛋白酶活性的抗肝纤维化作用机制。采用二甲基亚硝胺腹腔注射4w诱导大鼠肝纤维化模型。随机分为正常组、模型组与治疗组;治疗组成模后以扶正化瘀方灌胃4w。模型组予以等量生理盐水;检测血清肝功能与肝组织羟脯氨酸含量。蛋白印迹法分析肝组织α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原、基质金属蛋白酶-13和纤溶酶原激活物抑制剂-1蛋白表达,同位素标记底物凝胶法检测间质性基质金属蛋白酶活性。结果：扶正化瘀方显改善模型大鼠肝功能与肝组织胶原沉积;明显降低肝组织羟脯氨酸含量。抑制肝组织α-SMA、I型胶原蛋白表达;对基质金属蛋白酶-13蛋白表达无影响,但明显降低PAI-1蛋白表达。促进间质性基质金属蛋白酶活性。提示扶正化瘀方可促进肝纤维化大鼠间质性基质金属蛋白酶酶原的激活与活性水平。该作用是扶正化瘀方逆转肝纤维化的重要机制之一。     

草苁蓉及氧化苦参碱治疗肝纤维化的实验研究

目的:观察草苁蓉(BR)、氧化苦参碱(OM)治疗大鼠肝纤维化的疗效,为临床治疗提供理论依据.方法:二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制作肝纤维化的大鼠模型,观察BR、OM治疗后大鼠血清ALT、PCⅢ和CⅣ的变化情况及肝组织的病理学改变.结果:BR、OM可明显提高肝纤维化模型大鼠血清ALT,降低模型大鼠血清PCⅢ和CⅣ(BR、OM组与模型组比较:P＜0.05);另外BR、OM组大鼠胶原纤维面密度和肝纤维化分级与模型组比明显减轻P＜0.05.结论:BR、OM对DMN造模的大鼠肝纤维化有治疗作用.     

丹酚酸B盐对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1及其受体蛋白表达的影响

目的:研究中药丹参的有效成分丹酚酸B盐抗肝纤维化作用的机制.方法:Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和丹酚酸B盐治疗组.采用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,丹酚酸B盐治疗组在造模4周后给予丹酚酸B盐治疗4周.治疗结束后,用盐酸水解法检测全部大鼠肝组织中羟脯氨酸的含量,用Western印迹法检测肝组织Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta receptor type Ⅰ,TβRⅠ)、转化生长因子β受体Ⅱ(transforming growth factor-beta receptor type Ⅱ,TβRⅡ)蛋白的表达.结果:模型组大鼠肝组织中羟脯氨酸的含量、Ⅰ型胶原蛋白、TGF-β1及其受体TβRⅠ和TβRⅡ蛋白的表达较正常对照组均有显著增加,而丹酚酸B盐治疗组的上述指标与模型组比较则均有不同程度的下降.结论:丹酚酸B盐具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制与抑制TGF-β1及其受体蛋白的表达有关.     

中药正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:观察正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响。方法:采用四氯化碳+高脂低蛋白饮食制备大鼠肝纤维化模型,治疗组以正肝化瘀方灌胃,正常组、模型组予以等量生理盐水灌胃,6 w后取材检测。用Jamall氏法测定各组大鼠肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,Western blot法检测各组大鼠肝组织α-SMA、Ⅰ型、Ⅳ型胶原蛋白的表达。结果:与模型组比较,治疗组大鼠肝组织Hyp含量及α-SMA、Ⅰ/Ⅳ型胶原蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:正肝化瘀方的抗肝纤维化机制与减少肝组织胶原合成与沉积有关。     

大黄虫丸预防DMN诱导大鼠肝纤维化的作用及其机制研究

[目的]观察大黄虫丸预防大鼠肝纤维化的作用。[方法]二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,同时用大黄虫丸进行预防,观察其对大鼠血清ALT、AST,肝组织的纤维化程度、血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1 R）及其mRNA的表达、以及血管紧张素转化酶mRNA表达的影响。[结果]大黄虫丸可降低大鼠血清ALT、AST水平,减轻肝纤维化程度,降低大鼠肝组织AT_1R及其mRNA表达。[结论]大黄虫丸能部分抑制大鼠肝纤维化时肝组织AT_1R及其mRNA的过度表达。     

SnoN蛋白在肝纤维化大鼠肝组织中的表达及其意义

目的观察SnoN蛋白在大鼠肝纤维化进展过程中的动态表达变化及其意义。方法 SD大鼠分两组:正常对照组6只,模型组24只,二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模后分别在第2周、4周、6周、8周取大鼠血及肝脏标本,HE和Masson染色并光镜下观察各组大鼠肝组织病理变化;RT-PCR检测SnoN、Smurf 2、TGF-β1及Ⅰ型胶原纤维(COL-1)在造模过程中的动态变化。结果模型组第4周、6周肝纤维化明显;模型组血清ALT、AST升高,第4周时达高峰;Alb逐步下降,6周时最低,各时间点与对照组比较均有统计学差异(P<0.005)。造模后,SnoN表达进行性降低,第8周达到最低,Smurf 2表达量逐渐增加,在第6周达最高峰,且明显高于对照组,各模型组与对照组相比均具有显著差别(P<0.05或0.01);TGF-β1表达水平逐步增高,于第4周时达高峰,各模型组与对照组相比均具有统计学差异(P<0.01)。结论 SnoN蛋白表达的降低可能是肝纤维化中的一个重要环节,值得进一步深入研究。     

卡托普利对肝纤维化大鼠肝功能及肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原的影响

目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)类药物卡托普利对肝纤维化大鼠肝功能的调节作用,探究其抗肝纤维化的分子机制.方法:采用四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化大鼠动物模型,并应用卡托普利进行治疗,于20周末采集大鼠肝组织及腹主动脉血.观察肝脏组织学变化,采用ELISA法检测大鼠血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)水平;分别采用RT-PCR法和免疫组化法检测大鼠肝组织中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)和α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的mRNA和蛋白表达变化.结果:(1)模型组大鼠血清AST、ALT与对照组相比升高(P=0.000),与模型组比较,ACEI高、中剂量组血清ALT表达水平均降低(P=0.000;P=0.010),ACEI高剂量组血清AST表达水平降低(P=0.032).(2)模型组大鼠肝组织Collagen-Ⅰ和α-SMA mRNA和蛋白表达较对照组均升高(P=0.000),与模型组比较,ACEI各治疗组上述指标表达水平均降低(P=0.000).结论:卡托普利能够改善肝纤维化大鼠的肝功能,缓解肝纤维化程度,该作用与其抑制HSC的激活并下调肝组织Collagen I和α-SMA的表达水平有关.