2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究

目的：探讨中国人2型糖尿病患者载脂蛋白E（apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性酶切片段长度多态性法，分别对74例2型糖尿病患者及191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E进行全面分析。结果：2型糖尿病患者的血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC),载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ、E水平及TG／HDLC比值较对照组显著升高（P＜0．01）；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），apoE/apoCⅢ比值显著降低（P＜0．05）。2型糖尿病组与对照组apoE基因频率分布无显著性差异（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清TG／HDLC比值较E3／3基因型显著降低；而携带ε4等位基因组血清apoAⅡ水平较E3／3基因型及携带ε2等位基因组显著升高（P＜0．001）。结论：2型糖尿病患者apoE基因多态性与血TG／HDLC及apoAⅡ有一定关联。     

载脂蛋白E基因型分型方法研究

目的：为调查海南省老年性痴呆患者载脂蛋白Ｅ（Ａｐｏ Ｅ）基因频率,建立一种简便、快速、准确的人载脂蛋白Ｅ基因型检测方法。方法：应用碘化钠法提取模板ＤＮＡ,聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增Ａｐｏ Ｅ基因含１１２ 位和１５８ 位氨基酸的基因序列,扩增产物用限制内切酶Ｈｈａ Ｉ酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,观察酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＩＰ）图谱。结果：碘化钠法提取模板ＤＮＡ 与经典法无差异;运用ＰＣＲ－ ＲＦＩＰ法检测３０ 名健康人Ａｐｏ Ｅ基因型,实验成功。结论：该方法简单、快速、准确,适合于一般实验室开展Ａｐｏ Ｅ基因型调查     

不同人群载脂蛋白E基因频率分布特征

目的 :研究江苏地区汉族人群载脂蛋白E(ApoE)基因型及等位基因频率 ,并与国内外不同人群比较分布特征。方法 :聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)方法检测 16 8例江苏地区无血缘关系汉族人群ApoE基因型。计算各基因型及等位基因频率。结果 :江苏地区汉族人群载脂蛋白E各基因型频率分别为 :ε2 / 2 =0 .6 0 % ;ε2 / 3 =11.90 % ;ε2 / 4 =1.2 0 % ;ε3 / 4 =10 .70 % ;ε3 / 3 =75 .0 0 % ;ε4 / 4 =0 .6 0 % ;各等位基因频率分别为 :ε2 =7.14% ;ε3 =86 .31% ;ε4 =6 .5 5 %。频率分布在不同年龄、性别无显著差异。与其他地区中国人群频率分布相似。中国人群ε3 等位基因频率明显高于欧美人群 ,而ε4等位基因频率明显低于欧美人群。结论 :江苏地区汉族人群载脂蛋白E等位基因频率分布与其他地区中国人群频率分布相似 ,但与欧美人群有显著差异。     

载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨默病的关系探讨

目的 :探讨阿尔茨默病 (AD)患者的载脂蛋白E(ApoE)基因的分布 ,分析它们的相互关系。方法 :利用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术对AD患者和相应健康对照的ApoE基因进行分型 ,从而进行AD与ApoE等位基因多态性的关联分析。结果 :AD病人ApoE等位基因ε4 占 2 0 .74% ,明显高于正常人对照组的 7.6 4% ,而ε3 则占 6 4.6 3% ,低于正常人对照组的 84.12 % ,均有极显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :ApoE等位基因中 ,ε4 可能为AD的易感因子 ,而ε3 则为保护因子。     

载脂蛋白E基因多态性与脑血管病及血脂水平易感性的关系

载脂蛋白E（ApolipoproteinE，ApoE）基因多态性与脑血管病发病遗传易感性的关系是近年临床研究的焦点。ApoE是一种具有多态性的脂蛋白，有三种异构体E2、E3和E4．分别由第19号染色体上的三种等位基因E2、E3和E4编码。它参与机体脂质代谢及调节胆固醇水平，是动脉粥样硬化病变发生、发展的遗传因素之一．但是目前研究结果并不一致，为了明确ApoE基因多态性与脑血管病的关系，我们采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性技术分别对脑血管病患者和正常人ApoE基因多态性进行了检测，常规检测血脂水平。     

聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基因多态性及初步应用

目的 :建立聚合酶链反应—限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)分析结合 DNA直接银染技术检测载脂蛋白 E基因多态性。方法 :选择江苏地区汉族健康人 16 8例及冠心病 6 3例 ,PCR扩增 Apo E基因第 4外显子包含编码第 112位和第 15 8位氨基酸残基的基因序列 ,cfo I限制性内切酶酶切后电泳 ,银染色后分析 Apo E基因型。结果 :汉族健康人群及冠心病人群 Apo E基因型频率分别为 :ε2 /2 0 .6 % ,0 ;ε2 /3 11.9% ,14.3% ;ε2 /4 1.2 % ,4.8% ;ε3/4 10 .7% ,17.5 % ;ε3/3 75 .0 % ,6 1.9% ;ε4/4 0 .6 % ,1.6 % ;Apo E等位基因频率分别为 :ε2 7.14% ,9.5 2 % ;ε386 .31% ,77.78% ;ε46 .5 5 % ,12 .70 %。结论 :PCR- RFL P方法快速、简便、准确性和可靠性高 ,适合普通实验室开展及大规模研究     

2型糖尿病合并冠心病患者载脂蛋白E基因多态性研究

目的 :研究载脂蛋白 E(Apo E)基因多态性与 2型糖尿病患者合并冠心病的关系。方法 :用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P) ,研究了 12 5例 2型糖尿病 (DM)患者和 71例健康体检者 Apo E基因型 ,分析了 Apo E基因多态性与 2型糖尿病及其合并冠心病的关系。结果 :(1)糖尿病组 (DM)、糖尿病合并冠心病组 (DC)及对照组等位基因频率分别为 5 .5 %、89.7%、4.8% ,4.1%、85 .3%、10 .6 %和 5 .6 %、86 .6 %、7.8%。相互间 P均 >0 .0 5 ,说明 Apo E基因型与中国人的 2型糖尿病及合并冠心病的发生发展无相关性。 (2 )通过对不同 Apo E基因型的血胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL )及低密度脂蛋白 (L DL )水平比较 ,发现携ε4等位基因的个体血 TC高于携其他 ApoE等位基因的个体 ,而携ε2等位基因的个体血 TG的水平高于携ε3、ε4等位基因的个体 (P<0 .0 5 )。 (3)Apo E基因多态性与高血压 (HT)无显著相关性。 (4 )携ε2、ε3、ε4等位基因的个体之间冠心病的发生率差异无显著性。结论 :Apo E等位基因多态性不是 2型糖尿病合并冠心病的独立危险因素     

人载脂蛋白E的PCR－RFLP基因分型

采用两对引物进行套式聚合酶链式反应（ＰＣＲ），扩增人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因第４号外显子的２３３ｂｐ特异性片段。用限制性核酸内切酶ｎｈａｌ酶解ＰＣＲ产物。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型。此方法简便、灵敏，结果可靠。分析了１００名正常人ａｐｏＥ的基因型，其等位基因ｅ２，ｅ３，ｅ４频率分别为０．０５，０．８８和０．０７。     

载脂蛋白E基因多态性和动脉瘤性自发蛛网膜下腔出血预后相关性

目的 探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性和动脉瘤性自发蛛网膜下腔出血(SAH)预后的关系。方法 对104例动脉瘤性SAH患者采用哥拉斯格预后评分(GOS)，对伤后3个月的恢复情况进行评估。测定患者的血脂ApoE基因多态性，通过限制性片段长度多态性而确定(RFLP)。结果 病例组的基因型和等位基因频率与正常对照组无显著性差异(P＞0．05)。在18例ApoE∈4等位基因携带者中有5例(27．8％)预后不良，明显高于非∈4等位基因携带者(8．1％，P＝0．032)；单因素和多因素Logistic回归均提示仅∈4是预后不良的危险因素(单因素OR＝4．34，P＝0．026；多因素0R＝6．95，P＝0．030)。结论 APOE∈4等位基因是动脉瘤性SAH患者预后不良的危险因素。     

载脂蛋白B基因多态性与冠心病和血浆脂质水平的关联

关于冠心病与载脂蛋白B(ApoB)基因多态性关联的研究，国际上已有不少报道，但研究结果不尽相同。一般采用PCR技术检测ApoB基因上Xbal酶切位点、EcoR1酶切位点和3宋端串联重复序列(3′VNTR)位点多态性，也有的包括Ins／Del位点。上述检测手段把ApoB基因多态性分为3种形式：①限制性片段长度多态性(restriction fragment length poly-     

载脂蛋白E遗传多态性及其与疾病的关系

目的:分析载脂蛋白E遗传多态性及其与疾病的关系.方法:采用PCR-RFLP的方法,检测了67例糖尿病患者、114例冠心病患者及135例正常人ApoE基因型.结果:在基因型频率比较中,糖尿病和冠心病患者组ε3/3基因型频率均有明显下降,其中冠心病患者组ε3/4基因型频率明显升高;在基因频率比较中,二组ε4基因频率均有明显上升,ε3基因频率均有明显下降.结论:以上数据表明ApoE的ε4等位基因可能为糖尿病、冠心病的生物性风险因子,ε3/4基因型与冠心病密切相关.     

中国北方汉族人载脂蛋白E基因多态性与血脂代谢的关系

目的从基因水平探讨载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与中国北方汉族人血脂的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术测定150例心血管病患者（病例组）和130例正常对照者（对照组）的ApoE基因多态性,并测定血脂代谢的指标,研究ApoE基因多态性与血脂水平的关系。结果在3种等位基因间,总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及载脂蛋白B（ApoB）水平均按ε4基因携带者〉ε3基因携带者〉ε2基因携带者的顺序递减,差异有显著性（对照组均P〈0.05,病例组均P〈0.01）,而三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白AI（ApoAI）水平差异无显著性（均P〉0.05）。结论ApoE基因多态性影响中国北方汉族人的血脂代谢,ε4等位基因对TC、LDL-C及ApoB有升高作用。     

男性人群中载脂蛋白E基因多态性与血脂水平的关联性分析

目的: 探讨男性人群中载脂蛋白E(APOE)的基因多态性与血脂水平的关联性,为APOE基因作为诊断血脂异常指标提供理论依据。方法: 从3家重庆医院体检中心随机抽取男性356人,其中242例高血脂患者作为病例组,114名健康者作为对照组。检测研究对象静脉血中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)水平,并测量其身高和体质量。采用基因芯片测序方法对APOE基因进行分型。结果: APOE基因型在人群中分布,共检测出6种基因型,其中E3/3频数最高,为69.10%;APOE等位基因中E2频数为17.98%,E3频数为75.84%,E4频数为6.18%。在病例组中,不同APOE基因型高血脂患者TC水平比较差异有统计学意义(P<0.05),且APOE4基因携带者的TC水平明显高于APOE2和APOE3基因携带者(P<0.05)。多元线性回归分析,APOE多态性与TC、TG呈正相关关系(r=0.157,P<0.05;r=0.276,P<0.05),与HDL水平呈负相关关系(r=-0.153,P<0.01)。结论: 中国男性人群中APOE基因多态性对血脂水平有一定的影响,APOE4基因型携带者TC和TG水平有升高的趋势。     

ApoE e4等位基因与全麻苏醒期躁动的关系

目的 研究ApoE e4等位基因与全麻苏醒期躁动(EA)之间的关系.方法 选择年龄≥60岁的全麻下择期腹部手术患者,在麻醉恢复室采用Riker镇静、躁动评分(Sedation-AgitationScale,SAS)进行躁动诊断,并采用PCR-RFLP方法进行ApoE基因型测定.结果 共有196例患者人选本研究,其中39例(22.4%)发生了EA;38例(19.4%)携带ApoE e4等位基因.e4等位基因、低水平教育程度分别是EA发生的危险因素(36.9% vs 15.8%,P=0.005,30% vs 14.3%,P=0.01).多因素回归分析显示e4等位基因与EA有关联(odds ratio:4.32,95%CI:1.75～10.05).结论 ApoE e4等位基因是发生EA的高危因素.     

人突变的载脂蛋白E对转基因小鼠学习与记忆能力的影响

目的 研究突变的人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）对大脑皮层功能的影响。方法 以Ｆ１代ａｐｏＥ４与ａｐｏＥ７转基因小鼠为研究对象,分别用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析及ＥＬＩＳＡ检测人ａｐｏＥ基因在Ｆ１代小鼠染色体上的整合与在血中的表达;以主动回避实验检测小鼠的学习能力和短期与长期记忆能力的变化,同时用酶法测定Ｆ１代小鼠的血脂水平。结果 （１）人ａｐｏＥ４和ａｐｏＥ７基因稳定地整合于Ｆ１代小鼠染色体上并高效表达于     

载脂蛋白E基因型与脑叶出血的关系

目的　探讨载脂蛋白E(apoE)基因型与脑叶出血的关系。 方法　用PCR技术检测 2 6例脑叶出血apoE的基因型 ,并与 30名健康同年龄对照组和 30例基底节脑出血组比较。结果　脑叶出血组ε4 等位基因频率明显高于健康对照组 (P <0 .0 5 ) ,且脑叶出血组E3/3基因型有下降趋势 ;而基底节出血组apoE基因型与ε4 等位基因频率和健康对照组比较没有显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　ε4 等位基因有较高的脑叶出血风险 ,而与非脑叶出血无关。     

巢氏PCR—RFLP和多重PCR检测HBV基因型、基因亚型方法的比较

目的:建立HBV基因型和亚型的分型方法,并分析相关的两种方法特异性和敏感性。方法:采用型特异性引物的巢氏PCR-RFLP和六种主要的HBV型特异性引物和亚型特异性引物的多重PCR方法,分别检测了100例患者标本。结果:两法不一致率为50%(27/54)。型特异性引物巢氏PCR-RFLP法检测出B基因型41例(41%),C基因型25例(25%),B C基因型34例(34%),B j亚型3例(7.3%),Ba亚型为38例(92.7%),Cs亚型为21例(84%),Ce亚型为3例(12%),1例C型未分出亚型(4%)。多重PCR法检出B型18例(33.3%),C型7例(13%),B C混和型5例(9.3%),B2亚型2例(11%),C1亚型2例(28.5%)。巢氏PCR-RFLP法型检出率100%亚型检出率98.5%,多重PCR法型检出率55.6%,亚型检出率仅为16%,前者高于后者(P<0.05)。结论:巢氏PCR-RFLP鉴定HBV基因型、基因亚型较多重PCR敏感性高,重复性好,但耗时长,费用高。     

阿尔茨海默病患者载脂蛋白E基因型分析

目的：研究载脂蛋白E（ApoE)等位基因与阿尔茨海默病（Alzheimers Disease AD)之间的关系。方法：应用PCR－RFLP技术测定AD组（52例）及对照组健康老人（106例）的ApoE基因分布,并对二者结果进行比较,结果：AD组ApoE 4基因频率（18．27％）明显高于对照组健康老人（5．66％）,差异有显著性（P＜0．01）,结论：ApoE4等位基因可能是AD的一种遗传危险因素。     

家族性高胆固醇血症患者载脂蛋白E基因多态性及其对血脂的可能影响

目的 分析我国部分地区家族性高胆固醇血症(FH)患者载脂蛋白E(ApoE)基因型分布情况及其对FH血脂变化水平的可能影响。方法 采用PCR—RFLP法检测载脂蛋白E基因型，比较其与普通高胆固醇血症患者的基因型分布情况。提取外周血基因组DNA，PCR扩增包含2个等位基因决定位点的DNA片段，PCR扩增产物经Hha Ⅰ酶切后进行聚丙烯酰胺电泳，银染后分析ApoE基因型。检测FH患者血脂变化。结果 FH患者和普通高胆固醇血症患者ApoE表型频率：E3／2分别为3．3％、11．0％，E3／3为56．7％、63．0％，E4／2为10．0％、15．1％，E4／3为30％、9．6％；ApoE等位基因频率：ε2分别为6．7％、14．4％，ε3为73．3％、73．3％，ε4为20．0%、12．4％。ApoE基因型对FH患者血脂变化的影响不显著。结论 在所调查的FH患者中，ApoE ε4等位基因有增高的趋势，但对血脂变化影响不明显。     

普法他汀对高脂血症患者载脂蛋白E的影响

目的 :探讨普法他汀对高脂血症患者血清总载脂蛋白E(apoE)水平的影响。方法 :40例高脂血症患者每晚顿服普法他汀 2 0mg 4周 ,比较服药前后血清甘油三酯 (TG)、胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、apoA、apoB、apoE及脂蛋白 (a) [Lp(a) ]水平的变化。结果 :用药后血清TC及TG分别下降 2 0 .3%及 8.7% (P <0 .0 0 1,<0 .0 5 ) ,LDL C下降 2 3.1% (P <0 .0 1) ,apoB及apoE分别下降 12 .9%及 32 .5 % (P<0 .0 5 ,<0 .0 0 1) ,apoA1增加 7 3% (P <0 .0 5 )。apoE下降幅值分别与其自身基础和TG及LDL C基础值呈正相关(P <0 .0 1,<0 .0 1,<0 .0 5 )。HDL C呈增高趋势 ,Lp(a)改变无统计学差异。结论 :普法他汀能导致血清apoE水平显著下降其可能参与了抗动脉粥样硬化过程。