不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化

目的从生化和形态两个方面探讨不同年龄组抑郁症模型大鼠脑乙酰胆碱酯酶及乙酰胆碱转移酶活性的变化。方法 Sprague-Dawley雄性大鼠,按照年龄分为幼年、成年和中年组共3组,每组20只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激(chronic mild unp redictable stress,CMUS)与孤养相结合的方法建立抑郁症动物模型,运用敞箱实验(Open-Field)与糖水消耗量评定大鼠行为学改变,用比色法和免疫组化法测量大鼠大脑皮层、海马区乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase,ChAT)与乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)活性,并用电镜观察大鼠脑海马CA3区超微结构变化。结果造模21 d后,与对照组相比,模型组水平运动得分、垂直运动得分、体重和糖水偏爱度明显降低(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠ChAT与AChE活性均升高(P<0.05);与幼年模型组、成年模型组相比,中年模型组两个酶活性均升高(P<0.05),与幼年模型组相比,成年模型组两个酶活性均升高(P<0.05)。电镜观察结果显示,海马凋亡细胞主要集中在幼年、成年和中年模型组。结论抑郁症模型ChAT与AChE活性升高,并且随着年龄的增长升高尤为显著,胆碱能神经系统与抑郁症发生发展有密切关系。     

乙酰胆碱酯酶与老年性痴呆关系的研究进展

1　概　况面对人口老龄化的世界性难题 ,老年疾病的防治是刻不容缓的 ,这不仅是一个医学问题也是一个社会问题。痴呆多见于老年人 ,多数人估计 6 5岁以上的老人中重度痴呆为 5 %～ 8% ,其中老年性痴呆病人约占半数。在美国 ,老年性痴呆是引起死亡的第 4位原因 (在心脏病 ,癌 ,中风之后 ) ,每年死于老年性痴呆的超过 10万人 ,可见老年性痴呆已成为现代社会中主要致死疾病之一〔1〕。因此对老年性痴呆的研究是十分必要的 ,不仅具有巨大的社会效益而且明显减轻国家和家庭的经济负担。1.1　老年性痴呆的病理特征　皇家医师学院定义痴呆是指大脑…     

蚊乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性

媒介昆虫的抗药性主要有两种分子机制即基因突变和基因扩增,其中基因突变与抗药性有着密切的关系。蚊对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性的产生可能是由于突触部位的乙酰胆碱酯酶对杀虫剂不敏感造成的,这种不敏感性的产生是编码乙酰胆碱酯酶的基因Ａｃｅ发生突变,从而导致氨基酸替代,这种变化也改变了酶对底物以及杀虫剂的催化活性。     

华支睾吸虫乙酰胆碱酯酶定位的电镜观察

用透射电镜对华支睾吸虫乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）的亚显微定位进行了观察，发现该酶的反应产物以微粒形式沉着于实质细胞的核膜和内质网、神经突起的轴突膜及肠绒毛的片层膜结构。同时观察到实质细胞和皮层合胞体内Ａ、Ｂ二型囊泡及神经轴突内的Ａ型囊泡在酶定位过程中有破裂或变形现象，而实质细胞内的Ｃ型大颗粒及Ｄ型分泌小体无明显变化。     

不同品系淡色库蚊各发育阶段的非特异性酯酶和乙酰胆碱酯酶活力变化

研究并探讨非特异性酯酶（NSE）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活力在不同品系淡色库蚊（Cules pipiens pallens）各发育阶段的变化，为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据。用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE和AChE活力，结果显示，敏感品系、DDVP抗性品系和残杀威抗性品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育阶段有变化，I－Ⅲ龄幼虫较低，Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊较高，在各发育阶段均是DDVP抗性品系NSE活力最高，残杀威抗性品系次之，敏感品系最低，其中Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊阶段三个品系间NSE活力差别更明显；三个品系淡色库蚊AChE活力在I－Ⅳ龄幼虫和蛹期较低，3日龄雌成蚊较高，三个品系间AChE活力稍有差异，从高到低依次为残杀威抗性品系、DDVP抗性品系和敏感品系。测定蚊虫NSE活力判断抗药性可选择Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄未吸血雌成蚊；测定蚊虫AChE不敏感性判断抗药性可选择3日龄未吸血雌成蚊；蚊虫化学防治中应选择低龄幼虫阶段施药。     

蚊乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性

媒介昆虫的抗药性主要有两种分子机制即基因突变和基因扩增。其中基因突变与抗药性有着密切的关系。蚊对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性的产生可能是由于突触部位的乙酰胆碱酯酶对杀虫剂不敏感造成的。这种不敏感性的产生是编码乙酰胆碱酯酶的基因Ace发生突变,从而导致氨基酸替代,这种变化也改变了酶对底物以及杀虫剂的催化活性。     

孕激素对成骨细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨孕激素对成骨细胞凋亡的影响及其机制. 方法以Western blot分析测定鼠原成骨细胞(MC3T3-E1)孕激素受体的表达水平和细胞色素C释放,吖啶橙/溴乙碇(AO/EB)染色和夹心法酶免法分析测定细胞凋亡,荧光底物显色法估计半胱天冬蛋白酶-9/3的活性. 结果在孕激素浓度为10~(-10)mol/L、10~(-9)mol/L及10~(-8)mol/L细胞培养中,细胞凋亡程度分别为1.93±0.12、1.57±0.13和0.795±0.14,均明显低于无血清细胞培养(2.97±0.22),差异有统计学意义(均为P<0.01);添加10~(-6)mol/L孕激素受体拮抗剂RU486后,细胞凋亡程度与无血清培养差异无统计学意义(2.88±0.21,P>0.05);孕激素对细胞色素C的释放及半胱天冬蛋白酶-9/3活性的抑制作用均被逆转. 结论孕激素通过激素受体及其下游的线粒体信号通路抑制成骨细胞凋亡,这可能与孕激素促进骨形成的作用机制有关.     

不同剂量碘对小鼠迷宫前后大脑乙酰胆碱和乙酰胆碱酯酶的影响

目的研究不同剂量碘对迷宫前后小鼠大脑乙酰胆碱(Ach)量、乙酰胆碱酯酶(AchE)活力的影响。方法采用随机区组实验设计方法将昆明初断乳鼠随机分为适碘组(I),不同剂量高碘(Ⅱ￣Ⅴ)组,碘通过饮水给予,喂养100d,复制成高碘动物模型,交配生仔,取25日龄各组仔鼠迷宫训练前12只、迷宫训练后10只测定大脑Ach含量和AchE活力。结果①除Ⅲ组外,其余组逃避潜伏期均随实验次数增加而减少(P<0.05),高碘组部分实验次数逃避潜伏期较适碘组明显延长(P<0.05)。②迷宫前第Ⅳ、Ⅴ组Ach含量较适碘组明显减少(P<0.05);迷宫后第Ⅱ、Ⅲ组较适碘组明显减少(P<0.05);迷宫后与迷宫前比较,除第Ⅱ组外其余组均较迷宫前显著增多(P<0.05)。③迷宫前、迷宫后各组AchE活力虽存在显著差异(P<0.05),但Ⅱ￣Ⅴ组与适碘组比较差异无统计学意义(P>0.05);迷宫前后同组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论高碘引起的学习记忆功能障碍与脑内合成的Ach数量减少有关;强化训练小鼠学习记忆功能,可引起脑内Ach合成增多,Ach含量改变与AchE活力无明显关联。     

印度殖盘吸虫神经系统的乙酰胆碱酯酶定位观察

采用乙酰胆碱酯酶组织化学方法对印度殖盘吸虫进行染色,观察并描绘其神经结构。结果显示,该吸虫脑神经节与神经连合位于口吸盘和生殖吸盘之间、虫体的背侧。脑神经节向前发出4对神经干,与口吸盘内神经网相连;向后发出3对神经干,其中腹主神经干最粗大,3对神经干在虫体后端各分出几条神经分支进入腹吸盘。生殖吸盘上分布有发达的神经网。虫体表面神经纤维成对并行,斜行交叉,构成表面神经网。分布于前体部的神经细胞分为3种类型。说明印度殖盘吸虫神经结构符合复殖类吸虫的基本特征,其生殖吸盘内具有独特、复杂的神经结构。     

IN VITRO EFFECTS OF METHOTREXATE ON HUMAN ARTICULAR CARTILAGE AND BONE-DERIVED OSTEOBLASTS

Conflicting data have been published on whether low-dose methotrexate(MTX) treatment of rheumatoid arthritis (RA) is able to slowdown radiological joint damage, i.e. retard the destructionof articular cartilage and (subchondral) bone. We studied theeffects of MTX on proteoglycan (PG) turnover and interleukin-1(IL-1)- and RA mononuclear cell (RA-MNC)-induced cartilage damagein human articular cartilage tissue cultures, and the effectsof MTX on basal and RA-MNC-influenced proliferation and differentiationof osteoblasts in cultures of human bone-derived osteoblasts.MTX exerted no direct effect on cartilage nor did MTX influenceIL-1- or RA-MNC-induced cartilage damage, despite strong suppressionof basal as well as mitogen- and antigen-induced RA-MNC proliferation.MTX induced strong inhibition of osteoblast proliferation, butdid not significantly interfere with osteoblast differentiation(i.e. alkaline phosphatase activity). RA-MNC-enhanced proliferationand differentiation of osteoblasts were abolished by MTX. Theseresults suggest that if MTX is able to induce retardation ofradiological progression in RA, this is not based on an initialdirect effect of MTX on cartilage as measured by PG turnover,nor on an initial inhibition of IL-1- or RA-MNC-induced cartilagedamage. However, longstanding MTX-induced inhibition of RA-MNCproliferation may lead to reduction of the catabolic activityinvolved in cartilage destruction. On the other hand, long-terminhibition of osteoblast proliferation may eventually lead todecreased bone formation and osteopenia. Whether this will turnout to be a problem of clinical importance in the treatmentof RA has to be established. KEY WORDS: Methotrexate, Cartilage, Osteoblasts, Rheumatoid arthritis Pressent address:      

缺血心肌细胞钙分布变化的细胞化学研究

本文报道用细胞化学的磷酸盐—焦锑酸盐(PPA)法观察大鼠心肌缺血时心肌细胞钙分布变化。用PPA法显示正常心肌细胞钙定位在肌膜包括T管及闰盘的肌膜。钙沉淀物分布在肌膜的胞质面,沉淀物大小不超过20nm。在冠状动脉结扎30min后,肌膜的结合钙沉淀物减少甚至消失。当缺血超过60min,心肌细胞损伤严重,肌膜结合钙消失,细胞内肿胀线粒体的基质内积聚了丝团状的钙沉淀物。说明肌膜和钙结合能力是心肌细胞生存的重要特性。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞早期凋亡的研究

目的：为了解观察ＳＬＥ患者休内细胞凋亡情况，并其外周血淋巴细胞早期凋亡率进行了检测，方法：应用最新的ＡｎｎｅｘｉｎＶ检测试剂盒及流式细胞仪检测早期凋亡细胞。结果：ＳＬＥ活动期患者外周血淋巴细胞早期凋亡率（１２．６１±６．３２，ｎ＝２）明显高于稳定期患者（４．４７±３．３９，ｎ＝８，Ｐ〈０．０１）及正常人（５．１３±３．３７，ｎ＝１１，Ｐ〈０．００１），但与ＳＬＡＭ评分无相关，活动期患者初发病组（１     

肥大心肌细胞自体吞噬泡的细胞化学及形态定量研究

用胞嘧啶单核苷酸酶（ＣＭＰ酶）作为溶酶体标志物和视频图像数字分析仪观察大鼠腹主动脉结扎后４周、１０周的肥大心肌细胞的自体吞噬泡变化。实验发现：①自体吞噬泡内有ＣＭＰ酶反应产物出现；②在１０周组，单位面积（２４．７７μｍ￣２）胞质内ＣＭＰ酶反应产物面积和Ｔ管面积明显大于对照组及４周组；③在１０周组最明显特征是细胞降解产物排到扩张Ｔ管。这些结果说明，细胞成份的自体吞噬降解在心肌肥大过程中起着重要调节作用，扩张的Ｔ管也反映了心肌细胞外吐加快的适应性改变。     

DOSE-RESPONSE RELATIONSHIPS IN A CYTOCHEMICAL SECTION BIOASSAY FOR THYROID STIMULATORS

The thyroid stimulators TSH and thyroid stimulating immunoglobulins (TSI) have previously been distinguished in a cytochemical section bioassay (CBA) by the different times at which they caused maximum increase of lysosomal membrane permeability within guinea-pig thyroid follicular cells. The present study demonstrates that the times at which maximum stimulation occurs in the assay depends not only on the type (TSH or TSI) but also on the concentration of the stimulator. At higher concentrations of stumulator earlier times of maximum stimulation were observed for both TSH and TSI. When both stimulators were simultaneously present in plasma at higher concentrations a single peak of stimulatory activity occurred. Neutralization studies using specific antisera revealed that the single peak represented a merging of TSH and TSI peaks. These findings explain the lack of parallelism to the standard curve seen at higher concentrations of TSH or TSI in the CBA. They emphasize the necessity of measuring plasma samples at a variety of dilutions in order to achieve parallelism and to avoid intra-assay interference between TSH and TSI. When these conditions are observed CBA can be used to detect TSH and TSI with extreme sensitivity even when both are simultaneously present in plasma.