胶原性关节炎大鼠血清中IL-17水平的分析

目的 检测胶原性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清IL-17的水平.并分析其与抗Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ,CII)抗体以及关节炎症指数的关系.方法 建立CIA模型.ELISA法检测IL-17及抗CII抗体的水平;并观察CIA大鼠炎症指数.结果 CIA大鼠血清IL-17和抗CII抗体水平均高于对照组.且CIA组IL-17与关节炎炎症指数和血清抗CII抗体水平呈正相关关系.结论 CIA大鼠血清IL-17水平升高,且与病情活动有关.     

穴位埋线对大鼠CIA模型Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清Treg/Th17相关细胞因子及滑膜组织病理形态学的影响,从细胞因子角度以及组织病理形态学改变探讨其的作用机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。动态观察大鼠一般情况、各项关节炎活动指标、HE染色观察滑膜病理改变、ELISA法检测血清中IL-6、IL-17和TGF-β1含量。结果与模型组比较,各治疗组均能有效改善CIA大鼠关节肿胀以及关节炎指数;提高血清中TGF-β1含量和降低血清中IL-6、IL-17含量,各治疗组能有效减轻CIA模型滑膜组织关节炎炎症及病理形态的改变。结论穴位埋线治疗具有免疫调节作用,其可能调节Th17/Treg细胞平衡而显著减轻关节炎症和破坏。     

甲氨蝶呤对小鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用及其机制

目的： 研究甲氨蝶呤关节周围注射后对小鼠胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis,CIA）的治疗作用及其机制。方法： 从初次免疫后第22天开始至50天止,每周3次关节周围注射甲氨蝶呤,PBS作阴性对照,对CIA小鼠关节炎严重程度进行评分并比较各组关节炎发生率,石蜡切片观察组织病理学变化,流式细胞术检测腹股沟淋巴结细胞中Th17细胞与Treg细胞的比例变化情况。结果： 甲氨蝶呤可以有效降低小鼠关节炎的发病率及平均关节炎指数(P＜0.001);石蜡切片显示甲氨蝶呤对炎症细胞浸润、血管翳的形成、软骨以及骨的破坏具有较好的抑制作用;流式细胞术检测显示甲氨蝶呤组Th17细胞比例降低,Treg细胞比例增加(P＜0.05)。结论： 甲氨蝶呤关节周围注射可以有效抑制类风湿关节炎的发展,其机制可能与下调Th17/Treg细胞的比率有关。     

沙利度胺对胶原诱导性关节炎大鼠TNF-α表达的影响

目的探讨沙利度胺对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法以CIA大鼠作为类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的动物模型,将健康雄性Wistar大鼠76只分为正常对照组、CIA组、沙利度胺治疗组,通过比较三组大鼠足爪厚度及血清TNF-α水平之间的关系,探讨TNF-α在RA发病过程中的作用以及沙利度胺对CIA大鼠的治疗效果。结果血清TNF-α与CIA大鼠关节炎的肿胀程度密切相关,TNF-α浓度越高,关节的肿胀越严重。沙利度胺能够降低CIA大鼠血清TNF-α的浓度,改善CIA大鼠的关节肿胀情况。结论沙利度胺可通过降低大鼠血清TNF-α浓度进而改善CIA大鼠关节症状,有望应用于类风湿关节炎的治疗。     

紫草素对晚期胶原性关节炎的作用研究

目的 研究紫草素对晚期Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠的抗炎症、免疫调节作用.方法 紫草素(5 ms/kg)每日1次腹腔注射已经成模胶原性关节炎(collagen.induced arthritis,CIA)小鼠,连用10天,用关节炎评分评估CIA小鼠关节炎病情;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子表达水平;用组织学染色评价膝关节的软骨和骨破坏.结果 紫草素降低了晚期Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠的关节炎评分,阻止了软骨破坏,髌骨及邻近滑膜组织的Th1型细胞因子(TNF-α和IL-12)和炎症性细胞因子IL-6的mRNA水平与对照组相比均显著被抑制.结论 紫草素免疫干预已发病的CIA小鼠,降低了关节炎评分阻止了软骨破坏,其机制可能为紫草素通过抑制了Th1细胞因子的表达发挥了抗炎症的作用.     

唾液乳杆菌对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的脾脏T细胞及炎症因子影响

目的 探讨唾液乳杆菌对类风湿性关节炎（RA）的治疗效果及作用。方法 选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,对雄性SD大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型。随机选取24只造模成功的大鼠,随机分成CIA模型组、唾液乳杆菌组、甲氨蝶呤组,每组8只,另外选择8只大鼠作为健康组。健康组和CIA模型组均给予细菌培养基灌胃;唾液乳杆菌组给予唾液乳杆菌灌胃;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤药物灌胃,每组连续灌胃4周。结束后评定关节炎指数,测量发病足厚度,观察踝关节组织病理改变并进行组织病理学染色;检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞（Treg）的含量,评估各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 与健康组相比,CIA模型组、唾液乳杆菌组及甲氨蝶呤组的关节炎指数评分（t=82.31、257.33、234.21）,发病足厚度（t=21.47、56.14、51.44）,血清中IL-1β(t=3...     

Th17细胞在类风湿关节炎中的作用机制

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以对称性多关节病变为主要表现的慢性自身免疫性疾病。RA病因不明,自身免疫反应和细胞因子被认为在RA发病中具有重要的作用。目前辅助性T细胞(Th)根据产生细胞因子种类的不同分为4个亚群:Th1,Th2,Treg和Th17。Th17细胞是最近发现的一种     

银屑病性关节炎“风湿三项”与外周血T细胞表达及其相关性

目的探讨"风湿三项"与外周血T细胞在银屑病性关节炎中的表达及其相关性。方法 2010年7月—2013年10月收治的54例银屑病性关节炎患者为观察组,另选56例健康体检人员为健康对照组。检测并比较2组患者的类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、抗链球菌溶血素O(ASO)的水平,外周血T细胞(Th1、Th2、Th17、Treg)表达情况。结果观察组银屑病性关节炎患者血清中RF、CRP、ASO水平均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);外周血Th1、Th17表达均高于健康对照组,Treg细胞表达低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);银屑病性关节炎外周血Th1细胞表达与RF、CRP相关(P<0.05),Th2细胞表达与CRP相关,Th17细胞表达与RF、ASO相关,Treg细胞表达与风湿三项均无相关性(P>0.05)。结论银屑病性关节炎外周血Th1表达与RF、CRP相关,Th2表达与CRP相关,Th17表达与RF、ASO相关,Treg表达与风湿三项表达无相关性。     

类风湿关节炎肾虚证大鼠模型的建立

目的：建立类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）肾虚证病证结合大鼠模型。方法：选用6周龄无特殊病原体级Sprague-Dawley大鼠110只,雌雄各半。分别采用去势法和羟基脲法制作肾虚动物模型,然后采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂混合物的方法诱导出关节炎。通过对大鼠一般状态观察,关节炎指数计算和关节肿胀度测量对比两种RA肾虚证病证结合动物模型的发病情况,并采用酶联免疫吸附测定法检测血浆抗Ⅱ型胶原抗体、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）、IL-10、γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）和皮质酮（corticosterone,CORT）含量,放射免疫法检测肾上腺环腺苷酸（cyclic adenylic acid,cAMP）和环鸟苷酸（cyclic guanylic acid,cGMP）含量。结果：与胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）对照组大鼠相比,结合去势法、羟基脲法制作的肾虚CIA大鼠关节红肿程度和关节损伤程度明显加重,并且这两组大鼠出现倦怠、精神萎靡,弓背蜷缩,体毛枯疏,自主活动少,反应逐渐迟钝,喜扎堆,饮食减少,大便质稀,肛周污秽等与临床肾虚证相似的症状;肾虚CIA大鼠cAMP与cGMP比值明显降低,雄性大鼠CORT含量升高,雌性大鼠的CORT水平下降,抗Ⅱ型胶原抗体含量明显升高。采用去势法制作的肾虚CIA大鼠与CIA对照组大鼠相比,IL-6、IL-10及IFN-γ水平明显升高。结论：用去势法和羟基脲法制作的肾虚证RA动物模型,既有明显的肾虚症状,又有明显的RA特征,说明这两种肾虚型RA病证结合模型能够部分地反映肾虚证RA病人的发病特点,具有可行性。而去势法制作的肾虚CIA大鼠更适合RA肾虚证的实验研究。     

Ⅱ型胶原多肽263～272序列中多个氨基酸替换的意义及其在胶原性关节炎治疗中的作用

目的:研究Ⅱ型胶原变构肽(APL)中氨基酸替换对胶原性关节炎(CIA)的抑制作用,为类风湿关节炎(RA)的多肽免疫治疗提供试验依据.方法:以丙氨酸替换Ⅱ型胶原(CⅡ)263～272多肽中与T细胞受体(TCR)结合的氨基酸,3H掺入法检测变构肽对RA患者外周血T细胞活化的竞争抑制作用,筛选用于CIA治疗的变构肽.以牛CⅡ诱导大鼠CIA模型,应用不同剂量(1, 10, 100 μg)的CⅡ变构肽每周2次皮下注射,观察大鼠关节肿胀的变化情况.治疗3周后(初次免疫后第35天)处死大鼠,进行X线及病理评分.ELISA法检测血清IFN-γ水平.结果:3条CⅡ263～272变构肽均不同程度抑制CⅡ原型肽对RA患者T 细胞的活化.其中,同时替换267位谷氨酰胺(Q)、270位赖氨酸(K)和271位甘氨酸(G)为丙氨酸(A)的APL3效果最好.应用APL3对CIA进行治疗的结果发现,100 μg治疗组CIA大鼠的关节炎指数、X线及病理评分均显著低于PBS对照组.血清IFN-γ水平也较PBS对照组明显下降.而无关肽组与PBS对照组相比,关节炎指数、X线和病理评分以及血清IFN-γ水平均无明显差别.结论:TCR结合氨基酸位点替换后的CⅡ263～272多肽具有T细胞低反应性和对原型肽的竞争抑制作用,并可抑制大鼠胶原性关节炎的发展,提示其抑制RA免疫异常的可能性.     

雷公藤红素对胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用研究

目的研究雷公藤红素对牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠抗炎作用及其对T细胞的作用机制。方法选用DBA/1J小鼠,以牛Ⅱ型胶原诱导建立小鼠关节炎CIA模型。成模后,以雷公藤红素2mg/kg给药治疗并设置对照组,记录小鼠关节评分;二次免疫70d后摘眼球取血处死小鼠,ELISA检测小鼠血浆中IL-17、IL-6、TGF-β水平,HE染色法观察小鼠关节病理变化,流式细胞术检测小鼠脾脏细胞中Th17和Treg比例。结果雷公藤红素组小鼠关节评分显著低于模型组(P0.01);HE染色结果显示,雷公藤红素有效改善关节滑膜炎性浸润情况(P0.05);ELISA检测小鼠血浆结果显示雷公藤红素使Th17相关细胞因子IL-6水平显著降低(P0.01);流式检测结果显示,雷公藤红素可显著降低小鼠脾脏中Th17细胞亚群比例(P0.01)并增加Treg细胞亚群比例(P0.05)。结论雷公藤红素可以有效缓解CIA小鼠关节炎症症状,抑制关节滑膜炎性细胞浸润、血管翳生成和软骨破坏。雷公藤红素治疗CIA小鼠炎症反应可能是通过减少CIA小鼠体内IL-6等促炎症因子的分泌并伴随着抑炎因子参与的免疫平衡调节过程而实现。     

全反式视黄酸预防性给药可减轻类风湿关节炎模型大鼠的炎症

目的 探索全反式视黄酸(ATRA)对Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的类风湿关节炎模型(CIA)大鼠关节炎形成期关节组织结构、血清中相关炎性细胞因子表达水平,以及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响.方法 将6～8周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、ATRA各剂量组,给予溶剂对照组和ATRA各剂量组大鼠尾部皮内注射CⅡ和不完全弗氏佐剂诱导类风湿关节炎,空白对照组大鼠以相同方式给予等量生理盐水.自初次免疫第2天起,ATRA各剂量组大鼠腹腔注射不同剂量(0.05、0.5、5 mg/kg)的ATRA油剂,溶剂对照组腹腔注射等体积玉米油,空白对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周3次,连续3周.观察ATRA对大鼠关节炎指数(AI)评分、膝踝关节组织病理形态学、血清中相关炎性细胞因子的表达水平及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响.结果 自初次免疫第15天起,ATRA各剂量组和溶剂对照组AI值均显著高于空白对照组(P＜0.05),溶剂对照组AI值趋于平稳,ATRA各剂量组AI值呈上升趋势,且低于溶剂对照组(P＜0.05);膝踝关节病理切片可见,ATRA各剂量组和溶剂对照组踝关节结构出现严重紊乱,但组间关节损伤的半定量评分差异无统计学意义(P＞0.05);此外,与溶剂对照组相比,ATRA各剂量组白介素-17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌减少(P＜0.05),白介素-10(IL-10)分泌增多(P＜0.05);膝关节中解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS-4)和基质金属蛋白酶(MMP-3)表达下调(P＜0.05),其余软骨损伤相关蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在胶原诱导关节炎形成期,ATRA可抑制TNF-α、IL-17A等促炎因子的分泌,促进IL-10的分泌,从而减轻CIA大鼠关节炎形成期的炎症反应.说明ATRA在关节炎形成期可延缓疾病的进展,其作用机制可能与纠正Th1/Th2及Th17/Treg失衡有关.     

一贯煎联合硫酸羟氯喹对干燥综合征肝肾阴虚证患者临床疗效及血清Th17/Treg比率变化影响

目的探讨一贯煎联合硫酸羟氯喹治疗干燥综合征肝肾阴虚证患者临床疗效以及对血清Th17/Treg比率变化的影响。方法将72例干燥综合征肝肾阴虚证患者按随机数字表法随机分为观察组和对照组,各36例。对照组给予硫酸羟氯喹口服,观察组在硫酸羟氯喹基础上加用一贯煎治疗,两组疗程均为8周,比较两组临床疗效、眼干视觉模拟评分(VAS)、口干VAS评分、欧洲风湿病联盟干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)评分、欧洲风湿病联盟干燥综合征患者主观症状评分(ESSPRI)、唾液流率、泪液流率、泪膜破碎时间、血清免疫球蛋白G(IgG)、血清C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)水平以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比率变化。结果治疗8周后,观察组总有效率(94.44%)明显高于对照组(75.00%),观察组眼干VAS评分、口干VAS评分、ESSDAI评分、ESSPRI评分显著低于对照组,观察组唾液流率、泪液流率、泪膜破碎时间显著高于对照组,观察组IgG、CRP、ESR水平显著低于对照组,观察组患者外周血Th17/Treg比率明显少于对照组。结论一贯煎联合硫酸羟氯喹治疗干燥综合征肝肾阴虚证可改善口干、眼干症状,提高生活质量,具有较好抗炎、调节免疫作用以及较高的安全性,临床疗效显著,调节Th17/Treg比率可能是其作用途径之一,值得临床推广。     

类风湿关节炎患者Treg细胞变化及与病情活动度的关系

目的探讨Treg细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及与病情活动度、RA相关抗体的关系。方法流式细胞仪技术检测40例RA患者和40例健康对照者外周血Treg占CD4+T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验检测血清IL-10及TGF-β1,实时荧光定量PCR法检测Foxp3 mRNA,分析Treg细胞百分率与病情活动度及RA相关抗体的相关性。结果 RA患者外周血中Treg细胞(CD4+CD25+FOXP3+T细胞)的百分率显著低于健康对照组[(5.36±1.55)%vs(7.49±1.46)%,P<0.01],Foxp3mRNA表达也较对照组显著减少(P<0.01);RA组IL-10水平低于健康对照组(P=0.000),而TGF-β1则显著高于健康对照组(P=0.000);相关性分析显示IL-10水平与Treg细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量正相关;RA患者外周血中Treg细胞百分率与关节压痛数、关节肿胀数、患者疼痛模拟视觉评分、健康评估问卷、DAS28评分、红细胞沉降率、C反应蛋白等临床和实验室病情活动指标无明显相关性(P>0.05),与RF、抗CCP抗体滴度也无相关性(P>0.05)。结论 RA患者中Treg细胞数量减少并存在功能异常,疾病活动度越高的患者可能Treg细胞数量减少越明显。     

Ⅱ型胶原变构肽鼻黏膜给药治疗胶原诱导性关节炎的实验研究

目的:研究以丙氨酸替换Ⅱ型胶原(collagen Ⅱ,CⅡ)263-272序列中的267、270、271位氨基酸的变构肽鼻黏膜给药对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)的抑制作用及其作用机制.方法:以牛CⅡ免疫Lewis大鼠诱发CIA.于发病的当天开始给予CⅡ变构肽和原型肽鼻滴入治疗,连续每天给药,5 d后,改为隔天给药,空白对照组给予磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS).观察关节肿胀情况,记录关节炎评分以及体重的改变.治疗结束后处死大鼠,行后踝关节病理切片,观察关节病理改变.ELISA方法检测血清巾抗C Ⅱ抗体亚型以及细胞因子的变化,流式细胞仪检测外周血 CD4+CD25+T细胞的变化,荧光定量PCR检测脾和淋巴结中Foxp3和TGF-β mRNA的表达水平.结果:(1)CⅡ变构肽可以抑制CIA的发展.实验结束时CⅡ变构肽、原型肽以及PBS组大鼠关节炎评分分别为2.50±2.43、4.50±2.23和6.33±2.73(变构肽治疗组与PBS对照组比较,P<0.05),各组大鼠后踝关节病理学评分分别为1.33±1.07、2.17±0.94和2.83±0.58,与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以明显抑制CIA关节病变的发展(P<0.05).(2)与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以降低CIA大鼠体内抗CⅡ抗体IgG2a亚型的滴度(0.56±0.19和0.95±0.29,P<0.05).C Ⅱ变构肽、原型肽及PBS对照组大鼠血清中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平分别为(185.33±29.77)、(231.62±41.82)和(220.64±83.61)ng/L,与原型肽组相比,CⅡ变构肽可以降低大鼠血清中IFN-γ水平.(3)CⅡ变构肽治疗对调节性T细胞的影响:3组大鼠外周血CIM+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例差异无统计学意义,CⅡ变构肽治疗组大鼠脾和淋巴结中Foxp3和转化生长因子B(transforming growth factors β,TGF-β)mRNA的表达水平较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.结论:C Ⅱ变构肽鼻黏膜给药治疗可以抑制CIA的发展,CⅡ变构肽可能主要通过抑制CIA大鼠体内IgG2a型抗CⅡ抗体的产生,并降低血清中IFN-Ⅱ,从而抑制Th1型免疫反应而发挥治疗作用.     

栀子苷对类风湿性关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎症因子的影响

目的考察栀子苷对类风湿性关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎症因子的影响。方法建立大鼠胶原诱导关节炎模型,通过病理切片观察踝关节组织变化,ELISA检测血清TNF-α,Western blot法检测转录因子Foxp3和ROR-γt的蛋白表达,免疫组化法检测关节滑膜组织IL-10、IL-17表达。结果模型组血清TNF-α、IL-17以及ROR-γt和关节滑膜IL-17表达较正常组显著升高(P0.01),而模型组血清IL-10浓度以及Foxp3和关节滑膜IL-10表达较正常组显著降低(P0.01),栀子苷中、高剂量组血清TNF-α、IL-17浓度以及ROR-γt和关节滑膜IL-17表达较模型组显著降低(P0.05~0.01),而血清IL-10浓度、Foxp3和关节滑膜IL-10表达较模型组显著升高(P0.05~0.01)。结论大鼠胶原诱导关节炎模型成模之后Treg/Th17会失衡,栀子苷可升高IL-10、Foxp3表达,降低IL-17、ROR-γt表达,提示其可能通过诱导Treg细胞生成同时抑制Th17细胞分化,从而恢复病变部位Treg/Th17的平衡。     

类风湿关节炎患者外周血腱糖蛋白C 与CD4+T细胞亚群的关系

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血腱糖蛋白C(TN-C)的表达,并分析其与CD4⁺T细胞亚群及临床指标的相关性。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对RA患者(n=130)和健康对照者(n=40)进行血清TN-C检测,流式细胞术(FCM)检测所有受试者外周血CD4⁺T细胞亚群的计数及百分比,并记录RA患者的各项临床指标。比较两组血清TN-C水平,分析其与外周血CD4⁺T细胞亚群及临床指标的相关性。结果 RA患者血清TN-C水平显著高于对照组(P=0.000);类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)阳性患者血清TN-C水平高于阴性患者(P＜0.05)。TN-C的曲线下面积(AUC)为0.85,敏感度为63.10%,特异性为95.00%,95%CI为0.79～0.91。与对照组、TN-C正常组比较,TN-C升高组Treg细胞计数及百分比降低,Th17/Treg比值升高(P＜0.01)。RA患者血清TN-C水平与Treg细胞计数及百分比均呈负相关 (r=-0.368、-0.237,P＜0.01),与Th17/Treg比值呈正相关(r=0.229,P＜0.05)。结论 RA患者血清TN-C高表达,外周血Th17/Treg失衡,TN-C可能通过影响Th17/Treg平衡参与 RA 过程。     

槲皮素对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的 明确槲皮素(quercetin,QUE)对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠的抗血管新生作用及其机制.方法 采用牛Ⅱ型胶原(CⅡ)和不完全弗氏佐剂(IFA)建立大鼠CIA模型.随机分为正常对照(control)组、CIA组和槲皮素(QUE)组,每组6只,从初次免疫...     

宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响

目的:观察宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响。方法:将大鼠随机分为正常组(N组)和模型复制组,模型复制组经成功复制CIA大鼠模型后,随机分为模型组(M组)和宣痹汤组(X组)。X组灌胃给予宣痹汤3周,同时M组和N组给予9.0 g/L氯化钠注射液3周。其间测量非致炎足踝关节直径,并进行关节炎指数评分。灌胃结束后,经股动脉取全血,使用ELISA法测定血清INFγ和IL-4水平;使用流式细胞术,以外周血CD4 INFγ 和CD4 IL-4 T细胞分别代表Th1和Th2细胞,测定各自在淋巴细胞所占比例,计算Th1/Th2比值,并将CIA大鼠踝关节直径与Th1/Th2比值进行相关性分析。结果:与M组相比,CIA大鼠关节直径、关节炎指数评分均有改善(P<0.05);血清INFγ和IL-4水平,Th1所占比例以及Th1/Th2比值均显著下降(P<0.01),Th2所占比率显著上升(P<0.01),且CIA大鼠临床症状的改善与Th1/Th2比值降低具有相关性(r=0.846,P<0.01)。结论:宣痹汤能有效缓解CIA大鼠临床症状,恢复Th1/Th2漂移,这可能是其临床治疗类风湿关节炎的机制之一。     

艾灸调节胶原诱导的关节炎小鼠Treg/Th17细胞及Galectin-9实验研究

目的:探讨艾灸对小鼠胶原诱导的关节炎(CIA)炎症、Th17和Treg细胞的影响及Galectin-9在其中的作用。方法:复制Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎小鼠模型并予以艾灸治疗,观察艾灸治疗及Galectin-9注射对关节肿胀、关节滑膜病理表现的影响,流式细胞术分析Th17、Treg细胞变化,ELISA检测相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、Galectin-9的含量。结果:CIA模型建立后,小鼠关节明显红肿,关节面粗糙、滑膜层变薄。经治疗,艾灸组、Galectin-9组小鼠关节红肿相对模型组有较明显的消退;而不治疗组、PBS组小鼠关节红肿无明显消退。上述4组小鼠关节评分组间差异经秩和检验比较,有统计学意义(P=0.04)。经艾灸治疗的小鼠病变关节面恢复平整,滑膜层较治疗前变厚,接近正常组。CIA模型小鼠Treg细胞显著下降、Th17细胞明显上升(P0.01);艾灸治疗和Galectin-9注入后,Treg细胞的数量有显著上升(P0.01),且两组无明显差异(P=0.36);艾灸治疗和Galectin-9注入后,Th17细胞数量显著性下降(P0.01),且两组无明显差异(P=0.71)。细胞因子Galectin-9在CIA模型小鼠脾脏中含量降低(P0.01),艾灸治疗和Galectin-9均能使其增高(P0.01),但艾灸治疗组不及Galectin-9组(P0.01)。CIA模型小鼠脾脏中IL-1β、IL-6、IL-17等致炎因子表达增高(P0.01);艾灸治疗及注入Galectin-9后它们的含量相应降低(P0.01),与不治疗组、PBS组比较差异有显著的统计学意义(P0.01);而抑炎因子IL-10、TGF-β在CIA模型小鼠脾脏中表达降低,艾灸治疗及Galectin-9注入后它们的表达明显提高(P0.01),与不治疗组、PBS组比较有显著的统计学差异(P0.01);Galectin-9注入后,Galectin-9组IL-1β、IL-6、IL-17含量提高(P0.01),与PBS组比较有显著的统计学差异(P0.01)。艾灸组中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量与Galectin-9组比较有显著差异(P0.01,P0.01,P0.01,P0.01,P=0.01)。结论:艾灸治疗能改善CIA小鼠关节炎症,调节Th17/Treg细胞失衡;其机制可能与促进Galectin-9分泌有关。