颅脑损伤性肺水肿的发生与内皮素含量变化的关系

目的:观察颅脑损伤性肺水肿(NPE)的病理生理特点及内皮素(ET)的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为4组:对照组10只,颅脑损伤后死亡组,颅脑损伤后6 h处死组,颅脑损伤后24 h处死组,各14只,建立弥漫性颅脑损伤动物模型;内皮素测定方法采用人内皮素-1酶免疫检测试剂盒。结果:颅脑损伤后总体死亡率为46.43%。颅脑损伤后大鼠的肺湿干比与PaO2、肺灌洗液白蛋白浓度、肺病理评分存在相关关系;肺组织匀浆ET-1与肺灌洗液白蛋白浓度及肺湿干比存在相关关系;肺灌洗液ET-1与PaO2、肺灌洗液白蛋白浓度、肺湿干比、肺病理评分存在相关关系。死亡组血浆、肺组织匀浆、肺灌洗液ET-1水平分别为(80.32±60.85)、(35.44±16.83)、(35.84±6.77)pg/mL,均明显高于其它各组,且三者之间存在相关性。结论:颅脑损伤导致NPE发生;ET-1可促进NPE的发生,其浓度水平与肺水肿的严重程度有关,其中肺组织局部ET-1起着更为重要的作用。     

双光气损伤机制的探讨:豚鼠双光气中毒后支气管—肺灌洗液中LDH活性的变化

以LDH作为细胞损伤的指标,观察双光气对豚鼠呼吸道的损伤作用。豚鼠吸入双光气的剂量为Lct 50左右,支气管—肺灌洗液LDH活性是182±27单位％,对照组是29±7单位％,两者差异显著,中毒组灌洗液中游离血红蛋白含量不升高,表明增加的LDH不来源于红细胞。肾上腺素组灌洗液LDH活性值和中毒组灌洗液LDH同工酶谱,都提示增加的LDH来自呼吸道细胞。这些结果证明双光气对豚鼠呼吸道细胞有直接损伤作用。     

奥曲肽对兔肺缺血再注灌损伤的保护作用

目的 观察奥曲肽对兔肺缺血再灌注后丙二醛(MDA)、细胞炎性因子、Clara细胞及分泌蛋白(CCSP)、肺含水量和肺超微结构的影响,探讨奥曲肽对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制.方法 30只新西兰大白兔随机分为3组,每组各10只.假手术组(Ⅰ组)只行左肺门套带不阻断;缺血再灌注组(Ⅱ组)和奥曲肽预处理缺血再灌注组(Ⅲ组):阻断左肺门60min,再灌注120 min.测定肺组织丙二醛、肺湿/干重比、肺超微结构及Clara细胞计数、血清、肺泡灌洗液CCSP含量及血清细胞炎性因子.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ和Ⅲ组MDA、细胞炎性因子及肺湿/干重比明显升高(P<0.05),Clara细胞计数、血清、肺泡灌洗液CCSP含量降低,肺超微结构损伤程度加重;Ⅱ组与Ⅲ组比较,Ⅲ组上述观察指标除血清、肺泡灌洗液CCSP外均高于Ⅱ组(P<0.05),血清、肺泡灌洗液CCSPⅢ组低于Ⅱ组(P<0.05),肺超微结构损伤程度减轻.结论 奥曲肽抗氧化、抗炎作用以及可能减轻肺缺血再灌注后Clara细胞减少,促进CCSP分泌或合成增加,肺组织炎症反应减轻,起到保护肺组织的作用.     

矽肺大鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数、LDH、蛋白含量的动态变化

支气管肺泡灌洗术(BAL)已应用于临床尘肺的治疗,但进展不快,主要是其可行性和可能性仍有异议.本实验通过观察不同染尘时间矽肺大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中排出物含量的动态变化,就其可能性进行探讨.实验结果表明:不同时间实验组BALF中的细胞总数、LDH活性、总蛋白含量均高于对照组,且差别有非常显著意义(P<0.01),尤以染尘7、15、30天差异更为显著.提示:BAL术可以洗出肺内大量细胞及非细胞成分,对减轻肺泡炎症、减少肺部损伤将有积极作用.     

燃煤烟气对健康危害的动物模拟实验

在动式大气中毒室模拟居民燃煤炉发生烟气给大鼠和金黄地鼠吸入染毒3和1个月。设高浓度短时间,低浓度长时间染毒组和对照组。高浓度组染毒2周后金黄地鼠肺灌洗液中肺巨噬细胞(PMφ)数下降,生化指标和肺病理检查未见明显改变。另用燃煤产生的颗粒物经气管注入染毒,大鼠肺灌洗液PMφ数下降,中性白细胞数增加,乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(AGP)、碱性磷酸酶(AKP)、白蛋白、N-乙酰神经氨酸(N—Acetylneuraminic acid,NA)增加。燃煤烟气吸入使大鼠碳氧血红蛋白(HbCO)增高,超过对健康不良反应的阈值。用兔观察HbCO消减情况,脱离接触后,HbCO消减迅速,半减期为1.27h。上述结果表明燃煤烟气通过吸入途径可使肺巨噬细胞的数量降低,但未引起肺组织损伤;由气管灌入的高剂量燃煤颗粒物可引起肺组织和PMφ的损伤。由于染毒方式和剂量的不同,燃煤烟气与颗粒物的毒性反应有明显差别。     

急性肺损伤家兔早期血管内皮生长因子的变化

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)在急性肺损伤(ALI)早期的变化及意义。方法将17只新西兰家兔分成2组:对照组9只,ALI组8只,建立内毒素ALI模型。测定2组动物血气、血清及肺泡灌洗液(BALF)中VEGF的质量浓度,并进行肺组织病理学观察。结果ALI组动物注射内毒素(LPS)后出现血压、心率降低,pH值进行性下降(P均<0.05)。给药后3 h,血清VEGF质量浓度明显升高,给药后6 h继续升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。给药后6 h,BALF中VEGF质量浓度亦明显升高(P<0.01)。模型动物肺组织炎性细胞浸润明显,弥散性肺泡间隔增厚,灶性出血和纤维蛋白渗出。结论内毒素所致ALI早期,VEGF迅速升高,VEGF是ALI早期较为敏感的监测指标之一。     

磷脂酶A_2对灌流肺的损伤作用及其机制探讨

我们建立的离休豚鼠肺灌流装置,可以连续描记肺重量和肺动脉压的变化。在此模型上研究了磷脂酶A_2(PLA_2)对肺的损伤作用。获得的结果是:灌流液加PLA_2(46U/ml)后,30min内肺重量进行性增加,肺动脉压无明显变化。30min时肺白蛋白通透性表面乘积、肺表面渗出液、肺水含量、肺系数和灌流液中血管紧张素转换酶(ACE)活性明显增加。PLA_2抑制剂对溴苯酚基溴可阻断上述变化。白三     

小剂量丹参酮ⅡA磺酸钠对急性肺损伤的保护作用

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对内毒素诱导的急性肺损伤小鼠动脉氧分压、支气管肺泡灌洗液细胞总数计数及中性粒细胞分类、小鼠血清和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平、光镜下病理学变化的影响,探讨对急性肺损伤的保护作用。方法取健康成年雄性KM小鼠54只,采用气管内滴注内毒素法复制急性肺损伤模型动物模型。将小鼠随机分为对照组、损伤组和丹参酮ⅡA组。记录小鼠动脉氧分压、支气管肺泡灌洗液细胞总数计数及中性粒细胞分类、小鼠血清和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平、光镜下病理学变化的影响。结果病理学检查:实验第24小时对照组小鼠肺泡结构清晰,肺泡壁薄,肺泡内未见水肿液;损伤组内毒素损伤后实验第24小时无法分辩肺泡结构,肺内大量炎细胞浸润(以中性粒细胞为主)伴出血、水肿、透明膜形成;丹参酮ⅡA组实验第24小时肺泡结构仍存在,但肺泡间隔增厚,中性粒细胞浸润明显减轻,肺泡腔内见少量渗出。损伤组小鼠实验第2、6、24小时动脉血氧分压小鼠明显低于对照组和丹参酮ⅡA组(P<0.01);支气管肺泡灌洗液细胞总数计数明显高于对照组和丹参酮ⅡA组(P<0.01)。对照组和丹参酮ⅡA组实验第2小时血清肿瘤坏死因子α水平明显低于损伤组(P<0.01);损伤组实验第2、6、24小时支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平明显高于对照组(P<0.01);丹参酮ⅡA组实验第6小时支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平明显高于对照组(P<0.01)。丹参酮ⅡA组实验第2、6小时支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α水平明显低于损伤组(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA磺酸钠注射液对内毒素诱导的急性肺损伤小鼠有明显的保护作用。     

实验动物巨噬细胞内及无细胞灌洗液内生化成分正常值的测定

作者测定了实验动物巨噬细胞和无细胞灌洗液内生化成分正常值。结果表明巨噬细胞内乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性较高,碱性磷酸酶(AKP)和N-乙酰神经氨酸(NA)含量很低,而无细胞灌洗液中LDH、ACP活性较低、AKP和NA含量很高。巨噬细胞内生化成分的正常值可以作为体外细胞培养评价环境毒物毒性作用的定量参比标准。     

基于数据挖掘的哮喘动物模型应用分析

目的分析哮喘动物模型造模要素,为提高造模成功率及有效评价受试药物提供方法学参考。方法以哮喘和动物模型为主题词,搜索中国知网(2009年1月至2019年8月)相关期刊文献,收集实验动物种类、激发方式、致敏方法、检测指标等,建立数据库,进行统计分析。结果纳入符合标准的期刊文献118篇,其中使用最多的实验动物种类为BALB/c小鼠(43次,36. 4%)和SD大鼠(42次,35. 5%);使用最多激发方式为雾化激发(102次,86. 4%);使用最多的致敏方法为卵清白蛋白(OVA)致敏(107次,90. 6%);检测最多的指标为肺组织病理(92次,77. 9%)、血清中生化指标(49次,41. 5%)、肺泡灌洗液细胞分类计数(42次,35. 6%)、肺组织免疫组化(40次,33. 9%)、肺泡灌洗液上清中生化指标(39次,33. 1%)等。结论建立哮喘动物模型时使用BALB/C小鼠或SD大鼠作为实验动物,采用雾化激发的方式雾化致敏,用OVA作为致敏抗原,可以提高模型的成功率,指标选取建议选取肺组织病理、血清中生化指标、肺泡灌洗液细胞分类计数等以有效的评价受试药物,为更好的进行哮喘动物实验研究提供依据。     

呼吸窘迫综合征早期诊断指标初探

为探索呼吸窘迫综合征(ARDS)的早期诊断指标,用油酸复制ARDS动物模型。在注射油酸后不同时间,测定肺灌洗液(BALF)和面清中的乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(ALP)活性。结果发现,BALF中LDH在注射油酸后半小时即增加,达对照组的6.7倍;血清LDH达对照组的2倍;BALF和血清中ALP也有异常变化。实验表明,BALF和血清中LDH升高可作为早期诊断ARDS的指标之一。     

不同粉尘对大鼠肺灌洗液、血清和肺组织生化指标的影响及其相互关系的探讨

作者分别用新康温石棉、石棉矿精选车间自然积尘、石英和钛尘对成年Wistar大鼠作一次性非暴露式气管染尘,3个月后处死,研究不同粉尘对大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)、血清和肺脏的影响及其相互关系,并与对照组比较。结果表明,BALF中的肺泡巨噬细胞(AM)、乳酸脱氨酶(LDH)与酸性磷酸酶(AcP)的数值与肺胶原、肺总脂、血清中铜蓝蛋白(Cp)及羟脯氨酸(HoP)均有非常显著相关;BALF、细胞培养液和血清中的LDH之间也有显著相关。提示,BALF,尤其是其中AM与LDH的测定,是了解尘肺受损情况的较好指标。     

中性粒细胞在大鼠急性重症胰腺炎肺损伤中的作用机制

目的:探讨急性重症胰腺炎(ASP)合并急性肺损伤时肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)凋亡和坏死的发生规律及可能涉及的作用机制.方法:选取雄性SD大鼠48只,分为ASP实验组(24只)、对照组(24只).实验组大鼠穿刺胰胆管并注入35g/L牛磺胆酸钠制作ASP大鼠模型,分别在制模后3,6,12 h剖杀,于预定时相取支气管灌洗液,密度梯度离心分离PMN,用流式细胞仪测定PMN凋亡、坏死比例,同时测定乳酸脱氢酶(LDH)含量、肺通透指数.结果:ASP组大鼠肺灌洗液中PMN存活细胞比例增加(P＜0.01),凋亡延迟.同时,肺灌洗液LDH明显升高(P＜0.01),肺通透指数显著增加(P＜0.01).结论:ASP合并急性肺损伤时,PMN凋亡延迟,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放,与急性肺损伤密切相关.     

硫化氢吸入中毒肺毒理学及救治方案研究

应用支气管肺泡灌洗术、超速离心、光镜和电镜技术对大鼠硫化氢吸入中毒肺毒理学进行了研究。以支气管肺泡灌洗液(BALF)中的酶活性改变(LDH、AKP、ACP、ACE)作为细胞损伤的指标;BALF中白细胞数的变化作为炎症反应的指标;蛋白浓度和伊文思蓝浓度的改变作为通透性变化的指标。此外,还对硫化氢所致的脂质过氧化及天然抗氧化系统的作用,能量物质的受损以及BALF中磷脂含量的变化进行了研究,结合光镜和电镜观察,所得结果表明:(1)硫化氢对肺有强烈的细胞毒作用,因而导致肺各型细胞和肺组织严重损伤,并出现明显的肺水肿;(2)硫化氢所致的肺水肿是多种因素综合作用造成的;(3)生化改变较之病理变化出现早,恢复快。 对硫化氢吸入中毒的防治药物进行了筛选,证明高铁血红蛋白形成剂对小鼠、家兔、犬均有显著效果,但不能预防或减轻肺损伤;伍用激素、自由基清除剂、血管活性物质对减轻和促进肺损伤的恢复有良好作用。 根据实验研究结果,提出了硫化氢吸入中毒的救治方案。     

供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化

目的　探讨供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化。方法　实验动物分为对照组 (非缺血保存组 )和实验组 (缺血保存组 ) ,对保存和再灌注期间的肺组织和支气管肺泡灌洗液中的肺表面活性物质磷脂进行了分析。结果　与对照组相比 ,实验组保存后肺组织总磷脂 (TPL)和卵磷脂 (PC)含量明显降低 ,卵磷脂占总磷脂的比例 (PC/TPL)降低 ,卵磷脂与鞘磷脂比 (L/S)降低。实验组再灌注后肺组织和支气管肺泡灌洗液中的TPL、PC、PC/TPL、L/S均明显低于对照组。结论　肺表面活性物质 (SAM)改变是肺缺血和再灌注损伤的敏感指标 ,热缺血、冷保存和再灌注对SAM磷脂的含量、构成及功能都有损害。     

硝普钠对犬肺缺血再灌注损伤保护作用的病理学观察

目的研究硝普钠对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将12只成年杂交犬随机分为两组,低钾右旋糖苷(low potassium dextran,LPD)联合硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)液组和LPD液组。在开始阻断左肺动、静脉及左主气管后,分别用LPD液或LPD联合SNP液?硝普钠,10 mg/L?灌注,灌注量50 ml/kg,测量主肺动脉压。缺血2 h循环开放前,冲洗左肺血管。循环开放后测量左、右肺动脉压。肺动脉压采用间歇测定法,每30分钟测定1次。再灌注4 h,取左肺下叶肺组织10%中性福尔马林固定后脱水、浸蜡、切片、HE染色,测定肺泡损伤指数、血管腔内径与血管外径比、左肺支气管灌洗液内中性粒细胞浓度及左肺湿干重比。结果左肺动脉血管壁水肿,明显增厚,肺动脉血管充血,有淋巴细胞贴壁现象,血管周围组织有中性粒细胞浸润,肺间质明显水肿增厚,肺泡腔内有大量的红细胞渗出,可见巨噬细胞。两组的肺泡损伤指数、血管腔内径与血管外径比、左肺支气管灌洗液内中性粒细胞数、左肺湿干重比、主肺动脉压及左右肺动脉压相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论硝普钠对肺缺血再灌注损伤无明显的保护作用。     

中性粒细胞凋亡延迟在脂多糖所致大鼠急性肺损伤发病机制中的作用

目的 探讨急性肺损伤时肺组织及外周血中性粒细胞（PMN）凋亡和坏死的发生规律及其与肺损伤的关系。以及可能涉及的机制。方法 Wistar大鼠50只,腹腔注射脂多糖（LPS,O55B5,3mg/kg)造成大鼠急性肺损伤,分为LPS注射后2h组、4h组、8h组,12h组及正常对照组。于预定时相取血及支气管灌洗液,密度梯度离心分离PMN,用流式细胞仪测定凋亡,坏死细胞比例及呼吸焊发功能,同时测定乳酸脱氢酶（LDH）含量,肺通透指数,肿瘤坯 煞费苦心因子（TNF）、白细胞介素（IL）1β、IL-6含量和Ca^2 浓度。结果 ALI大鼠肺灌洗液中PMN凋亡,坏死比例的变化与外周血不同,主要表现为存活细胞比例增加,凋亡延迟,肺灌洗液中TNF、IL-1β、IL-6含量明显高于外周血,且持续时间较长,同时,肺灌洗液LDH明显升高,肺通透指数显著增加。结论 肺组织中高浓度的细胞因子和短暂升高的Ca^2 使游出的PMN的正常凋亡途径发生障碍,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放,与肺组织损伤有密切关系。     

机械通气对小鼠肺损伤的初步研究

目的建立小鼠机械通气肺损伤(VILI)模型,研究大潮气量、高浓度氧疗以及不同机械通气时间对VILI的影响及其可能机制。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为9组,对小鼠进行机械通气,再对小鼠进行支气管肺泡灌洗,采用双抗体夹心法检测肺泡灌洗液中总蛋白含量和炎症因子水平;小鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色,显微镜下观察肺组织形态变化及损伤程度。结果大潮气量组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低潮气量组(P<0.05);高浓度氧疗组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低浓度氧疗组(P<0.05),并且随着通气时间的延长而升高;与正常对照组相比,各实验组小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量明显升高(P<0.01);HE染色显示大潮气量机械通气4 h后,小鼠肺组织肺间隔明显增厚、炎性细胞浸润以及肺泡中出现渗出物,部分肺泡中出现红细胞的渗出等。结论大潮气量、高浓度氧疗均产生了明显的VILI,主要表现为肺组织急性炎症反应、渗透性肺水肿、氧化应激反应。     

外源性血管紧张素Ⅱ在体灌注对大鼠肺泡屏障的损伤作用及机制

目的:观察外源性血管紧张素(Ang)Ⅱ灌注大鼠气道对肺上皮屏障的损伤作用,并探讨其可能的损伤机制。方法:Wistar大鼠随机分为5组:PBS对照组、Ang 6、20 h组、Ang+zVAD-fmk组、Ang+氯沙坦组(n=10),各组大鼠分别经气管灌注PBS、Ang(10 μmol/L)磷酸盐缓冲溶液、Ang(10 μmol/L)+zVAD-fmk(60 μmol/L)、Ang+氯沙坦(losartan,100 μmol/L),另设10只大鼠不作任何处理作为空白对照组。大鼠经气管灌入相应溶液后在体灌洗动物肺脏,测定灌洗液中的血红蛋白(Hb)和灌洗肺前由静脉注入的荧光物质(BODIPY)标记的白蛋白含量,判断肺损伤;取肺组织标本进行病理学观察;采用末端脱氧核苷酸转移酶标定法(TUNEL)和抗caspase 3免疫标定方法检测肺泡上皮细胞凋亡。结果:灌注Ang 6 h后,支气管和肺泡上皮细胞内标定的断裂DNA片段(P<0.05)和活性caspase 3(P<0.01)显著增加,但单纯灌注磷酸盐缓冲溶液没有作用;同时灌注caspase抑制剂zVAD-fmk或Ang受体1阻断剂氯沙坦均阻断Ang对DNA 和caspase 3的作用。灌注Ang 6 h后,肺泡灌洗液中荧光标定的白蛋白含量(P<0.01)和Hb含量(P<0.05)亦显著增加;zVAD-fmk或氯沙坦亦阻断支气管肺泡灌洗液中荧光白蛋白含量和Hb含量的变化。结论:在体大鼠呼吸道内灌注外源性Ang可介导肺泡上皮细胞凋亡;Ang诱导的在体肺泡上皮细胞凋亡可能与Ang受体1亚型介导的激活caspase 3信号转导通路有关。     

Milrinone在离体肺保护中应用的实验研究

目的 :本研究是探讨Milrinone(米力农 )对离体肺保护的作用。材料与方法 :以离体兔肺模型为肺保护实验对象 ,以肺动脉灌洗再次肺动脉灌注为实验方法 ,以新西兰兔 2 4只为实验动物 ,随机分为两组 ,每组 12只。一组用LPD液行肺动脉灌洗和保存 ,另一组用米力农加LPD液组成实验组 ,用同样的方法灌洗和保存。保存 18h后 ,观察病理形态、含水量以及测量NO(一氧化氮 )、SOD(超氧化物歧化酶 )及MDA(丙二醛 )的含量。结果 :肉眼见组织新鲜红润 ,部分组织充血、水肿及淤血 ;光镜下两组的肺泡、支气管及毛细血管结构完整 ,高倍视野下对照组较实验组肺泡上皮及毛细血管上皮细胞肿胀、肥大 ,少部分组织可见肺泡内有红细胞渗出、间隔增宽等。实验组的含水量低于对照组 (P <0 0 5 )。实验组肺组织中的NO及SOD含量高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,MDA含量低于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :米力农能清除氧自由基 ,有较强的抗氧化性 ,能较明显的减轻肺的再灌注损伤。在LPD液中加入米力农 ,能够对离体肺起到更好的保护效果。离体兔肺再灌注模型是一种较理想的实验动物模型。