重组鼠白细胞介素12与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因联合治疗小鼠B16黑色素瘤

目的：研究重组鼠白细胞介素12（AdCMVIL-12）与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（AdCMVGM-CSF）的腺病毒载体联合应用对B16黑色素瘤的抗肿瘤作用。方法：将B16黑色素瘤细胞接种于C57/BL6小鼠右侧背部皮下后,待瘤体直径达5mm时将荷瘤小鼠随机分为4组,分别为AdCMVIL-12组、AdCMVGM-CSF组、AdCMVIL-12加AdCMVGM-CSF组（联合治疗组）和AdC MVLacZ组（对照组）,每组12只,并于肿瘤组织局部分别多点注射相对应剂量的腺病毒载体,观察各组小鼠肿瘤的生长情况及其诱导的细胞免疫反应,检测各组小鼠血清IL-12和GM-CSF表达水平的变化。结果：病理学观察,联合治疗组肿瘤组织内可见大片凝固性坏死,有大量的淋巴细胞、巨噬细胞浸润。治疗30 d后,联合治疗组肿瘤平均体积为（60.73±11.36 ）mm³,与对照组、AdCMVIL-12组和AdCMVGM-CSF组［分别为（675.18±80.59）、（1 86.91±19.15）和（223.45±23.11）mm³］ 比较差异均有显著性（P>0.01）。同时,AdCMVIL-12与AdCMVGM-CSF联合基因治疗可有效延长IL-12和GM-CSF的表达时间,并且对B16黑色素瘤细胞具有很强的特异性杀伤作用,杀伤率为（69.53 ± 9.20）%。 结论：IL-12与GM-CSF联合基因治疗可增强荷B16黑色素瘤小鼠的抗肿瘤免疫反应,并能有效降低单独应用AdCMVIL-12的毒副作用。     

芝麻素对C_(57)BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其机制

目的:初步观察芝麻素(Sesamine,Ses)对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制作用,并探讨其机制。方法:①体内实验:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型,成模后的40只小鼠随机分为5组,即模型组[0.5%羧甲基纤维素10 ml/(kg.d)]、Ses低、中、高剂量组[30、60、120 mg/(kg.d)]和阳性对照5-氟尿嘧啶组[5-Fu 128 mg/(kg.d)],连续灌胃给药28 d。计算抑瘤率和脏器系数;免疫组化法表达肿瘤组织中MMP-2和MMP-9;ELISA检测瘤组织TNF-α含量;HE染色观察肿瘤形态学变化;②体外实验:MTT检测细胞抑制率。结果:体内试验显示Ses各剂量组呈剂量依耐性抑制小鼠肿瘤生长,减慢肿瘤增殖速度,减轻瘤重,升高脾脏和胸腺系数,减少MMP-2,MMP-9、TNF-α的表达。光镜下可见瘤细胞排列较稀疏,小片状坏死区,有核固缩和溶解现象。体外实验显示Ses含药血清呈明显的浓度依赖性抑制Lewis肺癌细胞的增殖。结论:Ses对C57BL/6小鼠Lewis肺癌细胞有一定剂量依赖性抑制作用,其机制可能与调节机体的免疫功能、减少细胞外基质降解有关。     

多西他赛联合地塞米松抗肺癌血管生成的研究

目的：探讨多西他赛化疗及地塞米松对C57BL／6小鼠Lewis肺癌（LLC）肿瘤生长和血管生成的影响。方法：C57BL／6小鼠皮下接种LLC细胞，随机分组后分别给予相应治疗。隔天测量小鼠体重及肿瘤体积。小鼠处死后称瘤重。应用免疫组化检测小鼠肿瘤组织中CD34和HIF-1α蛋白表达。结果：对照组皮下瘤重明显大于节律组、地塞米松组和联合组。对照组微血管密度（MVD）明显高于三个实验组（P〈0．05），三个实验组HIF-1α蛋白表达较对照组显著下降（P〈0．05）。结论：多西他赛节律化疗和地塞米松可明显抑制LLC的生长及血管生成，其可能的机制之一是通过下调小鼠肿瘤组织中HIF-1α的表达而间接实现抗肿瘤血管生成作用。     

热休克瘤细胞裂解物冲击的异基因树突状细胞促进抗肿瘤免疫

目的探讨热休克瘤细胞裂解物冲击的异基因树突状细胞（DC）抗肿瘤免疫效应。方法应用热休克（43℃,1h）小鼠Lewis肺癌细胞（LLC）裂解物（LhTCL）冲击的小鼠骨髓细胞衍生的树突状细胞（DC）作为瘤苗（DC／LhTCL）。应用Western印迹检测可诱导HSP70表达。用FITC-标记的LhTCL和CFSE-标记的异基因DC分别进行体外吞噬和体内示踪实验,藉酶联免疫吸附（ELISA）、流式细胞术（FCM）和共聚焦荧光显微镜观察分析不成熟异基因DC体外摄取LhTCL对其表型和IL-12产生的影响以及受鼠接种局部引流淋巴结DC（LD-DC）对异基因DC的摄取。然后,通过免疫接种的小鼠脾细胞体外诱生CTL的杀瘤活性（LDH法）和产生的Th-1相关细胞因子检测,LLC移植瘤的免疫预防和早期带瘤鼠的治疗实验以评价C57BL小鼠接种异基因或同系DC／LhTCL瘤苗的产生的抗肿瘤免疫效应。结果（1）热休克增加LLC胞浆内可诱导HSP70表达。（2）小鼠不成熟异基因DC能充分摄取LhTCL并促进其DC成熟（增加DC表面共刺激分子表达和IL-12分泌）。（3）皮下注射LhTCL冲击的异基因DC观察到有促进受鼠DC摄取异基因DC的效应。（4）LhTCL冲击的异基因DC免疫的C57BL小鼠脾细胞能特异性杀伤活LLC,分泌Th-1相关的细胞因子（高水平IFN-γ和低水平IL-4和IL-10）。（5）C57BL小鼠LLC移植瘤免疫保护实验和治疗实验均证实,免疫接种异基因DC／LhTCL瘤苗能够阻止或延缓LLC肿瘤的生长,其产生的免疫保护效应要比同系DC／LhTCL瘤苗强。结论接种热休克处理的肿瘤裂解物冲击的异基因树突状细胞瘤苗有促进抗肿瘤免疫的效应。     

骨髓间充质干细胞对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的作用

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的影响.方法 自C57BL/6小鼠骨髓分离MSCs,制备单细胞悬液并于体外传代培养,取第4～5代细胞用于实验.56只C57BL/6小鼠经Lewis肺癌细胞皮下接种建立小鼠肺癌皮下移植瘤模型,根据MSCs给予时间分为D0组(接种同时给予MSCs)和D10组(接种后第10天给予MSCs),其中D0组分为3个亚组(n=8):组1单纯接种肿瘤细胞,组2肿瘤细胞和MSCs共同接种,组3肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs;D10组分为4个亚组(n=8):组4(肿瘤细胞接种及瘤体内注射MSCs)及其等量PBS对照组(组5),组6(肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs)及其等量PBS对照组(组7).观察各组移植肿瘤的生长情况,包括肿瘤形成时间及不同时间点的瘤体大小,并进行组间分析比较.结果 与组1和组3比较,组2的肿瘤形成时间明显缩短(P<0.05);而各时间点三组瘤体大小比较,差异无统计学意义(P>0.05).组4的瘤体显著大于其对照组(P<0.05);而组6与其对照组的瘤体大小比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 MSCs与Lewis细胞同时接种可加速小鼠肺癌皮下移植瘤形成,而成瘤后MSCs瘤体内注射具有促进移植瘤生长的作用.     

调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能调节的实验研究

目的：研究调衡方对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的作用并探讨其作用机制．方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠右腋皮下建立Lewis肺癌模型;灌胃给药12d后观察瘤组织中淋巴细胞与瘤细胞形态学的变化;常规石蜡切片HE染色．观察瘤组织癌细胞形态的变化;免疫组化法检测瘤组织中CD4＋,CD8＋的表达水平及其血清IL-2的活性．结果：调衡中、大剂量组可见瘤组织Lewis肺癌细胞大量坏死和凋亡,荷瘤对照组对肿瘤细胞形态无明显影响;调衡中剂量组和调衡大剂量组瘤组织中CD4＋与CD8＋表达均增多,而阳性组、调衡小剂组、热休克组则主要是CD8＋表达升高．调衡方在25g／kg剂量下,对Lewis肺癌荷瘤小鼠外周血IL-2活性水平有显著地增强作用．结论：调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与增强小鼠外周血IL-2的活性有关及增强CD4＋,CD8＋的表达水平,从而阻止了肿瘤细胞的侵袭转移．     

骨髓间充质干细胞对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的作用

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的影响。方法 自C57BL/6小鼠骨髓分离MSCs,制备单细胞悬液并于体外传代培养,取第4～5代细胞用于实验。56只C57BL/6小鼠经Lewis肺癌细胞皮下接种建立小鼠肺癌皮下移植瘤模型,根据MSCs给予时间分为D0组(接种同时给予MSCs)和D10组(接种后第10天给予MSCs）,其中D0组分为3个亚组（n=8）：组1单纯接种肿瘤细胞,组2肿瘤细胞和MSCs共同接种,组3肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs;D10组分为4个亚组（n=8）：组4(肿瘤细胞接种及瘤体内注射MSCs)及其等量PBS对照组（组5）,组6（肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs）及其等量PBS对照组（组7）。观察各组移植肿瘤的生长情况,包括肿瘤形成时间及不同时间点的瘤体大小,并进行组间分析比较。结果 在D0组,组1、2、3肿瘤形成时间分别为（9.37±1.41）d、（7.62±1.40）d和（9.25±1.49）d,与组1和组3比较,组2的肿瘤形成时间明显缩短（P<0.05）;而各时间点三组瘤体大小比较,差异无统计学意义（P>0.05）。组4的瘤体显著大于其对照组（P<0.05）;而组6与其对照组的瘤体大小比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 MSCs与Lewis细胞同时接种可加速小鼠肺癌皮下移植瘤形成,而成瘤后MSCs瘤体内注射具有促进移植瘤生长的作用。     

小鼠肺癌模型的建立及其在顺铂、恩度对比试验中的应用

目的:构建Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,研究恩度与顺铂及联和用药对Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用.方法:使用C57BL/6小鼠作为实验动物.培养小鼠Lewis肺癌细胞,收集对数生长期的肿瘤细胞,调整细胞悬液浓度至1×107/ml.于小鼠右侧腋部皮下注射细胞悬液0.2 ml(细胞总数为2×104).建立Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤动物模型.待接种后第8天,能扣及肿瘤时(约8 mm)开始实验.将40只荷瘤小鼠随机分为四组.A组:生理盐水组;B组:顺铂组;C组:恩度组;D组:恩度与顺铂联用组.C组、D组每日给予恩度3 mg/kg,腹腔注射给药,每日1次,连续14 d;B组、D组腹腔注射顺铂0.2 ml(按照1 mg/kg给药),每天1次,连续2周.A组给予生理盐水0.2 ml/只腹腔注射,每日1次,连续二周后处死.观察各组小鼠的生存质量情况,每3天称取体重一次并测量肿瘤长短径,描绘肿瘤生长曲线;称量瘤重,计算抑瘤率.结果:各治疗组小鼠移植瘤生长较生理盐水组相对缓慢.联合治疗组肿瘤体积明显小于生理盐水组、顺铂组和恩度组;顺铂组、恩度组和联合治疗组抑瘤率分别为32.19%、21.96%、55.08%.顺铂与恩度联用对小鼠移植瘤具有协同抑制作用(Q>1.15).结论:在实验条件下,恩度与化疗药物顺铂均对Lewis肺癌皮下移植瘤生长有明显抑制作用.恩度与顺铂对Lewis肺癌移植瘤具有较好的协同抑制作用,同时能够改善小鼠的生存质量,在肺癌治疗中具有一定潜力.     

IRM-2小鼠移植性肿瘤模型的生物学特性

目的 观察IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌生物学特性的对比研究.方法 取肿瘤组织研磨,用生理盐水稀释成2×106/mL,取细胞悬液接种于IRM-2小鼠和C57BL/6小鼠腋下,0.2 mL/只.观察两品系肿瘤生长、荷瘤鼠生存时间,外周血细胞及病理指标变化.结果 两品系小鼠成瘤率均是100%,荷瘤鼠存活时间无明显差异,IRM-2小鼠荷瘤鼠体重净增长明显高于C57BL/6荷瘤小鼠(P＜0.05).白细胞分类及病理指标变化无明显差别.结论 IRM-2小鼠与C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型生物学特性基本一致,IRM-2小鼠可以建立稳定的Lewis肺癌肿瘤模型应用于实验研究.     

肺岩宁膏方对Lewis肺癌荷瘤鼠抗瘤作用及对免疫器官的影响

目的探讨肺岩宁方为基础的膏方制剂对荷瘤鼠抗肿瘤活性及免疫功能的影响。方法以C57BL/6小鼠Lewis肺癌为模型,随机分为膏方组、辅料方组、生理盐水组,每组11只,给药10d后检测各组C57BL/6荷瘤小鼠的体质量,瘤重,肺转移灶数,肺转移发生率,脾指数及胸腺指数。结果肺岩宁膏方能明显减少C57BL/6Lewis肺癌荷瘤小鼠的肺转移灶数,降低肺转移的发生率(P<0.05);显著提高荷瘤小鼠的免疫功能,使小鼠的体质量、脾指数、胸腺指数均明显高于空白组(P<0.05);但三组间瘤重无明显差异。结论肺岩宁膏方能够明显提高Lewis肺癌荷瘤小鼠的免疫功能,对Lewis肺癌转移有一定抑制作用,但对Lewis肺癌皮下移植瘤无明显抑制作用。     

GM—CSF基因转导的肿瘤疫苗研究

目的：观察ＧＭ－ＣＳＦ基因转导的肿瘤细胞免疫小鼠的抗肿瘤效果。方法：用电穿孔法将小鼠ＧＭ－ＣＳＦ的表达质粒导入ＲＭＡ淋巴瘤细胞,经Ｇ４１８筛选后,将ＧＭ－ＣＳＦ高表达克隆（ＲＭＡ－ＧＭ）细胞皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,观察成瘤性,以及经丝裂霉素－Ｃ处理灭活的ＲＭＡ－ＧＭ细胞免疫小鼠,观察抗肿瘤作用。结果：ＲＭＡ－ＧＭ细胞免疫小鼠及亲代肿瘤细胞攻击后与对照组相比,肿瘤生长速度减慢,小鼠生存期明显延长     

TNF-α gene-modified dendritic cells act as more potent adjuvants for peptide delivery to induce specific antitumor immunity in mice

Objective To investigate the antitumor immune efficiency of mouse dendritic cells (mDCs) by using adenovirus-mediated tumor necrosis factor-alpha (AdV-TNF-α) gene transfer.Methods MDCs infected with AdV-TNF-α and AdV-pLpA (no gene insert) at 100 multiplicity of infection (MOI) were analyzed by RNase protection assay for their cytokine secretion. Mixed lymphocyte reactions were also performed to analyze their capacity for alloantigen-presentation. C57BL/6 mice were challenged with R3LL tumor cells (Lewis lung carcinoma line) 10 days after vaccination with different engineered DCs and regular DCs as well.Results Compared to AdV-pLpA and mock-infected DCs, AdV-TNF-α-infected DCs displayed up-regulated expression of alpha tumor necrosis factor, interleukin-12 (IL-12), interleukin-18 (IL-18) and granulocyte macrophage colony stimulation factor (GM-CSF), and indicated stronger allogeneic T cell proliferative responses. Furthermore, vaccination of mice with dendritic cell tumor necrosis factor-alpha (DCTNF-α) pulsed with Mut1 peptide induced more efficient tumor-specific cytotoxic T lymphocyte (CTL) cytotoxicity against R3LL tumor cells in vitro and with efficient antitumor immunity in vivo. Conclusion This type of engineered DCs could be applied in clinical settings of DC-based cancer vaccines     

小剂量紫杉醇节律化疗影响Lewis肺癌细胞株增殖和肿瘤血管生成的研究

目的小剂量化疗药物节律化疗是一种新型抗肿瘤化疗途径,在给药方式、毒副反应、作用机制等方面皆有别于传统化疗。文中探讨了小剂量紫杉醇节律化疗对小鼠Lewis肺癌细胞株皮下移植瘤生长的抑制及对其肿瘤血管生成的影响。方法C57BL/6小鼠皮下接种(Lewis Lung Cancer,LLC)细胞,成瘤后随机分为对照组(等渗盐水0.2 ml,腹腔注射,每天1次);小剂量紫杉醇组(紫杉醇2 mg/kg,腹腔注射,每天1次);常规剂量紫杉醇组(紫杉醇20 mg/kg,腹腔注射,第1天)。每天测量小鼠肿瘤体积。在第14天、第28天2个时间点分别取小鼠肿瘤,测定组织Evans Blue(EB)渗透浓度及肿瘤坏死率,半定量RT-PCR法测定肿瘤组织血管内皮生长因子-A(vasculav endothelial growth factor-A,VEGF-A)、血栓反应素-1(thrombosp-odin-1,TSP-1)、G蛋白信号通路调节蛋白5(regulator of G-protein signaling5,Rgs 5)基因表达水平。结果与对照组相比,小剂量紫杉醇节律化疗能够明显抑制Lewis肺癌细胞株皮下移植瘤的生长(P<...     

肿瘤抗原多肽致敏白细胞介素18基因修饰的树突状细胞治疗小鼠转移性肺癌

目的探讨肿瘤多肽致敏的白细胞介素18(IL-18)基因修饰的树突状细胞(DC)对自发性肺转移癌的治疗作用。方法小鼠足垫注射3LLLewis肺癌细胞建立自发性肺转移癌模型,经骨髓来源的IL-18基因修饰、3LL特异抗原多肽Mut1体外致敏DC(DC-IL-18/Mut1)皮下免疫2次,观察荷瘤鼠肺脏重量、肺表面转移结节、存活期的变化及相应免疫指标等变化,实验分8组,组间差异行t检验,生存期行时序检验。结果与对照病毒组(DC-LacZ/Mut1)及未处理DC组相比,DC-IL-18/Mut1组肺脏重量最轻(215mg±20mg与398mg±23mg和987mg±45mg比较,t值分别为14.7及38.4,P均<0.01)、肺表面转移结节最少(0与7.8±2.7和49.4±4.3比较,t值分别为7.07及16.2,P均<0.01)、存活期最长(χ2分别为6.78、10.49,P均<0.01),其诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性(53.4±3.1与41.3±2.6和9.8±2.1比较,t值分别为7.3及28.5,P均<0.01)和天然杀伤细胞(NK)活性(35.8±2.4与15.6±2.8及13.6±2.5比较,t值分别为13.4及15.7,P均<0.01)最显著,且CD4+T、CD8+T及NK细胞比例增加。结论MHCⅠ类限制性肿瘤抗原多肽致敏的IL-18基因修饰的DC能通过诱导显著的抗肿瘤免疫反应而对自发性肺转移癌有明显的治疗作用。     

H22肝癌与Lewis肺癌荷瘤小鼠证候特征比较研究

目的比较H22肝癌与Lewis肺癌C57BL/6N荷瘤小鼠证候及其差异。方法分别在雄性C57BL/6N小鼠右腋下接种H22肝癌腹水和Lewis肺癌瘤组织单细胞悬液,并设立正常对照组,采用小鼠四诊工作站平台与方法收集小鼠四诊信息,并进行计量辨证。结果接种第11~21天,Lewis肺癌小鼠肿瘤增长与小鼠死亡速度较H22肝癌小鼠速度快,第21天H22肝癌与Lewis肺癌小鼠存活比例分别为43.75%(7/16)和25.0%(5/20)。H22肝癌与Lewis肺癌荷瘤小鼠均自发形成了常见虚证,其中Lewis肺癌小鼠证候出现早,程度重,发展快。结论H22肝癌与Lewis肺癌C57BL/6N荷瘤小鼠与人类类似,存在着证候的自然发生与演变,可模拟临床肿瘤证候的发生与演变,用于辨证论治的实验研究;而本文所采用的计量化辨证有助于荷瘤小鼠个体化辨证论治,以及疾病和辨证论治客观化、计量化的疗效评价。     

Induction of protective antitumor activity of tumor lysate-pulsed dendritic cells vaccine in RM-1 prostate cancer model

Objective： To investigate the antitumor activity of tumor lysate-pulsed dendritic cells vaccine in RM-1 prostate cancer mice model with the survival time of mice calculated and the tumor size measured in DC vaccine therapy. Methods： C57BL/6 mice were immunized on the dorsal flank by s.c. inoculation of Lysate-DC, ova-DC, and non-DC on day -7. On day 0, 2× 10^6cells of RM-1 tumor cells （H-2b） were injected s.c. in C57BL/6 mice pre-treated by s.c. inoculation of modified DCs, correspondingly. DTH assay was performed with modified DCs. In partial test, for the determination of which immune cells were required for antitumor activity, mice were immunodepleted of CD4, CDS, or natural killer （NK） NK1.1 cells with the corresponding monoclonal antibodies. The survival time of nude mice loaded with tumor cells was calculated and the size of tumor measured. Results： In RM-1 mice prostate cancer model, immunized with lysate-DC, compared with ova-DC and non-DC, the pre-infection vaccine resulted in 100% clearance of primary tumors, whereas on day 0 of injection vaccine cleared 40-60% of primary tumors. On day 0, C57BL/6 mice （H-2b） were immunized with Lysate-DC, compared with ova-DC and non-DC by caudal vein injection, then on day 15, RM-1 cells were inoculated. On day 30, average diameters of tumor in different groups of modified DC were 23.7±5.4 mm, 22.1±4.9 mm, 4.3±2.6 mm, respectively. Lysate-DC, compared with ova-DC and non-DC, can greatly depressed RM-1 tumor cell growth （P〈0.01）. The mean survival time of C57BL/6 mice in Lysate-DC, ova-DC and non-DC groups were 15.8±2.6, 16.6±3.2, 39.0±5.6, respectively, and there was a significant difference in the mean survival time in lysate-DC group between ova-DC and non-DC group （P〈0.01）. DTH test showed that lysate-DC could prime T lymphocyte and elicit tumor antigen specific immune response, and over 80% mice in groups of lysate-DC showed obvious swelling in their foot pad. This response was strengthened with repeating inoculation, whereas DTH response was not seen in control group. In vivo depletion of NK cells resulted in a 40-60% reduction in growth suppression within the primary tumor, and depletion of CD4^＋ cells resulted in a 20% reduction in growth suppression. Conclusion： The minor lysate-pulsed dendritic cells vaccine could elicit antitumor activity in RM-1 loaded C57BL/6 mice, and prolong the duration of RM-1 loaded C57BL/6 mice. So DC-based immunotherapy with hormone-refractory prostate carcinoma yielded protective immunity, generated efficient cellular antitumor responses, thereby providing further preclinical support for feasible immunotherapy approaches for prostate cancer.     

低剂量全身照射增强荷瘤小鼠局部大剂量照射的抑瘤作用

本实验采用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠皮下接种Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞为实验肿瘤模型。当荷瘤小鼠肿瘤局部１０ｍＧｙＸ射线照射前２４ｈ接受７５ｍＧｙ全身照射时，发现对肿瘤生长的抑制作用比单纯局部照射时增强。将７５ｍＧｙ全身照射或假照射的荷瘤小鼠脾细胞与Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞混合接种于正常小鼠皮下进行Ｗｉｎｎ试验，观察到照射小鼠脾细胞与癌细胞混合接种的小鼠肿瘤发生率低于假照射小鼠脾细胞与癌细胞混合接种的小鼠，后者肿瘤出现的时间亦较早。这些差别在接种效靶细胞比５０：１的小鼠中更为明显。提示这种抑瘤作用的增强可能是由于低剂量Ｘ射线全身照射后促进荷瘤机体免疫反应所致。＊Ｐ＜０．００１ｖｓ１０Ｇｙｉｒｒａｄ．１６．７％，后者８０％。Ｆｉｇ．２Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｐｌｅｎｉｃｃｅｌｌｓｏｆｔｕｍｏｒ─ｂｅａｒ－ｉｎｇｍｉｃｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇ７５ｍＧｙＷＢＩｏｎｔｕ－ｍｏｒｉｎｃｉｄｅｎｃｅｉｎａＷｉｎｎａｓｓａｙｔｕｍｏｒｃｅｌｌｏｎｌｙＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｆｒｏｍＴＢＭＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｆｒｏｍＴＢＭＩＴＢＭＴｕｍｏｒ─ｂｅａｒｉｎｇｍｉｃｅＴＢＭＩ：Ｔｍｕｏｒ─ｂｅａｒｉｎｇｍｉｃｅｉｒｒａｄ．＊Ｎｏｔｕ－ｍｏｒｄｅｖｃｌｏｐｉｎｇ?     

IL-21膜表面修饰MB49细胞疫苗治疗小鼠转移性膀胱癌的实验研究

目的制备白细胞介素21(IL-21)膜表面修饰的小鼠膀胱癌MB49细胞疫苗,评价其在小鼠膀胱癌皮下转移模型中诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL s)的效应和治疗作用。方法将SA-IL-21锚定在经30%酒精灭活后的MB49细胞膜表面而制成IL-21膜表面修饰疫苗。建立C57BL/6小鼠皮下MB49膀胱癌模型,将荷瘤小鼠随机分为5组:IL-21膜表面修饰疫苗组、单纯游离IL-21组、GFP膜表面修饰疫苗组、单独灭活MB49肿瘤疫苗组、PBS组。利用上述制备的疫苗进行治疗,通过检测各组小鼠肿瘤体积变化及CTL来评价疫苗的抗肿瘤功能。结果成功制备了IL-21膜表面修饰MB49疫苗。IL-21/MB49疫苗可显著抑制肿瘤生长并产生长期特异性免疫反应(P<0.05)。在同一效靶比下IL-21/MB49疫苗组的CTL杀伤活性显著高于其他组(P<0.05)。结论采用蛋白膜锚定技术可将IL-21高效锚定于MB49细胞膜表面制备成IL-21膜表面修饰膀胱癌肿瘤疫苗,该疫苗既可保持IL-21生物学活性又可明显增强CTL杀伤BCa肿瘤活性。