Ca2+对角质形成细胞增殖与分化调控的作用研究

目的：探讨胞外Ca^2＋对人角质形成细胞（HKC）的增殖与分化的调控作用，为组织工程皮肤的研制提供依据。方法：HKC体外培养，应用形态学、免疫细胞化学、MTT等方法检测胞外Ca^2＋对HKC增殖与分化的影响，并利用钙通道阻滞剂SK＆F 96365来研究其作用的可能途径。结果：Ca^2＋为0.5mmol/L时，HKC呈单层生长，免疫细胞化学显示HKC呈低分化状态，当Ca^2＋为1mmol/L与1.5mmol/L时，细胞在3天后出现复层生长，免疫细胞化学显示细胞K19角蛋白表达减少，Ca^2＋为2.0mmol/L时表现出一定的细胞毒性作用，SK＆F 96365可逆转Ca^2＋的促增殖与分化作用。结论：胞外Ca^2＋在一定范围内具有促HKC分化与增殖的作用，并且该作用可以被SK＆F 96365所阻滞。     

阴茎海绵体平滑肌钙信号通路研究进展

早在100多年前，研究者已经注意到Ca^2＋在生命中的作用，但直到1967年，美籍华人张槐耀发现钙调素后，人们才开始对Ca^2＋的作用机理有了深刻的认识，提出了Ca^2＋是胞内的一种第二信使。随着研究的深入，人们发现钙信号通路在生命活动中无处不在，具有非常重要的地位。阴茎勃起与疲软受很多因素的影响，但最终分子机制的共同通路就是钙信号通路。所以研究钙信号通路对阴茎勃起及勃起障碍的生理、病理、诊断及治疗等有很重要的意义。     

组织血液灌注与微循环的病理生理(1)——氧的利用障碍

2．细胞钙稳态紊乱：静息状态下，细胞胞浆Ca^2＋浓度约为10^-7mol／L，而细胞外液Ca^2＋浓度约为10-3mol/L，细胞内外Ca^2＋浓度相差10000倍左右。细胞内Ca^2＋浓度的变动可作为细胞内信使影响多种钙依赖性酶的活性而改变细胞的功能状态。细胞一系列的Ca^2＋运转机制失调使细胞内Ca^2＋浓度出现非控制性增高时，则出现细胞钙稳态紊乱。从理论上判断这种钙稳态紊乱是由于①Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶（钙泵）活性降低，或Na^2＋／Ca^2＋交换、H^＋／Ca^2＋交换逆转，以致胞内Ca^2＋外流减少；     

抗精子抗体阳性大鼠精子凋亡及机制的研究

目的探讨抗精子抗体（AsAb）阳性人鼠精子凋亡率的变化及其可能的机制。方法建立AsAb阳性人鼠动物模型，HE染色观察人鼠附睾组织形态；采用3’-原位末端DNA标记（TUNEL）技术检测大鼠精子的凋亡率；应用化学比色法测定精了匀浆的MDA含量和总抗氧化能力；应用定磷法测定精予匀浆的Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca24ATP酶活性。结果与正常组相比，AsAb阳性组大鼠精子凋亡率和MDA含量显著增加（P〈0．01：P〈0．01）；总抗氧化能力、Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性显著降低（P〈0．01；P〈0．01；P〈0．05）。结论AsAb阳性大鼠精子凋亡率增加；可能与氧自由基含量增多、Na^＋K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性降低有关。     

硝苯地平体外对人精子运动功能及顶体反应的影响

近年来发现精子对L型Ca^2＋通道阻断剂二氢吡啶类较为敏感。本研究旨在探讨正常血药浓度下。二氢吡啶类阻断剂硝苯地平（NIF）体外对人精子活力、活率及顶体反应的影响。从而为男性不育的诊断、开发新型避孕药以及指导临床用药提供帮助。     

氯胺酮对卵蛋白激发的致敏大鼠离体肺泡巨噬细胞胞内钙和自由基的影响

目的 研究氯胺酮对卵蛋白（OVA）刺激的致敏大鼠肺泡巨噬细胞胞内游离钙离子（[Ca^2＋]i）及自由基的作用，探讨氯胺酮在哮喘治疗中的作用及其机制。方法 体外培养的致敏肺泡巨噬细胞经氯胺酮（10、100和1000μM）处理、OVA刺激后，测定细胞[Ca^2＋]i并检测细胞培养上清液中一氧化氮（NO）和羟自由基（·OH）水平。结果 OVA激发可引起致敏肺泡巨噬细胞[Ca^2＋]i增高及NO和·OH的生成增多，氯胺酮对此具有浓度依赖性抑制作用。结论 氯胺酮可抑制OVA所致的氧化应激，其分子机制可能与[Ca^2＋]i相关。     

氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度波动方式的影响

目的研究氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PCI2细胞内Ca^2＋浓度波动方式的影响。方法使用含25ng／LNGF的DMED培养基在多聚赖氨酸包被的培养皿中培养PCl2细胞；与终浓度10gmol／L的Ca^2＋指示剂Fluo-3 AM ester共孵育30min洗涤后，加入终浓度50gmol／L荷包牡丹碱；在激光共聚焦显微镜选定多个细胞分别测定荧光强度的变化；随后加入氯胺酮，记录细胞荧光强度的改变。在试验结束前依次加入Triton X-100和EGTA分别记录单个细胞最大荧光强度（Fmax）和最小荧光强度（Fmin），以计算细胞内Ca^2＋的相对强度。结果氯胺酮不改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2＋浓度波动的基线，但抑制细胞内Ca^2＋浓度升高的幅度（P〈0．05），缩短相邻波峰间的时间间隙（P〈0．05）。结论氯胺酮不仅改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2＋浓度升高的幅度，而且改变Ca^2＋浓度波动的周期。     

离子对啤酒酵母代谢产酸的影响

在离子型培养基中分别添加6.804,13.610,27.216 g/L 的KH2PO4以及66.39,138.75, 277.4 mg /L 的CaCl2,对通风发酵过程中的不同K^＋、Ca^2＋浓度影响啤酒酵母代谢产6种有机酸含量的动态变化进行了跟踪检测.研究结果表明,K^＋、Ca^2＋可能通过作用于酵母细胞膜上的膜蛋白或调控生理代谢网络中代谢流相关的酶,从而使不同的K^＋、Ca^2＋浓度影响啤酒酵母响应产酸的峰值和峰值响应时间;在通风发酵过程中,啤酒酵母代谢产乳酸较多（多达8.3 mg/mL）,产琥珀酸较少（不超过250 μg/mL）;发酵终点时,随K^＋、Ca^2＋浓度增大,啤酒酵母代谢产酒石酸和琥珀酸等含量减少.     

外科患者血清K^＋、Ca^2＋分析与探讨

我们在长期的临床观察与分析中发现，严重外伤性患者及严重外科腹痛患者，特别是严重外伤休克患者，在做电解质分析时，血清K^＋都有偏低现象，病情越严重者，血K^＋偏低更为明显。通过给予适当的药物治疗或手术后，发现大多数患者血Ca^2＋也相继减低，鉴于血清总钙影响因素较多，因此血K^＋、Ca^2＋减低时，应结合临床综合考虑。     

异丙酚对大鼠海马神经细胞内游离钙和钙调蛋白活性的影响

目的观察一次性注射异丙酚对Wistar＇s大鼠海马神经细胞内游离钙（[Ca^2＋]i）和钙调蛋白（calmodulin，CaM）相对活性的影响。方法40只Wistar＇s大鼠随机分为5组，即对照组、诱导期组、麻醉期组、恢复期组、清醒期组。对照组腹腔注射生理盐水10ml／kg，其余各组注射异丙酚100mg／kg．在不同麻醉时期断头取脑，用流式细胞术测定海马神经细胞内[Ca^2＋]i和CaM相对活性。结果①麻醉诱导后海马神经细胞内[Ca^2＋]i与对照组比较升高有统计学意义（P〈0．01）．②CaM平均荧光强度诱导期与对照组及恢复期比较升高有统计学意义（P〈0．05），恢复期其活性接近对照组水平（P〉0．05）。结论Wistarg大鼠腹腔注射异丙酚100mg／kg即刻可明显影响其海马神经细胞内[Ca^2＋]i和CaM相对活性。CaM作为信号分子在异丙酚全麻作用的分子学机制中发挥了一定作用。     

异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸诱发大鼠海马神经元内游离钙离子浓度的影响

目的观察异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱发大鼠海马神经元内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响。方法取当天新生的Wistar大鼠海马神经元，培养12d随机分为5组，对照组（C组）、NMDA组、异丙酚10μmol／L＋NMDA组（P1组）、异丙酚100μmol／L＋NMDA组（P2组）、异丙酚400μmol／L＋NMDA组（P3组）。NMDA组培养液中加入NMDA至终浓度20μmol／L，P1组、P2组及P3组加入NMDA前即刻分别加入异丙酚至终浓度为10、100、400μmol／L，加入异丙酚后11min用激光共轭聚焦显微技术测定[Ca^2＋]。结果NMDA可诱发海马神经元[Ca^2＋]．升高，预先加入异丙酚100、400μmol／L可抑制这种改变，异丙酚10μmol／L对NDMA诱发的上述改变无影响。结论高浓度异丙酚可抑制NMDA诱发的大鼠海马神经元细胞[Ca^2＋]．的升高，这可能是其神经保护作用的机制之一。     

细胞内Ca^2＋及Na^＋/Ca^2＋交换体在对比剂急性肾损伤中的作用

对比剂急性肾损伤（contrast induced-acute kidney injury,CI-AKI）的发病机制到目前为止尚未完全明确.有观点认为,细胞内Ca^2＋超载是CI-AKI发生的一个关键因素,在病理条件下电压依赖性钙离子通道（voltage dependence calcium channel,VDC）和Na^＋/Ca^2＋交换体（Na^＋/Ca^2＋ exchange,NCX）是引起细胞内Ca^2＋超载的主要途径.本文将对细胞内NCX介导的Ca^2＋超载引起肾小管上皮细胞损伤及血流动力学改变在CI-AKI发病机制中的作用做一综述.     

利多卡因对大鼠海马CA1区锥体神经元L-型Ca2+通道开放功能的影响

目的研究不同浓度利多卡因对大鼠海马CA1区锥体神经元L-型Ca^2＋通道开放功能的影响。方法成年SD大鼠,体重200～250 g,雌雄不拘。麻醉后迅速断头取脑,采用酶加机械分离的方法急性分离海马CA1区锥体神经元。配制利多卡因溶液,终浓度依次为2、4、8、16、32μg/ml。选取活力好的细胞,采用膜片钳细胞贴附模式单通道记录技术,依次记录L-型Ca^2＋通道在不同浓度利多卡因作用下单通道的开放时间,并计算开放概率,共观察和记录7个锥体神经元。结果利多卡因对大鼠海马CA1区锥体神经元L-型Ca^2＋单通道功能的影响呈浓度依赖性：与未加利多卡因比较,2和4μg/ml利多卡因对L-型Ca^2＋单通道的功能无明显影响,8和16μg/ml利多卡因使L-型Ca^2＋单通道开放时间延长,开放概率增加（P〈0.05）;32μg/ml利多卡因使L-型Ca^2＋单通道开放时间缩短,开放概率降低（P〈0.05）。结论2和4μg/ml利多卡因对大鼠海马CA1区锥体神经元L-型Ca^2＋单通道无明显影响;8和16μg/ml时有增强作用;32μg/ml时有抑制作用。     

西地那非的脑动脉血管活性效应中K~+和Ca~(2+)离子流的作用

为了探讨磷酸二酯酶抑制剂西地那非在脑动脉血管活性效应中K^＋和Ca^2＋（离子）流的作用，Salom等做了一项相关研究，研究者使用离体兔子的脑基底动脉来评价西地那非诱导的血管扩张细胞外K^＋升高的效应，并且研究西地那非对K^＋、Ca^2＋离子膜通道选择性递质的药理作用。信使和蛋白的水平用来评估K^＋通道的亚基Kv1的表达。苯氮嘌呤酮作对照完成类似的实验。用KCL（50mmol／L）、     

创伤性脑损伤后血清镁、钙离子检测的临床研究

目的探讨急性期血清Mg^2＋、Ca^2＋浓度检测对创伤性脑损伤诊断和预后的价值。方法采用原子吸收分光光度法测定86例急性创伤性颅脑损伤患者和10例健康献血员血清Mg^2＋、Ca^2＋浓度。对颅脑损伤患者入院时进行GCS评分，3个月后随访记录GOS评分。结果与对照组比较，颅脑损伤后血清Mg^2＋、Ca^2＋浓度明显下降（P〈0．05）。轻型组下降不明显（P〉0．05），而中、重型组显著下降（P〈0．05；P〈0．01）。中型组与轻型组比较差异无统计学意义（P〉0．05），而重型组与轻、中型组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。三组间GOS评分两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论颅脑损伤后血清Mg^2＋、Ca^2＋浓度明显下降，且下降程度与中、重型患者伤情成正相关，与GOS评分成负相关。急性期血清Mg^2＋、Ca^2＋浓度测定对创伤性脑损伤具有诊断和预后的价值.     

钙调素与精子功能

钙调素集中分布于精子头和尾部的多个区域，钙调素通过激活精子的多种功能酶活性调节精子内的Ｃａ＾＋＋浓度，ＣＡＭＰ水平及至精子的鞭毛运动，影响精子的获能与顶体反应，钙调素与在受精过程中起重要作用的Ａｃｔｉｎ ＰＬＡ２等相互作用从而参与精卵融合的调节。     

线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道在未成熟心肌缺血预处理中的作用

目的探讨线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）在未成熟心肌预处理保护中的作用,为未成熟心肌的保护提供依据。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型,将24只新生（出生14～21d）日本长耳大白兔按随机数字表法分为4组：缺血／再灌注组（I／R组）,心脏缺血预处理组（E1组）,mitoKATP阻滞剂5-hydroxydecanoate（5-HD）＋心脏缺血预处理（E2组）,mitoKATP通道开放剂Diazoxide（Diaz）预处理组（E3组）;检测心脏功能恢复率、心肌含水量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、三磷酸腺苷（ATP）含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋-三磷酸腺苷酶活性（Ca^2＋-ATPase）、心肌线粒体合成ATP的能力;电子显微镜观察心肌超微结构。结果E1组、E3组心功能恢复优于I／R组和E2组,心肌含水量低于I／R组和E2组（P〈0．05）;E1组、E3组三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌线粒体Ca^2＋-ATPase活性、心肌线粒体合成ATP的能力均优于I／R组和E2组（P〈0．05）,丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶漏出率、心肌细胞内Ca^2＋含量、心肌线粒体Ca^2＋含量低于I／R组、E2组（P〈0．05）;E1组、E3组心肌超微结构损伤较I／R组和E2组明显减轻。结论心肌缺血预处理对未成熟心肌具有明显的保护作用,其机制可能是通过mitoKATP通道的开放起作用。     

化瘀补肾下石法对大鼠肾结石的作用

目的：探讨化瘀补肾下石法对Wistar大鼠肾结石的疗效及可能的治疗机制，为临床应用提供理论及实验依据。方法：用1．25％的乙二醇加1％氯化铵溶液造成大鼠肾结石模型，给予化瘀补肾下石法施治，并进行对照观察。结果：化瘀补肾下石法能显著降低肾结石大鼠血清Ca^2＋、尿酸及肾组织草酸，增加肾结石大鼠尿量、尿Ca^2＋、尿酸的排泄，提高血Mg^2＋、尿Mg^2＋含量，并能改善大鼠的肾功能。结论：化瘀补肾下石法对乙二醇法所致大鼠肾结石有明显的治疗和预防作用，其总体效果优于排石颗粒。     

大鼠烫伤后补锌对血清和组织锌、钙离子的影响

目的 探讨大鼠烫伤后补锌对血清和组织锌离子、钙离子的影响及其意义。方法 SD大鼠80只随机分为对照组和烫伤后正常进食组、创面补锌组、口饲补锌组,伤后1、3、7天活杀大鼠,留取标本检测血清、肝脏、骨骼及烫伤皮肤等组织中Zn^2＋、Ca^2＋含量。结果 烫伤后正常进食组、创面补锌组血清Zn^2＋明显下降,约低于伤前1／3,而口饲补锌组明显上升,高达13．1～16．2μmol／L。肝Zn^2＋各组均呈上升趋势,以口饲补锌组最明显,补锌第1天升至41．6μg／g。肝脏Ca^2＋正常进食组、创面补锌组增加,烫伤第1天正常进食组升至30．8mg／g,口饲补锌组低于伤前和正常进食组、创面补锌组。骨Zn^2＋、骨Ca^2＋在烫伤后各组均呈递减趋势,以正常进食组最明显,烫伤后第7天,骨Zn^2＋和Ca^2＋分别降至41．5μg／g和50．2μg／g。烫伤皮肤Zn^2＋在伤后第1天正常进食组、创面补锌组下降,口饲补锌组却明显升高至27．1μg／g,第3、7天,各组均逐渐上升,以创面补锌组最明显,达34．3μg/g。烫伤皮肤Ca^2＋各组均呈大幅度递增,其中以正常进食组最明显,烫伤后第7天升至5．4mg／g,高出对照组67．5倍,创面补锌组明显低于正常进食组。结论 烫伤后及补锌血清、组织中的Zn^2＋、Ca^2＋含量均出现明显的变化,不同途径补锌对组织中Ca^2＋含量也有影响,其机制需进一步探讨。     

磷脂酶C—zeta在生殖生物学中的作用及研究进展

细胞信号转导通路中的磷脂酶C（PLC）可以引起卵子发生Ca^2＋振荡,激活卵子,在顶体反应、受精及随后的胚胎发育中发挥着巨大作用。它的亚型之一PLCξ近年来在生殖领域的深入研究中揭示了其作为“精子因子”的实质。并认为对其研究将有助辅助生殖技术的受精率提高。在此对其功能及新近的研究进展进行简要概述。