恶性肿瘤细胞血循环微转移检测进展

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重要疾病之一,其致死的主要原因是肿瘤局部或区域的复发和远处转移.具有转移潜能的肿瘤细胞在术前或术时已脱离原发灶,以极少的数量转移到淋巴结、骨髓、血液或远处器官中,常规的检测手段却不能发现,称为肿瘤的微转移(micrometastasis).肿瘤细胞血循环微转移是肿瘤远处器官转移的重要起始步骤.及时诊断肿瘤血循环微转移有助于治疗方案的选择及预后的判断.现就恶性肿瘤血循环微转移检测方法及目前研究进展作一综述.     

肿瘤微转移的基因诊断

肿瘤的微转移一般是指恶性肿瘤在发展过程中，播散并存活于血循环淋巴道，骨髓及各组织器官中的肿瘤细胞尚未形成转移结节，无任何临床表现，常规检查方法如影像、常规病理检查等难以发现。肿瘤的转移与预后密切相关，所以检测微转移很重要。ＰＣＲ的出现很大程度上促进了肿瘤微转移的检测。基因诊断检测出肿瘤微转移可作为加强术后辅助化疗的选择性标记，有助于建立个体化的治疗方案。     

微转移检测在食管癌诊疗中的应用及其临床意义

许多食管癌患者在术后原发灶和转移灶被切除，病理检测也为阴性，但最后仍死于肿瘤的转移和复发。这是因为在恶性肿瘤的早期病程，肿瘤细胞可能已播散到原发灶以外的远处组织与器官，这种播散或者说转移，不能被常规的临床手段所检测，往往成为肿瘤高致死率的一个重要因素。近些年来，关于肿瘤微转移的临床意义，检测及其控制成为肿瘤研究的一个重要领域。本文就微转移检测在食管癌诊疗中的应用做一综述。     

肿瘤微转移的检测

肿瘤的浸润和转移是影响肿瘤患者预后的重要因素 ,而肿瘤的转移大多通过淋巴及血液循环播散。非血液系统的恶性肿瘤在发展过程中 ,肿瘤细胞播散并存活于淋巴系统、血循环、骨髓、肝肾、肺等组织器官中的微小肿瘤灶 ,常无任何临床表现 ,这称为微转移[1] 。常规的检查方法如 :Ｘ线、ＣＴ、ＭＲＩ、单抗放射显影技术以及普通的病理检查对于这些微转移的肿瘤细胞常难以检测。但微小的转移灶会迅速生长 ,成为复发和转移灶 ,因此检测患者淋巴结、骨髓和血液中有无肿瘤细胞对肿瘤的诊断、分期、复发、预后判断及治疗方案的选择都有着重要的指导意义…     

宫颈癌微转移检测研究进展

微转移是指用常规检查方法如影像学、常规病理检查方法难以发现的播散并存活于血循环、淋巴结、骨髓及其他组织器官中的肿瘤细胞.在一些实体瘤的研究中,人们已发现微转移的检出率与患者的预后有密切关系,并可早期诊断肿瘤的复发和远处转移.宫颈癌微转移的检测主要采用免疫组化及PCR技术检测淋巴结、外周血和活检标本中人乳头瘤病毒(HPV)、细胞角蛋白(CK)以及鳞状细胞癌抗原(SCC)的表达.部分研究显示宫颈癌微转移的检测有助于预后判断.     

宫颈癌微转移检测研究进展

微转移是指用常规检查方法如影像学、常规病理检查方法难以发现的播散并存活于血循环、淋巴结、骨髓及其他组织器官中的肿瘤细胞。在一些实体瘤的研究中，人们已发现微转移的检出率与患者的预后有密切关系，并可早期诊断肿瘤的复发和远处转移。宫颈癌微转移的检测主要采用免疫组化及PCR技术检测淋巴结、外周血和活检标本中人乳头瘤病毒（HPV）、细胞角蛋白（CK）以及鳞状细胞癌抗原（SCC）的表达。部分研究显示宫颈癌微转移的检测有助于预后判断。     

原发性肝癌血行转移相关基因的研究

肝细胞癌是常见的恶性肿瘤 ,早期易发生血行播散 ,而血循环中的肿瘤细胞被认为是血行或远处器官转移的指标。目前已提出AFPmRNA和白蛋白mRNA作为循环中存在肝肿瘤细胞的标志物。综述国内、外有关研究 ,探讨其在预测肝细胞癌发生血行转移中的价值以及与其他转移、预后指标的相关性     

基因检测肿瘤微转移

实体肿瘤的主要治疗方法为手术治疗。而根治术后复发、转移率高达５０％以上，微转移是主要原因之一。早期认识有无肿瘤转移、转移方式及范围对临床诊断、治疗及预后判断具有重要意义。近年来随着免疫学及分子生物学的发展，使肿瘤的微转移检测成为可能并成为目前研究热点之一［１］。１微转移的概念 自 １８６９年首次在外周血中发现癌细胞以来，肿瘤微转移逐步引起人们重视。微转移一般指非血液系统的恶性肿瘤在发展过程中，播散并存活于淋巴系统、血循环、骨髓、肝、肺等组织器官中的微小肿瘤细胞灶，常无任何临床表现，常规检查方法如 …     

原发性肝癌血行转移相关基因的研究

肝细胞癌是常见的恶性肿瘤．早期易发生血行播散，而血循环中的肿瘤细胞被认为是血行或远处器官转移的指标。目前已提出AFPmRNA和白蛋白mRNA作为循环中存在肝肿瘤细胞的标志物。综述国内、外有关研究．探讨其在预测肝细胞癌发生血行转移中的价值以及与其他转移、预后指标的相关性。     

血管内皮生长因子C和D与肿瘤淋巴结转移的关系

淋巴系统是人类恶性肿瘤的主要转移途径,几乎所有的肿瘤在局限期时,淋巴结转移是非常重要的不良预后因素。一些动物模型发现,抑制区域性淋巴结转移可以减少远处转移,因此推测肿瘤远处器官的转移需要经过淋巴结。过去认为,肿瘤细胞淋巴道转移是经过肿瘤周围已经存在的淋巴     

Screening and identification of differentially expressed transcripts in circulating cells of prostate cancer patients using suppression subtractive hybridization

Background  

Tumor metastasis and changes in host immunosurveillance are important components in cancer development. Tumor cell invasion into the bloodstream is an essential step for systemic metastasis. Currently, the detection of tumor cells in the circulation is mainly dependent upon the utilization of known epithelial cell markers. However, expression of these molecules is not limited to cancer patients; healthy people also have a small number of epithelial cells in their circulation. Utilizing these markers to detect circulating tumor cells (CTCs) cannot adequately explain the mechanisms of tumor cell survival or their development of metastatic potential in peripheral blood. The immune system can also evolve along with the cancer, actually promoting or selecting the outgrowth of tumor variants. Unfortunately, both metastasis and immunosurveillance remain mysterious and are debatable because we have yet to define the molecules that participate in these processes. We are interested in identifying the existence of expressed genes, or mRNA species, that are specifically associated with circulating cells of cancer-bearing patients using prostate cancer (PCa) as a model.     

CEA mRNA identification in peripheral blood is feasible for colorectal, but not for gastric or pancreatic cancer staging

OBJECTIVE: It has been suggested that the molecular identification of cancer cells in the circulation may be useful in predicting the presence of micrometastasis in several cancer types. The aim of the present study was therefore to assess the feasibility of CEA mRNA identification in blood for diagnosing and staging colorectal, gastric and pancreatic cancer. METHODS: We studied 16 control subjects, 69 patients with colorectal (CRC), 30 with gastric (GC), 27 with pancreatic cancer (PC) and 8 with benign diseases of the pancreatobiliary tree. At diagnosis CEA mRNA was identified in peripheral blood by means of a RT-PCR procedure. RESULTS: The specificity of this test in control subjects was 94%, and its sensitivity in identifying CRC, GC and PC were 34, 37 and 41%, respectively. False-positive findings were recorded in 25% patients with benign diseases. No association was found between CEA mRNA and stage in patients with GC or PC. In CRC patients, positive CEA mRNA findings were correlated with local spread (chi(2) = 14.6, p<0.01), lymph node (chi(2) = 18.95, p<0.001) and distant metastasis (chi(2) = 11.3, p<0.001). In these cases, CEA mRNA, but not CEA, was entered in stepwise discriminant analysis to classify the presence of lymph node metastasis. CONCLUSIONS: The molecular detection of micrometastasis in the blood by means of CEA mRNA identification is feasible for colorectal, but not for gastric or pancreatic cancer staging. Further studies are needed in order to define the clinical utility of this marker also in follow-up protocols.     

骨髓微转移在乳腺癌预后判断中的作用

 目的　探讨骨髓微转移状况与乳腺癌临床病理学指标、生物学因子及预后的关系。方法　采用RT-PCR法检测乳腺癌骨髓组织中人乳球蛋白（hMAM）mRNA表达;免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果　102例Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者骨髓组织hMAM mRNA表达阳性率38.2 %。骨髓微转移率随乳腺癌肿块的增大而增高（P＝0.000）;骨髓微转移与淋巴结转移状况相关（P＝0.001）;临床分期越晚,骨髓微转移率越高（P＝0.001）;组织学分化越差,骨髓微转移率越高（P＝0.001）;浸润性导管癌和浸润性小叶癌的骨髓微转移率较低度恶性乳腺癌组高（P＝0.032）。乳腺癌组织ER蛋白表达阴性组中,骨髓hMAM mRNA表达率高（P＜0.05）。乳腺癌患者骨髓hMAM阳性者易发生远处转移（P＝0.009）。结论　乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子有一定相关性;微转移阳性者发生远处肿瘤转移的概率高,预后差;骨髓微转移检测可以作为判断乳腺癌预后的指标之一。     

循环肿瘤细胞检测与结直肠癌复发转移的研究进展

结直肠癌发病率在逐年上升,转移和复发是结直肠癌死亡的主要原因。血液循环中的肿瘤细胞可能具有增生能力或转移潜能,循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）的检测为预测评估复发转移及疗效、肿瘤分期及个体化治疗提供了一个可靠手段,随着检测技术的不断优化发展,将为临床提供更好的支持。本文旨在对CTC检测与结直肠癌复发转移等方面的研究进展进行综述。      

巢式RT-PCR检胃癌患者外周血循环癌细胞的研究

目的　分析胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的异常表达及意义。方法　采用RT PCR方法检测 5 2例胃癌患者术前外周血中CK 2 0mRNA及CEAmRNA的表达。结果　胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为 42 .3 % (2 2 /5 2 )及 5 1.9% (2 7/5 2 ) ,CK 2 0mRNA和CEAmRNA两者中至少 1个基因为阳性的表达率为 63 .5 % (3 3 /5 2 )。胃癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达与胃癌的远处转移有关 ,CEAmRNA表达、CK 2 0mRNA和CEAmRNA都表达、CK 2 0mR NA和CEAmRNA两者中至少 1个表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和远处转移相关 (P <0 .0 5 )。结论　胃癌患者外周血CK 2 0和CEA的RT PCR检测有助于患者预后的判断 ;联合检测CK 2 0mRNA和CEAmRNA可增加外周血循环癌细胞检测的敏感性     

宫颈癌前哨淋巴结微转移的研究与应用现状

宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,其主要转移途径为淋巴结转移。前哨淋巴结是肿瘤发生淋巴结转移的第一站,由于传统组织病理学检查具有一定的局限性,使某些存在于前哨淋巴结的微转移或孤立肿瘤细胞被忽略,使其发展成为临床转移。怎样把前哨淋巴结示踪与微转移检测技术两者结合,是近年来研究的热点,其具有重要的临床意义,可以使得某些宫颈癌患者避免不必要的盆腔淋巴结清扫术,从而降低手术并发症。本文就近年来对宫颈癌前哨淋巴结微转移的研究及临床应用现状做一综述。     

Occult neoplastic cells and malignant micro-aggregates in lymph node sinuses: review and hypothesis

Many studies have shown a close relationship between the detection of occult neoplastic cells (ONCs) freely floating in lymph node sinuses remote from the primary tumor and the recurrence/metastasis of various malignancies. If 5 to 10 circulating ONCs form an aggregate of tumor cells, it may easily escape attack by the host immune system. Since such malignant micro-aggregates cannot pass through the circulation in the liver and lungs, which filter tumor cells from the blood, the aggregates may become anchored in these organs and cause metastasis. A hypothesis is proposed that the most important factor leading to distant metastasis/recurrence of stage I or II cancer without microscopic lymph node metastasis, so-called N0 local disease (N0-LD), is the release of malignant micro-aggregates consisting of many ONCs from the primary tumor. Distant metastasis/recurrence of N0-LD may occur when such infiltrating/proliferating cells enter target organs, especially the liver and lungs, in a viable state during their first pass through the circulation preoperatively and/or intraoperatively.     

RT-PCR法检测外周血LUNX-mRNA诊断非小细胞肺癌微转移的研究

 目的　探索检测中早期非小细胞肺癌外周血微转移的理想途径以及手术对促进微转移的影响。方法　对 2 0例可手术的中早期非小细胞肺癌分别于术前、手术刚结束、术后一周取外周血 ,用RT PCR法检测肺癌特异性基因LUNX的表达情况 ,并与肺部良性疾病患者外周血LUNX基因的表达进行对比。结果　在被检测的 2 0例患者中 ,有 9例在不同时期被检测到有LUNX基因表达 ,而肺部良性疾病患者外周血均未发现LUNX基因表达。结论　RT PCR法检测外周血LUNX mRNA是理想的诊断非小细胞肺癌微转移的方法 ;手术治疗可以减少肺癌患者术后远处转移的发生 ;手术操作可能促进肿瘤细胞向外周血的脱落     

胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶mRNA表达及其临床意义

目的研究胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶（hTERT） mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用TaqMan 实时定量RT-PCR法检测58例患者、20名健康对照者外周血hTERT mRNA的表达,随访2年。结果胃癌患者外周血hTERT mRNA阳性率为55.17%,显著高于健康对照组（P＜0.001）;hTERT mRNA表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和临床分期相关,其中淋巴结转移和远处转移是影响hTERT mRNA 表达的独立因素;近期疗效无效的患者hTERT mRNA 的阳性率显著高于近期疗效有效的患者（P=0.003）。化疗前hTERT mRNA阳性与阴性患者的1年生存率分别是28.13%和76.92%。结论外周血hTERT mRNA可作为检测胃癌患者微转移的分子标志,定期监测有助于评估化疗疗效和预测预后。淋巴结转移和远处转移与hTERT mRNA 表达密切相关。