Neuritin基因在肺癌及正常肺组织中表达的检测

目的:了解neuritin基因在肺癌组织中的表达情况,探讨neuritin基因表达与肺癌发生发展的相关性.方法:收集肺癌、正常肺石蜡及新鲜组织标本,利用免疫组化检测组织中neuritin的表达情况.利用RT-PCR方法检测新鲜肺癌及正常肺组织中neuritin mRNA表达.结果:肺癌组织中neuritin的表达高于正常肺组织,差异有统计学意义(p＜0.05).结论:neuritin在肺癌组织和正常肺组织表达存在显著差异,提示neuritin表达可能与该肿瘤的发生发展相关.     

抗癌药对人结肠癌细胞株P53蛋白表达的影响

采用PCR-DNA序列分析方法检测6例人结肠癌细胞株P53基因突变及突变位点，应用免疫组化方法检测上述细胞P53蛋白改变。结果表明：6例细胞株中，4例显示p53基因突变，P53蛋白亦呈阳性表达，其余2例则为阴性，对两种方法检测均呈阳性者，再进行抗癌药物处理，结果显示，P53蛋白表达强弱与药物作用时间长短有关，经药物作用2h者，P53蛋白表达明显减低，作用10h者，蛋白表达更加减弱，说明抗癌药物对P53蛋白表达有较明显影响。     

用BC2单抗检测人正常腺上皮组织中MUC1基因的表达

目的：揭示ＭＵＣ１基因在人正常腺上皮中的表达规律。方法：用ＢＣ２单克隆抗体和ＡＢＣ免疫组织化学方法检测腺上皮组织中的ＭＵＣ１核粘蛋白的表达。结果：ＭＵＣ１核粘蛋白主要分布于胃粘膜的上皮层和基底部，上皮层内以核周明显，腺颈及基底部呈弥漫胞浆型；胃窦，胃底的表达无差异。     

人睾丸组织发育过程中EGF表达的动态研究

目的：研究EGF（表皮生长因子）在人胚胎睾丸组织发育过程中的表达。方法：收集30例12－32周龄胎儿睾丸组织标本，免疫组织化学染色，光镜观察。结果：EGF在人胚胎睾丸组织间质细胞呈阳性表达，在曲细胞精内精原细胞，支持细胞，管周肌样细胞未见阳性表达，EGF在12周龄睾丸组织未见阳性表达，16周时是表达的高峰，此后呈逐渐下降趋势（P＜0．01），结论：EGF在人胚胎睾丸组织发育过程中可能起着形态学和生理学作用。     

肾细胞癌组织与正常组织中VEGF165b的差异表达及其意义

目的:研究血管内皮生长因子165b(Vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肾细胞癌(Renal cell carcinoma,RCC)组织和正常组织中的表达情况,初步探讨其与肾细胞癌发生发展的关系.方法:(1)用S-P免疫组化法检测30例肾细胞癌组织和29例正常肾组织中VEGF165b蛋白的表达情况;(2)用RT-PCR法分别检测32例肾细胞癌组织和30例正常肾组织中VEGF165b mRNA的表达情况.结果:(1)正常肾组织中VEGF165b蛋白表达率为96.55%(28/29),肾细胞癌组织中VEGF165b蛋白的表达率为20.00%(6/30),表达差异有统计学意义(P<0.05). (2)正常肾组织中VEGF165b mRNA阳性表达率为93.33%(28/30),肾细胞癌组织中VEGF165b mRNA的阳性表达率为18.75%(6/32),具有统计学意义(P相似文献   

人肺癌组织中神经降压素的异位表达

探讨神经降压素在肺组织内的分布及临床意义。方法采用免疫组织化学ＳＰ法对４３例肺癌病人肿瘤组织中ＮＴ进行标记。结论肺癌组织可合成，分泌ＮＴ，且其在肺癌分化的判定及肺吕诊断中具有一定的应用价值。     

人睾丸发生过程中NGF表达的研究

目的：研究NGF（神经生长因子）在人胚胎睾丸发生过程中的表达。方法：收集30例12－32周龄胎儿睾丸标本，免疫组织化学ABC法染色，以正常羊血清代替－抗为阴性对照，NGF抗血清的工作浓度为1：100，光镜观察。结果：NGF在人胚胎睾丸组织间质细胞、持支细胞和管周肌样细胞均有表达，曲细精管内精原细胞未见阳性表达，NGF在12周龄睾丸组织未见阳性表达，16周时是表达的高峰，此后呈逐渐下降趋势。结论：NGF在人胚胎睾丸发生过程中有重要作用。     

Twist在几种不同肿瘤细胞系中的差异表达

目的：探讨Twist基因在不同肿瘤细胞系中的表达水平。方法：运用RT-PCR方法检测Twist在人类乳腺癌、结肠癌、肾癌、胃癌、肝癌、正常肝细胞等6种细胞系中mRNA水平上的表达。结果：正常肝细胞系中Twist的相对表达量最低,在不同癌细胞系中,结肠癌的相对表达量最高,肝癌最低,组间差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：Twist在不同肿瘤细胞系中的表达差异性可能为肿瘤发生发展的研究以及肿瘤的诊断与鉴别诊断提供一定线索。     

人CD123稳定表达细胞株的建立与鉴定

目的探索建立人CD123稳定表达细胞株的方法,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产提供材料。方法构建人CD123 CDS区真核表达载体(hCD123 CDS-pEGFP-N1);经脂质体包裹转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-S;经流式分选结合G418筛选,并用流式细胞术和Western印迹法检测人CD123蛋白的表达情况,初步筛选出人CD123高表达的CHO-S细胞株;并进一步用经人CD123 Fc重组融合蛋白免疫的小鼠血清检测该细胞株hCD123表达情况。结果测序及GenBank中序列比较结果显示扩增到的人CD123基因序列是正确的,酶切结果表明表达质粒构建正确;流式分选结合G418筛选得到1个人CD123高表达的细胞株——克隆8G9 CHO-S,其CD123-APC阳性细胞百分数为92.07%,用融合蛋白免疫的血清检测各细胞株人CD123表达情况,结果显示克隆8G9 CHO-S细胞和对照CHO-S细胞的CD123阳性率分别为(97.94±1.93)%和(2.84±1.35)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论建立了人CD123抗原稳定高表达的细胞株克隆8G9 CHO-S,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产及其导向治疗奠定了坚实的基础。     

Neuritin过表达对BMSCs增殖的影响

目的：为全面了解Neuritin的功能,探讨Neuritin对细胞增殖的影响。方法：利用已构建Neuritin真核表达载体pcDNA3.1（-）A-Neuritin,转染BMSCs,通过MTT、细胞计数等观察Neuritin过表达对BMSCs增殖的影响。结果：MTT检测结果显示,BMSCsneu约在第3天进入对数生长期,第5天进入平台期;细胞计数结果显示,Neuritin过表达与BMSCs的数目呈负相关,并且在各检测点上,稳定表达Neuritin的BMSCs数目均低于对照组。结论：Neu-ritin过表达抑制了BMSCs的增殖。     

RCAS1在多种肿瘤细胞系中的表达

目的采用多种方法检测多种肿瘤细胞系中S iSo细胞表达的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)的表达情况。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)、Northern b lot检测、免疫组化法和酶联免疫吸附实验对10个人肿瘤细胞系及2个正常人细胞系RCAS1分子的表达进行了检测。结果实时定量PCR及Northern b lot结果显示,除了正常肝细胞LO2,各肿瘤细胞及正常人胚肾细胞293均见RCAS1 mRNA表达;免疫组化见各肿瘤细胞和293细胞的细胞膜和细胞浆中均有RCAS1蛋白,但在LO2细胞中未见RCAS1蛋白;除了HuH-7和LO2细胞,其余10个细胞培养上清液中的RCAS1蛋白量均明显高于DMEM全培液(P<0.001)。结论RCAS1广泛表达于多种肿瘤细胞系中。     

水通道蛋白及其mRNA在正常大鼠肾脏的表达

目的 :明确水通道AQP2在正常大鼠肾脏的表达情况。方法 :采用免疫组化及RT PCR方法检测AQP2蛋白及其mRNA水平的表达。结果 :表明AQP2仅在大鼠集合管表达 ,肾脏其它部位无表达 ,其它组织器官亦无表达。结论 :集合管是肾脏唯一将钙和水代谢机制联系起来的部位 ,推测此部位信号传导异常可能导致结石形成。     

Neuritin在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定

目的：构建Neuritin的毕赤酵母分泌表达系统,为进一步探讨Neuritin的生物学功能及作用机制奠定基础。方法和结果：在巳克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF与载体pPIC9k重组,然后利用电击转化将重组质粒pPIC9k—Neuritin导入GSll5酵母菌株。筛选出阳性克隆经PCR及测序正确后,用甲醇诱导Neuritin分泌表达;表达产物经SDS—PAGE及Western—blot鉴定。结论：成功构建Neuritin的毕赤酵母分泌表达系统。     

乳腺癌组织中神经营养因子Neuritin的表达及其临床意义

目的：观察神经营养因子Neuritin蛋白和mRNA在人乳腺癌组织中的表达及其
与临床病理特征的关系,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法： 收集74例乳腺癌组织
标本和12例正常乳腺组织标本,采用免疫组织化学和Western blotting法检测标本中Neuri
tin蛋白的阳性表达率和表达水平,利用RT-PCR法检测标本中Neuritin mRNA的表达水平。结
果：Neuritin蛋白在正常乳腺组织中阳性表达率为25%,在乳腺癌组织中阳性表达率为70.62%,
乳腺癌组织中Neuritin蛋白阳性表达率高于正常乳腺组织(P<0.05),且其在乳腺癌肿瘤细胞中定位于细胞核和细胞质。Neuritin蛋白的阳性表达率与乳腺癌淋巴
结转移、TNM分期和ER/PR/HER2高阳性率有关联(P<0.05)。与正常乳腺组织比较,Ⅰ-Ⅱ
期及Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01);与Ⅰ
-Ⅱ期乳腺癌组织比较,Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中Neuritin蛋白和mRNA表达水平亦升高(P<0.05)。结
论：Neuritin可能是促进乳腺癌发生发展的一个重要基因,也可能是治疗乳腺癌的关键靶向分子。
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基质金属蛋白酶在乳头状甲状腺癌中的表达

目的：研究基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase，MMPs）基因在乳头状甲状腺癌中的表达。方法：手术中获得的乳头状甲状腺癌、甲状腺腺瘤、桥本氏炎症及正常甲状腺组织的新鲜标本共31例，提取其总RNA，然后进行RT-PCR，比较MMP-2、MMP-9与MMP-14在不同疾病组织中的表达差异。结果：3种MMPs基因在乳头状甲状腺癌中的表达阳性率显著高于腺瘤、桥本氏炎症和正常甲状腺组织。结论：MMPs基因在乳头状甲状腺癌中表达增高与癌的发生有关。     

正常人肝细胞中HBV-PHSA受体基因表达的研究

作者根据乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｄｒ型ＰｒｅＳ２基因序列设计合成一对聚合酶链反应（ＰＣＲ）引物，经特异性试验后，用于扩增正常人肝细胞中多聚人白蛋白受体（ＰＨＳＡｒ）基因转录产物。结果：ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＮＡ－ＰＣＲ扩增结果均为阳性，而相应骨骼肌总ＲＮＡ扩增结果呈阴性，提示乙型肝炎病毒ＰｒｅＳ２区与ＰＨＳＡｒ基因外显子序列具有一定程度的同源性；同时表明ＰＨＳＡｒ基因在肝组织中处于表达状态，而对ＨＢＶ不敏感的组织如骨骼肌则不表达。该研究结果与其它ＨＢＶ－ＰＨＳＡｒ研究相比，进一步证实了ＰＨＳＡｒ在ＨＢＶ感染肝细胞的作用。     

CD3AK细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用

目的研究ＣＤ３ＡＫ细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用。方法应用抗ＣＤ３单克隆抗体及重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）刺激培养ＣＤ３ＡＫ细胞,体外实验研究ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及对人肺癌细胞株Ａ５４９、ＳＰＣ－Ａ１细胞的杀伤能力。结果刺激培养４ｄ,ＣＤ３ＡＫ细胞增殖及杀伤能力与ＬＡＫ细胞无差异;培养８ｄ,ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及杀伤能力明显优于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）;培养１６ｄＣＤ３ＡＫ细胞仍见增殖,且杀伤作用保持在５０％以上。结论ＣＤ３ＡＫ中细胞作为一种新的肿瘤过继性免疫治疗效应细胞具有潜在的临床应用价值。     

人角膜缘干细胞初步建系研究

目的：探讨建立人角膜缘干细胞系，为组织工程研究提供足够的细胞储备。方法：取健康人角膜缘深部色素区组织块，经消化后，在含有RPMI—1640、20％胎牛血清的培养瓶和以羊膜细胞外基质为培养载体的培养皿中分别进行体外培养，并对连续传代的细胞行光镜、扫描电镜观察，比较细胞形态的变化并进行细胞计数与冻存处理。结果：人角膜缘干细胞具有人上皮细胞培养的特性，在培养液中传33代后，细胞仍然保持旺盛的分化、增殖能力，并且更适宜在羊膜细胞外基质上生长；目前我们冻存细胞的复苏率为82．2％。结论：将人角膜缘干细胞经体外培养33代并逐代冻存后初步建立了人角膜缘干细胞系。     

重组人B淋巴细胞刺激因子基因原核表达载体的构建及鉴定

目的构建人BLyS基因原核表达载体。方法采用RT-PCR方法,从人外周血淋巴细胞的总cDNA中扩增得到474bp的人BLySDNA片段,再用BamHI和EcoRI双酶切后,克隆到原核表达载体pGEX-5X-3中,用限制性内切酶酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒。结果BLyScDNA已经正确克隆到原核表达载体pGEX-5X-3中。结论本实验为研制抗人BLyS单克隆抗体来研究人BLyS与自身免疫性疾病的关系奠定了基础。