人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 克隆中国人的肥胖基因，并在大肠杆菌中高效表达人瘦素蛋白。方法 用RT-PCR从培养的中国人脂肪细胞提取的总RNA中扩增出肥胖基因，与TA载体连接后进行核酸序列测定．并将该基因定向克隆至高效表达质粒pBV220，在大肠杆菌中表达。结果 克隆出中国人肥胖基因，其cDNA序列与献报道的一致，构建了重组质粒pBV220-OB，并成功地实现了人肥胖基因在大肠杆菌中的表达。结论 人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达，为进一步研究该基因在肥胖症及其相关疾病中的作用，以及在脂肪代谢与脂肪细胞分化中的调控机制奠定基础。     

辽宁中年汉族人群IRS-2G1057D突变筛查及其意义

目的筛查中国辽宁地区中年汉族人群IRS-2基因G1057D突变并探讨其意义。方法选取辽宁汉族40-60岁健康者221人，其中肥胖组113人，非肥胖组108人。运用PCR-RFLP方法，筛查IRS-2G1057D突变。同时结合2型糖尿病（T2DM）发病机制相关的胰岛素分泌及其作用的8项参数水平的检测，明确该突变与T2DM的相关性。结果IRS-2G1057DHae Ⅱ限制酶切的电泳结果为：正常纯合子GG型为183和102bp两条带；杂合子GD型为285、183和102bp三条带；突变纯合子DD型为285bp一条带；IRS-2G1057D的D等位基因频率在总研究人群中为29．6％，在肥胖及非肥胖人群中分别为24．3％和35.2％；非肥胖组DD基因型的FPG及OGTT的2hCP均低于同组GG基因型（P〈0．05，P〈0．01），HOMAB高于同组GG基因型（P〈0．01）；肥胖组DD基因型的OGTT的2hCP及HOMAIR均高于同组GG基因型（P〈0．01，P〈0．01）；肥胖组DD基因型的WHR高于同组GG基因型（P〈0．05）。结论携带DD基因型的非肥胖者胰岛素敏感性增高，而携带DD基因型的肥胖特别是中心性肥胖者的胰岛素敏感性却降低，提示IRS-2G1057D突变以肥胖为中介与T2DM相关联。     

解密肥胖基因——FTO

长久以来，人们认为某些基因突变可能与肥胖的发生相关，但经过艰苦的探索一直未找到相关基因。在寻找2型糖尿病的致病基因过程中，人们发现了一个新的基因——FTO基因，推断该基因可能与2型糖尿病的发生相关。但一项通过对39000人基因筛查的研究发现了有特定FTO突变的2个拷贝，同时携带FTO基因突变的人在研究过程中体重增加了3kg，从而使研究人员很快发现FTO的真正作用是参与肥胖的发生发展，     

广西壮汉人群肥胖基因第一外显子的多态性分析

目的：探讨广西肥胖症、非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)是否与肥胖基因突变有关，同时观察广西壮族汉族人群的肥胖基因(ob基因)多态性。方法：将296例研究对象分为三组：肥胖47例，NIDDM79例，对照组170例，用PCR法扩增各组ob基因的第一外显子，再用改良的SSCP法对PCR扩增片段进行分析比较，并对异常扩增片段测序。结果：广西壮族人ob基因第一外显子存在多态性A75→T。结论：ob基因第一外显子突变并非导致肥胖症、NIDDM的普通原因。     

人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 克隆中国人的肥胖基因,并在大肠杆菌中高效表达人瘦素蛋白。方法 用RT-PCR从培养的中国人脂肪细胞提取的总RNA中扩增出肥胖基因,与TA载体连接后进行核酸序列测定,并将该基因定向克隆至高效表达质粒pBV220,在大肠杆菌中表达。结果 克隆出中国人肥胖基因,其cDNA序列与文献报道的一致,构建了重组质粒pBV220-OB,并成功地实现了人肥胖基因在大肠杆菌中的表达。结论 人肥胖基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达,为进一步研究该基因在肥胖症及其相关疾病中的作用,以及在脂肪代谢与脂肪细胞分化中的调控机制奠定基础。     

正常体质量和肥胖患者血清瘦素浓度比较

Ob基因是脂肪细胞特有基因，它编码瘦素的氨基酸序列，而瘦素这种蛋白质具有调节体质量的功能。发生ob基、因突变的大鼠血液中缺乏瘦素，结果引起肥胖；在使用重组的瘦素以后，体质量下降。研究报道，肥胖患者ob基因的表达比正常体质量的人高。本研究探讨血清中瘦素浓度与体质量的相关性，以及减肥后血清瘦素浓度是否下降，从而阐明瘦素与肥胖的关系。     

青春期瘦素水平及其影响因素的研究

1994年Zhang等在遗传性肥胖小鼠 (ob/ob小鼠 )的脂肪组织中采取定位克隆技术 ,首次克隆出小鼠的肥胖基因 (obgene) [1] 。随后Jesse等又成功克隆了人的肥胖基因 ,该基因位于 7q31 3,为单考贝基因。肥胖基因的表达产物即为“瘦素”。它是一种多肽类激素 ,属于细胞因子家族。血清     

RAS基因多态性与肥胖相关性的研究进展

肥胖为多基因遗传性疾病，其基因多态性与肥胖的关系是目前热门研究。目前国内外均有大量研究分析了肾素血管紧张素系统基因多态性与肥胖的关系。本文就肾素-血管紧张素系统(RAS)主要组成及生物学功能进行论述，并重点讨论ACE基因、MRAS基因和NOS3基因与肥胖的相关性。     

基因多态性与儿童肥胖关系的研究进展

儿童肥胖的病因十分复杂,发生原因及机理至今尚未完全明确,但已确定主要与遗传和环境因素有关,基因的多态性是肥胖发生的重要遗传因素之一.从基因水平上,目前发现已有200余种基因位点与肥胖的发生有关,并且发现不同的基因变化所引起的脂肪聚集部位、肥胖表型是不同的.因此环境相互作用下的多基因参与才是大多数人发生肥胖的原因所在.本文结合本研究组研究结果综述调节能量摄入的基因、调节能量消耗的基因、影响脂肪细胞储存脂肪的基因及其他诸如胰岛素受体底物受体等基因多态性与儿童肥胖的关系.     

人肥胖基因的克隆与原核表达载体的构建

目的：克隆人肥胖基因瘦素蛋白（leptin）编码区cDNA序列，并构建其原核表达载体。 方法：在人体脂肪组织中提取mRNA，利用RT-PCR扩增人肥胖基因，将其插入pMD18-T载体，经双酶切、鉴定后将肥胖基因片段亚克隆入pET-28a表达载体，提取质粒。将阳性重组质粒转化表达受体菌E.coliBL21(DE3)，经IPTG诱导肥胖基因表达产物,以聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测产物蛋白。 结果：经测序证实获得的肥胖基因序列与相关文献报道一致，其表达产物的相对分子质量约为20 000。 结论：利用pMD18-T克隆载体和pET-28a表达载体可以有效地在原核生物中表达重组人类瘦素蛋白。     

儿童肥胖发病基因研究

肥胖是全世界所关注的问题 ,它不但影响了人的身体健康 ,也影响到人们的日常生活 ,而儿童的肥胖则是众多肥胖的类型之一 ,直接影响到儿童的身心健康。肥胖的病因极其复杂 ,包括环境、饮食及遗传等多种因素。本文主要从基因角度谈谈儿童肥胖的病因问题。1　ｏｂ基因与肥胖抑素 (ｌｅｐｔｉｎ)　　 1 994年有人利用定位克隆的方法成功克隆了小鼠的肥胖相关基因之一———ｏｂ基因 ,并且发现正是由于该基因突变造成的生理生化过程改变导致了小鼠的肥胖。ｏｂ基因序列在脊椎动物中具有高度的保守性 ,其定位于人类染色体 7ｑ3 1 .3上。ｏｂ基因在…     

肥胖基因,瘦素与肥胖

肥胖是心血管病、糖尿病的重要危险因素，日益受到人们的重视。Ob基因和Ob受体基因的发现为肥胖的研究开辟了新的途径。目前尽管在动物试验中发现Ob基因可致肥胖，但人类筛查Ob基因突变的研究结果提示，大多数肥胖者的肥胖并不是由于Ob基因突变所致。Ob基因的产物Leptin(瘦素)，受多种因素调节，血Leptin水平主要取决于下丘脑的体重调节中枢，其可引起食欲降低，能量消耗增加，抑制脂肪合成而减轻体重。人类肥胖者存在Leptin抵抗，在肥胖的发生中起重要作用，但其发生的确切机制有待于进一步研究。同时胰岛素也是Ob基因表达的重要调节因素。空腹血浆胰岛素与血浆Leptin浓度正相关，胰岛素抵抗从某种意义上说是肥胖机体为防止进一步增重而产生的一种代偿机制。目前研究发现Leptjn受体基因突变与人类肥胖有关。但仍需进行深入研究。总之，人类肥胖是多基因遗传和环境双重因素共同作用的结果。     

Leptin与糖尿病

Leptin为ob基因的表达产物,参与能量代谢、调节体重,其与肥胖症关系的研究已相当深入.近年来的研究发现leptin与糖尿病患者的肥胖,糖、脂、胰岛素代谢以及糖尿病合并妊娠等关系密切.本文就这方面的研究进展作一综述.1 0b基因和leptin ob基因广泛存在于脊椎动物体内,其突变可致动物和人的肥胖表型[1,2],因而有人称之为肥胖基因.人0b基因位于7q313,全长18kb,其编码区核苷酸序列与小鼠有84%的同源性,人和小鼠ob基因均包含3个外显子和2个内含子[3].     

瘦素与胰岛素及胰岛素抵抗

1994年Ｚｈａｎｇ等[1]采用定位克隆技术首次克隆出小鼠的肥胖 (ｏｂ)基因并得到其编码的蛋白产物瘦素 (ｌｅｐｔｉｎ) ,使医学界对肥胖的研究有了很大的进展 ,后来大鼠和人的ｏｂ基因也相继被克隆定位。由于瘦素与肥胖之间有直接联系 ,肥胖与 2型糖尿病、高血压、高血脂及冠心病这些与胰岛素抵抗相关的代谢综合征也常相伴随 ,近年来医学家们在不断地寻找瘦素与胰岛素及胰岛素抵抗之间的相互关系 ,期望在预防和治疗相关代谢综合征方面取得新的突破。1　ｏｂ基因和瘦素小鼠的ｏｂ基因位于第 6号染色体 ,人的ｏｂ基因位于 7ｑ31 .3,长约 2 0ｋ…     

成都地区肥胖患者脂肪酸结合蛋白2基因Ala54Thr多态性研究

目的 研究脂肪酸结合蛋白2基因(fatty acid-binding protein 2,FABP2)Ala54Thr多态性是否与中国人肥胖有关联.为探讨肥胖的分子遗传基础提供依据.方法 应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)对成都地区272例非肥胖者及121例肥胖患者FABP2基因Ala54...     

肥胖男性β3肾上腺素能受体基因多态性研究

目的研究单纯性肥胖男性β3肾上腺素能受体（β3-adrenergic receptor，β3-AR）Trp64Arg多态性的分布情况及对肥胖类型的影响。方法利用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）方法检测单纯性肥胖患者及正常对照β3-AR基因Trp64Arg突变。进一步比较不同类型肥胖中突变的发生率。结果β3-AR基因Trp64Arg突变频率在正常对照组、周围性肥胖组及中心性肥胖患者中分别为16．67％、21．05％、34．78％，Arg等住基因在3组中的频率依次为8．33％、10．53％、19．57％。中心性肥胖患者Trp64Arg突变及Arg等住基因频率较正常对照及周围性肥胖者明显增加，但无统计学差异。结论β3-AR基因Trp64Arg突变可能与男性单纯肥胖者腹内脂肪积聚有关，对此需进一步扩大样本后加以研究。     

β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y Y5受体反义基因治疗中的作用

目的：探讨β3肾上腺素能受体基因在肥胖大鼠神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因治疗中的作用。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、错义寡核苷酸或生理盐水，测定肥胖大鼠的腹腔内脂肪组织湿重与血脂，并采用RT-PCR技术检测腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平。结果：①高营养饮食诱导下肥胖模型大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠；②经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠的腹腔脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中β3肾上腺素能受体基因的表达水平则显著高于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著降低肥胖大鼠的体脂、血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织β3肾上腺素能受体基因的表达上调有关。     

瘦素的检测及其临床应用

瘦素(1eptin,简称LP)是脂肪细胞合成并分泌的调节机体能量代谢的一种蛋白类激素.1994年由Zhang等人[1]首次用从肥胖小鼠中成功地克隆出肥胖(ob)基因,是其基因编码的蛋白产物.     

肥胖病因及发病机制的多基因多因素分析

目的：为了解多候选基因及其它相关因素在单纯性肥胖发生中的意义。方法：在92名正常对照者，219名肥胖患者中进行了多元线性回归和多因素条件Logistic回归分析。结果：多元线性回归分析发现，肥胖发病PC-1基因Q等位基因型，Bβ3-AR基因Arg64变异，腰臀围比值，平均血压，收缩期血压水平，舒张期血压水平，空腹、餐后血糖水平，空腹、餐后胰岛素水平，空腹、餐后C肽水平、载脂蛋白B水平呈显著正相关。经调整其它变量后，多因素务件Logisitic回归分析显示，PC-1基因Q等位基因，β3-AR基因外显子64位Arg变异，空腹C肽水平，胰岛素敏感指数、舒张期血压水平依然与肥胖的发生呈显著相关，而其它指标则不具统计学意义。结论：遗传因素是肥胖病发生的主要危险因素，胰岛素抵抗、血压升高也是肥胖发生的独立危险因素。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肥胖、瘦素的关系

瘦素是肥胖基因编码的蛋白产物，具有调控体重的作用，而肥胖患者易患阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）。本文OSAHS、肥胖和瘦素三者之间相互关系进行综述。