复发及难治急性髓细胞白血病病人多药耐药基因检测及意义

目的研究复发及难治急性髓细胞白血病（AML）病人多药耐药基因（mdr1）的表达及其与临床疗效的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测65例AML病人（其中初诊组38例,完全缓解组14例,复发难治组13例）、27例非白血病病人和健康人（包括健康人15例、缺铁性贫血病人10例、特发性血小板减少性紫癜病人2例）mdr1基因的表达水平,并分析其临床意义。结果AML病人mdr1基因表达阳性率高于对照组,复发难治组mdr1基因表达阳性率高于初诊组和完全缓解组,临床耐药组mdr1基因表达阳性率显著高于非临床耐药组,CR率非临床耐药组显著高于临床耐药组,差异均有显著性（χ^2=8.334～49.630,P〈0.01）。结论mdr1基因阳性表达与AML病人临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素,可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一。     

急性髓系白血病中乳腺癌耐药蛋白基因表达与临床意义

目的  研究急性髓细胞白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因的表达以及在预后判断中的意义。方法  构建实时定量PCR检测BCRP基因表达的技术，定量检测20例初治组AML患者、20例完全缓解组AML患者及20例难治复发组AML患者BCRP基因的表达水平，分析其在AML患者和非血液系统恶性肿瘤患者中的差异及与临床疗效的关系。结果  急性髓系白血病患者中BCRP的表达高于对照组（P <0.01），初治组、完全缓解组、难治复发组的BCRP表达均存在差异（P <0.01），其中难治复发组表达最高，初治组次之，完全缓解组最低。结论  BCRP基因在急性髓系白血病患者中表达增高，BCRP的表达水平可能是疾病进展的重要标志，可能是AML的独立危险因素。

     

急性髓性白血病多药耐药基因的表达及其临床意义

目的 探讨急性髓性白血病（AML）多药耐药基因mdrl表达与临床耐药和化疗疗效的关系。方法 应用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR），检测30例AML患者骨髓和10名正常人外周血单个核细胞中mdrl基因的表达。结果 正常对照组均为阴性表达。AML初治组mdrl阳性率为26.32%，而复发难治组mdrl阳性率为81.82%，两组之间存在明显差异（P＜0.01)。初治组中mdrl阳性患者的首次完全缓解率（20.00%)明显低于mdrl阴性患者的首次完全缓解率（85.71%)（P＜0.01)。结论 AML的mdrl基因过度表达与临床耐药密切相关，是判断疗效及预后的一个重要指标。     

FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病免疫表型 及临床特征分析

目的 讨论FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病（AML）的免疫表型及临床特征。方法 回顾性 分析2015 年6 月—2017 年6 月中国医科大学附属第四医院收治的FLT3-ITD+ 及FLT3-ITD- AML 组患者的 免疫表型、临床资料,并对两组患者化疗后临床结局及生存状况进行比较。结果 FLT3-ITD+ AML 组患者 CD56、CD33、CD11b 及CD7 表达高于FLT3-ITD- AML 组（P <0.05）,而CD34、CD117 表达低于FLT3- ITD- AML 组（P <0.05）。与FLT3-ITD- AML 组患者比较,FLT3-ITD+ AML 组患者外周血白细胞计数及骨 髓原始细胞比例升高（P <0.05）,而血红蛋白及血小板计数比较,差异无统计学意义（P >0.05）;FLT-ITD- AML 组患者总反应率高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）;FLT3-ITD- AML 组患者无病生存率和总生存率 高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）。FLT3-ITD+ AML 组患者完全缓解患者CD56、CD34、CD11b、CD7、 CD33 及CD117 的表达水平低于未缓解患者（P <0.05）。结论 FLT3-ITD+ AML 患者白血病细胞抗原表达 紊乱,外周血白细胞及骨髓原始细胞高,完全缓解率低,预后差,是AML 预后不良因素。AML 患者早期检测 FLT3-ITD 突变及免疫分型对于指导治疗、判断预后具有重要临床意义。     

BAALC蛋白在急性白血病中的表达及其临床意义

目的探讨脑和急性白血病胞质（Brain and acute leukemia cytoplasmic,BAALC）蛋白在急性髓细胞性白血病（Acute myeloid leukemia,AML）的表达及其临床意义。方法采用Western blot方法半定量检测BAALC蛋白在58例AML患者（初诊24例、完全缓解28例和复发6例）的骨髓单个核细胞（Bone marrow mononuclear cells．BM-MNCs）的表达水平。15例非恶性血液病患者以及AML细胞系KG1a和HL-60分别作为阴性和阳性对照。结果KG1a和HL-60细胞BAALC均为阳性高表达,非恶性血液病对照者BAALC表达均为阴性。BAALC阳性率在AML初诊组（83．3％）与复发组（100％）均高于完全缓解（CR）组（7．1％）和阴性对照组（0）（P〈0．001）;AML初诊组和复发组的BAALC蛋白相对含量明显高于CR组和阴性对照组（P〈0．01）,且CR组和阴性对照组之间BAALC表达阳性率和相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论BAALC蛋自在AML中表达水平异常增高,提示BAALC可能与AML的发生发展密切相关。     

β连环蛋白在急性髓系白血病的表达及意义

目的研究β连环蛋白在急性髓系白血病中的表达及意义。方法采用半定量RT-PCR方法分别检测20名健康对照者及107例AML患者β连环蛋白基因的表达。结果20名正常人骨髓单个核细胞（MNC）中β连环蛋白基因表达阳性率为25%（5/20）。在107例急性髓细胞白血病（AML）中,初治AML患者β连环蛋白基因表达阳性率为57.3%（47/82）;复发/难治AML患者阳性率为80%（20/25）;β连环蛋白基因表达阳性者完全缓解（CR）率（44.7%）明显低于β连环蛋白基因表达阴性者（80%）。结论β连环蛋白基因的表达在初治和复发/难治AML患者有差异;β连环蛋白基因表达阳性者CR率低,β连环蛋白基因的表达与AML预后有一定关系。     

急性髓细胞白血病患者环氧化酶-2与骨桥蛋白表达的意义及相关性研究

目的：探讨环氧化酶-2 （COX-2）与骨桥蛋白（OPN）在急性髓细胞白血病患者中的表达及二者的相关性.方法：采用免疫酶联法（ELISA）检测34例初发未治急性髓细胞白血病患者不同时期的78份标本,以及20例健康对照组外周血中COX-2及OPN的表达情况.结果：在急性髓细胞白血病（AML）初发未治组、未缓解组、复发组患者外周血中COX-2及OPN的表达水平高于正常对照组和完全缓解组（P＜0.05）;正常对照组与完全缓解组患者表达无统计学差异（P＞0.05）;COX-2及OPN在未治组、未完全缓解组及复发组患者外周血中的表达情况,每二者之间表达无统计学意义（P＞0.05）;COX-2及OPN在AML患者中的表达正相关（P＜0.05）.结论：COX-2及OPN的高表达可能与AML的发生发展相关.因此检测COX-2及OPN的表达水平对AML患者的早期诊断、监测疗效、预测复发和评价预后具有一定意义.     

分化抑制因子1基因在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的: 探讨分化抑制因子1（inhibitor of differentiation 1,ID1）基因在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者骨髓单个核细胞中的表达及其临床意义。方法: 应用实时定量PCR方法检测153例初诊AML患者骨髓单个核细胞ID1基因的转录本水平。结果： ID1基因的表达范围为0.000～3.536（中位为0.030）。以中位数值为界将AML患者分为高表达组和低表达组,两组AML患者性别、外周血小板计数以及常见基因突变无统计学差异（P>0.05）,外周血白细胞计数、外周血血红蛋白、FAB分型、WHO分型、核型分组及核型危险程度分组趋近统计学差异（P<0.10）。ID1高表达患者年龄以及骨髓原始细胞比例显著高于ID1低表达患者（P=0.033、0.035）。ID1高表达组患者经治疗后完全缓解率低于ID1低表达组（P<0.01）,且定量分析显示经1～2个疗程诱导化疗获得完全缓解的AML患者初诊时ID1表达水平显著低于未获得完全缓解的AML患者（P=0.001）。生存分析显示在全部患者、非M3患者或正常核型AML患者中,ID1高表达患者总体生存时间均明显短于ID1低表达患者（P=0.002、0.008和0.050）。 结论： ID1基因表达水平可作为AML患者化疗反应以及预后判断的分子标志。     

MRP1和XIAP基因在急性髓系白血病及细胞株中的表达及临床意义

目的 本研究旨在探讨多药耐药相关蛋白1 (MRP1)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因在急性髓系白血病(AML)患者及K562、K562/ADM细胞株中的表达,探讨其在AML发生及多药耐药中的意义.方法 应用实时荧光定量PCR方法和蛋白免疫印迹法检测81例AML患者与20例正常人骨髓细胞(对照组),以及K562、K562/ADM细胞株中MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达.结果 K562/ADM细胞MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白水平明显高于K562细胞(P＜0.05).AML患者初治组和复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P＜0.05),复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平明显高于初治组(P＜0.05).结论 MRP1、XIAP基因的异常表达与白血病发病及复发密切相关,可能通过诱导白血病细胞耐药及抑制细胞凋亡的途径发挥作用,其表达水平的高低对评估AML患者预后及治疗效果有重要意义.     

实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的：应用实时荧光定量PCR（real time quantitative PCR,RQ-PCR）检测WT1基因表达水平,探讨其在监测白血病微小残留病（minimal residual disease,MRD）中的临床意义。方法：采用RQ-PCR检测70例急性髓系白血病（AML）患者、20例正常对照者骨髓细胞WTl基因拷贝数及内参基因（ABL）拷贝数,以NQ比值=WTl基因拷贝数/内参基因拷贝数计算基因表达水平。结果：初诊组与复发组WT1表达水平分别与完全缓解组及对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,而对照组与完全缓解组之间比较及初诊与复发组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,即初诊急性白血病患者WT1表达水平明显高于完全缓解组及对照组,复发时同样高于完全缓解组及对照组。在初诊的各种白血病亚型中,M3亚型WT1表达水平最高（平均值为3.44）,M5亚型WT1表达水平最低（平均值为0.25）。4例短期随访提示在达到完全缓解时WT1表达水平下降,而复发时再次升高。结论：用RQ-PCR测定WT1基因的表达,可以作为白血病MRD的一项监测指标。     

实时荧光定量PCR检测白血病患者WT1基因表达及临床意义

目的 研究白血病患者WT1基因的表达水平及与临床预后的关系.方法 建立实时荧光定量PCR检测WT1基因表达技术,并分析65例白血病患者WT1基因的表达水平及与临床预后的关系.结果 建立的实时荧光定量PCR方法的标准曲线相关系数＞0.99.急性髓性白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者WT1基因表达水平较正常对照组均显著升高(P=0.001).慢性髓性白血病(CML)急变期患者WT1基因表达水平显著高于慢性期.WT1表达量与急性白血病发病时外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板无明显相关关系.AML和ALL患者中WT1基因高表达患者与低表达病例CR率差异无显著性.急性白血病患者治疗缓解后WT1的表达量较治疗前显著下降(P=0.032).随访显示WT1持续高表达或下降后又上升的患者呈现难治及复发.结论 实时荧光定量PCR技术检测急性白血病患者WT1基因表达量可预测难治复发及用于MRD的检测.     

NPM1基因在急性髓细胞白血病中的表达及其临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)野生型NPM1基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测59例AML患者,分析NPM1基因表达水平与患者性别、年龄、外周血细胞数、骨髓原始幼稚细胞数及临床疗效的关系,并对部分患者NPM1表达水平进行动态观察。结果初治AML患者中NPM1阳性表达率为73.8%,难治复发组NPM1阳性率为100%,完全缓解组NPM1阳性表达率为66.7%,对照组NPM1阳性表达率为60%,但各组之间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。分析表达水平显示,难治复发组NPM1中位表达水平(0.798 8)高于初治组(0.541 0)、完全缓解组(0.483 6)及对照组(0.371 8)(P<0.05)。NPM1高表达组患者有效为63.1%,低于低表达组(88.9%)和不表达组患者(100%)(P<0.05)。NPM1表达强度与外周血白细胞数和骨髓原始细胞数呈正相关(P<0.05)。对12例初治时NPM1基因高表达患者进了动态观察,1个疗程化疗后获完全缓解5例,其表达水平达正常中位水平以下,其余7例为未缓解患者,NPM1表达水平未见明显变化。结论 NPM1基因在AML中均存在不同程度的过度表达现象,NPM1高表达者提示预后差,完全缓解率低,可作为AML预后不良的指标,PCR动态检测AML患者治疗前后NPM1表达水平,可作为判断AML预后和监测微小残留病(MRD)的一项指标。     

Clinical variations of serum levels of ferritin, folic acid and vitamin B12 in acute leukemia patients

Acute leukemia is one of the most common hematologic malignancies and its exact mechanism of development is unknown yet.In clinical,acute leukemia always accompany with abnormal iron balance.Ferritin.folic acid and vitamin B 12 arc important components of blood cells.In this study,we measured variations of serum levels of ferritin (SF),folic acid and vitamin B12 in the acute leukemia patients under different disease stages including first diagnosed stage,complete remission (CR) stage and not remission (NR) or relapse stage.It demonstrated that serum SF levels in patients at the first diagnosed stage and NR or relapse slage were significantly higher than the CR stage in acute myelocytic leukemia (AML) patients and acute lymphoblastic leukemia (ALL) patients (P＜0.05).The serum rolic acid levels in patients at the first diagnosed stage and NR or relapse stage were significantly lower than the CR stage in AML patients and ALL patients (P＜0.001).Whereas.serum vitamin B12 levels in AML patients were significantly higher at the first diagnosed stage and NR or relapse stage than the CR stage (P＜0.001 ).And it was significantly higher in ALL patients at the NR or relapse stage than at thc first diagnosed stage and CR stage (P＜0.05).There are obvious variations of serum levels of SF,folio acid and vitamin B12 in acute leukemia patients under different stages Increased serum levels of SF and vitamin B12 and decreased levels of folic acid may correlate to the active degree of acute leukemia as well as tumor load.     

急性髓系白血病CTNNA1基因的表达及临床意义

目的：研究急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者钙黏蛋白相关蛋白（α—catenin,CTNNA1）基因的表达情况并探讨其临床意义。方法：应用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测25例非恶性血液病患者（对照组）和92例初诊AML患者（观察组）中CTNNA1基因的表达水平,并分析其与临床参数的相关性。结果：观察组中51例（51／92,55．43％）存在CTNNA1低表达,而对照组未发现CTNNA1低表达（0．00％）,两组比较,差异有统计学意义（,=17．152,P〈0．001）;CTNNA1表达水平与AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性（P均〉0．05）。ROC曲线分析表明CTNNA1表达水平能有效鉴别观察组和对照组,AUC=0．806。观察组中CTNNA1低表达的患者化疗后完全缓解率高于对照组,但差异无统计学意义（x^2=2．476,P=0．142）。4例初诊AML患者在获得完全缓解后CTNNA1表达水平均较治疗前有所升高。结论：CTNNA1基因低表达可能是AML中的一个常见分子事件,检测其表达可用于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测。     

初诊急性白血病患者化疗前后血浆可溶性血管内皮细胞蛋白C受体、血管性血友病因子、P-选择素水平的变化

目的探讨初诊急性白血病(AL)患者化疗前后血浆可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(s EPCR)、血管性血友病因子(v WF)、P-选择素(P-selectin)含量变化的临床价值。方法选取105例初诊AL患者以及120例健康体检者作为研究对象,再根据疾病类型将入组的初诊AL患者分为急性淋巴细胞白血病(ALL,35例)、急性早幼粒细胞白血病(APL,37例)、不包括APL的急性粒细胞白血病(non-APL AML,33例)。ALL组患者采用VDLP方案诱导化疗,APL组患者采用全反式维甲酸、三氧化二砷、柔红霉素方案诱导化疗,non-APL AML组患者采用DA方案或IA方案诱导化疗。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测初诊AL患者化疗前后以及健康体检者的血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平。结果 1初诊AL患者化疗前血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著高于健康体检组(P0.05)。初诊AL患者化疗完全缓解后血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著低于化疗前(P0.05),但是血浆s EPCR、v WF水平仍然显著高于健康体检组(P0.05),而血浆P-selectin水平与健康体检组相比差异无显著性(P0.05)。2不同类型初诊AL患者化疗前血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平相比差异有显著性(P0.05),APL患者血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平显著高于ALL患者、non-APL AML患者(P0.05),ALL患者与non-APL AML患者之间血浆s EPCR、v WF、P-selectin水平相比差异无显著性(P0.05)。结论初诊AL患者在治疗前往往伴随有血管内皮细胞损伤、血小板活化以及血液高凝状态,这种情况以APL表现更为显著。     

急性髓系白血病患者血清miR-182-5 p和HOXA9 mRNA表达及与复发的关系

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者血清微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和同源盒基因A9(HOXA9)信使核糖核酸(mRNA)的表达水平,并分析二者与AML治疗后复发的关系.方法 选取2018年4月—2020年3月四川大学华西医院血液内科收治的AML患者110例作为研究对象,根据患者治疗后1年内是否复...     

WT1基因水平动态检测对白血病患者异基因骨髓移植后微小残留病监测的意义

目的探讨白血病患者接受异基因骨髓移植(allo BMT)后骨髓中WT1的动态表达水平在监测微小残留病(MRD)中的意义。方法建立实时定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法,采用LightCyclerPCR仪检测了15例白血病患者allo BMT前后(111例次)和23例非白血病患者骨髓中WT1及内参GAPDH的表达水平,以WT1N=(WT1拷贝数/GAPDH拷贝数)×104计算WT1表达水平。结果初诊与复发白血病患者骨髓中WT1N的中位表达水平分别为40 18和125 89,明显高于完全缓解组和对照组(分别为4 80和1 47),对照组与完全缓解组之间及初诊与复发组之间差异无统计学意义;动态检测WT1N变化与相应融合基因变化具有很好的相关性, WT1N表达水平再次升高可提前40~180d预示白血病临床复发。结论实时定量RT PCR动态检测WT1在白血病患者allo BMT后骨髓中表达水平,可作为监测残留病的指标,提示复发。     

miR-324-5p和miR-215-5p在多发性骨髓瘤中的表达及预后分析

目的 检测多发性骨髓瘤（MM)患者血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平,研究其表达水平和预后的关系。方法收集60例MM患者血清标本,为初治组（20例）、巩固治疗组（20例）、复发难治组（20例）;20例健康人血清标本（健康对照组）,实时荧光定量PCR检测血清中miR-324-5p和miR-215-5p的表达水平。结果与健康对照组比较,MM患者血清中miR-215-5p表达水平下降（P<0.008 3）,初治组和难治复发组患者血清miR-324-5p表达水平下降（P<0.008 3）,巩固治疗组与健康对照组血清miR-324-5p表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）;巩固治疗组血清miR-324-5p表达水平高于初治组及难治复发组（P<0.008 3）;巩固治疗组血清miR-215-5p表达水平高于初治组（P<0.008 3）,巩固治疗和难治复发患者间差异无统计学意义（P>0.008 3）;初治组与复发难治组之间两种miRNAs表达水平差异无统计学意义（P>0.008 3）。miR-324-5p和miR-215-5p表达水平与β2微球蛋白和红细胞体积分布宽度呈负相关,与血红蛋白呈正相关。初治MM患者血清miR-324-5p和miR-215-5p高表达组无进展生存期高于低表达组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论miR-324-5p和miR-215-5p在MM血清中表达水平降低,miR-324-5p和miR-215-5p可能与疾病密切相关,其低表达可能提示预后不良。     

急性白血病形态学与免疫学分型

目的：分析急性白血病形态学分型(FAB分型)与免疫学分型的相互关系。方珐：选择我院2000～2002年确诊的169例初诊急性白血病进行形态学与单克隆检测免疫学分型比较。结果：106例FAB分型为急性髓细胞白血病(AML)，免疫学特征有M3 HLA-DR(-)，M4、M5有CD14( )特征，及有淋系相关抗原表达；63例FAB分型为急性淋巴细胞白血病(ALL)，免疫学分型有单纯髓系4例，B-ALL18例，T-ALL5例，变异型23例，混合型13例。结论：在AML中(除M0、M7)，不如形态学直观、分型仔细。对于ALL病FAB分型不如免疫学分型，对于M0、M7，只有依靠免疫学分型。FAB分型与免疫学分型两者要相互结合，互相补充，才能更好地反映急性白血病的状况，对临床治疗方案的选择及判断预后有重要意义。