单宁酸与牛颈静脉的交联机制研究

为从化学角度探索单宁酸与牛颈静脉的交联机制,使用5种含有单宁酸不同特征基团的模式分子,分别对戊二醛固定后的牛颈静脉带瓣血管进行交联处理。体内实验采用20只SD大鼠皮下植入处理后的带瓣血管,21和60 d后用原子吸收光谱法测定抗钙化效果,用Masson和EVG染色测定交联程度。体外采用热稳定性和酶解实验检测交联程度,并使用傅里叶变换红外光谱检测带瓣血管化学结构的变化,推测单宁酸与带瓣血管交联作用的类型;进一步在确定交联类型的体系中加入系列浓度梯度(0.1、0.3、0.5、1 M)的尿素,对交联类型使用同样方法进行验证。结果显示,含多酚羟基的单宁酸组带瓣血管交联程度最高,21和60 d钙含量分别为2.25、8.26 mg/g,抗钙化能力最优(P<0.05);傅里叶变换红外光谱图中,单宁酸组带瓣血管有氢键生成。浓度梯度尿素实验表明,随着尿素浓度的增加,单宁酸与牛颈静脉组织交联程度下降(P<0.05),60 d时单宁酸组钙含量为8.10 mg/g,远低于加入0.1 M尿素组的16.83 mg/g和0.5 M尿素组的50.76 mg/g(P < 0.001)。研究表明,单宁酸对牛颈静脉带瓣血管的交联作用是由其所含的多酚羟基与组织中蛋白质基团间通过氢键而产生的,为进一步优化单宁酸抗钙化处理流程提供依据。     

铁离子-单宁酸处理增强牛颈静脉综合性能

经传统戊二醛(GA)交联的牛颈静脉易发生钙化,限制了其在临床上的广泛应用。在GA交联基础上增加单宁酸(TA)处理,取得了良好的抗钙化效果,但也存在组织柔顺性较差的不足。根据单宁酸易与金属阳离子产生螯合作用的特性,本研究尝试应用三价铁离子(Fe³⁺)与反应体系中的单宁酸形成螯合物,防止单宁酸过度反应,从而提高其抗钙化的综合性能。探索Fe³⁺添加方式和pH等反应条件,分别通过单轴拉伸实验测定力学性能、大鼠皮下植入实验测定钙化水平和两点弯曲法测定血管柔顺性,筛选出优化的TA-Fe³⁺处理方法,并对此方法处理得到的牛颈静脉进行生物相容性评价。结果表明,碱性条件(pH=8)下,TA处理前增加Fe³⁺处理步骤能改善TA固定牛颈静脉的组织柔顺性,柔顺度较TA组显著改善,同时保持了TA处理的力学强度;大鼠皮下植入21和60 d后钙含量显著低于GA组[21 d:(1.71±0.41) mg/g vs (38.12±7.40) mg/g; 60 d:(2.73±1.13) mg/g vs (124.19±14.22) ...     

染料介导光氧化固定牛颈静脉血管片体外内皮化

目的研究染料介导光氧化固定牛颈静脉的细胞毒性．初步探讨此种材料体外内皮化的可能性,方法实验组为染料介导光氧化固定组。对照组为戊二醛固定组。采用羊的颈内静脉内皮细胞作为细胞源,细胞种植于管腔一侧,时间为5d。动态观察细胞生长情况,扫描电子显微镜检查种植细胞前后的材料和免疫组织化学因子Ⅷ染色情况。结果光氧化固定组．采用扫描电子显微镜观察,在种植细胞前,在材料表面无细胞,而在种植细胞后,在材料表面密布一层细胞。戊二醛固定组．采用扫描电子显微镜观察,在种植细胞前后无差别,在材料表面见戊二醛固定时残留的少许细胞。光氧化同定组．材料表面种植的细胞因子Ⅷ染色为阳性。结论染料介导光氧化固定牛颈静脉血管片无明显细胞毒性．在体外可以很好地内皮化。     

血液灌流吸附剂血液相容性研究进展

血液灌流器属于与血液接触的医疗仪器,必须充分考虑血液与吸附材料之间相互作用的特性,因此改善灌流材料的血液相容性尤为重要.随着医学、化学、生物医学工程等领域的发展,近年涌现出多种血液灌流（HP）的新材料,HP吸附剂的血液相容性也得到了极大改善,HP技术的临床应用范围越来越广泛.结合近年来HP吸附材料方面的研究成果,对HP吸附剂血液相容性的研究进展作一综述.     

聚氨酯的血液相容性评价

血液相容性是生物多材料研究领域里最受关注的问题之一，血液相容性是一个涉及血液和生物医学材料表面作用的复杂现象。影响因素繁多。对材料的血液相容性的测试和评价同样是一个复杂问题，涉及到多学科，多领域的技术和方法。本文以聚氨酯为例，对生物材料血液相容性的概念、生物医学材料表面和血液的相互作用以及评价方法作一综述。     

生物材料血液相容性综合评价体系的研究

本文提出由四个体外和半体内试验综合评价生物材料血液相容性的体系,同时用此综合评价体系评价了六种用于心血管系统的聚氨酯材料和一种硅橡胶材料的血液相容性。试验结果表明本文提出的四参数综合评价体系可较真实地评价生物材料对血液的急性反应,并可对生物材料的血液相容性进行粗筛。     

新型抗钙化牛颈静脉管道材料的体外细胞毒性评价

背景：Triton X-100、环氧氯丙烷联合改性处理戊二醛固定的牛颈静脉管道是一种新型抗钙化右心管道材料,其生物相容性方面的研究较少。 目的：评价新型抗钙化牛颈静脉管道的体外细胞毒性。 方法：通过CCK-8法检测新型抗钙化牛颈静脉管道(实验组)及单纯戊二醛处理牛颈静脉管道材料浸提液(对照组)对L-929小鼠成纤维细胞的毒性作用,以第2,4天为检测时间点,计算细胞相对增殖率、对材料毒性进行分级。 结果与结论：CCK-8法细胞毒性试验显示新型抗钙化牛颈静脉管道材料浸提液第2,4天L-929细胞增殖率均在85%以上,毒性分级为1级,无细胞毒性,且显著优于对照组(P < 0.05)。提示经戊二醛、Triton X-100、环氧氯丙烷联合处理制备的新型抗钙化牛颈静脉管道材料无细胞毒性。     

亲水性交联剂处理牛颈静脉的理化特征

分别用 4 %的 EX- 313与 0 .5 %的戊二醛处理牛颈静脉带瓣胶原管道 ,所获的材料分别进行外观、扫描电镜与光镜检查 ;另外进行大鼠皮下埋植试验 ,生物力学的测试 ,所获的数据进行 t检验。EX- 313处理后的材料比戊二醛处理者质地更接近天然血管 ,结构间充满空隙 ,抗张强度与戊二醛处理者相当 ,抗钙化方面 EX- 313处理者明显优于戊二醛处理者。用亲水性交联剂 EX- 313处理的生物材料在抗钙化与顺应性方面比戊二醛更有优势 ,由其处理的牛颈静脉有可能成为较理想心脏修复材料     

染料介导光氧化固定牛带瓣颈静脉的生物特性评价

为了解染料介导光氧化固定牛颈静脉的生物稳定性,抗钙化性和免疫原性,新鲜的牛颈带瓣静脉经染料介导光氧化法固定,分别进行化学消化和胃蛋白酶消化,上清液进行梯度聚丙烯酰胺电泳来了解其生物稳定性;将氧化固定的材料埋植于SD大鼠皮下,3周后取出,测钙含量、进行钙染色以及组织学检查了解其抗钙化性和免疫原性;采用戊二醛固定以及新鲜的牛带瓣颈静脉作为对照。染料介导光氧化固定的牛带瓣颈静脉经化学和酶消化之后的上清液电泳之后出现极淡的蛋白条带,明显淡于新鲜的未处理的材料,戊二醛固定的材料几乎不出现蛋白条带。皮下埋植3周后,钙含量测定,染料介导光氧化组显著低于戊二醛组,统计学上差异有显著性意义;钙染色,戊二醛组可见大量的钙沉积,新鲜组也可见钙沉积,但比戊二醛组少,染料介导光氧化组只见少量钙沉积;组织学检查提示光氧化组细胞浸润明显少于其他两组。体外动物实验提示,染料介导光氧化固定的牛带瓣颈静脉具有生物稳定性,低的钙化性和低免疫原性。     

Hemocompatibility of Silver Nanoparticles Based on Conjugate of Quaternized Chitosan with Gallic Acid in In Vitro Experiments

Bulletin of Experimental Biology and Medicine - We studied hemocompatibility of silver nanoparticles synthesized on the basis of a conjugate of quaternized chitosan with gallic acid (QChit-Gal)....     

In Vitro Antibacterial Activity of Bovine Dialyzable Leukocyte Extract

The rapidly developing resistance of many infectious pathogenic organisms to modern drugs has spurred scientists to search for new sources of antibacterial compounds. One potential candidate, bDLE (dialysis at 10 to 12 kDa cut-off) and its fractions (“S” and “L” by 3.5 kDa cut-off and I, II, III, and IV by molecular exclusion chromatography), was evaluated for antibacterial activity against pathogenic bacterial strains (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Lysteria monocytogenes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Salmonella typhi) using standard antimicrobial assays. A minimum inhibitory concentration (MIC) of bDLE and its fractions was determined by agar and broth dilutions methods. Only bDLE and its “S” fraction had an effect upon all bacteria evaluated (MIC ranging from 0.29 to 0.62 U/ml), and the bactericidal and bacteriostatic effects (evaluated by MTT assay) were bacterial species-dependent. These results showed a remarkable in vitro antibacterial property of bDLE against several pathogenic bacteria.     

HIFU在牛肝组织中形成线形凝固性坏死的剂量投放研究

探讨高强度聚集超声(High ntensity focused ultrasound,HIFU)在牛肝组织中形成线形凝固性坏死的剂量投放策略。首先在辐照深度2cm处用声强(ISAL)6500W/cm2的HIFU定点辐照牛肝1s得到一横径W为3mm的点状凝固性坏死。采用单个点状凝固性坏死相互叠加形成线形凝固性坏死时,相邻的两个单次辐照的空间间距D分别为1、2、2.5、3、4.5、5mm。当采用直线扫描形成线形凝固性坏死时,扫描速度V分别为1、3、6、7mm/s,往返次数为1。辐照结束后沿长度方向剖开,直视下观察最大剖面的损伤形态、范围、程度和损伤的完整性。结果表明,当D≤W时,采用单个点状凝固性坏死相互叠加能在牛肝中形成一个完整的线形凝固性坏死,当D>W时不能在牛肝中形成一个完整的线形凝固性坏死,且中间有正常组织的残留。当运动速度V为3mm/s,往返次数为1,采用直线扫描方式能在牛肝中形成了一个边界清楚、能量分布均匀、中间没有正常组织残留的完整的线形凝固性坏死。实验结果证实:依据单个点状凝固性坏死的声辐照和其大小确定形成线形凝固性坏死的辐照参数并进行剂量投放能够在组织中形成线形凝固性坏死。     

去白细胞采输血器的血液相容性体外评价

去白细胞采输血器是用于过滤全血或红细胞悬液中白细胞的医疗器械类产品,为保证其临床应用的安全性,本文对去白细胞采输血器（型号：NGL/RF-XZ-200）进行血液相容性体外评价.选择去白细胞采输血器的3个主要部件：软管、塑料血袋和去白细胞滤器滤膜为试验样品,以进口同类产品作为参照,按照GB/T 16886.4-2003和GB/T 14233.2-2005标准的要求和方法,进行溶血、PTT以及体外自发性血小板聚集3个体外血液相容性指标测试.结果 显示试验样品溶血率小于5%,样品凝血时间和血小板最大聚集率与参照样品无显著性差异（P〉0.05）.该结果表明去白细胞采输血器对血液成分和功能无明显不良影响,具有良好的血液相容性.     

Replication of Bovine Herpesvirus Type 4 in Human Cells In Vitro

A reference strain (Movár 33/63) of bovine herpesvirus type 4 (BHV-4) was inoculated into 14 different human cell lines and five primary cell cultures representing various human tissues. BHV-4 replicated in two embryonic lung cell lines, MRC-5 and Wistar-38, and in a giant-cell glioblastoma cell culture. Cytopathic effect and intranuclear inclusion bodies were observed in these cells. PCR detected a 10,000-times-higher level of BHV-4 DNA. Titration of the supernatant indicated a 100-fold increase of infectious particles. Since this is the first bovine (human herpesvirus 8 and Epstein-Barr virus related) herpesvirus which replicates on human cells in vitro, the danger of possible human BHV-4 infection should not be ignored.     

Anti-inflammatory Effects of Oleanolic Acid on LPS-Induced Inflammation In Vitro and In Vivo

Oleanolic acid (OA) is a triterpenoid known for its anti-inflammatory and anti-cancer properties; however, the anti-inflammatory effects of OA on lipopolysaccharide (LPS)-mediated pro-inflammatory responses have not been studied. Here, we first investigated the possible anti-inflammatory effects of OA against pro-inflammatory responses in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by LPS and the associated signaling pathways. We found that OA inhibited LPS-induced barrier disruption, expression of cell adhesion molecules (CAMs), and adhesion/transendothelial migration of monocytes to HUVECs. OA also suppressed acetic acid-induced hyperpermeability and carboxymethylcellulose-induced leukocyte migration in vivo. Further studies revealed that OA suppressed the production of tumor necrosis factor-α and activation of nuclear factor-κB by LPS. Collectively, these results suggest that OA has anti-inflammatory effects by inhibiting hyperpermeability, the expression of CAMs, and the adhesion and migration of leukocytes, thereby endorsing its usefulness as a therapeutic agent for vascular inflammatory diseases.     

静息B细胞体外诱导同种T细胞低反应的实验研究

本文采用体外同种混合淋巴细胞实验系统观察了静息B细胞 (restingBcell)诱导的同种免疫低应答反应。C5 7BL/6小鼠脾细胞经贴壁去除巨噬细胞后 ,用抗Thy 1抗体加补体和Percoll非连续密度梯度离心法分离 ,获得纯化的静息B细胞 ,经FACS检测其表面高表达SmIg (94 88% )和处于细胞分裂的G0 期 (95 79% ) ,并表达H 2Kb(99 5 % )和H 2I Ab(82 42 % ) ,但低表达CD80 /CD86 (分别为 4 2 6 %和 4 16 % )。C5 7BL/6小鼠静息B细胞刺激同种BALB/c小鼠T细胞 (初次MLR)只呈现微弱增殖反应 ,明显低于用LPS活化B细胞或全脾细胞刺激时的反应值。作再次MLR实验时 ,经初次MLR处理的T细胞对C5 7BL/6小鼠脾细胞表现为很弱的应答反应 ,但对无关的第三品系AKR鼠脾细胞却呈现强应答 ,说明这种应答低下具有相对特异性。上述结果提示 ,静息B细胞在MLR系统中不能诱导同种T细胞的充分活化而表现为同种免疫应答的低下。这在同种移植中诱导受体对移植物耐受提供有益的启示。