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目的:探讨自噬( autophagy)对正常培养多发性骨髓瘤( Multiple myeloma,MM)细胞株增殖的影响。方法 MM细胞株U266在正常培养条件下分别加入雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),以正常血清培养U266细胞及淋巴瘤Jurkat细胞株为对照组;分别检测细胞的增殖及凋亡水平;单丹磺酰尸胺( monodansylcadaverine ,MDC)荧光染色法检测细胞自噬水平;逆转录PCR检测自噬相关基因mtor、Beclin1、Atg5在细胞内水平,蛋白质印迹法检测细胞内自噬相关蛋白轻链3I/Ⅱ( LC3I/Ⅱ)含量。结果 U266细胞及Jurkat细胞内均存在自噬,但前者水平高于后者。雷帕霉素可诱导MM细胞发生自噬,3-MA对自噬有双重作用。雷帕霉素及3-MA下调细胞增殖水平。雷帕霉素及3-MA处理24 h可上调正常培养条件下U266细胞凋亡水平(1.7%±0.2%,19.1%±1.0%和16.8%±0.61%)。延长培养时间至72 h,雷帕霉素处理组凋亡水平无明显变化(16.9%±0.48%)。而3-MA处理组凋亡水平下降(9.0%±0.70%)。结论 MM细胞株内会存在一定水平的自噬,并通过实验证明其高于淋巴瘤Jurkat细胞株的自噬水平。在正常培养条件下加入了雷帕霉素及3-MA可抑制MM细胞的增殖,并可诱导细胞凋亡。 相似文献
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目的 探讨尿多酸肽(CDA-2)抑制多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖作用及其机制。方法 采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测CDA-2对RPMI8226抑制作用并筛选研究浓度;通过Hoechst33258、Annexin-V/PI、细胞周期分析、DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测CDA-2诱导RPMI8226凋亡作用;使用Western Blot法检测caspase-8、caspase-3及其激活物的表达改变;半定量RT-PCR法检测TNF、FADD、TRAF3mRNA表达。结果 CDA-2能够抑制RPMI8226细胞株增殖,并呈浓度依赖性,IC50为1.64mg·mL1;经CDA-2作用后,Hoechst33258荧光染色提示细胞核浓集及出现凋亡小体,Annexin-V/PI分析示早期凋亡细胞比例呈时间依赖增加,细胞周期分析提示呈浓度依赖上调凋亡峰及下调G1期比例,DNA凝胶电泳可见断裂成180~200bp及其倍数的片断梯形条带,故CDA-2可诱导RPMI8226细胞株凋亡;WesternBlot检测发现随药物作用时间延长caspase-8、caspase-3表达明显下降,而active-caspase8、active-caspase3表达上升;半定量RT-PCR证实凋亡相关基因TNF、FADD、TRAF3mRNA表达上调。结论 CDA-2可抑制RPMI8226增殖,且可通过死亡受体途径诱导细胞凋亡。 相似文献
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目的 鲎素是来源鲎血细胞的一种抗菌肽,它能抑制HL-60细胞生长,诱导细胞凋亡.但是鲎素诱导细胞凋亡的确切机制尚未清晰.本研究探讨鲎素是否可以促进Fas/FasL的表达,诱导HL-60细胞凋亡,揭示鲎素诱导HL-60细胞凋亡的可能机制.方法 Hoechst 33258和PI双荧光染色观察细胞调亡,流式细胞仪检测细胞调亡.Western blotting检测easpase-3,caspase-8活性变化,Fas,FasL,FADD表达变化.结果 鲎素处理HL-60细胞后,细胞调亡,caspase-3,caspase-8被激活,Fas,FasL,FADD表述时间依赖性上调.结论 鲎素诱导HL-60细胞凋亡可能与死亡受体介导的途径相关. 相似文献
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目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G—CSF)对足叶乙甙(VP16)诱导白血病细胞凋亡以及Survivin基因表达的影响。方法:用HL-60白血病细胞株进行传代培养,通过DNA凝胶电泳和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,用RT—PCR方法检测Survivin基凶表达。结果:VP16可诱导HL-60细胞凋亡,下调Survivin表达:G—CSF可上调SurvivinmRNA表达,与VP16联合应用时,细胞凋亡率低于单独应用VP16组(P〈0.01),Survivin mRNA表达水平高于单用VP16组(P〈0.01)。结论:VP16诱导白血病细胞凋亡可能与其抑制Survivin表达有关;G—CSF能抑制VP16的促凋亡作用。 相似文献
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目的:探讨辛伐他汀对人甲状腺未分化癌(ATC)细胞株 HTh‐74生长抑制和凋亡的作用。方法 MTT法检测细胞生长率;结晶紫染色观察细胞克隆形成情况;膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3(Caspase‐3)、B细胞淋巴瘤‐白血病2(Bcl‐2)和Bcl相关X蛋白(Bax )的表达。结果辛伐他汀对H T h‐74细胞有显著生长抑制作用,呈浓度和时间依赖性( P<0.05或P<0.01)。辛伐他汀处理后可抑制细胞克隆形成、使细胞凋亡率显著增高、Caspase‐3剪切体和Bax蛋白表达量增加、Bcl‐2蛋白表达量降低、Bax/Bcl‐2比值增加,且均呈浓度依赖性(P<0.05或P<0.01)。结论辛伐他汀可诱导人 ATC 细胞株HTh‐74凋亡,其可能机制是与Bcl‐2表达下调、Bax表达上调以及Caspase‐3活化有关。 相似文献
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目的探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响及对凋亡相关基因的作用。方法培养卵巢癌细胞株SK-OV-3,用不同浓度阿司匹林进行干预,用Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪方法定量检测细胞的凋亡及细胞周期的变化,用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2/bax表达。结果阿司匹林对SK-OV-3增殖的抑制率随作用时间的延长和药物浓度的增加而增加;阿司匹林作用后SK-OV-3细胞出现了典型的凋亡形态学变化,可见凋亡小体;不同浓度的阿司匹林处理细胞48h后,流式细胞术(FCM)显示细胞的凋亡呈剂量依赖性。1、5、10mmol/L阿司匹林诱导SK-OV-3细胞的凋亡率分别为(11.1±0.5)%、(17.9±0.4)%、(30.8±0.4)%均高于对照组(P〈0.01);同时,随着阿司匹林浓度的增加,Co/G期细胞比例下降,G/M期细胞比例升高,细胞被阻断在G2/M期,细胞周期发生明显改变;阿司匹林作用后的卵巢癌细胞的凋亡相关基因Bcl-2表达降低,bax基因表达升高。结论阿司匹林能抑制卵巢癌细胞增殖,诱导其凋亡.且阿司匹林诱导SK-OV-3细胞凋亡是通过下调Bcl-2表达和上调bax表达,而达到抗肿瘤的作用。 相似文献
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目的探讨甲异靛诱导慢性髓系细胞白血病K562细胞株凋亡的作用。方法K562细胞经20μm/L甲异靛处理12h、24h、48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果K562未经甲异靛作用时凋亡率[(1.0±0.36)%]与人体正常细胞系NIH3T3凋亡率[(2.6±0.39)%]相比,差异有统计学意义(P〈0.05);K562细胞空白组凋亡率为(1.0±0.36)%,12h组为(12.5±0.69)%,24h组为(19.4±1.07)%,48h组为(42.5±3.22)%,与NIH3T3细胞组同时间比较,差异有统计学意义(P〈0.05);k562组12h、24h、48h与空白组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。甲异靛能使K562细胞阻滞于G2/M期,G2/M期细胞比例增加,G0/G1期和S期细胞减少。结论甲异靛对体外K562细胞有诱导凋亡作用,其作用与时间成正相关关系。甲异靛可使K562细胞阻滞于G2/M期。 相似文献
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目的:研究1,25二羟维生素 D3抑制人喉癌 Hep-2细胞增殖作用,诱导细胞凋亡及其凋亡相关机制。方法用不同剂量(10-8、10-7、10-6 mol/L)1,25二羟维生素 D3处理 Hep-2细胞24 h、48 h、72 h,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测 Hep-2细胞的增殖情况,计算抑制率。流式细胞术检测 Hep-2细胞的凋亡率。Western blot 检测用药前后细胞中 Bax 和 Bcl-2蛋白的表达水平。结果1,25二羟维生素 D3可以抑制 Hep-2细胞增殖(P <0.05),最高抑制率可达30.71%,在上述浓度内随着浓度增加、时间延长抑制作用逐渐增强,呈时间-剂量依赖性。10-7、10-6 mol/L 1,25二羟维生素 D3作用48 h 后,Hep-2凋亡细胞比例显著增加,凋亡率高于空白对照组(P <0.05)。1,25二羟维生素 D3处理48 h 后,Hep-2细胞 Bax 蛋白表达上升,Bcl-2蛋白表达水平下降。结论在一定浓度范围内1,25二羟维生素 D3能够抑制人喉癌 Hep-2细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞凋亡有关;1,25二羟维生素 D3可通过上调 Bax 蛋白表达、下调 Bcl-2蛋白表达诱导 Hep-2细胞凋亡。 相似文献
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目的:探讨水合氯醛处理对RAW264.7巨噬细胞凋亡的影响及其机制。方法:以不同浓度的水合氯醛对RAW264.7巨噬细胞处理不同时间,采用形态学观察、AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂、Hochest33258染色和DNA1adder试剂检测RAW264.7巨噬细胞的凋亡情况,并检测Fas/FasL表达情况。结果:水合氯醛处理后RAW264.7巨噬细胞形态由梭形变圆直至脱落悬浮;AnnexinVFITC/PI双染检测显示水合氯醛处理可诱导RAW264.7巨噬细胞从早期向晚期凋亡,Hochest33258染色和DNA1ad-der检测均显示诱导凋亡;同时高表达Fas,但不表达FasL。结论:水合氯醛可通过Fas/FasL途径诱导RAW264.7巨噬细胞细胞凋亡。 相似文献
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The prevention of histamine-induced gastric and duodenal ulceration in the guinea-pig has been examined using a series of undegraded and degraded carrageenans. Undegraded carrageenans were active at lower doses than degraded carrageenans. The high viscosity of the undegraded carrageenans in solution prevented their use in larger doses. Degradation of carrageenan without serious loss of sulphate, gives a product which allows the dose to be increased to an extent that its effect more than offsets the slight loss in activity caused by the degradation. No single feature of carrageenan structure can be related to anti-ulcer activity although degradation, and hence reduction of molecular size, generally reduces activity. Sulphate contents over 30% have little apparent effect on activity; κ-carrageenans were not consistently different in anti-ulcer activity from Λ-carrageenans. This contrasts with the antipeptic activity of carrageenans where κ-carrageenans are less active than their Λ-counter-parts. As with antipeptic activity, the degree of anti-ulcer activity is probably determined by a combination of structural features which includes molecular size and polyanionic properties. 相似文献
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《Journal of addictive diseases》2013,32(3):73-87
Depression and anxiety frequently coexist in patients with substance use disorders. This clinically-oriented article examiens the relationship between these conditions and emphasizes data showing that substances of abuse can cause signs and symptoms of both depression and anxiety. These substance-related syndromes appear to have a different course and prognosis than uncomplicated, independent anxiety and major depressive disorders, and clinicians should consider the role of alcohol and other drugs in all patients presenting with these complaints. The authors will also outline an approach for diagnosing and managing patients with the combination of a substance use and depressive or anxiety disorder. 相似文献
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Larks and owls and health, wealth, and wisdom 总被引:1,自引:0,他引:1
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Z J Witczak 《IDrugs : the investigational drugs journal》1998,1(1):30-31
The American Chemical Society Symposium "Glucosidase and fucosidase inhibitors" took place on 1 April 1998 and was organized by Professors Zbigniew J Witczak (UConn, School of Pharmacy, CT, USA), Kuniaki Tatsuta (Waseda University, Tokyo, Japan) and Waldemar Priebe, MD (Anderson Cancer Center, University of Texas, USA). Professor Witczak provided introductory remarks including the status of existing glucosidase inhibitors, and chaired the morning session, which consisted of six lectures. The symposium was well received, and was particularly attractive for those interested in networking, as attendance was about sixty. In addition, some participants and attendees presented posters on the subject during the regular poster session organized by the Division of Carbohydrate Chemistry. 相似文献