呼吸道合胞病毒对哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的 探讨RSV感染诱导哮喘发作的新的免疫机制.方法 选用40只清洁级Balb/c小鼠,随机分组.分别采用不同的方法制备哮喘组(OVA)、哮喘合并RSV感染组(OVA/RSV)、单纯RSV感染组(RSV)及对照组(NS)动物模型.所有小鼠于末次激发后24 h取右肺中叶标本作病理切片,观察炎症改变;部分通过mRNA原位杂交鉴定肺部RSV感染情况;同时收集外周抗凝血,通过流式细胞仪分析及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平.结果 ①OVA、RSV组外周血CD4 CD25 调节性T细胞百分率明显降低(P＜0.01),OVA/RSV组降低更加明显.②与NS组相比.IL-10水平在OVA组明显降低(P＜0.005),RSV组无明显变化(P=0.65),OVA/RSV组则明显升高(P＜0.005).③TGF-β1水平在OVA组较对照组明显降低(P＜0.01),OVA/RSV组降低更加明显.④各组外周血CD4 CD25 调节性T细胞百分率与IL-IO、TGF-B.无相关性(P＞0.005).结论 ①哮喘小鼠体内CD4 CD25 调节性T细胞和IL-IO、TGF-B,数量和分泌水平降低,可能是导致哮喘发生的原因之一.②在哮喘基础上合并RSV感染可进一步减少CD4 CD25 调节性T细胞数量和TGFβ1分泌水平,可能是病毒感染诱发和加霞哮喘的原因之一.③外周血中CD4 CD25 调节性T细胞仅部分由IL-10、TGF-β诱导产生,其相互间的变化水平是综合因素影响的结果.     

CD4+CD25+调节性T细胞在支气管哮喘中的研究进展

近年来,关于CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在支气管哮喘发病中作用的研究有相当大的进展,支气管哮喘的发病机制已不能单纯用Th1/Th2平衡理论来解释,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞越来越受到重视,它通过细胞接触和分泌细胞因子发挥免疫抑制功能,维持自身免疫平衡,控制支气管哮喘的发展,Foxp3、IL-6等在其功能调控中发挥重要作用。支气管哮喘中,有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞作用机制及数量变化的观点不一,糖皮质激素通过增强CD4^＋CD25^＋调节性T细胞功能发挥治疗作用。     

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的作用

目的：建立哮喘小鼠动物模型并给予吸入糖皮质激素治疗,通过分析CD4+CD25+调节性T细胞及相关细胞因子在哮喘发病中的变化情况,以及观察糖皮质激素治疗对该细胞的影响和干预作用,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法：分别制备哮喘组（OVA）,哮喘吸入激素治疗组（OVA/GC）及对照组（NS）动物模型。所有小鼠于末次激发后24 h,取右肺中叶标本作病理切片,观察炎症改变;同时收集外周抗凝血及肺组织细胞悬液,通过流式细胞仪及酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+ T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果：①哮喘小鼠外周血及肺组织细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显降低（P<0.01）,吸入糖皮质激素治疗后CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显升高（P<0.01）。②IL-10在哮喘组较对照组明显降低（P<0.01）,糖皮质激素治疗组IL-10明显升高（P<0.01）。③TGF-β1在哮喘小鼠较对照组明显降低（P<0.01）,吸入糖皮质激素治疗后TGF-β1有所升高,但差异无显著性。结论： ①哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10,TGF-β1数量和分泌水平降低,尤其是肺部CD4+CD25+调节性T细胞不能有效聚集,导致全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发生的原因之一。②糖皮质激素可通过增加CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10数量和分泌水平,增强其免疫抑制功能而发挥治疗作用。③外周血和肺部CD4+CD25+调节性T细胞百分率变化具有一致性,监测外周血CD4+CD25+调节性T细胞变化情况可以了解肺部变化趋势。     

哮喘患儿CD4+CD25+T细胞FoxP3表达的意义

目的研究表达FoxP3的CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,探讨其在发病机制中的意义。方法采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测哮喘患儿外周血FoxP3表达,并与健康对照组进行比较。结果哮喘患儿CD4和CD25双阳性细胞所占比例与健康对照组比较无明显差异,而CD4^＋ CD25^high和CD4^＋ CD25^＋ FoxP3＋细胞明显低于对照组（Pa〈0.05）。FoxP3 mRNA表达水平与蛋白质表达水平变化一致。结论哮喘患儿CD4^＋ CD25^＋ FoxP3＋调节性T细胞明显减少,可能与哮喘的发病机制有关。     

哮喘患儿外周血中CD4~+LAP~+调节性T细胞比例及功能变化研究

目的测定哮喘患儿外周血中CD4+LAP+调节性T细胞(CD4+LAP+Treg细胞)比例和功能的改变,探讨CD4+LAP+Treg细胞在哮喘发病中的作用。方法选取2014年3月至2015年9月确诊为哮喘的患儿75例为研究对象,依据病情将哮喘患儿分为哮喘急性期组(n=40)和哮喘缓解期组(n=35);另选取行健康体检儿童30例为健康对照组。采用流式细胞仪检测各组儿童外周血CD4+LAP+Treg细胞百分比;采用3H-脱氧胸腺嘧啶苷法检测各组CD4+LAP+Treg细胞的免疫抑制情况。结果哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg比例(2.0%±1.0%)较缓解期组(4.1%±2.4%)及健康对照组(4.6%±3.0%)均降低(P0.05);哮喘急性期组患儿体内CD4+LAP+Treg细胞免疫抑制率(21%±4%)较缓解期组(55%±9%)及健康对照组(62%±11%)均降低(P0.05)。结论哮喘患儿外周血中CD4+LAP+Treg数量降低和抑制功能减弱可能参与了哮喘的急性发病过程。     

自身免疫性疾病患儿CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 通过检测外周血CD4+CD25+ 调节性T淋巴细胞(Treg),了解自身免疫病患儿Treg细胞的变化,以期更好的为临床诊断和治疗提供依据.方法 收集2007年11月-2008年6月本院风湿免疫科诊断为自身免疫性疾病患儿93例.本院同期门诊体检健康儿童35例作为健康对照.对发病人数在前3位的类风湿性关节炎(JRA,22例)、SLE(12例)和过敏性紫癜(HSP,12例)分别与健康对照组进行比较.采用流式细胞术检测2组儿童外周血CD4+CD25+ T淋巴细胞和CD4+ T淋巴细胞,计算CD4+CD25+ Treg细胞占CD4+ T淋巴细胞百分数.应用SPSS 11.5统计软件对数据进行独立样本t检验.结果 1.自身免疫性疾病患儿组CD4+CD25+ Treg细胞/CD4+ T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(21.85±11.68)%、(6.14±3.21)%,健康对照组为(12.83±3.61)%、(3.68±1.02)%,2组比较前者显著高于后者(Pa<0.05).2.JRA患儿CD4+CD25+ Treg细胞/CD4+ T淋巴细胞、CD4+CD25+T淋巴细胞分别为(19.49±8.60)%、(6.22±3.11)%,SLE患儿为(31.04±17.38)%、(7.38±4.09)%,HSP患儿为(19.0±9.33)%、(5.80±2.44)%,均显著高于健康对照组(Pa<0.05).结论 自身免疫性疾病患儿CD4+CD25+ Treg细胞显著升高,其可能参与了自身免疫性疾病的病理过程.     

哮喘小鼠气道重塑过程中CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的动态变化

目的探讨哮喘小鼠Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在脾组织中表达水平的变化规律及与气道重塑的关系。方法将SPF级雌性Balb/c小鼠48只随机分为对照组和哮喘组,利用腹腔注射卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝混悬液致敏及雾化吸入OVA激发制备哮喘气道重塑模型,对照组应用生理盐水替代。两组分别在雾化2周、4周及8周后的24 h内随机处死8只小鼠,左肺组织病理切片观察肺气道重塑程度;流式细胞仪测定脾组织中Th17、CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比。结果随着激发时间的延长,哮喘组支气管总管壁面积(Wat/Pbm)及支气管平滑肌面积(Wam/Pbm)逐渐增厚(P0.01);脾组织细胞悬液中Th17细胞水平逐渐升高,与气道重塑的程度呈正相关(P0.01),而CD4+CD25+Treg细胞水平逐渐降低,与气道重塑程度均呈负相关(P0.01)。结论哮喘小鼠气道重塑是动态变化的过程,激发的时间越长,气道重塑越严重,Th17细胞表达越高,CD4+CD25+Treg细胞表达越低,两者间免疫失衡可能是哮喘气道重塑发生的重要因素之一。     

幼年特发性关节炎患儿CD4+CD25high调节性T细胞检测的意义

目的探讨CD4^＋ CD25^high调节性T细胞在幼年特发性关节炎（JIA）发病机制中的作用。方法利用流式细胞术检测JIA患儿外周血和关节液中T细胞表面CD4和CD25表达,并利用胞内染色技术检测细胞内转录因子FoxP3。同时检测年龄和性别相匹配的7例健康体检儿童外周血作为正常对照。结果JIA患儿关节液中高表达CD25的CD4^＋ T细胞（CD4^＋CD25^high）明显多于JIA和正常人外周血,而JIA外周血中数量又少于正常人外周血。CD4^＋ CD25^highT细胞表达高水平的FoxP3。结论JIA患儿关节局部天然调节性T细胞增多,可能与其发病机制有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在免疫性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

免疫性血小板减少性紫癜是一种以血小板破坏增加和(或)血小板生成异常为特点自身免疫性疾病,以皮肤、黏膜或内脏出血为主要表现.该病发病机制复杂,目前尚未明确.CD4+ CD25+调节性T细胞为抑制细胞,是具有独特免疫调节功能的成熟CD4+T细胞亚群,在小鼠和健康人体中约占外周血CD4+T细胞的5％ ～10％,占人体外周血单个核细胞的1％ ～2％,其通过多种途径对免疫反应发挥抑制效应,能维持内环境的稳定.CD4+ CD25+调节性T细胞功能紊乱或数目异常是导致自身免疫性疾病的重要因素之一,在免疫性血小板减少性紫癜的发生、发展中发挥重要的作用.该文对CD4+ CD25+调节性T细胞的特征和作用及其在免疫性血小板减少性紫癜发病中的作用的研究进展作一综述.     

CD4+CD25+T调节细胞及Foxp3在哮喘中的研究进展

CD4 CD25 T调节细胞是具有免疫调节(或抑制)作用的T细胞,其主要功能是抑制自身反应性T细胞的活化和增殖,参与自身免疫调节,维持自身免疫耐受,在儿童哮喘等疾病中发挥重要作用。Foxp3已作为CD4 CD25 T调节细胞的特异性标志。本文就CD4 CD25 T调节细胞及Foxp3的生物学特性、效应机制及其与儿童哮喘发病的关系作一综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞及其在重症肌无力中的研究进展

CD4 CD25 调节性T细胞是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,主要通过细胞接触和细胞因子机制抑制自身反应性T细胞活化与增殖,在自身免疫性疾病中发挥着重要作用。重症肌无力(MG)患者胸腺中存在大量激活的自身反应性CD4 T细胞是MG发生重要原因。本文对CD4 CD25 调节性T细胞产生、发育、效应机制及其在MG发病中作用作一综述。     

昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响

目的 探讨海洋药物昆布多糖对哮喘小鼠呼吸道炎性反应的影响.方法 SPF级昆明系小鼠32只随机分为阳性对照组、布地奈德组、昆布多糖组和阴性对照组,每组8只,通过长期反复吸入卵清蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型.布地奈德组自第14天起,每天雾化吸入布地奈德混悬液200μg加9g/L盐水共4mL干预;昆布多糖组以昆布多糖50mg/kg灌胃;阳性对照组自第14天起,以9g/L盐水0.3mL灌胃干预;阴性对照组在致敏激发和灌胃干预阶段采用9g/L盐水.所有动物在第42天灌胃雾化24～48h处死.HE染色观察各组呼吸道炎性反应并评分,光镜计数各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞数及分类计数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠BALF中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平.结果 阴性对照组小支气管无炎性细胞浸润;阳性对照组肺组织呈明显炎性浸润,渗出液堵塞呼吸道;布地奈德和昆布多糖组肺组织炎性浸润明显减轻,偶见肺泡内渗出液,小支气管上皮完整.昆布多糖组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、IL-4与阳性对照组比较均有降低(t=5.942,7.089,7.078 Pa<0.01),IFN-γ升高(t=6.171 P<0.01),差异有显著性,肺病理评分降低(P<0.01);与阴性对照组相比,细胞总数、EOS、IL-4均显著升高(t=2.150,3.977,2.593 Pa<0.05),IFN-γ降低(t=4.116 P<0.01),肺病理评分增高(P<0.01);与布地奈德组比较,BALF细胞总数、EOS明显升高(t=4.984,6.195 Pa<0.01),IL-4无明显差异(t=1.424 P>0.05),IFN-γ显著降低(t=4.275 P<0.01),肺组织病理评分明显升高(P<0.01).结论 海洋药物昆布多糖能在一定程度上减轻哮喘小鼠呼吸道炎性反应,可能是一种新的治疗哮喘的辅助药物.     

红霉素对哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的：探讨红霉素对哮喘豚鼠气道炎症的影响。方法：以卵蛋白(OVA)致敏的过敏性哮喘豚鼠为模型,诱喘后24 h取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类及右肺中叶HE染色,镜下观察支气管肺组织形态学改变并对BALF及气道壁嗜酸粒细胞、中性粒细胞、单核细胞进行计数。结果：哮喘组BALF及支气管管壁嗜酸粒细胞、中性粒细胞、单核细胞数分别为:[B3ALF(10.9±1.2)×108/L,(3.9±0.7)×108/L,(4.2±1.0)×108/L:支气管管壁(73.6±8.8)个/HP,(7.1±1.9)个/HP,(3.5±0.7)个/HP],分别与正常对照组比较[BALF(0.5±0.1)×108/L,(0.4±0.1)×108/L,(2.0±0.4)×108/L;支气管管壁(5.5±1.6)个/HP,(1.2±0.9)个/HP,(0.7±0.5)个/HP],均显著增高(P<0.01或0.05),红霉素组BALF及支气管管壁嗜酸粒细胞、中性粒细胞、单核细胞数分别为[BALF(3.3±0.5)×108/L,(1.7±0.2)×108/L,(3.1±0.7)×108/L;支气管管壁(38.7±5.6)个/HP,(3.7±0.8)个/HP,(2.2±1.0)个/HP],较哮喘组明显下降(P<0.01或0.05),但较正常对照组仍显著增加(P<0.01或0.05)。结论：红霉素能减轻哮喘豚鼠气道炎症反应,具有抗炎作用,但红霉素不能完全阻断这种气道炎症反应。     

细辛脑注射液对支气管哮喘患儿呼吸道炎症因子的影响

目的观察细辛脑对支气管哮喘患儿呼吸道炎症因子的影响。方法共选取60例支气管哮喘患儿,随机分成2组,治疗组予细辛脑注射液0.5 mg/kg,用10%葡萄糖注射液稀释成0.01%的溶液,静脉滴注,2次/d;对照组用氨茶碱针4~6 mg/kg加入5%葡萄糖注射液100 mL静脉滴注,1次/d,两组均用7 d为1个疗程,共观察2个疗程。结果治疗2周后,两组嗜酸性粒细胞与巨噬细胞治疗前后比较均有明显差异(P均<0.05),同时治疗组的淋巴细胞、CD4 T细胞与治疗前比较均有明显差异(P均<0.05),两组嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、CD4 T细胞比较也均有明显差异(P均<0.05)。治疗后两组肺功能均比治疗前明显改善(P均<0.05),治疗组的肺功能I、L-5与对照组有明显差异(P<0.05)。结论细辛脑注射液对哮喘患儿呼吸道炎症因子的影响优于氨茶碱组。     

原发性肾病综合征患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞水平的变化及其意义

目的通过观察原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血淋巴细胞亚群,尤其是CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞水平的变化,探讨其免疫发病机制。方法采用双标法用流式细胞仪检测25例初发PNS患儿(PNS组)外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+)、B淋巴细胞亚群(CD3-CD19+、CD19+CD23+)及自然杀伤细胞(CD3-CD16+56+)水平,同时选取同期19例健康儿童作为健康对照组。数据采用SPSS 15.0软件进行统计学分析。结果 PNS组患儿外周血中CD3+、CD3+CD8+、CD4+CD25+、CD19+CD23+淋巴细胞均显著高于健康对照组(Pa<0.05),而自然杀伤细胞则较健康对照组显著降低(P<0.05);PNS组CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+淋巴细胞与健康对照组比较差异无统计学意义。结论体内淋巴细胞亚群的紊乱参与了PNS的发病过程,其中CD4+CD25+调节性T细胞及CD19+CD23+细胞的变化为PNS的免疫治疗目标提供了理论依据。     

紫癜性肾炎患儿CD4+CD25+调节性T细胞和淋巴细胞亚群变化的意义

目的 探讨紫癜性肾炎(HSPN)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分比和淋巴细胞亚群的变化和意义.方法 初诊初治的HSPN患儿35例于治疗前抽取清晨空腹静脉血2 mL,加入乙二胺四乙酸(EDTA)钾盐抗凝,采用流式细胞仪(FCM)检测其外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分比及淋巴细胞亚群数量,并分析CD4+CD25+调节性T细胞与24 h尿微量清蛋白(24 h UMA)的关系.同时随机选取同期本院35例健康体检儿童外周血标本作为对照组.结果 HSPN患儿外周血CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+/CD4+均低于健康对照组(Pa＜0.01);CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD3-CD(16+56)+均低于健康对照组(Pa＜0.05);而CD19+CD23+则高于健康对照组(P＜0.05).CD4+CD25+调节性T细胞百分比与24 h UMA呈显著负相关(r=-0.61 P＜0.01). 结论 外周血淋巴细胞亚群的变化可能参与HSPN的发病过程,而CD4+CD25+调节性T细胞百分比可作为监测HSPN患儿病情及预后治疗的指标之一.