二代测序技术在植入前遗传学诊断中的应用

二代测序技术在植入前遗传学诊断、筛查中的应用正在迅速发展,其不仅能进行胚胎染色体的全面筛查和诊断,还能检测单基因病。文章就二代测序技术在染色体病、单基因病的植入前     

拷贝数变异测序在染色体易位夫妇植入前遗传学诊断中的临床应用

目的探讨拷贝数变异测序(copy number variation sequencing, CNV-seq)用于染色体易位夫妇胚胎植入前诊断的应用价值。 方法回顾性分析2017年1月至2018年12月,在广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科进行植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的211对染色体易位夫妇患者的临床病例。使用CNV-seq对胚胎染色体进行检测,并对患者一般信息和PGD结果进行分析。 结果1210个胚胎中,被检出837个(79.2%)胚胎存在染色体异常,373个(30.8%)胚胎为整倍体。在241个PGD周期中,68个(27.6%)周期所有胚胎均存在染色体异常,178个(72.4%)周期至少含有一个整倍体胚胎。在176个移植周期中,130个(73.9%)确定临床妊娠,已出生46个健康婴儿,12例发生早期流产。 结论CNV-seq可准确地区分胚胎染色体是否存在异常,避免因胚胎含有染色体异常而被移植,是一种可靠而准确的PGD技术。     

植入前遗传学检测在反复妊娠丢失中的应用

反复妊娠丢失（RPL）是困扰育龄期女性的常见疾病,胚胎染色体异常是导致RPL的最常见因素。近年来,随着植入前遗传学检测（PGT）技术的发展,可以更有效地避免因胚胎非整倍体导致的流产,PGT 在RPL患者中的临床应用日益广泛。文章回顾PGT技术自问世以来30年间的发展过程,从检测技术、活检技术、临床应用等方面,包括其在RPL中的应用进展做一阐述。     

植入前遗传学检测在反复妊娠丢失中的应用

反复妊娠丢失（RPL）是困扰育龄期女性的常见疾病,胚胎染色体异常是导致RPL的最常见因素。近年来,随着植入前遗传学检测（PGT）技术的发展,可以更有效地避免因胚胎非整倍体导致的流产,PGT 在RPL患者中的临床应用日益广泛。文章回顾PGT技术自问世以来30年间的发展过程,从检测技术、活检技术、临床应用等方面,包括其在RPL中的应用进展做一阐述。     

胚胎植入前遗传学诊断技术

植入前遗传学诊断 (ｐｒｅｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉａｇｎｏｓｉｓ,ＰＧＤ)技术 ,是指通过体外受精获得的胚胎在送入母体宫腔前取 1个或几个胚胎细胞进行遗传学分析。据估计 ,人群中约有 1/ 4到 1/ 5的人患某种遗传病 ,平均每人携带 5～ 6个致病基因[1] 。这将对未来的人类造成巨大的遗传负荷 (ｇｅｎｅｔｉｃｌｏａｄ)。因此ＰＧＤ技术的产生与完善使试管婴儿技术不再局限于治疗不孕症 ,它在阻断遗传病传播、降低人类遗传负荷上都具重要意义。根据遗传物质发生变化的方式不同 ,可将ＰＧＤ技术归为 4类 :染色体分析、Ｄ…     

基因测序在胚胎植入前遗传学诊断应用的研究进展

经过30多年的发展,基因测序技术已从最初的Sanger测序发展至当今以单分子测序为特点的测序。早期的Sanger测序可应用于单基因疾病的检测,但其可检测的通量小、速度慢,逐渐被荧光原位杂交(FISH)、比较基因组杂交(CGH)、芯片检测技术等取代。下一代测序(nextgeneration sequencing,NGS)技术作为胚胎植入前遗传学诊断(preimplataion genetic dignosis,PGD)的新检测手段,不仅能检测染色体非整倍性、染色体结构异常以及单基因疾病,而且精度更高,弥补了芯片检测易受探针影响的缺陷。新近建立的基于N G S的非整倍体测序与连锁分析(mutated allele revealed by sequencing with aneuploidy and linkage analyses,MARSALA)技术可以同时检测染色体疾病和单基因疾病。本文概述了基因测序技术的发展进程及其在PGD中的应用,介绍了包括近年开发的多重退火环状循环扩增(MALBAC)技术和MARSALA在内的NGS技术应用于PGD的优点和局限。     

单核苷酸多态性微阵列在染色体易位植入前遗传学诊断中的应用

染色体易位是不孕不育的重要原因之一,也是植入前遗传学诊断 （PGD）的主要适应证之一。单核苷酸多态性微阵列（SNP array）是近年用来于PGD诊断的新技术。与传统的单细胞诊断方法相比较,SNP微阵列具有更多的优点。文章从SNP array原理、SNP array PGD国内外现状及适应证、优缺点及SNP array在PGD中的应用和展望等方面进行阐述。     

应用荧光原位杂交技术进行植入前胚胎染色体诊断的价值

目的 初步探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术进行植入前胚胎染色体诊断的价值。方法 对10对不孕夫妇进行植入前遗传学诊断(PGD)周期的超促排卵和卵母细胞浆内单精子注射,于受精后第3天进行胚胎活检及FISH分析,第4天选择染色体组成正常或平衡的胚胎进行移植。结果 10个PGD周期共获卵158个,对其中54个胚胎进行活检,51个胚胎获得明确诊断,诊断率为94％(51／54)。对染色体组成正常或平衡的24个胚胎进行官腔内移植,共4例获得妊娠,其中3例已足月分娩健康婴儿,1例为异位妊娠。结论 应用FISH技术进行植人前胚胎染色体诊断,是预防流产和染色体异常患儿出生的有效手段。     

我国通过植入前胚胎遗传学检测技术阻断罕见遗传病的发展现状

        出生缺陷是我国乃至全球所面临的严峻挑战,指婴儿出生前发生的身体结构、功能或代谢异常,与环境、遗传因素密切相关,其中遗传因素又包括染色体异常与基因突变［1］。罕见遗传病作为出生缺陷的重要组成部分,80%~85%具有遗传基础,且绝大多数由基因突变导致［2］。 浏览更多请关注本刊微信公众号及当期杂志。     

我国通过植入前胚胎遗传学检测技术阻断罕见遗传病的发展现状

出生缺陷是我国乃至全球所面临的严峻挑战,指婴儿出生前发生的身体结构、功能或代谢异常,与环境、遗传因素密切相关,其中遗传因素又包括染色体异常与基因突变［1］。罕见遗传病作为出生缺陷的重要组成部分,80%~85%具有遗传基础,且绝大多数由基因突变导致［2］。浏览更多请关注本刊微信公众号及当期杂志。     

植入前遗传学诊断技术风险环节

植入前遗传学诊断（PGD）相关的技术在近20年迅猛发展,随之而来的是在技术应用时可能存在的问题和风险。从遗传咨询到胚胎培养、活检,再到遗传学诊断的各个环节都有需要引起重视的问题。等位基因脱扣和早期胚胎的染色体嵌合现象是目前诊断中最主要的导致误诊的风险因素。文章就目前PGD中各个可能的风险环节以及相应的应对措施进行阐述。     

高通量测序技术在产前诊断中的应用

拷贝数变异测序（CNV-seq）、基因包检测、全外显子组测序（WES）等高通量测序技术已用于产前诊断,几种技术各有优势和不足。国内外相继制定了拷贝数变异（CNV）解读指南、WES应用等指南。结合实践经验,文章讨论了如何在产前诊断中合理应用几种技术,期待将来全基因组测序（WGS）也可用于产前诊断。     

短串联重复序列在染色体罗氏易位植入前遗传学诊断的应用

目的:采用多重置换扩增(MDA)结合短串联重复序列(STR)建立一种基于PCR技术诊断染色体罗氏易位的植入前遗传学诊断(PGD)方法。方法:选择位于易位染色体上的STR位点,对家系采用荧光PCR进行分析,选择有多态性的位点,再采用MDA对单细胞进行全基因组扩增,根据家系分析的结果,对具有多态性的STR位点进行分析诊断。结果:对3个家系进行了4个取卵周期(3个PGD周期),每个家系分别采用7~15个具有多态性的STR位点进行分析,共对24个胚胎进行诊断。PGD的诊断效率为95.8%(23/24),平衡胚胎占52.2%(12/23),异常胚胎占47.8%(11/23),共移植了6个胚胎,获得2例临床妊娠,临床妊娠率为66.7%(2/3),出生了2个健康婴儿,染色体核型均正常。结论:采用依赖于STR的PCR分析法可以用于染色体罗氏易位的PGD。     

高通量测序和数字PCR应用于无创产前检测胎儿非整倍体研究进展

母体血浆中胎儿游离DNA的发现使无创产前检测成为可能.基于高通量测序的无创产前检测已用于临床筛查常见的胎儿染色体非整倍体疾病.测序流程复杂,质量控制有助于提高高通量测序无创产前检测的准确性和可靠性.数字PCR作为核酸定量检测的新技术,具有快速准确,流程简单的优势,有望成为无创产前检测胎儿染色体非整倍体更具成本优势的新方...     

植入前遗传学诊断及筛查咨询

随着分子生物学技术的飞速发展及其在生殖领域的应用,植入前遗传学诊断（PGD）、植入前遗传学筛查（PGS）的遗传咨询变得更加复杂。在PGD、PGS的遗传咨询中,医生应充分告知患者PGD、PGS的应用现状、利弊、可能的预后、技术缺陷与安全性问题。同时,经PGD、PGS成功妊娠的孕妇,仍需进行常规的产前诊断,这一点对于PGD、PGS的安全性至关重要。     

二次活检在胚胎植入前遗传学检测中的应用进展

胚胎植入前遗传学检测（PGT）是指通过对配子或胚胎活检后进行遗传物质检测从而诊断胚胎整倍性和遗传性疾病的方法。随着PGT的广泛开展,临床上出现诊断不明胚胎、嵌合体胚胎和片段非整倍体胚胎通过二次活检能够重新被诊断为整倍体胚胎,移植后实现健康活产,避免了潜在的整倍体胚胎被丢弃。因此二次活检对胚胎发育潜能的影响也成为近来研究的热点。本文将对二次活检在PGT中的应用进展进行综述,为评估二次活检的安全性和有效性提供参考,从而使二次活检更好地应用于临床实践中。     

胚胎植入前遗传学诊断应用进展

胚胎植入前遗传学诊断(PGD)正高速发展并逐渐应用于临床,这使不孕不育的夫妇不仅能喜得贵子,并且能实现优生优育。与传统的产前诊断相比,其具有非侵入性,更易为舆论、伦理所接受等优点。但同时,也有误诊、污染等不足。目前PGD的分析技术主要有聚合酶链反应和免疫荧光原位杂交等,许多新技术正不断发展。国外PGD正逐渐被应用,并已取得一定成果。国内的PGD技术也在逐步推广,但发展相对缓慢。本文就近年来PGD应用进展做简要综述。     

应用基因组杂交、单核苷酸芯片及二代测序技术开展植入前染色体异常诊断

流产是导致妊娠失败的最常见原因,其中因染色体异常导致的流产占早期自然流产的一半。胚胎染色体异常一部分是由于胚胎发育异常,一部分与遗传相关。我国普通人群中染色体异常的发生率为0.5%~1.0%,而在有不良孕产史的患者中发生率则高达2%~10%。随着辅助生殖技术的发展,体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的临床妊娠率有了显著提高,但胚胎着床率却维持在20%左右,其中染色体异常是造成人类胚胎低着床率和早期妊娠丢失的一个很重要原因。