加参方对CHF大鼠肾脏水通道蛋白(AQP)mRNA表达的影响

[目的]通过观察加参方对充血性心力衰竭(CHF)大鼠肾脏水通道蛋白(AQP)mRNA表达的影响,探讨加参方改善水钠潴留的机制。[方法]采用结扎大鼠冠状动脉前降支法造成心肌梗死后形成慢性CHF模型,随机将CHF大鼠分为加参方组、模型组和假手术组共3组,每组8只。连续给药4周。[结果]加参方能够减少CHF大鼠异常增加的抗利尿激素(AVP)水平,抑制AVP-2R受体的激活,降低CHF大鼠肾脏内髓AQP-2mRNA表达。[结论]加参方通过调控CHF大鼠肾脏水通道蛋白AQP mRNA表达,使管腔液中的水通透性减少,减轻CHF时水钠潴留,促进尿液排泄,降低心脏容量负荷,可能是加参方增强心功能的机制之一。     

丝瓜络对慢性心力衰竭大鼠肾脏水通道蛋白-2免疫荧光表达的影响

目的 观察中药丝瓜络（RLF）对慢性充血性心力衰竭（CHF）大鼠尿量和肾脏水通道蛋白-2（ AQP-2）免疫荧光表达的影响,探讨RLF的利尿作用及机制.方法采用异丙肾上腺素（ISO）法制备慢性充血性心衰大鼠模型,实验分为4组：正常组、CHF组、RLF大剂量组（10g·kg-1·d-1）和RLF小剂量组（5g·kg-1·d-1）.连续灌胃给药28d,末次给药后30min,采用足趾肿胀法,测量大鼠后肢足趾容积;代谢笼法,连续记录24h尿量;取肾脏髓质,免疫荧光法检测AQP-2的表达.结果丝瓜络连续用药可显著增加心衰大鼠尿量,减少后肢足趾容积（P＜0.05）,并可明显抑制心衰大鼠肾髓质AQP-2免疫荧光的过度表达.结论RLF对心衰大鼠有一定利尿作用,其分子生物学机制可能是通过降低肾脏髓质AQP-2蛋白的表达,从而减少水的重吸收.     

大黄藿苓汤对腺嘌呤致大鼠慢性肾衰PDGF的影响*

【目的】探讨大黄藿苓汤对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用及机制。【方法】Wistar大鼠灌服腺嘌呤复制慢性肾衰大鼠模型，检测肾功能、肾脏组织病理学改变及血小板源性生长因子（PDGF）表达，并观察大黄藿苓汤的影响。【结果】给药1、2组肾脏病理改变较模型对照组轻；尿素氮、肌酐、尿酸均较模型对照组低（P〈0．05）；给药组与模型对照组相比PDGF表达明显减少（P〈0．05）。【结论】大黄藿苓汤对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭大鼠肾脏有保护作用。其机制可能是抑制PDGF表达，进而抑制肾脏纤维组织增生。     

参附强心合剂对心衰大鼠水通道蛋白2水平的影响

目的：观察参附强心合剂对心衰大鼠心功能及水通道蛋白2（AQP-2）水平的影响,探讨参附强心合剂抗心衰水潴留的作用机制。方法用腹主动脉缩窄法制作心衰大鼠模型,造模成功60只大鼠随机分为参附强心合剂大、中、小剂量组,氯沙坦组和模型组,每组12只。前三组分别按成人用药剂量20、10、5倍的参附强心合剂14g/（kg·d）、7g/（kg·d）、3.5g/（kg·d）灌胃;氯沙坦组以成人剂量10倍的氯沙坦10mg/（kg·d）灌胃;模型组以蒸馏水灌胃。另假手术组大鼠12只以蒸馏水灌胃作为空白对照组。给药4周后,心超检查测定左室射血分数（LVEF）,ELISA法检测大鼠尿AQP-2浓度,Western blot检测大鼠肾脏AQP-2表达水平。结果参附强心合剂可改善心衰大鼠心功能,其各剂量组大鼠尿AQP-2浓度及肾脏AQP-2表达水平均明显下降（P〈0.01或P〈0.05）;随参附强心合剂剂量的增加,AQP-2浓度逐渐下降,EF值逐渐升高;EF值与AQP-2间有良好的线性负性相关关系（P〈0.01）。结论参附强心合剂可有效改善心衰大鼠心功能,降低AQP-2浓度,且呈一定的剂量依赖性;其作用机制与降低心衰大鼠AQP-2浓度有关。     

苏子油对肥胖大鼠肝脏VLDL合成关键基因表达的影响

【摘要】目的 探究富含n-3多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）的苏子油高脂饮食对肥胖大鼠肝脏极低密度脂蛋白（very low density lipoproteins，VLDL）合成关键基因表达的影响。方法 造模期：雄性SD大鼠随机分为2组，对照组（normal control group, NC）给予普通日粮，高脂组（high fat group, HF）给予高脂纯合日粮诱发肥胖大鼠模型；干预期：将肥胖大鼠随机分为4组:持续高脂组（consistent high fat group, CHF）和三个苏子油(perilla oil, PO)替代组，根据PO替代CHF中猪油比例的不同将替代组分为20%PO、50%PO、100%PO，4周后测定大鼠血清甘油三酯（Tryglyceride, TG）水平；Western blotting方法检测肝脏VLDL合成关键蛋白微粒体甘油三脂转运蛋白(microsomal triglyceride transfer protein，MTP)和载脂蛋白B（apolipoprotein B，APOB）蛋白表达；real time PCR方法检测肝脏Mtp、Apob mRNA表达。结果 肥胖大鼠血清TG水平显著高于NC组，并且有严重的脂肪沉积，肝脏MTP和APOB的mRNA、蛋白表达均有不同程度的降低；干预4周后，与CHF组相比，各PO替代组大鼠血清TG水平明显降低，病理切片结果显示肝脏脂肪沉积有明显改善，并且肝脏MTP和APOB的mRNA、蛋白表达均有不同程度的升高。结论 不同比例PO替代均能促进肥胖大鼠肝脏VLDL合成与分泌，改善肝脏脂肪沉积，并且PO促进Mtp mRNA、蛋白表达具有剂量依赖性。     

益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达水平的影响

目的 观察益气活血方（由丹参、黄芪、香加皮等组成）对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌钠钙交换蛋白（Sodium-calcium exchanger,NCX）与肌浆网钙泵-2a（SR calcium ATPase-2a,SERCA2a）mRNA及蛋白表达水平的影响,初步探讨益气活血方改善慢性心衰大鼠心功能的作用机制。方法 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌梗死后慢性心力衰竭模型。实验分6组：假手术组,模型组,卡托普利组,益气活血方高、中、低3个剂量组,连续ig给药4周后取材,检测心肌组织NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达。结果 各给药组均可不同程度的下调NCX mRNA的表达,上调SERCA2a mRNA的表达,其中益气活血方高、低剂量组以及卡托普利组与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）;各给药组均能降低NCX/SERCA2a mRNA的比值,与模型组比较差异显著（P＜0.05）。各给药组均有下调NCX蛋白、上调SERCA蛋白表达的趋势,但与模型组相比无显著差异（P＞0.05）。结论 益气活血方能够降低CHF大鼠NCX mRNA的表达,升高SERCA mRNA的表达,降低NCX/SERCA mRNA的比值,调节心肌细胞内钙循环,从而改善心肌的舒缩功能,其可能为益气活血方改善心脏功能、抗心力衰竭的机制之一。     

加参方对CHF大鼠缩血管保钠和扩血管排钠因素的影响

目的：通过对加参方治疗前后神经内分泌因子和细胞因子检测,以探讨加参方增强心功能、减少水钠潴留的作用机制。方法：各组大鼠灌胃给药4周后,处死取血5mL,用放免方法测定内分泌因子和细胞因子变化。结果：加参方能够明显抑制CHF大鼠的RAAS系统的AngⅡ、AID,降低ET、AVP、ANP,升高CGRP。结论：加参方很可能通过干预神经内分泌系统,减轻了心衰的发展,改善了水钠潴留。     

AQP-2在慢性心力衰竭小鼠肾脏中的表达及意义

目的研究水通道蛋白-2（Aquaporin，AQP-2）在实验性慢性心力衰竭（Chronic heart failure，CHF）早期（冠脉结扎2周）和晚期（冠脉结扎12周）小鼠肾脏组织中的表达及意义。方法以左冠状动脉结扎建立小鼠CHF模型。先镜下观察冠脉结扎心衰小鼠肾组织病理改变；用免疫组织化学法检测心衰小鼠肾组织AQP-2蛋白表达；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测心衰小鼠肾脏组织AQP-2mRNA表达。结果冠脉结扎2周后，肾小管可见水肿改变，结扎12周后，肾小管有明显空泡形成；结扎12周后肾组织AQP-2基因和蛋白表达显著高于结扎2周组和假手术组，其中结扎2周组较假手术组也有显著增高。结论CHF小鼠肾组织存在AQP-2基因和蛋白表达增加，且随着心力衰竭加重表达增强。     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏中内质网应激及炎症反应的抑制作用

【摘要】 目的 探讨内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）及相关炎症反应在糖尿病大鼠肾脏损害中的作用及血管紧张素II受体拮抗剂缬沙坦对其的影响。 方法 采用腹腔注射链脲佐菌素方法建立糖尿病肾病大鼠模型。将大鼠随机分为对照组（Con组）、糖尿病组（DM组）、缬沙坦组（DM V组）。缬沙坦组每日灌胃给予缬沙坦（10mg/kg）共6周。应用免疫组化法及Western blot方法检测ERS相关蛋白P-IRE1α、P-JNK及中性粒细胞趋化因子MCP-1的表达及定位，实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测IRE1α、JNK及MCP-1mRNA表达变化。同时观察各组大鼠尿蛋白、BUN、Scr等指标的变化。 结果 与Con组相比，DM组大鼠肾脏病理炎症细胞浸润加重，P-IRE1α、IRE1α、P-JNK、MCP-1蛋白表达上调，IRE1αmRNA、MCP-1mRNA表达水平上调;与DM组相比，DM V组肾脏病理炎症细胞浸润减轻，P-IRE1α、IRE1α、P-JNK、MCP-1蛋白表达下调，IRE1αmRNA、MCP-1mRNA表达水平下调。3组间JNKmRNA及蛋白表达无明显差异。 结论 糖尿病大鼠肾脏中存在内质网应激和炎症反应的激活，缬沙坦可能部分通过抑制内质网应激中的IRE1/JNK/MCP-1通路，减少炎症反应，从而发挥肾脏保护作用。     

参附注射液对脓毒症大鼠心肌Bcl-2、Bax表达的影响

目的：通过观察参附注射对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,阐明参附注射液抗脓毒症心肌损伤的相关机制。方法：雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组、模型组和参附组,每组8只。以盲肠结扎穿孔（Cecal Ligation and Puncture,CLP）法建立脓毒症大鼠动物模型,观察各组大鼠心肌酶谱变化;凋亡原位末端标记法(TUNEL) 检测心肌细胞凋亡指数,RT-PCR 法检测心肌细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达。结果：参附组大鼠心肌酶谱升高程度较模型组低（P<0.05）,模型组较假手术组心肌酶水平高（P<0.05）;参附组大鼠心肌细胞TUNEL评分平均光密度（MOD）较模型组明显降低（P<0.05）,模型组较假手术组升高（P<0.05）;参附组大鼠心肌细胞Bcl-2 mRNA表达较其他两组均升高（P<0.05）,而Bax mRNA表达较其他两组降低（P<0.05）。结论：参附注射液能减轻脓毒症大鼠的心肌损伤,其作用机制与上调Bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA表达,减少心肌细胞凋亡相关。     

麦门冬汤对大鼠骨髓间充质干细胞向肺泡上皮细胞分化的影响

[目的]观察麦门冬汤含药血清对促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）向肺泡上皮细胞分化的影响。[方法]分别予麦门冬汤大鼠血清、肺纤维化模型大鼠血清、肺纤维化模型大鼠+麦门冬汤血清对绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞（GFP-BMSC）进行干预14 d,通过免疫组化、实时荧光定量聚核酶链反应（qPCR）方法,检测各组GFP-BMSC细胞肺表面活性蛋白（SP-C）、水通道蛋白-5（AQP-5）蛋白及mRNA的表达。[结果]模型组、模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5蛋白表达明显高于DMEM对照组、麦门冬汤组（P<0.01）,其中模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5表达明显高于模型组（P<0.01）。[结论]麦门冬汤在肺纤维化环境中可促进GFP-BMSC向肺泡上皮细胞分化,该作用可能是其改善肺纤维化的重要机制。     

清肺化痰胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道上皮水通道蛋白-5表达的实验研究

[目的] 通过用清肺化痰胶囊治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠探讨其对大鼠气道上皮水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响进而探讨中药治疗COPD的作用机制。[方法] 36只雄性Wistar成年大鼠随机分为模型组、空白组、清肺化痰组、氨溴索组、痰热清组、红霉素组。造模并干预后, 免疫组化及图像分析法观察并测定各组AQP-5水平, 酶联免疫吸附测定法(ELISA法)测定各组肺组织匀浆中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平。[结果] 肺细支气管上皮细胞AQP-5蛋白面积百分比、积分光密度、肺组织匀浆NE水平模型组明显低于清肺化痰组、沐舒坦组、红霉素组、痰热清组和空白组(P<0.05);清肺化痰组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05).[结论] 清肺化痰胶囊能降低NE的含量, 调节AQP-5的表达, 调节黏蛋白分泌, 从而改善黏液高分泌状态, 起到缓解COPD临床症状、促进排痰、提高生活质量的目的。     

益心定悸方含药血清对人脐静脉内皮细胞VEGF表达影响的研究

[目的] 通过观察益心定悸方对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响探讨其治疗冠心病快速心律失常的作用机制, 同时为临床应用提供客观依据。[方法] 用20只雄性Wistar大鼠制备含药血清, 将内皮细胞接种在两种血清培养基上, 采用免疫组化方法测定VEGF的表达。[结果] 含药血清组细胞边界和核结构清晰细胞核颜色深染, 正常血清组VEGF仅有微弱表达。[结论] 益心定悸方能够明显促进VEGF表达, 这可能是本方治疗冠心病快速心律失常的作用机制之一。     

通补心宝胶囊治疗慢性充血性心力衰竭临床机制研究

[目的]通过比较通补心宝胶囊和补益强心片治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)临床疗效和对CHF患者血浆内皮素(ET)、一氧化氮(N0)及脑钠肽(BNP)的影响观察。[方法]选取120例心肾阳虚、血瘀湿阻型慢性充血性心力衰竭患者,采用随机数字表法,随机将其分为治疗组和对照组,两组均口服常规西药,治疗组加服通补心宝胶囊,对照组加服补益强心片,2个月为1个疗程。观察两组患者治疗前后中医证候、生活质量、心功能、心脏彩色多普勒超声心动图、血浆ET、NO、BNP指标检测。[结果]与对照组比较,治疗组心衰症状、生活质量及心功能明显提高(P<0.05),射血分数(EF)、心室舒缩末期内径(LVESD)均有明显改善(P<0.05),治疗组NO、ET及BNP水平明显降低(P<0.05)。[结论]通补心宝胶囊在改善慢性充血性心力衰竭症状、生活质量的同时能明显抑制CHF患者血浆ET、NO水平升高,降低BNP水平,且能明显改善和调整CHF血流动力学。     

益气活血中药对心力衰竭大鼠MMP-1、TIMP-1影响的实验研究

[目的]观察益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。[方法]选用雄性SD大鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心力衰竭的动物模型。将造模成功的大鼠随机分为3组:模型组、中药组和西药对照组;中药干预6周后,将动物处死,取其心肌组织,利用实时定量荧光聚合酶链反应(PCR)技术和蛋白印迹分析法(Western blot)分别检测心肌组织中MMP-1、TIMP-1基因表达和蛋白表达。[结果]与对照组比较,大鼠模型组MMP-1的表达高于正常组(P<0.01),而TIMP-1的表达明显低于正常组(P<0.01);中药组和西药组MMP-1的表达均低于模型组(P<0.01),TIMP-1的表达明显高于模型组(P<0.01)。[结论]益气活血中药可以下调MMP-1的表达,增加TIMP-1的表达,从而阻止MMP-1对心肌细胞外基质结构的破坏作用,延缓心肌重塑,改善心脏功能,从而阻止CHF的发展。     

参麦注射液治疗充血性心力衰竭50例

[目的]观察参麦注射液治疗充血性心力衰竭的疗效。[方法]将患者随机分为两组,对照组进行常规治疗,治疗组采用常规治疗加参麦注射液治疗,观察疗效。[结果]充血性心力衰竭应用参麦注射液治疗2周后,患者左室收缩功能得到明显改善,未发现药物不良反应。[结论]参麦注射液治疗充血性心力衰竭安全有效。     

固肠胶囊对慢性溃疡性结肠炎大鼠炎症介质及结肠黏膜的影响

[目的]观察固肠胶囊对慢性溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)水平及结肠病理组织的影响,探讨其可能作用机制。[方法]Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、固肠胶囊高、中、低剂量组,采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液及葡聚糖硫酸钠(DSS)联合应用复制大鼠慢性UC模型,于造模缓解复发期灌胃给药10 d,观察各组大鼠疾病活动指数(DAI),结肠黏膜损伤指数(CMDI)及病理组织学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α、IL-10水平。[结果]与空白对照组比较,模型组DAI、CMDI评分及血清TNF-α水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,固肠胶囊能明显升高血清IL-10水平(P<0.05),降低DAI、CMDI评分(P<0.01)及血清TNF-α水平(P<0.05),促进溃疡修复。[结论]固肠胶囊可通过抑制血清TNF-α表达、促进血清IL-10表达,抑制炎症进展,减轻结肠组织因过度免疫介导作用而导致的肠黏膜损伤而治疗慢性UC。     

丹酚酸B对急性心肌缺血/再灌注损伤大鼠心肌保护作用的机制研究*

[目的]通过观察丹酚酸-B对心肌缺血再灌注损伤大鼠的实验观察探讨其作用机制.[方法]将实验动物分为5组,假手术组、模型组、卡托普利组、复方丹参片组、丹酚酸-B组分别给于不同处理因素.[结果]丹酚酸-B可降低RI大鼠血浆AT-1、ET、TXA2、TNF、Ca2+水平,提高PGI2、SOD水平,明显优于复方丹参片组及模型组(P＜0.05).[结论]丹酚酸-B具有较好的RI心肌细胞保护作用.