白细胞介素与基因多态性在婴幼儿RSV感染中的作用研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿下呼吸道感染的常见病原体。婴幼儿RSV感染明显提高哮喘的发病率。RSV感染婴儿中一部分白细胞介素水平异常升高而另一部分降低,而白细胞介素的变化受基因多态性的影响,因此,白细胞介素及其基因多态性在RSV感染中发挥重要作用。了解白细胞介素及其基因多态性在婴幼儿RSV感染中的作用,可更好地理解其发病机制,有助于采取预防措施控制RSV感染的发展。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎免疫发病机制的研究

目的　研究呼吸道合胞病毒毛细支气管炎 (简称RSV毛支 )免疫发病机制。方法　对 12例确诊为呼吸道合胞病毒毛细支气管炎急性期患儿 (毛支组 )和 10例年龄匹配的健康婴幼儿 (对照组 )外周血T细胞亚群和单核细胞 (PBMC)分泌的细胞因子IFN -γ和IL - 4进行检测。结果　毛支组CD8+T淋巴细胞和NK细胞明显低于对照组 (P <0 0 2 ,0 0 1) ,CD3+T、CD4 +T、CD4 +T/CD8+T与对照组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。毛支组IFN -γ水平明显低于对照组 (P <0 0 1) ,IL - 4,IL - 4/IFN -γ较对照组明显增高 (P <0 0 1,0 0 1) ,且IFN -γ与IL - 4呈负相关 (r =- 0 81,P <0 0 5 ) ;毛支组中特应征 +患儿与特应征 -比较 ,前者IFN -γ明显降低 (P <0 0 1) ,IL - 4和IL - 4/IFN -γ明显增高 (P <0 0 1,0 0 5 )。结论　RSV毛支急性期存在Th1/Th2 平衡紊乱 ,表现Th2 优势应答 ,与遗传特应征与细胞因子分泌异常有一定关系 ,同时NK和CD8+T细胞在RSV毛支免疫发病机制中也起重要作用。     

Bronchiolitis: assessment and evidence-based management

Viral bronchiolitis is the commonest cause of hospital admission in young infants. Respiratory syncytial virus is responsible for most cases of bronchiolitis. Secondary bacterial infection is rare and antibiotics are seldom necessary. Most children with bronchiolitis develop only mild illness and can be managed at home. Infants born prematurely, those with pre-existing cardiac or respiratory disease, and infants in the first three months of life are more likely to need hospital admission. On current evidence, nebulised adrenaline, inhaled and systemic corticosteroids, and inhaled bronchodilators do not have a role in the routine management of infants with bronchiolitis.     

呼吸道合胞病毒感染患儿血清嗜酸性粒细胞趋化蛋白测定的临床意义

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染患儿血清嗜酸性粒细胞趋化蛋白(eotaxin)的表达与呼吸道高气道反应的相关性。方法收集40例RSV感染患儿的血清,其中27例为哮喘急性发作患儿(哮喘组),13例为喘息性支气管炎(喘支组),采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测其血清eotaxin的含量,并与正常对照组比较。结果哮喘组与喘支组及正常对照组的eotaxin含量比较均有显著性意义(P<0.05)。血清eotaxin的水平与外周血嗜酸性粒细胞(Eos)总数呈正相关(r=0.4196,P<0.001)。结论RSV感染后血清趋化因子表达增加,导致气道高反应是RSV感染致哮喘的病理基础。     

Detection of respiratory syncytial virus in nasopharyngeal secretions by 24-well plate precentrifugation assay using a monoclonal antibody against F protein

BACKGROUND: Respiratory syncytial virus (RSV) is responsible for 50% of all bronchiolitis and 25% of pneumonia cases during the first month of life. Detection of the RSV antigen by immunofluorescence in exfoliated nasal epithelium or by other methods in nasopharyngeal swabs is useful in the potentially infected patient because results are available within a few hours. In contrast, RSV antigen detection in cell culture may require as much as 3 weeks. METHODS: Three methods for detection of respiratory syncytial virus in 131 clinical respiratory specimens from patients with acute respiratory disease and bronchiolitis were compared utilizing the following: a precentrifugation immunofluorescence assay using Hep-2 cells, indirect immunofluorescence assay, and conventional tube cell culture using Hep-2 cells. RESULTS: Respiratory syncytial virus was identified in 36 specimens by the three methods previously described. The virus was recovered in 41 (31.3%) samples by precentrifugation immunofluorescence assay, 40 (30.5%) were identified by the immunofluorescence technique, and 38 (29.0%) cases were positive by conventional cell culture. The sensitivity of the precentrifugation assay in relation to the immunofluorescence technique was 90%, the specificity 94.5%, and the agreement, 96.2%. A positive predictive value of 90.2% was obtained. Sensitivity, specificity, agreement, and positive predictive values obtained by the precentrifugation assay variant compared to the conventional cell were 90.8%, 94.5%, 93.1%, and 87.8%, respectively. CONCLUSIONS: The precentrifugation immunofluorescence assay method was as sensitive as the remainder of the methods used in our study and represents a valid alternative for rapid detection of respiratory syncytial virus in clinical samples.     

Intussusception in a child with respiratory syncytial virus: a new association

Intussusception is known to be associated with childhood viral illnesses. Respiratory syncytial virus (RSV) has not, to our knowledge, been previously reported in association with intussusception. We report a case of a 4-month-old boy admitted with RSV bronchiolitis, who subsequently developed an intussusception during the hospital course, necessitating laparotomy and resection.     

呼吸道合胞病毒感染大鼠脊髓背根节信号转录因子的研究

目的：研究反复呼吸道合胞病毒（RSV）感染大鼠脊髓背根节感觉神经细胞转录因子的活化状态变化。 方法：1～2周龄 SD大鼠幼鼠共80只,区组随机分为对照组和RSV感染组,每组40只。 RSV感染组采用每周1次RSV(浓度5 ×105 U/mL)滴鼻法制作RSV慢性感染模型,对照组采用无病毒培养上清液滴鼻。8周后每组取5只大鼠进行气道反应性测定。原位杂交检测肺组织RSV RNA以证明呼吸道合胞病毒感染模型的可靠性。用TranSignal蛋白质/DNA活性芯片筛选C7~T5脊髓背根节组织中活性改变的转录因子。Western印迹对筛选结果中改变最明显的因子进行验证。结果：RSV感染组气道阻力增幅显著大于对照组(P＜0.05)。原位杂交显示RSV感染组肺组织有大量呼吸道合胞病毒存在,HE染色示肺部存在明显炎症细胞浸润,说明呼吸道合胞病毒感染模型建立成功。TranSignal蛋白/DNA组合芯片检测筛选：RSV反复感染大鼠背根节55个转录因子活性上调(RSV感染组/对照组>2),43个活性下调(RSV感染组/对照组<0.5)。Western印迹验证结果与芯片结果一致,并进一步明确蛋白/DNA组合芯片筛选的IRF转录因子是IRF-1,而不是IRF-2。结论：反复RSV感染可引起气道反应性增高和脊髓背根节感觉神经细胞内多种转录因子活性发生改变,可能与气道反应性增高的神经调控异常有关。     

呼吸道合胞病毒感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的观察

【】 目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力变化的影响。方法 6～8周龄雄性BalB/c小鼠30只,每组10只,随机分为空白组、OVA组(哮喘模型组)、OVA/RSV组(RSV+哮喘模型组)3组。OVA组用卵清蛋白(OVA)致敏和激发;OVA/RSV组在OVA 致敏后,隔日用RSV滴鼻,连续3次,复制急性病毒感染哮喘模型;空白组予等量PBS。末次激发24h后,用小鼠动物呼吸机(Buxco RC系统)检测小鼠气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析;留取肺组织,进行HE染色、PAS染色、VG染色,观察肺组织炎症反应。结果 OVA组肺功能和BALF嗜酸粒细胞比例(EOS％)与正常组相比差异有显著性 (P<0.05);OVA/RSV组肺功能和BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％) 与正常组相比有极显著性差异(P<0.01);OVA/RSV组气道反应性及BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％)与哮喘组相比差异有显著性 (P<0.05)。OVA组小鼠肺组织有炎性细胞浸润,气道可见粘液分泌物,气道周围可见胶原增生。OVA/RSV组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,肺泡腔明显狭窄,毛细血管扩张充血,气道可见明显粘液分泌物,气道周围胶原增生明显。结论 呼吸道合胞病毒感染能明显增加重哮喘模型小鼠肺部组织炎症反应同时气道阻力明显增高。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿中性粒细胞活化及蛋白酶平衡的研究

目的 探讨呼吸道合胞病毒毛细支气管炎(毛支)气道局部中性粒细胞活化及蛋白酶平衡状况.方法 收集符合毛支诊断标准的住院患儿30例,根据入院Lowell评分,≥10分为重度组(11例),<10分为轻度组(19例);20例治疗7～12 d后症状缓解采取标本作为恢复组,细菌性肺炎(肺炎)组24例,对照组15例.测定各组鼻咽吸出物中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、白细胞介素(IL)-8浓度、α1抗胰蛋白酶(α1AT)和蛋白酶抑制力.结果 毛支组中性粒细胞比例、NE、IL-8浓度(0.528、6.39×107kg/L、13.62×109kg/L)均明显高于对照组(0.074、2.53×107kg/L、2.64×109kg/L,均P<0.05)和恢复组(0.306、1.23×107kg/L、5.95×109kg/L,均P<0.05).恢复组中性粒细胞比例和IL-8浓度仍高于对照组(均P<0.05),重度毛支组该两项指标均高于轻度组(均P<0.05).毛支组α1AT表达高于恢复组(0.49比0.09,P<0.05),与对照组(0.26)比较差异无统计学意义.毛支组出现游离NE活性为6/30,与肺炎组7/24比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 呼吸道合胞病毒毛支气道局部存在大量中性粒细胞聚集活化和蛋白酶系统失衡,并可能在其发病中起重要作用.     

呼吸道合胞病毒感染对豚鼠肺组织M受体变化的影响

目的:研究豚鼠感染呼吸道合胞病毒(RSV)后不同时间内肺组织M胆碱能受体数量和功能的改变。方法:建立RSV感染豚鼠的动物模型,用放射配基结合分析法测定肺组织M胆碱能受体的数量和亲和力。结果:鼻内滴入RSV3天后,豚鼠肺组织就出现炎症改变,5～7天达高峰,14天基本恢复正常。肺组织病毒分离及免疫荧光检查均证实为RSV感染。放射配基结合分析表明肺组织M受体在感染RSV后3天就出现受体最大结合容量(Bmax)增高,平衡解离常数(Kd)值降低,第5、7天时,Bmax达高峰,Kd值达最低值,第21天仍与对照组差异显著(P<0.05)。结论:鼻内滴入RSV可形成豚鼠RSV感染模型。RSV感染后引起肺组织M受体数量的增加,亲和力上升,这种改变持续时间较长,是引起气道高反应性的主要原因之一。     

重庆儿童医院112例毛细支气管炎病原分布特征分析

目的探讨重庆地区住院毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中HBoV和其他10种呼吸道病毒检出率及其流行特征变化。方法收集2006-2008年的毛细支气管炎发病高峰季节(2006年11月至2007年3月和2007年11月至2008年3月)住院毛细支气管炎患儿的鼻咽分泌物,首先通过直接免疫荧光进行呼吸道常见7种病毒筛查,然后提取鼻咽分泌物病毒的DNA和RNA,用PCR/RT-PCR的方法检测HBoV等其余10种常见呼吸道病毒相应基因片段。结果①两时间段患儿的年龄比较,差异具有显著性(P<0.01)。临床症状中,发热、呕吐、气促的发生例数差异具有显著性(P<0.05)。其余情况差异均不显著;②重庆地区住院毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中共检出十余种呼吸道病毒,112例患儿呼吸道标本中共检出呼吸道病毒阳性84例(75%),其中单一病毒阳性45例(40.18%),2种或2种以上病毒合并阳性39例(34.82%),2006年11月至2007年3月和2007年11月至2008年3月毛细支气管炎发病高峰季节毛细支气管炎患儿病毒检出情况不同;③112例患儿中最常见的为RSV,其余依次为PIV3,RV等,检出HBoV10例,均为合并感染。结论...     

复方野马追胶囊抗呼吸道合胞病毒研究

目的 观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒（RSV）感染及炎性因子IL-8释放的抑制作用。方法 采用细胞病变（CPE）观察和活细胞染色方法,观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染细胞的保护。同时,通过ELISA法测定培养上清IL-8的变化。结果 复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染有抑制作用,其中以治疗法效果最为明显。同时该药对呼吸道合胞病毒感染后引起的IL-8释放也有明显抑制作用。结论 复方野马追胶囊具有明显的体外抗呼吸道合胞病毒感染、降低感染后气道炎症因子释放的作用。     

孟鲁司特治疗呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的疗效观察

目的：观察孟鲁司特（顺尔宁）治疗呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的临床疗效及预后。方法：对符合诊断标准的90例呼吸道合胞病毒毛细支气管炎儿童随机分为孟鲁司特治疗组52例和对照组38例。所有患儿均为首次发病,两组患儿均采用综合治疗,治疗组加用口服孟鲁司特4mg/次,1次/d,共用4周。观察两组患儿临床症状、恢复情况、住院天数,并对所有病例随访3个月,观察各组患儿喘息的复发率。结果：孟鲁司特治疗组较对照组症状缓解天数、住院天数明显缩短,差异有统计学意义（P〈0.05）。出院随访3个月,喘息复发次数明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎加用孟鲁司特治疗可有效改善患儿临床症状并缩短住院时间,降低呼吸道合胞病毒感染后喘息的复发率。     

呼吸道合胞病毒所致豚鼠中耳内耳病变的光镜观察

将呼吸道合胞病毒注入豚鼠中耳腔内,于接种后不同时间取材进行病毒分离,血清学检查及光镜观察。中耳粘膜病毒培养阳性率一周内为50％。血清特异性抗体IgG滴度呈逐渐增高的趋势。光镜观察中耳粘膜以变性坏死性炎症为主。伴有以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,三周后基本恢复。耳蜗毛细胞部分变性,少数坏死。前庭终器感觉毛细胞亦出现变性。结果表明:呼吸道合胞病毒能致豚鼠急性中耳炎症,并使内耳感觉毛细胞变性。     

单克隆抗体桥联酶标法快速诊断婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎调查研究

１９９１年１１月～１９９２年４月对河南省部分市及地区６９５例婴幼儿肺炎和毛细支气管炎住院患儿，采用单克隆抗体桥联酶标法快速诊断呼吸道合胞病毒肺炎。采集标本时间均在发病７天以内，男４０９例，女２８６例；年龄≤３岁６８８例，＞３岁７例。本调查显示，肺炎患儿呼吸道合胞病毒阳性检出率河南省各地为１４．９％～５６．１％，其总阳性检出率为４２．３％。表明该年度在本省广大地区呼吸道合胞病毒感染呈普遍流行趋势，其冬春季节发病月份以１１～１２月份为最高（５５．６％～５７．４％），其次为１～２月份（３５．２％～４０．０％）。呼吸道合胞病毒是婴幼儿肺炎主要病原体之一，早期快速诊断可及时指导治疗，并为小儿呼吸道感染流行病学监测和预防提供了依据。     

毛细支气管炎与白三烯受体拮抗剂

毛细支气管炎是婴幼儿常见的下呼吸道感染性疾病,病毒感染是主要致病原因。毛细支气管炎的病理、生理变化与哮喘有许多相同之处,许多炎性介质参与其中,造成呼吸道高反应,诱发喘息。在这些炎性介质中,白三烯在毛细支气管炎呼吸道炎症的发生中起到重要作用,而白三烯受体拮抗剂在毛细支气管炎的治疗中取得较好疗效。现就白三烯受体拮抗剂的作用机制及其在毛细支气管炎中的临床研究进行综述,探讨毛细支气管炎的治疗及早期干预以及降低喘息复发率的有效方法。     

Respiratory viruses detected in hospitalised paediatric patients with respiratory infections

Over 200 strains of respiratory viruses cause a variety of human infections ranging from common cold to life-threatening pneumonia. Respiratory viruses implicated in this study are respiratory syncytial viruses (RSV), adenovirus, influenza viruses and parainfluenza viruses. The objective of this study is to determine the epidemiology of respiratory viruses in paediatric patients with lower respiratory tract infection. The methods used were direct antigen detection method, shell vial culture method and conventional tube culture method. The samples included in this study are paediatric patients seen in Universiti Kebangsaan Malaysia Hospital, Kuala Lumpur with suspected acute viral respiratory infection, presenting with acute laryngotracheobronchitis (croup), bronchiolitis and pneumonia. Nasopharyngeal aspirates were collected and processed almost immediately. A total of 222 specimens were received during February 1999 to January 2000 showing a dual peak pattern in the months of April and December. The mean age of the patients was 13 months. Pneumonia (77.9%) was the most common clinical diagnosis in children with lower respiratory tract infection. This was followed by bronchiolitis (19.4%) and croup (27%). Viral aetiologies were confirmed in 23.4% of the patients. The most common respiratory virus isolated or detected was RSV, followed by parainfluenza viruses, influenza viruses and adenovirus.     

IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用

 目的 研究IL-33在呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染致哮喘急性发作中的作用。方法 将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白（ovalbumin,OVA）组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并致敏小鼠,再感染RSV致哮喘急性发作。麻醉后处死小鼠。ELISA法测小鼠血清总IgE水平、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺组织IL-33蛋白水平;瑞氏/吉姆萨染色后测BALF细胞总数及各细胞分类计数;取肺组织病理切片HE染色;real-time PCR测T辅助细胞2型（T helper 2,Th2）细胞因子、IL-33等mRNA表达。结果 OVA组与PBS组相比,血清IgE水平明显升高（P<0.05）。OVA/RSV组中BALF细胞总数较OVA组显著增加,主要表现为巨噬细胞和中性粒细胞的增加。病理切片HE染色可见OVA/RSV组小气道周围炎性细胞浸润更加明显。以上表明RSV感染OVA诱导哮喘急性发作的小鼠模型成功建立。real-time PCR显示：与OVA组相比,OVA/RSV组IL-13以及IL-33 mRNA表达显著增加（P<0.05）,IL-5和ST2表达有所增加,但差异无统计学意义。ELISA结果显示：与OVA组相比,OVA/RSV组肺组织中IL-33浓度增高更加显著（P<0.05）,BALF中IL-33浓度也有所增加,但差异无统计学意义。结论 IL-33可能通过启动Th2型免疫反应在RSV感染诱导哮喘急性发作小鼠模型中起重要作用。