电针膀胱经五脏俞对格林-巴利综合征家兔坐骨神经TNF-α IL-12影响的研究

目的:通过观察电针膀胱经五脏俞对格林-巴利综合征(GBS)家兔坐骨神经中T细胞Th1亚型细胞因子的影响,探讨电针膀胱经五脏俞治疗GBS作用机制。方法:采用国际公认的P2免疫动物模型(EAN),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观测电针膀胱经五脏俞对GBS家兔坐骨神经中TNF-α、IL-12mRNA表达水平的影响。结果:模型组TNF-α、IL-12 mRNA的表达明显增高,至发病高峰达最高,经过治疗后明显下降,第14天时电针组与免疫球蛋白组相比无明显差异(P>0.05)。结论:电针膀胱经五脏俞使TNF-α、IL-12的mRNA表达明显降低,拮抗Th细胞亚群的失衡,对GBS起到治疗作用。     

电针膀胱经五脏俞对格林-巴利综合征家兔淋巴细胞转化功能影响的研究

目的:通过观察电针膀胱经五脏俞对格林-巴利综合征(GBS)家兔脾中淋巴细胞转化的影响,探讨电针膀胱经五脏俞治疗GBS作用机制.方法:采用国际公认的P2免疫动物模型(EAN),采用MTT比色法检测电针膀胱经五脏俞对GBS家兔脾淋巴细胞转化OD值的表达水平的影响.结果:电针组与免疫球蛋白组的髓鞘脱失情况得到明显改善,细胞形态基本恢复.EAN家兔经电针膀胱经五脏俞治疗后,其淋巴细胞转化OD值表达水平明显下降,治疗第14 d时电针组淋巴细胞转化OD值较模型组明显降低(P＜0.01),与免疫球蛋白组相比无明显差异(P＞0.05).结论:电针膀胱经五脏俞对EAN家兔脾淋巴细胞转化功能有明显的抑制作用,提示电针膀胱经五脏俞可以抑制T细胞介导的免疫功能.     

电针五脏俞对格林-巴利综合征模型兔坐骨神经电生理功能的影响

目的:探讨电针膀胱经五脏俞治疗格林-巴利综合征(GBS)的作用机制.方法:选用健康大耳白兔80只,随机分成4组,即空白组、模型组、电针组、免疫球蛋白组,每组各20只.采用国际公认的P2免疫动物模型,电针组采用电针膀胱经五脏俞进行治疗,免疫球蛋白组家兔按每日80 mg/kg给予提取的兔免疫球蛋白静脉注射进行治疗.各组分别于第7、14 d各评价1次,观察2种方法对GBS家兔坐骨神经运动传导速度(MCV)、F波的影响.结果:急性变态反应性神经炎(EAN)家兔坐骨神经MCV明显减慢,治疗第14 d时电针组家兔坐骨神经MCV较模型组明显提高(P<0.01),F波异常例数与模型组相比明显减少(P<0.05).结论:电针膀胱经五脏俞能提高GBS模型兔坐骨神经MCV,降低坐骨神经异常F波出现率.     

中药清热利湿饮对HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA及分泌IL-8、IL-10的影响

目的:揭示中药清热利湿饮对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的作用机制。方法:以HaCaT细胞为研究对象,分别采用RT-PCR技术及ELISA方法观察中药清热利湿饮提取液对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的影响。结果:清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-6mRNA和IL-8mRNA的表达有下调作用,在药物浓度为10g/L和12.5g/L时,HaCaT细胞IL-10mRNA的表达量增强较为明显,与TNF-α诱导活化组相比,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-8的分泌有不同程度的抑制作用,但对IL-10的影响不明显。结论:清热利湿饮可下调IL-6mRNA、IL-8mRNA的表达,上调IL-10mRNA的表达,且此作用随药物浓度的升高而增强;同时可降低细胞IL-8的分泌,但对IL-10的分泌无明显的作用。     

电针内关穴对肝郁胸痹证大鼠IL-1、IL-2、IL-8表达的影响

目的:通过对比观察电针内关穴对肝郁胸痹证大鼠白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,探讨电针内关穴对肝郁胸痹证的治疗机制。方法:选取雄性健康SPF级大鼠40只,分为4组:空白组(n=10)、模型组(n=10)、电针治疗组(电针内关穴)(n=10)、电针对照组(电针非经非穴)(n=10)。除空白组外,其他组均以高脂饮食加注射垂体后叶素,并配合慢性束缚及游泳建立肝郁胸痹证大鼠模型,内关穴组与非经非穴组采用电针治疗,连续14 d。采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清IL-1、IL-2、IL-8表达。结果:与空白组比较,模型组的IL-1、IL-2、IL-8含量明显升高(P0.01);与模型组比较,电针治疗组和电针对照组的IL-1、IL-2、IL-8含量降低(P0.01)。与电针对照组比较,电针治疗组的IL-1、IL-2、IL-8含量降低(P0.05)。结论:电针内关穴能对肝郁胸痹证所产生的炎症因子有特异性调控作用,对肝郁胸痹证有一定的治疗作用。     

寿胎丸对自然流产模型小鼠母胎界面TNF-αmRNA和IL-4mRNA表达的影响

目的:探讨寿胎丸对反复自然流产模型小鼠蜕膜组织Th1/Th2型细胞因子TNF-αmRNA和IL-4mRNA表达的影响.方法:设立正常妊娠与自然流产模型,并将自然流产模型小鼠随机分为4组,分别为模型组,寿胎丸低剂量组,寿胎丸中剂量组,寿胎丸高剂量组,应用原位杂交法检测孕14 d各组蜕膜组织TNF-αmRNA和IL-4mRNA的表达.结果:TNF-αmRNA和IL-4mRNA在各组均有表达,与正常妊娠组相比模型组TNF-αmRNA明显升高(P＜0.01),IL-4mRNA表达明显降低(P＜0.05);与模型组相比寿胎丸低、中、高剂量组TNF-αmRNA表达明显降低(P＜0.01),IL-4mRNA表达明显升高(P＜0.05),但与正常妊娠组相比均无明显差异(P＞0.05).结论:寿胎丸可能通过降低自然流产小鼠模型TNF-αmRNA表达、升高IL-4mRNA表达.从而调控Th1/Th2型细胞因子的平衡,以达到治疗反复自然流产的目的.     

电针对家兔坐骨神经损伤后IL-1β的影响

目的:探讨电针治疗坐骨神经损伤的机理。方法:建立右侧坐骨神经挤压伤家兔模型,然后进行电针治疗,用ABC-ELISA法测定坐骨神经组织与脊髓腰膨大段中IL-1β水平。结果:电针治疗2个疗程后,在原损伤局部,模型对照组IL-1β含量高于空白对照组(P<0.05),有显著性差异;电针治疗组IL-1β含量低于模型对照组(P<0.05),有显著性差异;对于脊髓腰膨大段来说,电针治疗组IL-1β含量明显高于模型对照组(P<0.01),有非常显著性差异。结论:家兔坐骨神经损伤后,应用电针治疗可以降低损伤局部IL-1β含量,这可能与电针的抗炎镇痛作用有关;而对脊髓腰膨大段IL-1β含量则有明显的升高作用,这说明电针可能通过升高脊髓组织中IL-1β含量刺激神经生长因子产生,从而促进损伤坐骨神经神经元的修复。     

针灸预处理对摔跤运动员大负荷训练阶段IFN-γmRNA和IL-4mRNA表达的调节

目的:通过观察大负荷训练期间男子摔跤运动员IFN-γmRNA和IL-4mRNA表达水平的变化,探讨针灸预处理方法防治运动性免疫失衡的可能作用机制。方法:20例摔跤运动员,随机分为对照组(10例)和实验组(10例),在8周大负荷训练期间进行实验,分别在大负荷运动训练前,大负荷运动训练后、调整训练后采取外周静脉血共5次,采用实时荧光定量PCR检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)细胞因子mRNA的表达量。结果:摔跤运动员IFN-γmRNA表达变化,对照组W8与同组W2和W5相比明显降低(P0.05),调整后W9明显高于W8(P0.01);实验组W9高于同组W2和W5(P0.05),实验组W8与同期对照组相比明显升高(P0.05)。IL-4 mRNA表达对照组W4、W5、W8、W9均高于同组W2(P0.05,P0.01);实验组W5与同组W2、W4相比明显升高(P0.01),W8、W9与同组W5相比明显恢复(P0.05),实验组W4、W8与同期对照组相比有统计学意义(P0.01、P0.05)。IFN-γmRNA/IL-4mRNA比值变化,对照组W4、W5、W8均低于同组W2(P0.05,P0.01);实验组W5明显低于同组W2(P0.05),W8、W9与W5相比明显恢复(P0.05),实验组W8和W9与同期对照组相比有统计学意义(P0.01)。结论:大负荷训练期间运动员通过针灸预处理方法调节IFN-γ和IL-4细胞因子mRNA的表达水平,进而维持运动员Th1/Th2细胞因子的动态平衡,这可能是针灸延缓或防止运动员免疫机能下降或失衡的机制之一。     

寿胎丸对自然流产模型小鼠母胎界面INF-γ和IL-10表达的影响

目的:探讨寿胎丸对反复自然流产模型小鼠蜕膜组织Th1/Th2细胞因子IFN-γ和 IL-10表达的影响.方法:建立正常妊娠与自然流产模型,并将自然流产模型小鼠随机分为4组,分别为模型组,寿胎丸低剂量、中剂量组、高剂量组,应用免疫组化法检测孕14天各组蜕膜组织IFN-γ和IL-10的表达.结果:IFN-γ和IL-10在各组均有表达,与正常妊娠组相比模型组IFN-γ明显升高(P<0.05),IL-10表达明显降低(P<0.05);与模型组相比寿胎丸低、中、高剂量组IFN-γ表达明显降低(P<0.05),IL-10表达明显升高(P<0.05),与正常妊娠组相比均无明显差异(P>0.05).结论:寿胎丸可能通过降低自然流产小鼠模型IFN-γ表达、升高IL-10表达,从而调控Th1/Th2型细胞因子的平衡,以达到治疗反复自然流产的目的.     

寿胎丸对自然流产模型小鼠母胎界面INF-γ和IL-10表达的影响

目的:探讨寿胎丸对反复自然流产模型小鼠蜕膜组织Th1/Th2细胞因子IFN-γ和IL-10表达的影响。方法:建立正常妊娠与自然流产模型,并将自然流产模型小鼠随机分为4组,分别为模型组,寿胎丸低剂量、中剂量组、高剂量组,应用免疫组化法检测孕14天各组蜕膜组织IFN-γ和IL-10的表达。结果:IFN-γ和IL-10在各组均有表达,与正常妊娠组相比模型组IFN-γ明显升高(P&lt;0.05),IL-10表达明显降低(P&lt;0.05);与模型组相比寿胎丸低、中、高剂量组IFN-γ表达明显降低(P&lt;0.05),IL-10表达明显升高(P&lt;0.05),与正常妊娠组相比均无明显差异(P&gt;0.05)。结论:寿胎丸可能通过降低自然流产小鼠模型IFN-γ表达、升高IL-10表达,从而调控Th1/Th2型细胞因子的平衡,以达到治疗反复自然流产的目的。     

电针对类风湿性关节炎大鼠血清及膝关节白介素-17和白介素-23的影响

目的:通过观察电针对类风湿性关节炎(RA)模型大鼠白介素-17(IL-17)和白介素-23(IL-23)表达的影响,探讨电针治疗RA的作用机制。方法:60只雄性Wistar大鼠,随机取8只为正常组,其余大鼠采用Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂复制RA模型。将造模成功的24只大鼠随机分为模型组、泼尼松组和电针组,每组8只。电针针刺大鼠双侧的"足三里"和"昆仑"穴,强度为1~2mA,频率2Hz/100Hz,每次30min,每日1次,连续治疗10次。分别在造模前、造模后和治疗结束后测量大鼠的踝关节直径,分别采用酶联免疫吸附法、蛋白印迹法检测大鼠血清和膝关节内的IL-17和IL-23含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠的踝关节直径、血清和膝关节内的IL-17和IL-23的含量均升高(P0.05);与模型组比较,经电针和泼尼松治疗后的大鼠踝关节直径、血清和膝关节内的IL-17和IL-23的含量均降低(P0.05);电针组与泼尼松组相比,除膝关节IL-17含量电针组高于泼尼松组外(P0.05),其余差异均无统计学意义(P0.05)。结论:电针对RA大鼠有治疗作用,减少血清和膝关节中IL-17和IL-23的分泌可能是其作用机制之一。     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。     

电针镇痛时炎症痛大鼠PAG部位I型白细胞介素-1受体mRNA表达的变化

目的 :本实验观察炎症痛和针刺镇痛时 ,大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)部位I型白细胞介素 1受体基因 (IL 1RImRNA)表达的变化。方法 :实验分正常组、炎症痛组、假电针组、电针组。正常对照组大鼠脚掌注射生理盐水 ,炎症痛各组大鼠脚掌注射 2 %角叉菜胶 ( 1 0 0 μL)造成炎症痛模型。在角叉菜胶注射 3hr后大鼠处于一种稳定的痛敏状态。电针组大鼠于造模前电针将致炎侧“足三里”和“昆仑”穴 3 0min ,假电针组大鼠给予同样处理但不通电。实验采用原位杂交技术 ,观察脚掌注射角叉菜胶 3hr后大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)部位IL 1RImRNA表达的变化及针刺对其的影响。结果 :致炎后 3hr大鼠痛阈显著降低 ,大鼠PAG部位的IL 1RImRNA表达显著增加 ,假电针组大鼠该部位的IL 1RImRNA表达与炎症痛组相比无显著变化 ,而电针组大鼠该部位的IL 1RImRNA阳性细胞数与假电针组相比显著减少。结论 :炎症痛可引起大鼠PAG部位的IL 1RImRNA表达增加 ,而电针镇痛则抑制炎症痛引起的大鼠PAG部位IL 1RImRNA表达     

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理.方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组.摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达.结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达皆显著降低.结论:滋阴补肾法能使骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达降低,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.     

祛异康对子宫内膜异位症大鼠腹腔液IL-2、IL-6的影响

目的:观察中药祛异康对子宫内膜异位症大鼠腹腔液IL-2、IL-6的影响,探讨其治疗子宫内膜异位症的机理。方法:将40只健康雌性SD大鼠随机分为4组:A组只行开关腹,B、C、D组均行内膜移植,造模完成后,A、B组以生理盐水灌胃,C、D组分别给予中药祛异康、西药丹那唑灌胃,4周后开腹收集腹腔液测定IL-2I、L-6表达水平。结果:祛异康可以降低异位症大鼠腹腔液中IL-2及IL-6浓度(P<0.05;P<0.01)。结论:祛异康能明显改善腹腔微环境,其治疗子宫内膜异位症的作用机理可能是通过改变腹腔液微环境,降低细胞因子IL-2、IL-6的水平,从而抑制异位内膜生长来实现的。     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠T细胞亚群及白介素-10的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠T细胞亚群及白介素-10的影响并探讨其作用机制。方法:2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液灌肠制备溃疡性结肠炎大鼠模型,实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、中药泄浊解毒方低、高剂量组;采用流式细胞术检测T细胞亚群(CD4+、CD8+),放射免疫法测定IL-10。结果:泄浊解毒方可明显升高CD+8含量,降低CD4+的水平,使CD4+/CD+8的比值保持一定比例,并能明显增加IL-10含量。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调整T淋巴细胞亚群间的失衡,增加IL-10含量有关。     

瑞香素对B淋巴细胞TLR1～10mRNA及IL-12 mRNA表达的影响

目的观察瑞香素对人外周血B淋巴细胞TLR1～10 mRNA及IL-12 mRNA表达的影响,研究瑞香素对B淋巴细胞作用的可能机制。方法尼龙毛柱分离法分离T、B淋巴细胞;MTT法探讨瑞香素作用B淋巴细胞的适宜浓度;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测瑞香素对B细胞TLR1～10 mRNA及IL-12 mRNA表达影响,同时检测用抗TLR4单抗封闭B细胞TLR4后TLR mRNA及IL-12 mRNA表达的变化。结果瑞香素浓度为6.25～25.00μg/ml时对B细胞增殖有明显增强作用(P<0.05),与SPA有较好协同作用,以浓度为12.50μg/ml瑞香素作用最强;瑞香素作用的未封闭组与封闭组的B细胞TLR4 mRNA、TLR9 mRNA、IL-12 mRNA表达均明显高于对照组(P<0.05);未封闭组B细胞TLR4 mR-NA、TLR9 mRNA、IL-12 mRNA表达量明显高于封闭组(P<0.05)。结论天然免疫途径中TLR4、TLR9参与瑞香素从基因转录水平增加IL-12的分泌,从而增强B淋巴细胞免疫功能。     

幽门螺杆菌阳性与消化性溃疡患者IL-8、IL-10、IL-12及NF-κB表达的关系研究

目的研究幽门螺杆菌(H.pylori)与消化性溃疡(PU)患者胃黏膜IL-8、IL-10、IL-12及NF-κB表达的关系。方法采用荧光定量PCR法测定168例H.pylori阳性和46例H.pylori阴性的消化性溃疡患者以及30例正常对照者的胃黏膜IL-8、IL-10、IL-12及NF-κB mRNA含量,H.pylori阳性患者清除H.pylori后复查。应用免疫组化检测IL-8、IL-10、IL-12与NF-κB在胃黏膜组织的表达。结果H.pylori阳性组胃黏膜IL-8I、L-12及NF-κBmRNA含量较H.pylori阴性组和正常对照组明显增高(P均=0.000);H.pylori阳性患者清除H.pylori后胃黏膜IL-8、IL-12及NF-κB mRNA含量降低(P均<0.05)。免疫组化结果显示H.pylori阳性组较H.pylori阴性组以及正常对照组IL-8、IL-12、NF-κB表达明显增强(P均<0.05)。结论H.pylori感染可以诱导胃黏膜合成和释放IL-8、IL-12及NF-κB,它们是引起PU炎症以及进一步病理损害的重要因子。     

健脾益气清幽汤对慢性浅表性胃炎大鼠胃组织淋巴细胞亚群及IL-2mRNA的影响

目的:探讨健脾益气清幽汤对慢性浅表性胃炎大鼠胃组织淋巴细胞亚群及IL-2 mRNA的影响.方法:将66只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、健脾益气清幽汤低、中、高剂量组及兰索拉唑组,用0.02%氨水给大鼠自由饮用,连续90 d,制备大鼠试验性浅表性胃炎动物模型.用HE染色检测动物造模成功,免疫组化检测胃组织CD3+,CD4+,CDH+T细胞.RT-PCR检测胃组织IL-2 mRNA表达.结果:健脾益气清幽汤高剂量组大鼠胃组织CD3+,CD4+T细胞数量明显升高,CD8+T细胞数量明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.01).高、中剂量组大鼠胃组织IL-2 mRNA表达明显增多,与模型组比较有显著性差异(P<0.01).结论:健脾益气清幽汤能明显提高胃组织淋巴细胞CD3+,CD4+T细胞数量及IL-2mRNA表达,降低CD8+T细胞数量,提高大鼠免疫功能,为慢性浅表性胃炎的致病机制及治疗提供了依据.