辽宁地区血小板志愿捐献者HPA基因资料库的建立

目的对辽宁地区血小板志愿捐献者进行HPA基因分型,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法采用PCR-SSP方法对随机抽取的130名血小板捐献者进行HPA-1-6和HPA-15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果辽宁地区血小板志愿捐献者HPA的基因频率分别是:HPA-1a0.9925、1b0.0075、2a0.9305、2b0.0695、3a0.5810、3b0.4190、4a1.0000、4b0.000、5a0.9810、5b0.0190、6a0.9885、6b0.0115、15a0.4615、15b0.5385。结论辽宁地区血小板志愿捐献者HPA-1—6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了辽宁地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

邢台地区血小板志愿捐献者HPA基因资料库的建立

目的对邢台地区血小板志愿捐献者进行人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)基因分型,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primers,PCR-SSP)方法对随机抽取的150例血小板捐献者进行HPA-1~6和HPA-1 5抗原系统共14个抗原基因分型。结果邢台地区血小板志愿捐献者HPA的基因频率分别为:HPA-1a 0.953,1b 0.01 0;2a 0.9 53,2b 0.086;3a0.596,3b 0.394;4a 1.000,4b 0:5a 0.967,5b 0.01 5:6a 0.986,6b 0.010;15a 0.475,1 5b 0.506。结论邢台地区血小板志愿捐献者HPA-1~6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-weinberg遗传定律,与其他地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,应建立邢台地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

青岛地区汉族人群HPA-1—5,15多态性分布研究

目的研究青岛地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1-5,15抗原分布多态性。方法采用PCR-SSP方法对青岛地区918名无血缘关系固定血小板无偿捐献者进行HPA1-5及HPA-15系统的基因分型.结果各被检系统等位基因频率分别是1a=0.9940,1b=0.0060,2a=0.9319,2b=0.0681,3a=0.5822,3b=0.4178,4a=0.9897,4b=0.0104,5a=0.9804,5b=0.0196,15a=0.4913,15b=0.5087;HPA基因频率分布与国内资料比较,HPA-1与北方人群(河南),HPA-2与南方人群(四川)差异有统计学意义;与台湾人群HPA-2,-4,与日本人群HPA-2,-3,-5,与美国黑人HPA-1,-2,-5,与白人HPA-1,-4,-5,-15分别有统计学显著性差异。结论青岛地区汉族人群HPA分布具有本地人群特点。本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为北方汉族人群HPA基因分布频率数据库和青岛本地化血小板供者HPA资料库。     

河北地区汉族人群人类血小板同种抗原等位基因频率研究

目的 调查河北地区汉族人群人类血小板同种抗原(HPA)系统等位基因频率.方法 该地区汉族人群血小板捐献者血液样本765份,采用PCR-SSP方法检测HPA1-17基因型,统计基因频率.结果 河北地区汉族人群中除HPA-1、2、3、4、5、6、15基因系统有b基因型别外,其他HPA基因系统均为a/a纯合子,HPA-3、15抗原不配合概率较高,分别为0.369 4、0.374 8.结论 在河北汉族人群中,HPA-3、15抗原不配合概率高,推测HPA-3、15是引起本地区血小板输注反应的主要原因,在血小板输血中应加以重视.     

河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究

摘要：目的：研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。 方法：用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。 结果：HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5; 2a 0.946 9,2b 0.053 1; 3a 0.590 6,3b 0.409 4; 4a 0.996 9,4b 0.003 1; 5a 0.990 6,5b 0.009 4; 6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。 HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ²检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。 结论:河南汉族人HPA-15 和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。     

豫北地区汉族无偿献血者血小板特异性抗原多态性研究

目的:研究豫北地区汉族无偿献血人群血小板抗原(HPA-1-5、15)系统多态性,构建一定规模的血小板HPA基因资料库,为临床提供匹配的单采血小板。方法:随机采集豫北5地区500名汉族无偿献血者外周血,用PCR-SSP方法进行HPA-1-5、15系统基因分型。基因及基因型频率采用直接计数法检测,HPA基因频率的群体分布情况采用Hardy-weinberg平衡检验,与其他地区和种族比较采用χ~2检验。结果:豫北地区无偿献血人群HPA-1-5、15血型系统基因分别为1a0.985、1b0.015;2a0.924、2b0.076;3a0.469、3b0.531;4a1.000;5a1.000;15a0.532、15b0.468。HPA-1-5、15基因型频率分别为1aa0.970、1ab0.030;2aa0.848、2ab0.152;3aa0.222、3ab0.494、3bb0.284;4aa1.000;5aa1.000;15aa0.282、15ab0.500、15bb0.218。与中国汉族人群相比,豫北地区无偿献血人群HPA-3b、5a增高,差异有统计学意义(P﹤0.05);与中国少数民族人群相比,HPA-3b、5a也升高,但HPA-2a降低(P﹤0.05)。与国外不同种族人群相比,HPA-1a、2a、3a、5a均有不同程度的升高。结论:豫北地区无偿献血人群HPA基因分布符合Hardy-weinberg平衡定律。与其他地区和国家资料相比,HPA显示出种族和地域性差异。豫北地区无偿献血人群HPA-3、15最具多态性。这为研究同种免疫性血小板减少症和开展血小板同型输注的相关研究提供理论依据。     

大连地区汉族人群血小板捐献者HPA基因多态性研究

目的 对大连地区汉族人群血小板捐献者HPA-1～17基因多态性进行分析,建立本地化的血小板捐献者HPA分型资料库.方法 应用PCR-SSP技术,对257名大连地区45岁以下的汉族无血缘关系的血小板捐献者HPA1～ 17系统基因进行分型.结果 大连地区汉族人群血小板捐献者的HPA基因频率如下:1a和1b分别为0.972 ...     

长沙地区固定血小板献血者血小板抗原1～5、15系统基因多态性及分析

目的了解长沙地区100名固定单采血小板献血者血小板抗原(HPA)1~5、15系统基因多态性。方法采用PCR-SSP法对样本进行HPA1~5、15系统的基因分型。结果HPA1~5、15系统基因在长沙地区血小板固定供者中的分布频率分别为1a:0.9900,1b:0.0100;2a:0.9600,2b:0.0400;3a:0.5050,3b:0.4950;4a:1.0000,4b:0.0000;5a:0.9900,5b:0.0100;15a:0.4750,15b:0.5250。结论HPA-3,15系统最具有多态性。     

流式细胞仪结合序列特异性寡核苷酸探针基因分型方法在血小板供者资料库建立中的应用

目的 探讨高通量流式细胞仪结合序列特异性寡核苷酸探针(FLOW-SSO)技术在人类血小板抗原( HPA)基因分型中的应用.方法 采用FLOW-SSO技术对1378例汉族血小板捐献者HPA1～6,15系统的基因型进行检测;并以10份国际输血协会(ISBT)第12届血小板免疫学术研讨会提供的质控样品对FLOW-SSO技术的可靠性进行考核.以3家供应商提供的不同聚合酶链反应-序列特异引物法(PCR-SSP)试剂,对50份血小板样品的基因分型结果进行比对试验.分型结果采用x2检验考察HPA系统的基因型频率分布是否符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.结果 通过FLOW-SSO方法获得的1379例血小板供者HPA等位基因频率如下,HPA-1a为0.9927,HPA-1b为0.0073,HPA-2a为0.9536,HPA-2b为0.0464,HPA-3a为0.5700,HPA-3b为0.4300,HPA-4a为0.9982,HPA -4b为0.0018,HPA-5a为0.9804,HPA-5b为0.0196,HPA-6a为0.9822,HPA-6b为0.0178,HPA- 15a为0.5337及HPA-15b为0.4663.基因频率检测结果经x2检验,其分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.ISBT提供的10份样品考核结果相符率为100％.50份血小板样本采用3种不同的PCR-SSP试剂测定的HPA1～6,15基因分型结果,与FLOW-SSO技术测定结果完全一致.结论 FLOW-SSO基因分型技术有便捷、重复性好及高通量等特点,适用于血小板供者资料库的血小板基因分型.     

2458名中国汉族人类HPA-1～6、15基因多态性的研究

目的分析中国汉族人群HPA-1～6、15系统的基因多态性,研究中国南、北方汉族人群HPA-1～6、15的基因分布。方法采用Luminex结合序列特异性寡核苷酸探针(flow-sequence specific oligonucleotide probes,FLOW-SSO)方法对2 458名深圳巿机采血小板无偿捐献者(其中南方人群1 554人,北方人群904人)进行HPA-1～6,15系统基因分型。采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)方法对有疑问的标本及罕见抗原(如HPA-1b/1b、2b/2b、5b/5b等)做进一步确认。结果中国汉族人群中HPA-1～6、15基因频率分别为,HPA-1a 0.991 7,HPA-1b 0.008 3,HPA-2a 0.955 2,HPA-2b 0.044 8,HPA-3a 0.558 6,HPA-3b 0.441 4,HPA-4a0.998 0,HPA-4b 0.002 0,HPA-5a 0.986 2,HPA-5b 0.013 8,HPA-6a 0.985 6,HPA-6b 0.014 4,HPA-15a 0.545 2,HPA-15b 0.454 8。南、北方汉族人群HPA-1～6、15比较,在HPA-1和HPA-3系统(χ2=15.032 0、5.418 8,P0.05);基因频率分布差异有统计学意义。经χ2检验,符合Hardy-Weinbery遗传定律。结论中国汉族人群中HPA-3和HPA-15杂合程度最高,在中国南北方汉族人群中HPA-1和HPA-3系统基因多态性分布存在明显的地域差异。为了给免疫性血小板减少症患者提供相合血小板输注,在中国建立血小板供者资料库是必要的。     

潍坊地区汉族献血者血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性研究

目的研究汉族人群血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性区域分布特点,建立HPA基因型资料库。方法采用PCR-SSP技术对102名潍坊地区汉族无血缘关系的志愿捐献血小板者作HPA-1-16系统基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果从HPA-1、5、6系统分别检出1例a/b基因型,HPA-4系统检出2例a/b基因型,检出HPA-2a/2b 11例(基因频率占0.1078);HPA-3、15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3039、0.5392、0.1569,15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.3529、0.4608、0.1863;HPA- 7-14、16系统只检出a基因,呈单特异性。结论潍坊地区汉族人HPA-2、3、15系统具有多态性,是HPA配合性输注关注重点。在随机输血中供受者HPA-2系统不配合的机会为9.68%、HPA-3系统不配合的机会为36.95%、HPA-15系统不配合的机会为36.8%。     

石家庄汉族血小板捐献者HPA1-17基因多态性分析

目的建立石家庄地区已知HPA基因型别单采血小板捐献者基因资料数据库,分析石家庄地区3591名汉族血小板捐献者HPA基因多态性分布特点。方法 HPA基因分型采用聚合酶链反应—序列特异引物(PCR-SSP)方法,计算等位基因频率、基因型频率及HPA-1～17组合型频率。结果 3 591名无血缘关系的血小板捐献者HPA基因HPA-7～14、HPA-16、HPA-17系统均为aa纯合子,未检出b等位基因。HPA-1～6、15中杂合度最高的为HPA-3系统,不配合率为37.44%;其次为HPA-15系统,不配合率为37.40%;HPA-4系统的杂合度最低,不配合率仅为0.38%;与国内部分地区人群数据比较分析,发现石家庄地区汉族血小板捐献者HPA-5系统分布与国内其他地区人群存在显著差异。结论建立了石家庄地区血小板捐献者HPA-1～17基因分型数据库,可为患者提供HPA相合的血小板,对减少临床血小板输注无效的发生具有重要意义。     

潍坊地区血小板捐献汉族人群HLA-A、B和HPA1-17系统基因多态性研究

目的探讨潍坊地区汉族血小板捐献者HLA-A、B和HPA1-17系统基因多态性区域分布特点,初步建立血小板捐献者HLA、HPA基因资料库。方法分别采用PCR-SSOP和PCR-SSP方法对200名无血缘关系的汉族血小板捐献者做HLA-A、B和HPA1-17系统基因分型,计算基因频率、基因型频率。结果受检者共检出HLA-A位点14个,HLA-B位点30个,其中HLA-A座位频率较高的有A*02、A*11、A*30和A*24,基因频率分别为0.317 5、0.1450、0.127 5、0.125 0;HLA-B座位频率较高的有B*15、B*13、B*40和B*51,基因频率分别为0.157 5、0.145 0、0.1200、0.100 0。每个标本均检测到HPA1a、4a、5a、7a-14a、16a、17a基因,HPA7a-14a、16a、17a呈单特异性,未检测出相应的等位基因HPA-b;在HPA1-17中,杂合度最高的是HPA15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.28、0.565、0.155;其次为HPA3,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.355、0.51、0.135。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论探明了潍坊地区汉族血小板捐献者HLA-A、B和HPA1-17系统区域性分布特点,为免疫性血小板减少患者寻找匹配的血小板提供保障。     

长春地区无偿献血者HPA1-6,15基因分型及频率调查

目的调查北方汉族人群人类血小板抗原（HPA）的基因频率及分布规律。建立一支HPA-1a,-2a,-4a,-5a,-6a阴性及已知HPA抗原的献血者队伍。方法随机抽取172名长春地区固定无偿血小板捐献者静脉血3ml,枸橼酸钠抗凝;采用TIANGEN试剂盒提取DNA。基因定量仪测定DNA的浓度和纯度。采用PCR-SSP方法进行试验。最后进行统计学分析。结果各表现型的频率分别是：HPA-1aa 0.988,HPA-1ab 0.012,HPA-2aa 0.833,HPA-2ab 0.159,HPA-2bb 0.008,HPA-3aa 0.355,HPA-3ab 0.482,HPA-3bb 0.163,HPA-4aa 0.988,HPA-4ab 0.012,HPA-5aa 0.971,HPA-5ab0.029,HPA-6aa 0.977,HPA-6ab 0.023,HPA-15aa 0.286,HPA-15ab 0.498,HPA-15bb 0.216。未发现HPA 1bb、4bb、5bb、6bb。各基因型的频率分别是：HPA-1a 0.994,HPA-2a 0.913,HPA-3a 0.596,HPA-4a 0.994,HPA-5a 0.985,HPA-6a 0.988,HPA-15a 0.535。其中基因频率占99%以上的有HPA-1a-、4a。各基因型的不配合率分别是HPA-1a 0.011,HPA-2a0.147,HPA-3a 0.366,HPA-4a 0.011,HPA-5a 0.028,HPA-6a 0.023,HPA-15a 0.374。结论本研究有助于在长春地区建立已知HPA抗原的机采血小板捐献者队伍,可以提高血小板抗体的检出率,为同种免疫性血小板减少症患者提供HPA相合的血小板。     

人类血小板抗原-15系统PCR-SBT分型技术的建立

目的建立人类血小板抗原(HPA)-15系统的分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型。方法采用本研究合成的引物及G&T公司的商品化试剂盒,应用PCR-SBT技术对200名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,采用第l4届ISBT血小板协作组提供的l0份质控标本以及德国Inno-train公司提供的质控样品作为平行对照,进行验证。结果 200名汉族血小板志愿捐献者HPA基因频率为HPA-15a 0.430、HPA-15b 0.570;基因分型结果与ISBT公布的结果及Inno-train公司提供的质控样品的结果完全一致。结论所建立的HPA基因PCR-SBT分型技术具有高分辨率、高通量、高精确度、能直接发现新的等位基因等特点,具有广泛的应用前景。     

云南汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA基因多态性的分析

目的研究云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B基因和HPA1-17基因多态性,建立已知型血小板献血者基因数据库。方法分别采用PCR-SSOP和PCR-SSP方法对1 000名云南地区无血缘关系的汉族血小板献血者做HLA-A、B和HPA1-17系统基因分型,计算基因型频率、基因频率,并与其他人群进行比较。结果在云南地区人群中共检出HLA-A位点14个,HLA-B位点35个。A*02(35.81%)、A*11(35.42%)和A*24(17.72%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-A座位的主要等位基因;B*46(12.87%)、B*40(60)(10.83%)和B*15(62)(9.78%)3个等位基因为云南汉族人群HLA-B座位的主要等位基因。每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a、17a基因;HPA-4a、7a-14a、16a、17a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、2、5、6主要以a/a纯合子居多,a/a基因型频率分别是0.989、0.960、0.990、0.980,没有b/b纯合子出现。在HPA1-17中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.392、0.360、0.248;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.339、0.467、0.194。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论云南地区汉族血小板献血者HLA-A、B和HPA1-17基因频率与南方汉族接近,也呈现其自身特点。应建立本地区的血小板供者分型数据库。     

北京地区HPA1-6,15基因库的建立与应用

目的:建立人血小板抗原(human platelet antigen,HPA)HPA1-6,15血小板供者库,为患者提供HPA相合的血小板。方法:采用序列特异性引物-聚合酶链反应(Sequence specific primer polymerase chain reaction,SSP-PCR)对血小板捐献者和53名血小板抗体筛查阳性患者HPA基因进行分型。分析37例血小板抗体阳性患者输注HPA配型相合血小板的输注效果。结果:血小板捐献者最常见的基因型为HPA-1a/1a-2a/2a-3a/3b-4a/4a-5a/5a-6a/6a-15a/15b,其次为HPA-1a/1a-2a/2a-3a/3a-4a/4a-5a/5a-6a/6a-15a/15b。53名血小板抗体筛查阳性患者最常见的基因型为HPA-1a/1a-2a/2a-3a/3b-4a/4a-5a/5a-6a/6a-15a/15b。37例血小板抗体阳性患者中输注HPA基因相合血小板28例有效,与随机输注比较差异有统计学意义。HPA-3,HPA-15是导致供者和患者基因组合呈多态性的主要因素。结论:HPA-3,HPA-15系统具有多态性,是HPA配合性输注的关注重点。HPA配合性输注可改善患者血小板输注效果,避免血液资源的浪费。现有血小板捐献者基因型基本上能满足患者常见基因型输注的需求。     

南昌地区无偿捐献者血小板基因频率调查分析

目的研究南昌地区人群HPA1-6,9,15基因多态性。方法采用PCR-SSP方法对南昌地区158例无血缘关系的血小板无偿捐献者进行HPA1-6,9,15系统的基因分析。结果 HPA-2b、-3b、-4b、-5b、-6b、-15b基因频率分别为0.0443、0.4399、0.0032、0.0222、0.0158、0.4937,未检出HPA-1b、-9b.HPA-3,15抗原系统血小板随机输注不配合率分别为0.3714,0.3749。结论南昌地区人群HPA分布具有本地人群特点,调查数据分布符合Hardy-Wernberg平衡定律。HPA-3,15系统具有多态性,在同种免疫性血小板随机输注时易产生同种免疫反应。     

中国南京地区汉族人群血小板HPA-1-18遗传多态性研究

本研究旨在调查南京地区无关健康人群人类血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因频率,为输血患者寻找相容性血小板提供可靠依据。使用PCR-SSP方法对300例南京地区非血缘健康志愿者血液样品进行人血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因分型。结果表明,南京地区300例非血缘人群HPA等位基因频率分别为:HPA-2a 0.9183和-2b 0.0817;HPA-3a 0.6100和-3b 0.3900;HPA-5a 0.9733和-5b 0.0267;HPA-6a 0.9883和-6b 0.0117;HPA-15a 0.5250和-15b 0.4750。HPA-1a,-4a,-7a-14a和HPA-16a-18a均是纯合子。结论:HPA抗原等位基因频率存在种族和地域差异。南京地区HPA抗原等位基因频率显示具有自身特点。HPA-3和HPA-15是最常见的杂合子,因此必须关注HPA在血小板临床输血中的作用。     

新疆汉族人群血小板抗原1—5、15系统基因多态性分析

目的调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)1—5及15系统基因在新疆汉族人群中的遗传多态性。方法采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法对101例无血缘关系的新疆汉族血样进行HPA基因分型。结果新疆汉族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.9851、0.9208、0.5446、1、0.9505、0.4653,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.0149、0.0792、0.4554、0、0.0495、0.5347,新疆汉族HPA基因频率与维吾尔族人群相比,HPA-1a、1b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,HPA-3、15系统具有高度多态性。