宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的相关性研究

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒（HPV）感染与T细胞亚群、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组（40例）、正常对照组（20例）的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率。结果HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义（P〉O．05）,但调节性T细胞（Treg）在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。宫颈癌组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。HPV与CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞呈显著正相关（r=0．613,P〈O．05）。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。     

宫颈癌组织中IDO表达与外周血中T细胞亚群的相关性研究

【目的】探讨宫颈癌组织中IDD基因表达量与患者外周血中T淋巴细胞亚群数量的相关性。【方法】选择2010年1月-2012年1月期间我院符合纳入及排除标准的CINIII患者20例;宫颈癌患者20例;健康妇女20例。半定量RT-PCR、Western blotting检测宫颈组织中IDO mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测外周血中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs数量。【结果】宫颈浸润癌、宫颈原位癌组织中IDO mRNA及蛋白表达高于正常宫颈组织（P〈0.001）。宫颈浸润癌患者外周血中CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞数量及CD4＋/CD8＋显著降低,CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs数量显著增高（P〈0.05）。宫颈癌组IDO mRNA表达及蛋白表达与CD3＋T细胞,CD4＋T细胞/CD8＋T细胞呈负相关;与CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs呈正相关【结论】宫颈癌组织中IDO表达增高,机体免疫功能降低,IDO表达与肿瘤免疫抑制有关。     

细胞免疫对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

目的通过检测宫内感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）婴幼儿外周血T细胞亚群的变化,进一步探讨乙型肝炎疫苗免疫失败的机制。方法选择HBV宫内感染免疫失败婴幼儿20例和免疫成功者29例,采用流式细胞术及荧光染色法,检测外周血T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋的变化。结果免疫成功组婴幼儿外周血CD3^＋为64.17%±8.01%,CD4^＋为39.55%±8.80%,CD8^＋为24.62%±7.23%;CD4^＋/CD8^＋比值为1.66±0.51。免疫失败组婴幼儿外周血CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋分别为62.55%±7.32%、32.94%±7.58%和29.61%±7.08%;CD4^＋/CD8^＋比值为1.13±0.50。统计分析显示,CD3^＋T淋巴细胞百分数组间差异无显著性意义（P〉0.05）,CD4^＋T和CD8^＋T细胞在免疫失败组和免疫成功组有显著性差异（P〈0.05）。结论婴幼儿外周血CD4＋和CD8＋T细胞的数量变化可能是乙肝疫苗免疫接种失败的机制之一。     

哈萨克族食管癌外周血CD4＋CD2~＋Foxp3＋调节性T细胞与TGF-β1、IL-10的相关性研究

目的探讨哈萨克族食管癌患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋regulatory Tcells,Treg）的变化,及与转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-10（IL-10）表达水平的相关性。方法采用流式细胞术检测40例食管癌患者及26例健康体检者外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞占CD4＋T细胞的比例;采用ELISA法检测血清中TGF-β1、IL-10表达水平。结果哈萨克族食管癌患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例、TGF-β1和IL-10表达水平分别为（7.50±1.94）%、（46.41±11.12）μg/ml、（48.10±13.49）pg/ml,高于对照组（5.04±0.92）%、（35.21±7.46）μg/ml、（33.78±7.31）pg/ml（P〈0.05）。TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者与Ⅲ~Ⅳ期者Treg细胞比例及TGF-β1、IL-10表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1、IL-10表达水平与CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例明显相关（P〈0.01）。结论检测CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞比例对于判断食管癌的病期有一定价值。TGF-β1、IL-10的表达水平明显升高,可能参与Treg细胞对机体的免疫负调节机制。     

脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分离及功能特征的比较

目的分离成人外周血、脐血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞,并检测其功能,以了解脐血CD4^＋CD25^＋T细胞的特性。方法应用免疫磁珠分选法从健康成人外周血、脐血淋巴细胞中分离纯化CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞。应用流式细胞术检测分离纯度,胎盘蓝染色检测细胞存活率;RT-PCR技术检测CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞中Foxp3的mRNA的表达;体外增殖实验检测其对CD4＋CD25-T细胞的免疫抑制作用。结果 MACS分离的CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4＋CD25-T细胞纯度达（92.7±1.6）%、（90.3±1.2）%,细胞存活率达（95.3±2.1）%;体外经抗CD3、CD28单克隆抗体刺激培养的脐血及成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞同时得到扩增,而且高表达Foxp3;CD4^＋CD25^＋T细胞能有效的抑制效应T细胞的增殖,当效靶比为1︰1时,其抑制效应T细胞的作用最强,成人外周血抑制率为（81.36±1.61）%、脐血抑制率为（90.74±2.43）%。结论脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞,与成人外周血相比,培养后的脐血CD4^＋CD25^＋T细胞比成人外周血有更强的免疫抑制功能。     

食道癌患者CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例为（10．33±5．72）％,明显高于健康志愿者组（4．56±1．06）％（P〈0．01）,而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。     

类风湿关节炎RF阳性与阴性患者Foxp3表达的差异

目的 研究类风湿关节（rheumatoid arthritis,RA）患者类风湿因子（rheumatoid factor,RF）阳性及阴性之间是否存在CD4＋CD25＋调节性T细胞Foxp3表达的差异。方法RA患者43例．根据RF测定分为RF阳性组和RF阴性组,健康体检者18例为健康对照组。采用流式细胞仪检测RA患者及健康对照组外周血CD4℃D25＋T细胞及CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞的表达。结果RF阴性组CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞为（2．58±1．68）,与对照组（4．23±2．19）相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;RF阳性组CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞为（1．25±1．1）,与对照组（4．23±2．19）相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;RF阴性组与RF阳性组之间CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞存在明显差异（P〈0．05）。结论RF阳性与阴性RA患者之间存在调节性T细胞Foxp3表达差异,RF阳性与阴性患者之间存在免疫应答的不同,可能与CD4＋CD25＋调节性T细胞的功能有关。     

肺癌患者CD4＋CD25＋调节性T细胞的检测及临床意义

目的探讨肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化及意义。方法采用流式细胞技术检测60例肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞,采用ELISA法检测外周血中转化生长因子-1（TGF-1）的表达水平。结果肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为（6.46±0.42）%,与对照组（3.40±0.80）%比较差异有显著性（〈0.05）。30例鳞癌、17例腺癌、13例小细胞癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞比例分别为（6.51±0.37）%、（6.23±0.50）%、（6.65±0.89）%,各组间比较差异无显著性（〉0.05）;均显著高于对照组（3.40±0.80）%（〈0.05）;22例Ⅲ期,29例Ⅳ期肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞比例为（6.13±0.45）%,（7.16±0.50）%,均显著高于9例Ⅱ期患者（5.02±0.62）%（均〈0.05）。肺癌患者外周血中CD4＋CD25＋T细胞水平与TGF-1相关性不强（=0.265）,与CD8＋CD28＋T细胞呈负相关（=—0.531）。结论肺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4＋CD25＋调节性T细胞水平较高,且与分期有关,对肺癌患者具有免疫抑制作用。     

1型糖尿病患者骨髓间质干细胞对CD4~＋Foxp3~＋T细胞水平的影响

目的：探讨骨髓间质干细胞（MSC）体外对1型糖尿病（T1DM）患者外周血CD4＋Foxp3＋T细胞水平的影响方法：T1DM患者外周血单个核细胞（PBMC）分别与T1DM患者和正常人骨髓MSC按不同比例体外共培养72 h,检测共培养后PBMC中CD4＋Foxp3＋T细胞百分率。结果：正常骨髓MSC与T1DM患者PBMC共培养后CD4＋Foxp3＋T细胞百分率显著升高（P〈0.05）,且存在剂量依赖性,T1DM MSC也可上调T1DM患者CD4＋Foxp3＋T细胞水平,但作用较正常MSC弱（P〈0.05）;正常MSC培养上清也可上调T1DM患者PBMC中CD4＋Foxp3＋T细胞水平,但作用弱于MSC∶PBMC=1∶1组（P〈0.05）。结论：T1DM患者MSC上调CD4＋Foxp3＋T细胞百分率低于正常人MSC可能是T1DM患者发病的因素之一。     

咳嗽变异性哮喘患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平分析

目的 分析咳嗽变异性哮喘（CVA）患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平.方法 连续选择2011年1月至2012年12月在中国医科大学附属第四医院门诊就诊的CVA患者（CVA组）35例和慢性持续期哮喘患者（哮喘组）21例,另有18例同期参加体检结论健康者为对照组.3组对象同期接受了外周血调节性T细胞（CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg）和辅助性T细胞（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）检测.结果 CVA患者外周血CD4＋表达水平及CD4＋/CD8＋比值均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA患者外周血CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA咳嗽程度重组外周血CD4＋、CD4＋CD25＋ Treg、CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg表达水平及CD4＋/CD8＋比值都明显低于咳嗽程度轻组（P＜0.05,P＜0.01）.结论 CVA患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,且随着症状加重这些异常表达趋于显著.     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4~＋CD25~＋Foxp3~＋调节性T细胞的检测及临床意义

目的分析CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）在非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin＇s lymphoma,NHL）患者外周血中的水平,初步探讨Tregs与NHL预后的关系。方法选取我院2013年4月至2013年12月初诊NHL患者38例为观察组,20例健康志愿者设为对照组,对观察组化疗前后及对照组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例进行检测和对比。结果初诊NHL患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例显著高于对照组（P〈0.05）,化疗后达到完全缓解及部分缓解的患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例较化疗前组均显著减低（P〈0.05）,完全缓解组与部分缓解组相比无统计学意义（P〉0.05）。结论初诊的NHL患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs水平明显升高,经有效化疗后其水平显著降低,监测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs水平对于判断NHL预后具有的临床应用价值。     

结肠癌患者淋巴细胞亚群改变与疗效关系的探讨

目的：探讨检测结肠癌患者淋巴细胞亚群的临床意义。方法：收集85例我院收治的结肠癌患者,采用流式细胞仪检测其化疗前后淋巴细胞亚群的改变并与50例健康体检者进行比较,分析其临床意义。结果：结肠癌患者外周血中,CD3＋和CD4＋细胞的比例分别为（55.36±11.19）%和（32.03±8.57）%,CD4＋/CD8＋的比值（1.05±0.28）均较正常对照组显著降低（P〈0.05）。同时笔者发现患者临床分期越晚、组织分化程度越差,外周血中CD3＋和CD4＋细胞的比例越低、CD4＋/CD8＋的比值越低,而CD4＋CD25＋细胞的比例越高（P〈0.05）。治疗有效的患者CD3＋和CD4＋细胞的比例、CD4＋/CD8＋的比值均显著高于无效组,而CD4＋CD25＋细胞的比例显著低于无效组（P〈0.05）。结论：检测结肠癌患者淋巴细胞亚群及其化疗前后的变化有助于了解机体免疫状态,对患者的治疗效果进行判断。     

多发性硬化患者外周血γδT细胞与CD_4~+CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例的变化

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的变化。方法采集37例MS患者(MS组)及25例健康对照者(NC组)的外周静脉血,分离外周血单个核淋巴细胞,以流式细胞术检测γδT细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例。结果 MS组外周血γδT细胞比例较NC组显著升高,且活动性患者较非活动性患者进一步升高;MS组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例较NC组显著降低,而活动性患者较非活动性患者进一步降低。MS组外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例呈显著负相关(P<0.05)。结论 MS患者外周血γδT细胞比例的升高可下调CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,从而促进疾病的发生。     

肺岩宁方对肺癌小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞比例及Foxp3表达的影响

目的：研究肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（T regulatory cell,Treg）比例及转录因子Foxp3表达的影响。方法：建立小鼠Lewis肺癌细胞移植瘤模型后,将32只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组和综合治疗组。给予相应药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量、肺脏指数、脾脏指数和胸腺指数,并检测各组小鼠胸腺、脾脏和移植瘤CD4＋CD25＋Treg细胞的比例及Foxp3mRNA的表达。结果：肺岩宁方可降低肺癌小鼠脾脏和胸腺指数,增加去瘤体质量,减少移植瘤质量,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。肺岩宁方可显著降低Lewis肺癌小鼠胸腺、脾脏和移植瘤中的CD4＋CD25＋Treg细胞比例,并抑制Foxp3mRNA的表达,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肺岩宁方通过降低CD4＋CD25＋Treg细胞比例、下调Foxp3 mRNA表达而增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。     

肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞免疫分型及和功能状态评分间的关系

目的探讨肺癌患者化疗前后免疫功能变化及和功能状态评分间的关系。方法60例初治肺癌患者化疗前、化疗两个周期后分别用流式细胞仪检测的外周血淋巴细胞免疫分型并与20例正常体检者作对照,同时对肺癌患者进行功能状态评分。结果肺癌患者化疗前CD3^＋、CD4^＋、NK细胞比例分别为（46.19±8.72）%、（20.57±5.80）%、（17.67±6.53）%,均低于正常对照组[分别是（59.76±6.92）%、（35.89±6.97）%、（21.51±4.64）%],差异有统计学意义（P〈0.05）,CD8^＋细胞比例为（28.51±8.21）%,高于正常对照组[（20.93±4.78）%],差异有统计学意义（P〈0.05）,CD19＋细胞比例为（7.54±4.29）%,与正常组[（9.52±4.06）%]相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。一线两药含铂方案化疗两个周期后,肺癌患者外周血CD3^＋、CD4^＋、NK细胞比例分别为（57.96±8.33）%、（33.29±6.90）%、（21.48±5.78）%,较化疗前有增多趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）,而CD8^＋细胞比例为（21.64±5.10）%,较化疗前减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。肺癌患者功能状态评分化疗前平均为1.48±0.60,化疗后平均为1.45±0.95,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肺癌患者免疫功能较正常人普遍降低,化疗在短期内有可能使肺癌患者免疫水平得到一定程度恢复,检测肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型可作为疗效评估和全身功能状态评分的补充。     

宫颈癌患者外周血中T细胞亚群数量变化及临床意义

[目的]探讨宫颈癌患者外周血中T细胞亚群数量变化及临床意义.[方法]选择2008年10月-2009年10月期间符合纳入及排除标准的CINⅢ患者20例,宫颈浸润癌患者20例,正常宫颈健康妇女20例,流式细胞仪检测外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+ CD25+ Foxp3+Trregs数量.[结果]宫颈浸润癌患者外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞数量及CD4+/CD8+显著低于正常宫颈组和CINⅢ组(P＜0.05),正常宫颈组和CINⅢ组无显著性差异(P＞0.05).宫颈癌浸润组CD4+CD25+Foxp3+Tregs数量显著高于正常宫颈组和CINⅢ组(P＜0.05),正常宫颈组和CINⅢ组差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]宫颈浸润癌患者细胞免疫功能低下,存在免疫抑制.     

17β-雌二醇对小鼠淋巴结、脾脏和胸腺调节性T细胞及其Foxp3表达的影响

目的：研究小鼠去卵巢及体内注射17β-雌二醇（E2）后，淋巴结、脾脏和胸腺CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcell，Treg细胞）及相关调节性因子Foxp3表达的变化与E2的相关性。方法：采用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞功能相关因子Foxp3的表达，CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^＋high T细胞数量的变化。结果：E2抑制淋巴结中Treg细胞Foxp3的表达．上调其在脾脏和胸腺中的表达；E2下调淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋high T细胞的比例，上调它们在脾脏尤其是胸腺中的比例。结论：E2对淋巴结、脾脏和胸腺3种免疫器官中的Treg细胞有不同的调节作用。